CN104844702B - 植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1及其编码基因的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1及其编码基因的应用。植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1及其编码基因能够在培育耐铝毒、耐盐和耐渗透胁迫的大豆品种中的应用，所述的植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示，所述的编码植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示。将植物耐逆性相关蛋白编码基因GmSTOP1通过基因工程手段转入农作物，能够获得不仅耐铝毒，还具有耐盐和耐渗透胁迫的转基因植物新品种。

Description

植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1及其编码基因的应用
技术领域
本发明属于基因工程领域，涉及植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1及其编码基因的应用。
背景技术
大豆作为优质蛋白质食品和植物油的重要来源，一直是世界各国不容忽视的作物之一(王利群等，2009)。中国是大豆的发源地，我国南方大豆产区地域辽阔，自然条件优越，是我国大豆的主要产区之一。我国长江以南热带、亚热带地区主要为红色或黄色的酸性土壤，总面积达1.28亿hm2，占全国土地总面积的22.7％，占全国耕地面积的28％(金婷婷等，2007)。酸性土壤中活性A13+产生的铝毒害会显著抑制植物的根系生长，进而抑制地上部分的生长，是限制作物生长和产量的主要因素之一(Ma et al，2003；陈奇等，2012)。近年来随着酸雨发生频率变高及酸性和生理酸性肥料的大量施用，使得土壤酸度进一步加剧，铝毒害已经成为南方酸性土壤中大豆生长发育的重要限制因素(俞慧娜等，2008)。同时，盐碱、干旱等渗透胁迫是影响农作物生长发育继而限制作物产量的主要非生物胁迫因素，我国约有1亿hm2的盐碱土地，干旱、半干旱地区占全国陆地面积的二分之一(高世庆等，2005)，严重影响着大豆产量。因此，在进行土壤改良的同时，通过分子育种手段提高大豆的耐逆性，挖掘大豆自身的耐逆相关基因，选育耐铝毒能力强的、耐盐、耐旱的大豆品种对大豆的生产具有重要意义。
STOP1-like蛋白是一类含有C2H2型锌指结构域的转录因子，通过调控铝毒耐受机制和H+毒害耐受机制相关基因的表达，使植物具有对铝毒和H+毒害的耐性(Luchi et al，2007；Luchi et al，2008；Hoekenga et al，2006；Magalhaes et al，2007；Liu et al，2009)。Yamaji等(2009)通过突变体分析在水稻中发现一个与STOP1类似的锌指蛋白OsART1，它可调控30多种耐铝毒基因的表达，增强水稻对铝毒的抗性。Ohyama(2013)等人利用RNAi技术沉默NtSTOP1基因后发现烟草根对铝毒和H+毒害的耐性、铝毒胁迫下的根部柠檬酸分泌量、ALS3等耐铝毒相关基因的表达均受到抑制；将百脉根、小立碗藓、茶树、黑杨中的STOP1-like基因分别转入拟南芥突变体stop1中过表达，都能激活耐铝毒相关的AtALMT1、AtMATE和ALS3等基因恢复表达。多个物种中与AtSTOP1同源的基因都可通过调控耐铝毒基因的表达提高植物对铝毒害的耐性，而在大豆中还未见有关STOP1-like基因的研究报道，STOP1-like基因是否与除铝毒外的盐碱、干旱等其他逆境胁迫相关更是未见报道。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的上述不足，提供植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1及其编码基因与应用。
本发明的目的通过如下技术方案实现：
植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1在培育耐铝毒、耐盐和耐渗透胁迫的大豆品种中的应用，所述的植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示。
编码植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1的基因在培育耐铝毒、耐盐和耐渗透胁迫的大豆品种中的应用，所述的编码植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1的基因核苷酸序列如SEQ IDNO.14所示。
含有编码植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1的基因的重组表达载体在培育耐铝毒、耐盐和耐渗透胁迫的大豆品种中的应用，所述的编码植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示。
有益效果：
本发明所提供的植物耐逆性相关蛋白编码基因GmSTOP1读码框长度为1566bp，其编码蛋白含有与其他STOP-like蛋白高度同源的Cys-2-His-2锌指蛋白结构域，定位于细胞核内。
拟南芥是一种模式植物，其基因转化技术成熟，常被用来进行植物逆境胁迫相关的研究。本发明对植物耐逆性相关蛋白编码基因GmSTOP1进行了转基因拟南芥及其耐铝毒性、耐盐性和耐渗透胁迫的研究，获得的转基因拟南芥不仅提高了对铝毒的耐受性，还提高了耐盐和耐渗透胁迫的能力。qRT-PCR的结果也表明，大豆GmSTOP1响应铝毒、高盐和高渗透压的诱导，其表达水平显著上调。由此可见将植物耐逆性相关蛋白编码基因GmSTOP1通过基因工程手段转入农作物，能够获得不仅耐铝毒，还具有耐盐和耐渗透胁迫的转基因植物新品种。
附图说明
图1 GmSTOP1基因的RT-PCR扩增图。
图2 GmSTOP1蛋白的亚细胞定位。
A图为GmSTOP1融合蛋白在拟南芥原生质体中的亚细胞定位。标尺为20μm。
B图为GmSTOP1融合蛋白在洋葱表皮细胞中的亚细胞定位。标尺为100μm。
图3 GmSTOP1基因在大豆品种“科丰1号”不同组织中的相对表达量。
R、SAM、S、L、F、P、SE分别代表根、茎尖分生组织、茎、叶、花、荚、种子。误差线表示3次重复的标准误。
图4 GmSTOP1基因在AlCl3、ABA、NaCl和PEG处理下的相对表达量。
AlCl3、ABA、NaCl和PEG处理浓度分别是25μmol·L-1、100μmol·L-1、200mmol·L-1和20％(m/v)。误差线表示3次重复的标准误。
图5 pCAMBIA1301-GmSTOP1载体图。
图6 35S::GmSTOP1插入pCAMBIA1301的酶切鉴定。
图7纯合T3代GmSTOP1过表达转基因拟南芥PCR检测结果。
图8不同培养基上拟南芥的根生长情况。
AlCl3(铝毒)处理浓度为15μmol·L-1；Col-0为野生型拟南芥，#1和#2分别代表纯合T3代GmSTOP1过表达转基因株系GmSTOP1-1和GmSTOP1-2；图片拍摄于萌发15d时。
图9转基因拟南芥株系和野生型的根长。
Col-0为野生型拟南芥，GmSTOP1-1和GmSTOP1-2为纯合T3代GmSTOP1过表达转基因株系；根长测量于萌发15d时。误差线表示2次重复的标准误。相同的小写字母表示它们在最短显著极差法(shortest significant ranges,SSR)测验中5％水平上不存在显著性差异，标有不同的字母表示它们在5％水平上存在显著性差异。
图10转基因拟南芥株系和野生型的根相对生长量(RRG)
Col-0为野生型拟南芥，GmSTOP1-1和GmSTOP1-2为纯合T3代GmSTOP1过表达转基因株系。萌发15d后计算相对根生长量(RRG)。RRG(％)＝(RLTt-RLT0)/(RLCt-RLC0)，其中RLT0代表拟南芥在移入酸性pH4.3培养基或Al3+处理培养基上生长之前的根长，RLTt代表拟南芥在酸性pH4.3培养基或Al3+处理培养基上生长之后的根长；RLC0代表拟南芥转移之前的根长，RLCt代表在拟南芥对在pH5.8对照培养或酸性pH4.3培养基上生长之后的根长。每个株系处理10株苗，重复2次。误差线表示2次重复的标准误。相同的小写字母表示它们在最短显著极差法测验中5％水平上不存在显著性差异，标有不同的字母表示它们在5％水平上存在显著性差异。
图11 NaCl处理下GmSTOP1转基因拟南芥和野生型在幼苗期的表型。
Col-0为野生型拟南芥，GmSTOP1-1和GmSTOP1-2为纯合T3代GmSTOP1过表达转基因株系，野生型和转基因株系在含有0、50、100和150mmol·L-1NaCl的1/2MS培养基上垂直生长10d后统计主根长度。左图为代表性植物的表型图片，右图数值为二次独立实验数据的平均值。误差线表示2次重复的标准误。相同的小写字母表示它们在最短显著极差法测验中5％水平上不存在显著性差异，标有不同的字母表示它们在5％水平上存在显著性差异。
图12甘露醇处理下GmSTOP1转基因拟南芥和野生型在幼苗期的表型。
Col-0为野生型拟南芥，GmSTOP1-1和GmSTOP1-2为纯合T3代GmSTOP1过表达转基因株系，野生型和转基因株系在含有0、100、200和300mmol·L-1甘露醇的1/2MS培养基上垂直生长10d后统计主根长度。左图为代表性植物的表型图片，右图数值为二次独立实验数据的平均值。误差线表示2次重复的标准误。相同的小写字母表示它们在最短显著极差法测验中5％水平上不存在显著性差异，标有不同的字母表示它们在5％水平上存在显著性差异。
具体实施方式
以下实施例中所涉及的材料和试剂：
大豆品种为“科丰1号”、野生型拟南芥Col-0、载体pCAMBIA1301、pJIT166-GFP和根癌农杆菌菌株EHA105均由南京农业大学国家大豆改良中心保存。pMD19-T Vector和大肠杆菌感受态细胞DH5α购自宝生物工程(大连)有限公司。
T4DNA连接酶、rTaq酶、高保真酶DNA Polymerase、RTMaster Mix Perfect Real Time试剂盒、Premix Ex TaqTM II(Perfect Real-time)购自宝生物工程(大连)有限公司；质粒DNA小量试剂盒、无内毒素大提质粒试剂盒、琼脂糖凝胶回收试剂盒购自Axygen；植物总RNA快速提取试剂盒购自天根生化科技(北京)有限公司；限制性内切酶购自NEB(北京)。氨苄青霉素(Ampicillin)、卡那霉素(Kanamycin)、利福平(Rifampicin)均购自Sigma。
实施例1大豆GmSTOP1基因的克隆
参照离心柱型植物总RNA提取试剂盒说明书提取大豆品种“科丰1号”叶片和根的总RNA，使用RT Master Mix Perfect Real Time试剂盒进行反转录合成cDNA。根据大豆中拟南芥AtSTOP1同源基因Glyma16g27280的cDNA序列设计引物GmSTOP1-F和GmSTOP1-R，以铝胁迫处理6h的RNA反转录后的cDNA为模板，用高保真酶进行基因扩增。将目的条带进行切胶回收，连接pMD19-T载体，转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，随机挑取10个单菌落进行扩大培养，参照质粒DNA小量试剂盒说明书提取质粒后进行PCR鉴定，阳性克隆送至上海英潍捷基生物技术公司测序。
其中GmSTOP1-F：5’-ATGGATTCAAATGGGAGCCTAC-3’(SEQ ID NO.1)；
GmSTOP1-R：5’-TTATAAAAGATTGTCAGAACTAGATTCTCC-3’(SEQ ID NO.2)。
PCR反应程序为：
95℃预变性5min；95℃变性30sec、59℃复性30sec、72℃延伸1min40sec，35个循环；最后72℃延伸10min。
利用RT-PCR方法从大豆品种“科丰1号”中扩增出GmSTOP1基因(图1)，将其连接到pMD19-T载体，转化大肠杆菌后测序，结果表明该基因序列长度为1566bp，如SEQ ID NO.14所示，与Phytozome数据库中Glyma16g27280的CDS序列完全一致。
实施例2 GmSTOP1编码蛋白的亚细胞定位
以GmSTOP1-GFP-F/GmSTOP1-GFP-R为引物，扩增GmSTOP1基因，切胶回收扩增产物，用Sal I和BamH I酶切扩增产物和pJIT166-GFP质粒；最后，把酶切回收的PCR产物和质粒酶切片段连接，构建载体pJIT166-GmSTOP1-GFP，转入大肠杆菌DH5α，然后进行菌液PCR、酶切筛选阳性克隆，并对阳性克隆进行测序验证。使用无内毒素大提质粒试剂盒制备质粒，参考Yoo等的方法(2007)转化拟南芥原生质体，将培养好的原生质体用激光共聚焦显微镜进行检测GFP信号。同时，制备基因枪轰击洋葱表皮观察GFP瞬时表达体系。
其中GmSTOP1-GFP-F：5’-ACGCGTCGACATGGATTCAAATGGGAGCCTAC-3’(SEQ ID NO.3)
GmSTOP1-GFP-R：
5’-CGCGGATCCTAAAAGATTGTCAGAACTAGATTCTCCTC-3’(SEQ ID NO.4)
利用拟南芥原生质体瞬时表达体系和基因枪轰击洋葱表皮GFP瞬时表达体系对GmSTOP1进行亚细胞定位试验的结果显示融合蛋白的绿色荧光信号都集中在细胞核内(图2)，因此，该蛋白可能在细胞核内发挥作用。
实施例3大豆GmSTOP1基因表达的荧光定量分析
3.1 GmSTOP1基因表达在大豆不同组织中的荧光定量分析
提取大豆品种“科丰1号”沙子萌发3d后的根尖、14d苗龄的茎尖分生组织、18d苗龄的茎和第1复叶、盛花期的花、鼓粒盛期的绿荚和成熟种子的RNA，反转录为cDNA，稀释10倍后为模板，参照SYBR Premix Ex Taq II(Perfect Real-time)的操作说明书采用两步法，以大豆ACT11基因作为内参基因，利用荧光定量PCR对GmSTOP1基因在不同组织的表达进行定量分析。
PCR反应体系为：
其中qRT-GmSTOP1-F：5’-CCTTGCTCCTCATACCCATTTCTG-3’(SEQ ID NO.5)
qRT-GmSTOP1-R：5’-CCTCTTGATAGGCTTTGGTGATGC-3’(SEQ ID NO.6)
ACT11-F：5’-CGGTGGTTCTATCTTGGCATC-3’(SEQ ID NO.7)
ACT11-R：5’-GTCTTTCGCTTCAATAACCCTA-3’(SEQ ID NO.8)
PCR反应程序为：
95℃预变性5min；95℃变性10sec、60℃复性15sec、72℃延伸15sec，40个循环；95℃30s，60℃30s，60℃～95℃进行溶解分析。
反应结束后分析荧光值变化曲线和熔解曲线，相对表达量的计算采用2–ΔΔCT法，绘图并计算三次生物学重复数据的标准误。
荧光定量PCR结果表明，GmSTOP1基因在上述7种组织中均有表达，表达量存在明显差异；以根中表达量作对照，GmSTOP1在种子中表达量最高，其次是第1复叶(图3)。
3.2 GmSTOP1在AlCl3、ABA、NaCl和PEG胁迫处理下的荧光定量分析
“科丰1号”种子在25μmol·L-1AlCl3处理，处理时间为6h、12h、24h、48h和72h时，取根尖作为样品。在100μmol·L-1ABA(脱落酸)，200mmol·L-1NaCl、20％PEG-6000处理下，分别于0h、3h、6h、12h、24h、48h和72h对叶和根取样。以未经处理正常生长的幼苗作为对照。样品迅速保存于液氮以提取RNA，反转录为cDNA，稀释10倍后为模板，参照SYBR Premix ExTaq II(Perfect Real-time)的操作说明书采用两步法，以大豆60S基因作为内参基因(Leet al，2012)，利用荧光定量PCR对GmSTOP1基因在不同胁迫处理下的表达情况进行分析。
其中60S-F：5’-AAAGTGGACCAAGGCATATCGTCG-3’(SEQ ID NO.9)
60S-R：5’-TCAGGACATTCTCCGCAAGATTCC-3’(SEQ ID NO.10)
PCR反应体系和反应程序同3.1
分别以各时间点的未处理样品为对照，结果显示GmSTOP1基因对4种胁迫均有不同程度的响应。在AlCl3处理的根中，GmSTOP1基因的表达量在24h时出现峰值(铝处理根尖中的相对表达量是对照的9倍左右)，24h后表达量又迅速恢复到6h和12h时的表达水平。在ABA处理的根和叶中GmSTOP1基因表现为随时间的增加表达量递增的趋势，分别是在12h和24h出现各自的表达量高峰。NaCl胁迫的叶中GmSTOP1基因的表达模式是先快速上升后急剧下降并保持在较低的表达水平；NaCl处理后根中GmSTOP1基因表达量在3h出现一个小高峰，在48h达到最大值。GmSTOP1在叶中受PEG诱导表达量在3～12h之间快速增加并达到最大值；而在PEG处理的根中基因表达模式与NaCl胁迫比较相似。ABA、NaCl和PEG这3种处理下GmSTOP1在叶中的最高表达量都明显大于在根中的表达量(图4)。
实施例4 GmSTOP1表达载体的构建
以GmSTOP1-Bgl II-F/GmSTOP1-BstE II-R为引物，以测序正确的质粒为模板，扩增GmSTOP1基因，切胶回收扩增产物，用Bgl II和BstE II酶切扩增产物和pCAMBIA1301质粒，把酶切回收的PCR产物和质粒酶切片段连接，转化DH5α感受态细胞，提质粒后进行双酶切验证，酶切正确的克隆送公司测序。将重组质粒导入农杆菌EHA105中，由于农杆菌中质粒的拷贝数很低，直接提取质粒难以进行酶切检测，因此将质粒DNA反转入大肠杆菌DH5α中，提取质粒进行酶切鉴定。
其中GmSTOP1-Bgl II-F：5’-GGAAGATCTATGGATTCAAATGGGAGCCTAC-3’(SEQ IDNO.11)
GmSTOP1-Bgl II-R：
5’-GGGTNACCTTATAAAAGATTGTCAGAACTAGATTCTCC-3’(SEQ ID NO.12)
PCR反应体系和反应程序同1
用Bgl II和BstE II酶切PCR扩增产物和pCAMBIA1301质粒，GmSTOP1基因替换载体pCAMBIA1301上的GUS基因，构建表达载体
pCAMBIA1301-GmSTOP1(图5)，筛选基因为潮霉素(hygromycin)。转化大肠杆菌感受态DH5α，进行PCR检测和Hind III酶切鉴定(图6)，证明GmSTOP1植物过表达载体构建成功。
实施例5农杆菌介导的拟南芥遗传转化
拟南芥的转化采用花序法。在拟南芥初次开花时将主花序剪掉，使幼苗长出大量侧生花序。主花序结荚3～4对是侵染的最佳时期。侵染前将已长出的角果和开放的花剪掉。将处理好的拟南芥的花序在准备好的农杆菌菌液中浸染3～5sec。侵染后将拟南芥幼苗浇足水，黑暗培养24h。一周后再进行一次花序侵染。拟南芥盛花期较长，一般要侵染2～3次。角果自然开裂时开始收收种子。此时所收的种子即为T1代。
实施例6转基因拟南芥T3代的PCR检测
转基因T1代种子经消毒后均匀分布在含有25mg·L-1Hyg-B的1/2MS萌发培养基上，春化3d后置于人工气候室内培养。培养14d，初步认定绿色的、长出两片真叶的幼苗为转基因阳性植株，将其移栽到蛭石中继续生长。20～30d后分别取拟南芥的叶子提取RNA，反转录后进行PCR检测。检测呈阳性的植株单株收种，为T2代。T2代种子消毒，经过筛选、移栽后继续收种，为T3代。
T3代植株移栽30d后叶片提取RNA，选取8个株系反转录后进行PCR检测，结果如图7。选取株系4号和5号(编号：GmSTOP1-1，GmSTOP1-2)2个阳性株系进行功能研究实验。
实施例7转GmSTOP1基因拟南芥在铝胁迫下的表型分析
以野生型Col-0为对照，培养基有3种，一是正常的对照1/2MS萌发培养基(pH 5.8，Phytagel 4g·L-1)；二是酸性1/2MS培养基(pH 4.3，Agar 8g·L-1)。三是Al3+处理培养基。Al3+处理培养基是在正常1/2MS培养基中用15μmol·L-1A1Cl3替代MgSO4·7H20，调pH至4.3，加入8g·L-1Agar。将纯合T3代GmSTOP1过表达转基因株系GmSTOP1-1，-2和Col-0的种子在正常1/2MS萌发培养基中萌发，待幼苗根长至1cm左右时分别转移到酸性1/2MS培养基和Al3+处理培养基。将培养皿竖直放置在培养室内，15d后观察植株的生长情况，并测量根长，计算根相对生长量RRG。RRG(％)＝(RLTt-RLT0)/(RLCt-RLC0)，其中RLT0代表拟南芥在移入酸性1/2MS培养基或Al3+处理培养基上生长之前的根长，RLTt代表拟南芥在酸性1/2MS培养基或Al3+处理培养基上生长之后的根长；RLC0代表拟南芥转移之前的根长，RLCt代表在拟南芥在对照或酸性1/2MS培养基上生长之后的根长。每个株系处理10株苗，重复两次。
由图8可以看出，转基因株系和野生型在正常的未处理的培养基上都能正常生长，且长势基本一致。而在A1处理培养基和酸性对照培养基中生长都受到了不同度的抑制，但转基因株系比野生型的根系受到的抑制小。15d时测量根长发现，在正常培养基中转基因株系和野生型的根长没有显著差异(SSR测验P<0.05)，在酸性培养基和AlCl3(pH4.3)处理培养基中转基因株系的根长显著大于野生型(SSR测验P<0.05)(图9)。进一步计算转基因株系与野生型的相对根生长量(RRG)发现，与正常培养条件(pH＝5.8，无AlCl3)相比，两个转基因株系在铝毒处理(AlCl3)条件下的相对根生长量显著大于野生型(SSR测验差异显著，P<0.05)；与正常培养条件(pH＝5.8，无AlCl3)相比，两个转基因株系在酸性培养条件(pH＝4.3，无AlCl3)条件下的相对根生长量也显著大于野生型(SSR测验差异显著，P<0.05)；但两个转基因株系和野生型的相对根生长量在铝毒处理(AlCl3)与酸性条件(pH＝4.3，无AlCl3)之间不存在显著差异(SSR测验P<0.05)(图10)。
实施例8转GmSTOP1基因拟南芥在NaCl和甘露醇胁迫下的表型分析
GmSTOP1基因在NaCl和PEG胁迫诱导处理下上调表达，为验证GmSTOP1的功能是否与盐和干旱相关联，分析了过表达GmSTOP1基因的拟南芥在幼苗时期对盐和甘露醇的反应，观察比较转基因和野生型拟南芥种子在含有不同浓度NaCl或甘露醇的萌发培养基中培养10d后主根生长情况并测量主根长度。
将GmSTOP1-1、GmSTOP1-2株系和野生型Col-0种子分别种于含有不同浓度甘露醇(浓度0、100、200和300mmol·L-1)和NaCl(50、100和150mmol·L-1)的1/2MS培养基上。4℃春花处理3d，转移到培养箱中生长(22℃，16h光/8h暗)，竖直生长10d后统计植株的根生长量。从图11可以看出，在正常萌发培养基中下，转基因植株与野生型长势较好，主根长度没有显著性差异。但在含有NaCl的培养基上生长10d后，野生型和过表达株系的主根生长都会受到一定程度的抑制，但过表达株系的主根都明显比野生型的主根长。在150mmol·L-1NaCl中拟南芥的主根受到的抑制最明显。在高浓度NaCl中培养后期拟南芥的叶片有黄化现象出现，且野生型拟南芥黄化较明显，部分植株已死亡，野生型Col-0平均根长只有3.8mm，而两个转基因株系的根长分别为6.9mm和6.6mm。以上结果说明，与野生型相比，GmSTOP1过表达拟南芥在幼苗期对盐胁迫的抗性得到提高。
如图12所示，在四个处理间拟南芥的主根长度有显著差异(SSR测验P<0.05)。但在不加和只加100mmol·L-1甘露醇两个处理中转基因植株与野生型的主根长度没有显著性差异。在含有200mmol·L-1和300mmol·L-1甘露醇的两个处理中野生型和过表达株系的主根生长都受到一定程度的抑制，但过表达株系的主根长显著(SSR测验P<0.05)高于野生型。对转基因株系幼苗期抗甘露醇胁迫能力检测结果表明，GmSTOP1基因的过表达能够提高拟南芥在幼苗期对甘露醇胁迫的抗性。

Claims (3)

1.植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1在培育耐盐或耐渗透胁迫的大豆品种中的应用，所述的植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示。
2.编码植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1的基因在培育耐盐或耐渗透胁迫的大豆品种中的应用，所述的编码植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示。
3.含有编码植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1的基因的重组表达载体在培育耐盐或耐渗透胁迫的大豆品种中的应用，所述的编码植物耐逆性相关蛋白GmSTOP1的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示。
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