CN104823739A - 抗旱性蓝莓及其培育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种抗旱性蓝莓及其培育方法，所述培育方法包括：a、将真菌接种于待接种的蓝莓植株上；b、将接种后的蓝莓植株进行干旱胁迫处理；其中，所述真菌选自摩西球囊霉(Glomus mosseae)、地表球囊霉(Glomus versiforme)、根内球囊霉(Glomus intraradices)或幼套球囊霉(Glomus etunicatum)中的一种或多种。通过该方法培育而得蓝莓具有优异的抗旱性。
Description
技术领域
本发明涉及蓝莓，具体地，涉及一种抗旱性蓝莓及其培育方法。
背景技术
蓝莓(Vaccinium spp.)为杜鹃花科越橘属灌木果树。蓝莓的驯化栽培历史不长，美国于1937年将选出的15个品种进行商业性载培，之后世界各国竞相引种栽培。各国根据自己的气候特点和资源优势开展了具有本国特色的蓝莓研究和栽培工作。一些发达国家已把普及蓝莓列为全民健康保障的一种措施，所以蓝莓的社会需求量迅速增长，产量缺口与日俱增。我国的蓝莓品种主要来源于美国和日本，现已引进适宜我国南北各地种植的品种100多个，适合在全国各气候条件下栽培。
然而，蓝莓为浅根性灌木果树，主根不明显，无根毛，不耐旱。而我国南方蓝莓又主要栽培在丘陵山地，很多产区灌溉条件差，经常遭遇局部或间歇式干旱的威胁，干旱已成为蓝莓高产优质的重要限制因子之一。
发明内容
本发明的目的是提供一种抗旱性蓝莓及其培育方法，通过该方法培育而得蓝莓具有优异的抗旱性。
为了实现上述目的，本发明提供了一种抗旱性蓝莓的培育方法，所述培育方法包括：
a、将真菌接种于待接种的蓝莓植株上；
b、将接种后的蓝莓植株进行干旱胁迫处理；
其中，所述真菌选自摩西球囊霉(Glomus mosseae)、地表球囊霉(G.versiforme)、根内球囊霉(Glomus intraradices)或幼套球囊霉(Glomusetunicatum)中的一种或多种。
本发明还提供了一种抗旱性蓝莓，所述抗旱性蓝莓通过上述的方法培养而得。
通过上述技术方案，本发明通过在蓝莓植株上接种真菌，使得真菌能够与蓝莓植株形成互惠共生体，从而利用互惠共生体提高蓝莓的抗旱性。另外，对接种后的蓝莓植株进行干旱胁迫处理，从而使得蓝莓植株对干旱胁迫作出包括形态、生理和基因表达在内的适应性反应。最终，在真菌和干旱胁迫的协同作用下，抗旱性蓝莓体内的可溶性糖的含量以及超氧化物歧化酶的含量得到明显的提高，进而使得蓝莓具有优异的抗旱性。
本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。
附图说明
附图是用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本发明，但并不构成对本发明的限制。在附图中：
图1是本发明测试例1中测得的B1-B6以及A1-A4的菌根侵染率的柱状对比图；
图2是本发明测试例2中测得的B1-B6以及A1-A4的相对含水量的柱状对比图；
图3是本发明测试例3中测得的B1-B6以及A1-A4的叶绿素含量的柱状对比图；
图4是本发明测试例4中测得的B1-B6以及A1-A4的可溶性糖含量的柱状对比图；
图5是本发明测试例5中测得的B1-B6以及A1-A4的超氧化物歧化酶(SOD)活性值的柱状对比图。
具体实施方式
以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。
本发明提供了一种抗旱性蓝莓的培育方法，所述培育方法包括：
a、将真菌接种于待接种的蓝莓植株上；
b、将接种后的蓝莓植株进行干旱胁迫处理；
其中，所述真菌选自摩西球囊霉(Glomus mosseae)、地表球囊霉(G.versiforme)、根内球囊霉(Glomus intraradices)或幼套球囊霉(Glomusetunicatum)中的一种或多种。
在本发明中，虽然述真菌可以选自摩西球囊霉(Glomus mosseae)、地表球囊霉(Glomus versiforme)、根内球囊霉(Glomus intraradices)或幼套球囊霉(Glomus etunicatum)中的一种或多种，但是从提高蓝莓的抗旱的效果上考虑，优选地，所述真菌为摩西球囊霉(Glomus mosseae)。
在本发明中，干旱胁迫处理即是不向接种后的蓝莓植株提供水分，具体的培养条件可以在宽的范围内选择，但是为了蓝莓具有更优异的抗旱性，优选地，所述干旱胁迫满足以下条件：胁迫温度为25-38℃，胁迫时间为240-480h。
同时，向待接种的蓝莓植株上接种真菌的方式可以是本领域任何一种常规的接种方式，可以是接种于蓝莓植株的根上，为了使得蓝莓具有更优异的抗旱性，优选地，步骤a的具体步骤为：将待培养的蓝莓植株置于基质中进行培养，其中，所述基质中含有所述真菌。
在上述接种方式的基础上，各物料的具体用量可以在宽的范围内选择，为了提高蓝莓的抗旱性，优选地，相对于1株待培养的蓝莓植株，所述基质的用量为2000-2500g，所述真菌菌剂的用量为10-100g，且所述真菌菌剂中真菌的孢子数为150-1500个。另外，培养的具体条件也可以在宽的范围内选择，同样地为了提高蓝莓的抗旱性，优选地，所述培养的具体条件为：培养时间为3-6个月，培养温度为10-35℃，日照时间为7-12小时/天。
在上述培养过程中，基质的具体选择也可以在宽的范围内选择，但是为了提高接种后的蓝莓植株的长势，优选地，在步骤a之前，所述培育方法还包括：将红壤土、石英砂和珍珠岩混合，然后进行灭菌处理以制得基质。更优选地，相对于1重量份的珍珠岩，所述红壤土的用量为28-29重量份，所述石英砂的用量为10-11重量份。进一步优选地，所述红壤土、石英砂和珍珠岩的粒径各自独立地选自0.1-3.0mm。
在上述基质的制备过程中，灭菌的具体条件可以在宽的范围内选择，但是为了进一步提高灭菌效果，优选地，所述灭菌的具体条件为：灭菌温度为121-125℃，灭菌压力为0.11-0.12MPa，灭菌时间为0.5-3h。
本发明还提供了一种抗旱性蓝莓，所述抗旱性蓝莓通过上述的方法培养而得。
以下将通过实施例对本发明进行详细描述。以下实施例中，待接种的蓝莓植株选自南高丛蓝莓品系‘薄雾’(Misty)蓝莓幼苗。摩西球囊霉(Glomusmosseae)选自北京市农林科学院植物营养与资源研究所“丛枝菌根真菌种质资源库(BGC)”的编号为BGC HUN01A的市售品，地表球囊霉(Glomusversiforme)选自北京市农林科学院植物营养与资源研究所“丛枝菌根真菌种质资源库(BGC)”的编号为BGC HUN02B的市售品，根内球囊霉(Glomusintraradices)选自北京市农林科学院植物营养与资源研究所“丛枝菌根真菌种质资源库(BGC)”的编号为BGC AH01的市售品，幼套球囊霉(Glomusetunicatum)选自北京市农林科学院植物营养与资源研究所“丛枝菌根真菌种质资源库(BGC)”的编号为BGC HEB04的市售品。
实施例1
1)将粒径为0.1mm的红壤土、粒径为1mm的石英砂与粒径为2mm的珍珠岩按重量比例28:10:1均匀混合，然后经过0.11MPa、121℃下湿热灭菌2h，取出凉至25℃下制得基质。
2)将待接种的蓝莓植株移栽于2.2kg基质中，移栽时向蓝莓植株的根部接种Glomus mosseae菌剂20g(含有200个孢子)。
3)将接种后的蓝莓植株在30℃干旱胁迫处理480h并进行培养得到抗旱性蓝莓A1，其中，培养的具体条件为：培养时间为5个月，培养温度为30℃，日照时间为10小时/天。
实施例2
按照实施例1的方法进行培育得到抗旱性蓝莓A2，所不同的是，将Glomus mosseae菌剂换为Glomus versiforme菌剂。
实施例3
按照实施例1的方法进行培育得到抗旱性蓝莓A3，所不同的是，将Glomus mosseae菌剂换为Glomus intraradices菌剂。
实施例4
按照实施例1的方法进行培育得到抗旱性蓝莓A4，所不同的是，将Glomus mosseae菌剂换为Glomus etunicatum菌剂。
实施例5
按照实施例1的方法进行培育得到抗旱性蓝莓A5，所不同的是，Glomusmosseae菌剂的用量为10g。
实施例6
按照实施例1的方法进行培育得到抗旱性蓝莓A6，所不同的是，Glomusmosseae菌剂的用量为100g。
对比例1
按照实施例1的方法进行培育得到蓝莓B1，所不同的是，接种后的蓝莓植株不进行干旱胁迫处理而是正常供水，每日的供水量为100g/株。
对比例2
按照实施例2的方法进行培育得到蓝莓B2，所不同的是，接种后的蓝莓植株不进行干旱胁迫处理而是正常供水，每日的供水量为100g/株。
对比例3
按照实施例3的方法进行培育得到蓝莓B3，所不同的是，接种后的蓝莓植株不进行干旱胁迫处理而是正常供水，每日的供水量为100g/株。
对比例4
按照实施例4的方法进行培育得到蓝莓B4，所不同的是，接种后的蓝莓植株不进行干旱胁迫处理而是正常供水，每日的供水量为100g/株。
对比例5
按照实施例1的方法进行培育得到蓝莓B5，所不同的是，不对蓝莓植株进行真菌接种处理。
对比例6
按照实施例1的方法进行培育得到蓝莓B6，所不同的是，不对蓝莓植株进行真菌接种处理，同时不进行干旱胁迫处理而是正常供水，每日的供水量为100g/株。
检测例1
采用曲利苯蓝乳酸酚法对A1-A4以及B1-B6进行蓝莓体内根菌侵染率的检测，具体结果见图1，由图可知经过正常供水后的蓝莓和干旱胁迫处理后的的蓝莓具有大体相当的根菌侵染率。
通过同样地方法检测得知，A5和A6同样具有大体相当的根菌侵染率。
检测例2
通过称重法对A1-A4以及B1-B6进行蓝莓体内相对含水量的检测，具体结果见图2，由图可知，干旱胁迫后的蓝莓的含水量低于正常供水后的蓝莓的含水量。
通过同样地方法检测得知，A5和A6的含水量低于正常供水后的蓝莓的含水量。
检测例3
通过丙酮-酒精浸提法对A1-A4以及B1-B6进行蓝莓体内叶绿素(包括叶绿素a和叶绿素b)含量的检测，具体结果见图3，由图可知，干旱胁迫后的蓝莓的叶绿素含量低于正常供水后的蓝莓的叶绿素含量。
通过同样地方法检测得知，A5和A6的叶绿素含量低于正常供水后的蓝莓的叶绿素含量。
检测例4
通过蒽酮比色法对A1-A4以及B1-B6进行蓝莓体内可溶性糖含量的检测，具体结果见图4，由图可知，干旱胁迫后的蓝莓的可溶性糖含量高于正常供水后的蓝莓的可溶性糖含量。
通过同样地方法检测得知，A5和A6的可溶性糖含量高于正常供水后的蓝莓的可溶性糖含量。
虽然，与常供水后的蓝莓相比，经过干旱胁迫后的蓝莓的相对含水量和叶绿素含量降低，但是经过干旱胁迫后的蓝莓体内具有较高的可溶性糖，由此便可提高蓝莓体内的渗透压，进而提高蓝莓从土壤以及空气中吸收水分的能力，从而达到了提高蓝莓抗旱性的效果。经此可得知，经过真菌接种和干旱胁迫处理后的蓝莓具有优异的抗旱性
检测例5
通过氮蓝四唑法对A1-A4以及B1-B6进行蓝莓体内超氧化物歧化酶含量的检测，具体结果见图5，由图可知，干旱胁迫后的蓝莓的超氧化物歧化酶含量高于正常供水后的蓝莓的超氧化物歧化酶含量。
通过同样地方法检测得知，A5和A6的超氧化物歧化酶含量高于正常供水后的蓝莓的超氧化物歧化酶含量。
虽然，与正常供水后的蓝莓相比，经过干旱胁迫后的蓝莓的相对含水量和叶绿素含量降低，但是经过干旱胁迫后的蓝莓体内具有较高的超氧化物歧化酶含量。由于，蓝莓处于干旱条件下，蓝莓体内会产生大量的超氧阴离子自由基，而超氧阴离子自由基能够破坏植物细胞的膜系统以使得膜透性增大和电解质渗漏导致植物细胞的伤害和死亡。但是，超氧化物歧化酶(SOD)能够有效地清除氧阴离子自由基而产生对植株抗旱有利的水和氧气，从而有效地避免了干旱过程中超氧化物歧化酶含量对植株的伤害，进一步地说明了经过真菌接种和干旱胁迫处理后的蓝莓具有优异的抗旱性。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。
Claims (10)
1.一种抗旱性蓝莓的培育方法，其特征在于，所述培育方法包括：
a、将真菌接种于待接种的蓝莓植株上；
b、将接种后的蓝莓植株进行干旱胁迫处理；
其中，所述真菌选自摩西球囊霉(Glomus mosseae)、地表球囊霉(G.versiforme)、根内球囊霉(Glomus intraradices)或幼套球囊霉(Glomusetunicatum)中的一种或多种。
2.根据权利要求1所述的培育方法，其中，所述真菌为摩西球囊霉(Glomus mosseae)。
3.根据权利要求1所述的培育方法，其中，所述干旱胁迫满足以下条件：胁迫温度为25-38℃，胁迫时间为240-480h。
4.根据权利要求1-3中的任意一项所述的培育方法，其中，步骤a的具体步骤为：将待培养的蓝莓植株置于基质中进行培养，其中，所述基质中含有所述真菌。
5.根据权利要求4所述的培育方法，其中，相对于1株待培养的蓝莓植株，所述基质的用量为2000-2500g，所述真菌菌剂的用量为10-100g，且所述真菌菌剂中真菌的孢子数为150-1500个。
6.根据权利要求4所述的培育方法，其中，所述培养的具体条件为：培养时间为3-6个月，培养温度为10-35℃，日照时间为7-12小时/天。
7.根据权利要求4所述的培育方法，其中，在步骤a之前，所述培育方法还包括：将红壤土、石英砂和珍珠岩混合，然后进行灭菌处理以制得基质。
8.根据权利要求7所述的培育方法，其中，相对于1重量份的珍珠岩，所述红壤土的用量为28-29重量份，所述石英砂的用量为10-11重量份；
优选地，所述红壤土、石英砂和珍珠岩的粒径各自独立地选自0.1-3.0mm。
9.根据权利要求7所述的培育方法，其中，所述灭菌的具体条件为：灭菌温度为121-125℃，灭菌压力为0.11-0.12MPa，灭菌时间为0.5-3h。
10.一种抗旱性蓝莓，其特征在于，所述抗旱性蓝莓通过权利要求1-9中任意一项所述的方法培养而得。
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