CN104823737A - 一种叶面喷施菌素提高菝葜块根中薯蓣皂苷元含量的方法 - Google Patents

一种叶面喷施菌素提高菝葜块根中薯蓣皂苷元含量的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种叶面喷施菌素提高菝葜块根中薯蓣皂苷元含量的方法，该方法包括（1）尖孢镰刀菌菌素的制备，将尖孢镰刀菌经接种和扩大培养得到菌丝体，将培养得到的菌丝体用甲醇或乙醇溶液提取得到尖孢镰刀菌菌素；（2）尖孢镰刀菌菌素的喷施，将尖孢镰刀菌菌素配成0.05-0.1%的水溶液，在花期前后1-2个月进行叶面喷施，在日出前或日落后进行喷施，每1-3天喷施1次，每次喷施剂量为使叶片均匀沾有溶液。通过本方法进行叶面喷施后，当年冬天采挖的菝葜块根薯蓣皂苷元含量比同等条件下不进行叶面喷施的高出10%-20%，薯蓣皂苷元含量提升效果十分显著。该方法还便于进行产业化、规模化和标准化实施，应用前景广阔。

Description

一种叶面喷施菌素提高菝葜块根中薯蓣皂苷元含量的方法
技术领域
本发明涉及一种叶面喷施菌素提高菝葜块根中薯蓣皂苷元含量的方法，具体指在花期前后进行叶面喷施尖孢镰刀菌菌素来提高菝葜块根中薯蓣皂苷元含量的方法。
背景技术
菝葜为百合科菝葜属的一种多年生落叶攀援灌木，于2010年正式收载于《中国药典》,具有祛风利湿、解毒散淤等功效，可用于筋骨酸痛、小便淋漓、带下量多、疔疮痈肿。菝葜主要以地下生长的块根入药，以菝葜原料药材研制的中药制剂用于治疗慢性盆腔炎、附件炎，疗效显著，市场需求较大。
菝葜中最主要的药效成分为薯蓣皂苷元，《中国药典》规定其含量不得低于0.04%，一般来说，薯蓣皂苷元含量越高则品质越好。菝葜块根中薯蓣皂苷元的含量受产地影响较大，部分地区出产的菝葜块根中薯蓣皂苷元含量超过药典标准上百倍，但也有一些地区出产的菝葜块根达不到药典要求，导致这些地区生产的菝葜几乎没有药用价值。如果提供一种过程简单，成本低廉的提高菝葜块根中薯蓣皂苷元含量的方法，就能有效提高菝葜块根的品质。
真菌提取物可用作诱导子来提高植物细胞培养过程中次生代谢物的产量，有利于快速提高植物有效成分的含量指标，如国外Asada M等人发现在细胞培养基中添加真菌提取物等明显提高薄荷细胞中薄荷醇的含量。通过筛选适合的菌素，将这种菌素应用于菝葜的种植，如果能有效提高菝葜块根薯蓣皂苷元含量，则不仅具有重要的理论意义，也具备很强的实用价值。
发明内容
本发明要解决的技术问题就是克服现有技术的不足，通过叶面喷施尖孢镰刀菌菌素，提供一种能有效提高菝葜块根薯蓣皂苷元含量的方法。
本发明包括以下几个步骤：
（1）尖孢镰刀菌菌素的制备，将尖孢镰刀菌接种于种子培养液中，28℃-35℃、转速120 rpm-160 rpm，培养48-72 h获得种子液；将种子液以体积比5%-10%的接种量接于扩大发酵培养液，发酵温度28℃-35℃、转速120 rpm-160 rpm，发酵培养时间为4d-5d；发酵培养液离心过滤后，获得尖孢镰刀菌菌丝体，将菌丝体用甲醇或乙醇溶液提取后即得尖孢镰刀菌菌素；
（2）尖孢镰刀菌菌素的喷施，将上述尖孢镰刀菌菌素配成0.05-0.1%的水溶液，配好的溶液在花期前后1-2个月往正在生长的菝葜进行叶面喷施，在日出前或日落后进行喷施，每1-3天喷施1次，每次喷施剂量为使叶片均匀沾有溶液。
所述种子培养液的优选制备方法为：马铃薯200g、葡萄糖20g、蒸馏水l000ml、pH 6-7、121℃灭菌20 min得到种子培养液。
所述扩大发酵培养液的优选制备方法为：马铃薯150g-200g、工业蛋白胨15g-20g、葡萄糖15g-20g、氯化钾0.05g -0.1g、硫酸钠1g-1.5g、硫酸镁1g-1.5g、碳酸钙1g-2g、加水定容至1000 ml，调节pH值 6-7，121℃灭菌20 min得到扩大发酵培养液。
通过本方法进行叶面喷施后，当年冬天采挖的菝葜块根薯蓣皂苷元含量即有明显提升，菝葜块根中薯蓣皂苷元含量比同等条件下不进行叶面喷施的薯蓣皂苷元含量高出10%-20%，薯蓣皂苷元含量提升效果十分显著。
本发明所应用的尖孢镰刀菌既有市售，有条件的单位也可自行分离，很容易获得，菌素的制备也不复杂；所用试剂和材料均为常用试剂和材料，价格较低；所采用的喷施方法较为简单，喷施的次数不多，周期也不长，一年只需喷施两个月左右，在不需要太多投入的条件下就能实现，而由于喷施带来的效益却很显著，有效提高了菝葜块根的药用价值。该方法还便于进行产业化、规模化和标准化实施，市场应用前景广阔。
具体实施方式
以下对提高菝葜块根中薯蓣皂苷元含量的方法进行详细说明。
实施例1
（1）尖孢镰刀菌菌素的制备，将尖孢镰刀菌接种于种子培养液中，29℃、转速150rpm，培养50h获得种子液；将种子液以体积比7%的接种量接于扩大发酵培养液，发酵温度30℃、转速125 rpm，发酵培养时间为4.1d；发酵培养液离心过滤后，获得尖孢镰刀菌菌丝体，将菌丝体用甲醇或乙醇溶液提取后即得尖孢镰刀菌菌素。
（2）尖孢镰刀菌菌素的喷施，将上述尖孢镰刀菌菌素配成0.08%的水溶液，配好的溶液在花期前后1.1个月往正在生长的菝葜进行叶面喷施，在日出前或日落后进行喷施，每1天喷施1次，每次喷施剂量为使叶片均匀沾有溶液。
通过本方法进行叶面喷施后，当年冬天采挖的菝葜块根薯蓣皂苷元含量即有明显提升，菝葜块根中薯蓣皂苷元含量比同等条件下不进行叶面喷施的薯蓣皂苷元含量高出10.8%，薯蓣皂苷元含量提升效果十分显著。
实施例2
（1）尖孢镰刀菌菌素的制备，将尖孢镰刀菌接种于种子培养液中，34℃、转速130 rpm，培养60 h获得种子液；将种子液以体积比8%的接种量接于扩大发酵培养液，发酵温度30℃、转速140rpm，发酵培养时间为5d；发酵培养液离心过滤后，获得尖孢镰刀菌菌丝体，将菌丝体用甲醇或乙醇溶液提取后即得尖孢镰刀菌菌素；
（2）尖孢镰刀菌菌素的喷施，将上述尖孢镰刀菌菌素配成0.09%的水溶液，配好的溶液在花期前后1.5个月往正在生长的菝葜进行叶面喷施，在日出前或日落后进行喷施，每2天喷施1次，每次喷施剂量为使叶片均匀沾有溶液。
所述种子培养液的优选制备方法为：马铃薯200g、葡萄糖20g、蒸馏水l000ml、pH 6.8、121℃灭菌20 min得到种子培养液。
通过本方法进行叶面喷施后，当年冬天采挖的菝葜块根薯蓣皂苷元含量即有明显提升，菝葜块根中薯蓣皂苷元含量比同等条件下不进行叶面喷施的薯蓣皂苷元含量高出13.3%，薯蓣皂苷元含量提升效果十分显著。
实施例3
（1）尖孢镰刀菌菌素的制备，将尖孢镰刀菌接种于种子培养液中，31℃、转速140rpm，培养70 h获得种子液；将种子液以体积比6%的接种量接于扩大发酵培养液，发酵温度31℃、转速155 rpm，发酵培养时间为4.5d；发酵培养液离心过滤后，获得尖孢镰刀菌菌丝体，将菌丝体用甲醇或乙醇溶液提取后即得尖孢镰刀菌菌素；
（2）尖孢镰刀菌菌素的喷施，将上述尖孢镰刀菌菌素配成0.06%的水溶液，配好的溶液在花期前后2个月往正在生长的菝葜进行叶面喷施，在日出前或日落后进行喷施，每3天喷施1次，每次喷施剂量为使叶片均匀沾有溶液。
所述扩大发酵培养液的优选制备方法为：马铃薯180g、工业蛋白胨16g、葡萄糖17g、氯化钾0.08g、硫酸钠1.3g、硫酸镁1.2g、碳酸钙1.5g、加水定容至1000 ml，调节pH值 6.3，121℃灭菌20 min得到扩大发酵培养液。
通过本方法进行叶面喷施后，当年冬天采挖的菝葜块根薯蓣皂苷元含量即有明显提升，菝葜块根中薯蓣皂苷元含量比同等条件下不进行叶面喷施的薯蓣皂苷元含量高出16.8%，薯蓣皂苷元含量提升效果十分显著。
实施例4
（1）尖孢镰刀菌菌素的制备，将尖孢镰刀菌接种于种子培养液中，33℃、转速140 rpm，培养65 h获得种子液；将种子液以体积比7.5%的接种量接于扩大发酵培养液，发酵温度34℃、转速135 rpm，发酵培养时间为4.8；发酵培养液离心过滤后，获得尖孢镰刀菌菌丝体，将菌丝体用甲醇或乙醇溶液提取后即得尖孢镰刀菌菌素；
（2）尖孢镰刀菌菌素的喷施，将上述尖孢镰刀菌菌素配成0.07%的水溶液，配好的溶液在花期前后1.8个月往正在生长的菝葜进行叶面喷施，在日出前或日落后进行喷施，每2天喷施1次，每次喷施剂量为使叶片均匀沾有溶液。
所述种子培养液的优选制备方法为：马铃薯200g、葡萄糖20g、蒸馏水l000ml、pH 6.8、121℃灭菌20 min得到种子培养液。
所述扩大发酵培养液的优选制备方法为：马铃薯190g、工业蛋白胨19g、葡萄糖18.9g、氯化钾0.08g、硫酸钠1.1g、硫酸镁1.4g、碳酸钙1.7g、加水定容至1000 ml，调节pH值 6.5，121℃灭菌20 min得到扩大发酵培养液。
通过本方法进行叶面喷施后，当年冬天采挖的菝葜块根薯蓣皂苷元含量即有明显提升，菝葜块根中薯蓣皂苷元含量比同等条件下不进行叶面喷施的薯蓣皂苷元含量高出19.2%，薯蓣皂苷元含量提升效果十分显著。

Claims (3)

1.一种叶面喷施菌素提高菝葜块根中薯蓣皂苷元含量的方法，其特征在于包含以下几个步骤：
（1）尖孢镰刀菌菌素的制备，将尖孢镰刀菌接种于种子培养液中，28℃-35℃、转速120 rpm-160 rpm，培养48-72 h获得种子液；将种子液以体积比5%-10%的接种量接于扩大发酵培养液，发酵温度28℃-35℃、转速120 rpm-160 rpm，发酵培养时间为4d-5d；发酵培养液离心过滤后，获得尖孢镰刀菌菌丝体，将菌丝体用甲醇或乙醇溶液提取后即得尖孢镰刀菌菌素；
（2）尖孢镰刀菌菌素的喷施，将上述尖孢镰刀菌菌素配成0.05-0.1%的水溶液，配好的溶液在花期前后1-2个月往正在生长的菝葜进行叶面喷施，在日出前或日落后进行喷施，每1-3天喷施1次，每次喷施剂量为使叶片均匀沾有溶液。
2.根据权利要求1所述叶面喷施菌素提高菝葜块根中薯蓣皂苷元含量的方法，其特征在于：所述种子培养液的制备方法为马铃薯200g、葡萄糖20g、蒸馏水l000ml、pH 6-7、121℃灭菌20 min得到种子培养液。
3.根据权利要求1或2所述叶面喷施菌素提高菝葜块根中薯蓣皂苷元含量的方法，其特征在于：所述扩大发酵培养液的制备方法为马铃薯150g-200g、工业蛋白胨15g-20g、葡萄糖15g-20g、氯化钾0.05g -0.1g、硫酸钠1g-1.5g、硫酸镁1g-1.5g、碳酸钙1g-2g、加水定容至1000 ml，调节pH值 6-7，121℃灭菌20 min得到扩大发酵培养液。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106973752A (zh) * 2017-05-10 2017-07-25 胡江宇 一种提高山银花产量和质量的方法
CN107094475A (zh) * 2017-05-10 2017-08-29 胡江宇 利用超声波辐射提高山银花产量和质量的方法
CN107135830A (zh) * 2017-05-10 2017-09-08 胡江宇 利用电磁波辐射提高山银花产量和质量的方法
CN112322687A (zh) * 2017-04-05 2021-02-05 中国医学科学院医药生物技术研究所 用于制备薯蓣皂苷元的菌剂及其应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4652294A (en) * 1985-05-31 1987-03-24 Professional Agricultural Management, Inc. Foliar fertilization method and compounds
CN103503924A (zh) * 2013-08-29 2014-01-15 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 一种尖孢镰刀菌菌剂的制备方法与应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4652294A (en) * 1985-05-31 1987-03-24 Professional Agricultural Management, Inc. Foliar fertilization method and compounds
CN103503924A (zh) * 2013-08-29 2014-01-15 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 一种尖孢镰刀菌菌剂的制备方法与应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
刘娟等: "镰刀菌诱导子对盾叶薯蓣离体培养物中薯蓣皂素合成的影响", 《氨基酸和生物资源》 *
张瑞芬等: "盾叶薯蓣内生真菌及其对宿主培养物生长和皂苷元生产的影响", 《天然产物研究与开发》 *
李培琴等: "内生镰刀菌 Dzf17 多糖对盾叶薯蓣", 《天然产物研究与开发》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112322687A (zh) * 2017-04-05 2021-02-05 中国医学科学院医药生物技术研究所 用于制备薯蓣皂苷元的菌剂及其应用
CN106973752A (zh) * 2017-05-10 2017-07-25 胡江宇 一种提高山银花产量和质量的方法
CN107094475A (zh) * 2017-05-10 2017-08-29 胡江宇 利用超声波辐射提高山银花产量和质量的方法
CN107135830A (zh) * 2017-05-10 2017-09-08 胡江宇 利用电磁波辐射提高山银花产量和质量的方法

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