CN104814041A - 一种防治黄瓜白粉病的微生物源杀菌剂 - Google Patents
一种防治黄瓜白粉病的微生物源杀菌剂 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104814041A CN104814041A CN201510111077.0A CN201510111077A CN104814041A CN 104814041 A CN104814041 A CN 104814041A CN 201510111077 A CN201510111077 A CN 201510111077A CN 104814041 A CN104814041 A CN 104814041A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- weight
- powdery mildew
- cucumber
- microbial
- fatty acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
本发明涉及一种防治黄瓜白粉病的微生物源杀菌剂，其特征在于按重量份数由以下原料组成：1-30重量%的针叶树精油、20-50重量%的脂肪酸、1-30重量%的乳化剂、0.1-10重量%的多价酒精、10-50重量%的水、0.1-1重量%的微生物代谢产物混合组成的白粉病防治制剂。其将发酵后的抗生素溶杆菌的代谢产物，通过与保护剂和分散剂的有机组合配制生防制剂；该生防制剂将具有渗透迅速、药效快、普抗性广的特点，所有原料符合有机栽培标准。
Description
技术领域
本发明涉及一种防治黄瓜白粉病的微生物源杀菌剂，属于植物保护的领域。
背景技术
黄瓜白粉病是我国黄瓜生产面临的三大病害之一，同时也是世界范围内一种主要的黄瓜叶部病害，该病害从幼苗期到成株期都能侵染黄瓜植株，具有流行性强、发病率高、潜育期短和再侵染频繁的特点，可以导致黄瓜减产并影响果实品质。据统计，该病害导致的黄瓜减产量一般年份约在10%，而流行年份更是高达30%左右，已严重影响了黄瓜的农业生产。
应用硫制剂、苯并咪唑类、有机磷类、苯氧基喹啉累、甾醇合成抑制剂、甲氧基丙烯酸酯类、以及琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂防治黄瓜白粉病，化学防治见效快、高效且稳定，但是对环境污染较大，对人类、家畜有毒害。
提取蛇床子素、大黄等生物药剂防治黄瓜白粉病，虽然生物制剂对环境友好，但是见效较慢，生物活性易受环境影响而不稳定，对环境要求较严格，且成本较高。
发明内容
本发明的目的在于提供一种防治黄瓜白粉病的微生物源杀菌剂，其将发酵后的抗生素溶杆菌的代谢产物，通过与保护剂和分散剂的有机组合配制生防制剂；该生防制剂将具有渗透迅速、药效快、普抗性广的特点，所有原料符合有机栽培标准。
本发明的技术方案是这样实现的：一种防治黄瓜白粉病的微生物源杀菌剂，其特征在于按重量份数由以下原料组成：1-30重量% 的针叶树精油、20-50重量%的脂肪酸、1-30重量%的乳化剂、0.1-10重量%的多价酒精、10-50重量%的水、0.1-1重量%的微生物代谢产物混合组成的白粉病防治制剂。
所述的针叶树精油为含有Tricyclene, α-Pinene, β-Pinene, Camphene, Sabinene, Myrcene, β-Phellandrene, α-Terpinena, Limonene, α-Thujene, ν-Terpinene, ρ-Cymene, Terpinolene, α-Cubebene, α-Copaene, Camphore, Linalool, Linalyl acetate, Bornvl zcetate, Thymol methyl ether, β-Elemene, β-Caryophllene,Terpinene, Widdrene, Humulene, β-Selinene, ν-Muurolene, α-Terpineol, Borneol, α-Terpinyl acetate,ν-Elemene Bicyclosesqui, Phellandrene, α-Muurolene, α-Cadinene, σ-Cadinene, ν-Cadinene, ρ-
Cymene-3-ol, Caryophyllene, Oxide, Farnesol, Elemol, α-Selinece, Cedrol, Spathulene, β-Selinene, Τ-Muurolo, Stach-15-ene, α-Eudesmol Globulol, α-Podocarprene 当中的20种以上成分为特征；脂肪酸可选用Linoleic acid，Oleic acid, Palmitic acid, Linolenic acid, Ricinoleic acid，Stearicacid) 中的任何一种。
所述乳化剂可选用脂肪醇聚乙二醇醚，烷基酚，脂肪酸，甘油脂肪酸酯，脂肪酸烷醇酰胺，APG，糖酯，胺氧化物中的一种。
所述的微生物代谢产物的制得：称取采集土壤1g, 在含有100mL生理盐水的三角瓶中30℃恒温条件下震荡30分钟，制成样品悬浮液，采用梯度稀释法进行稀释后均匀涂布于几丁质细菌基础培养基上，培养3天；挑取周边有明显菌落透明圈的单菌落，进行划线纯化菌株。微生物在液态几丁质培养基发酵96小时后发酵液经4000 r/min 离心15min, 收集上清液, 于上清液中缓慢加入(NH4)2SO4,使溶液中(NH4)2SO4 饱和度达到20%, 4 ℃静置过夜后10000 r/min 冷冻离心, 去除杂蛋白。在清液中继续加入(NH4)2SO4, 使其饱和度达到75%, 4 ℃静置过夜后10000 r/min 冷冻离心, 将沉淀溶于蒸馏水,置于透析袋中, 对0.02 mol/L pH8.0 的磷酸缓冲液透析24 h。
所述的微生物发酵液中土壤是用分离筛选分解几丁质微生物获取的，土壤是采自浙江省舟山市周边富含蟹壳废弃物的海岸线土壤。所述的几丁质培养基由以下原料配方(g/L)组成：胶体几丁质 5；Na2HPO4 2; KH2PO4 1%; NaCl 0.5; NH4Cl 1; MgSO4 7H2O 0.5; CaCl2 2H2O 0.5; KNO3 0.5;酵母浸粉0.1；琼脂 20；
该制剂的制作工艺如下：
1. 针叶树精油和植物油（脂肪酸）的混合的制备：将100份重量的针叶树精油和200-250份重量的植物油（脂肪酸）混合后在常温条件下以100~500rpm的转速搅拌5-15分钟；
2. 上述经第1步制得的混合物100份重量中添加50-60份乳化剂及1-10份重量的多价酒精后以1,000~5,000rpm的转速搅拌10-30分钟；
3. 上述 经第2步制得的混合物100份重量中添加0.1-1重量%的微生物代谢产物和100-200份重量的水后以1,000~5,000rpm的转速搅拌10-30分钟；
4. 高压均化: 将上述经第3步制得的混合物在高压均化器中以500~1,000bar均化3次即可得到制剂。
本发明的积极效果是通过显微镜观察发现，可通过破坏孢子细胞壁来抑制白粉病病原菌的繁殖，植物试验结果显示，微生物制剂处理白粉病发病率仅为8.77%，防效高达89.32%，远高于对照。微生物制剂处理增产了15.7%，总氨基酸含量等品质指标和根系活力明显高于对照组。研究表明该制剂可以有效抑制黄瓜防治白粉病的发生，同时有促进植物生长的良好作用，具有潜在的应用价值。
附图说明
图1是清水处理的孢子A1图片。
图2为制剂处理的孢子B1图片。
图3为清水处理的叶表面A2的图片。
图4为制剂处理的叶表面B2的图片。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明做进一步的描述：
实施例 1、对白粉病病原菌的抑制效果观察
在白粉病发后用毛笔将分生孢子刷于盛于制剂浓度为0，500,1000,2000 ml/L的烧杯中静置2小时后利用显微镜观察孢子表面。发病叶片于乙醇一乙酸(V:V=3:l)混合液中固定脱色至透明后，甲基蓝/乳酸/甘油/蒸馏水(W:V:V:V=1:1:1:1)混合液染色24h。光学显微镜下观察病原菌在叶面的饱子萌发、附着胞形成、菌丝伸长、吸器发育以及分生孢子形成情况。
1-1盆栽实验
供试土壤采自公主岭市范家屯镇农田土，土壤经自然风干、锤碎、过5 mm筛，该土壤含有有机质3.23%，碱解氮115.5mg/kg，有效磷 277.8mg/kg，速效钾510mg/kg。制剂处理区将几丁质制剂原液稀释500倍而成，化学制剂处理处理选用百菌清，对照为清水处理，重复3次，随机区组排列。按50kg/667m2复合肥（N-P2O5-K2O=15%-15%-15%）做基肥，30kg/667m2尿素（含N量46%）分3次作为追肥施用。各处理于黄瓜白粉病接种以前喷施100mL，对照取等量清水叶面喷施1次。白粉病发病以后每5天喷施1次，共喷施3次。在晴天的早上9～11时或下午4～6时，均匀喷洒于叶片正反两面，达到叶表湿润。病虫防治及其它管理同生产。
1-2 测试项目
从白粉病发病开始统计各处理黄瓜植株发病叶片的数量，用以计算发病率和防治效果。
于盛果期取样（每个处理取样5根黄瓜），分析黄瓜的氨基酸、维生素C，葡萄糖含量等指标。
每个处理选择3株，测量基部茎粗（在主干离地面5cm部位测量）、叶片数、叶面积（每株取第11-第15节间的功能叶，利用数码相机和Photoshop软件非破坏性测定叶面积）、鲜重和叶绿素含量，及时采收并计产。
同时将上述3株黄瓜的根系完整取出，采用甲烯蓝吸附法对其进行根系活力测定。
2、光学显微镜下病原孢子情况
微生物制剂的处理对白粉病病原菌孢子及发病叶面的处理效果如图所示。在500倍稀释液处理2小时后病原菌的孢子子囊壳渐渐突起直至破裂，内容物被释放出来，直至子囊壳内无其他物质，子囊死亡（图1为清水处理的孢子A1，内容物全部被子囊壳包裹，子囊壳完整。图2为制剂处理的孢子B1，子囊壳已经破裂，内容物从中流出）。清水处理对照区的叶表面上可发现吸气（图3）而制剂处理区的叶面可见清晰未破坏的植物叶脉组织（图4）。由此可以证明该微生物制剂对白粉病孢子的破坏及对植物的保护作用。
2.1 微生物制剂对黄瓜生物性状的影响
不同处理条件对黄瓜生物性状的影响见表1，与对照相比，微生物制剂处理增产了15.7%，明显高于对照组；粗度相比对照组增加了11.7%，但与化学处理相比较增长不明显；在有效叶片、叶面积上微生物制剂处理与对照相比则无明显差异；但在防病能力方面微生物处理显现出明显的优势：对照组的发病率为82%，化学处理的为33.83%，微生物制剂处理的仅为8.77%，防效高达89.32%。可见，微生物制剂对于黄瓜的产量和防病效果都有积极的作用。
2.2 微生物制剂对黄瓜品质的影响
表2为不同处理条件对黄瓜植株品质的影响，可以看出，微生物制剂处理的总氨基酸、维生素C和葡萄糖含量均明显高于化学农药和对照处理，这说明了微生物制剂对黄瓜的品质有明显的改善作用。
2.3 微生物制剂对黄瓜根系活力的影响
不同处理条件对黄瓜根系活力的影响见表3，微生物制剂处理表现出了较强的根系活力，这与不同处理地下根部性状中的根条数，根体积，根鲜重等有关。结合表1我们可以看出，根系活力的大小与其产量有一定的联系，根系活力越大，产量越高。
黄瓜白粉病发病时主要侵害黄瓜叶片部位，致使光合作用受到影响，而光合作用的强弱直接影响植物对养分的利用效率[22]。本实验中，在发病前对黄瓜叶片进行微生物制剂处理可以大幅度降低叶片的发病率，从而降低了白粉病对黄瓜叶片光合作用的影响，进而提高了黄瓜对养分的利用效率。对黄瓜各项生物性状的测量数据也证明了上述结论的正确性。光学显微镜下对发病急正常叶片的观察有效证实了制剂对黄瓜白粉病有良好的抑制作用。
实施例 2 将原液稀释500倍，于黄瓜白粉病接种以前喷施100mL，白粉病发病以后每5天喷施1次，共喷施3次。在晴天的早上9～11时或下午4～6时，均匀喷洒于叶片正反两面，达到叶表湿润。病虫防治及其它管理同生产。
Claims (7)
1.一种防治黄瓜白粉病的微生物源杀菌剂，其特征在于按重量份数由以下原料组成：1-30重量% 的针叶树精油、20-50重量%的脂肪酸、1-30重量%的乳化剂、0.1-10重量%的多价酒精、10-50重量%的水、0.1-1重量%的微生物代谢产物混合组成的白粉病防治制剂。
2.根据权利要求1中所述的一种防治黄瓜白粉病的微生物源杀菌剂，其特征在于所述的针叶树精油为含有Tricyclene, α-Pinene, β-Pinene, Camphene, Sabinene, Myrcene, β-Phellandrene, α-Terpinena, Limonene, α-Thujene, ν-Terpinene, ρ-Cymene, Terpinolene, α-Cubebene, α-Copaene, Camphore, Linalool, Linalyl acetate, Bornvl zcetate, Thymol methyl ether, β-Elemene, β-Caryophllene,Terpinene, Widdrene, Humulene, β-Selinene, ν-Muurolene, α-Terpineol, Borneol, α-Terpinyl acetate,ν-Elemene Bicyclosesqui, Phellandrene, α-Muurolene, α-Cadinene, σ-Cadinene, ν-Cadinene, ρ-
Cymene-3-ol, Caryophyllene, Oxide, Farnesol, Elemol, α-Selinece, Cedrol, Spathulene, β-Selinene, Τ-Muurolo, Stach-15-ene, α-Eudesmol Globulol, α-Podocarprene 当中的20种以上成分为特征；脂肪酸可选用Linoleic acid，Oleic acid, Palmitic acid, Linolenic acid, Ricinoleic acid，Stearicacid) 中的任何一种。
3.根据权利要求1中所述的一种防治黄瓜白粉病的微生物源杀菌剂，其特征在于所述乳化剂可选用脂肪醇聚乙二醇醚，烷基酚，脂肪酸，甘油脂肪酸酯，脂肪酸烷醇酰胺，APG，糖酯，胺氧化物中的一种。
4.根据权利要求1中所述的一种防治黄瓜白粉病的微生物源杀菌剂，其特征在于所述的微生物代谢产物的制得：称取采集土壤1g, 在含有100mL生理盐水的三角瓶中30℃恒温条件下震荡30分钟，制成样品悬浮液，采用梯度稀释法进行稀释后均匀涂布于几丁质细菌基础培养基上，培养3天；挑取周边有明显菌落透明圈的单菌落，进行划线纯化菌株；微生物在液态几丁质培养基发酵96小时后发酵液经4000 r/min 离心15min, 收集上清液, 于上清液中缓慢加入(NH4)2SO4,使溶液中(NH4)2SO4 饱和度达到20%, 4 ℃静置过夜后10000 r/min 冷冻离心, 去除杂蛋白；在清液中继续加入(NH4)2SO4, 使其饱和度达到75%, 4 ℃静置过夜后10000 r/min 冷冻离心, 将沉淀溶于蒸馏水,置于透析袋中, 对0.02 mol/L pH8.0 的磷酸缓冲液透析24 h。
5.根据权利要求4中所述的一种防治黄瓜白粉病的微生物源杀菌剂，其特征在于所述的微生物发酵液中土壤是用分离筛选分解几丁质微生物获取的，土壤是采自浙江省舟山市周边富含蟹壳废弃物的海岸线土壤。
6.根据权利要求5中所述的一种防治黄瓜白粉病的微生物源杀菌剂，其特征在于所述的几丁质培养基由以下原料配方(g/L)组成：胶体几丁质 5；Na2HPO4 2; KH2PO4 1%; NaCl 0.5; NH4Cl 1; MgSO4 7H2O 0.5; CaCl2 2H2O 0.5; KNO3 0.5;酵母浸粉0.1；琼脂 20。
7.根据权利要求5中所述的一种防治黄瓜白粉病的微生物源杀菌剂，其特征在于所述的杀菌剂的制作工艺如下：
（1）针叶树精油和植物油（脂肪酸）的混合的制备：将100份重量的针叶树精油和200-250份重量的植物油（脂肪酸）混合后在常温条件下以100~500rpm的转速搅拌5-15分钟；
（2）上述经第（1）步制得的混合物100份重量中添加50-60份乳化剂及1-10份重量的多价酒精后以1,000~5,000rpm的转速搅拌10-30分钟；
（3）上述经第（2）步制得的混合物100份重量中添加0.1-1重量%的微生物代谢产物和100-200份重量的水后以1,000~5,000rpm的转速搅拌10-30分钟；
（4）高压均化: 将上述经第（3）制得的混合物在高压均化器中以500~1,000bar均化3次即可得到制剂。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510111077.0A CN104814041A (zh) | 2015-03-13 | 2015-03-13 | 一种防治黄瓜白粉病的微生物源杀菌剂 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510111077.0A CN104814041A (zh) | 2015-03-13 | 2015-03-13 | 一种防治黄瓜白粉病的微生物源杀菌剂 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104814041A true CN104814041A (zh) | 2015-08-05 |
Family
ID=53724746
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510111077.0A Pending CN104814041A (zh) | 2015-03-13 | 2015-03-13 | 一种防治黄瓜白粉病的微生物源杀菌剂 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104814041A (zh) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101356933A (zh) * | 2008-08-05 | 2009-02-04 | 聊城大学 | 一种食用植物油杀菌剂及其应用方法 |
| CN101669480A (zh) * | 2009-09-28 | 2010-03-17 | 深圳诺普信农化股份有限公司 | 农药水乳剂及其制备方法 |
| CN102283254A (zh) * | 2010-03-17 | 2011-12-21 | 钟韬 | 一种植物源环保农药制剂 |
| WO2012127129A1 (fr) * | 2011-03-21 | 2012-09-27 | Agro Industrie Recherches Et Developpements (A.R.D.) | Nouvelles compositions d'oligomeres polyesters et utilisation comme agents tensioactifs |
| CN102715199A (zh) * | 2012-06-29 | 2012-10-10 | 厦门百度科技开发有限公司 | 一种植物源杀菌剂及其制备方法 |
-
2015
- 2015-03-13 CN CN201510111077.0A patent/CN104814041A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101356933A (zh) * | 2008-08-05 | 2009-02-04 | 聊城大学 | 一种食用植物油杀菌剂及其应用方法 |
| CN101669480A (zh) * | 2009-09-28 | 2010-03-17 | 深圳诺普信农化股份有限公司 | 农药水乳剂及其制备方法 |
| CN102283254A (zh) * | 2010-03-17 | 2011-12-21 | 钟韬 | 一种植物源环保农药制剂 |
| WO2012127129A1 (fr) * | 2011-03-21 | 2012-09-27 | Agro Industrie Recherches Et Developpements (A.R.D.) | Nouvelles compositions d'oligomeres polyesters et utilisation comme agents tensioactifs |
| CN102715199A (zh) * | 2012-06-29 | 2012-10-10 | 厦门百度科技开发有限公司 | 一种植物源杀菌剂及其制备方法 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| FLORA V. ROMEO等: "Antimicrobial Effect of Some Essential Oils", 《JOURNAL OF ESSENTIAL OIL RESEARCH》 * |
| M. J. STADNIK等: "Bioprospecting for plant and fungus extracts with systemic effect to control the cucumber powdery mildew", 《JOURNAL OF PLANT DISEASES AND PROTECTION》 * |
| W. R. JARVIS等: "Factors affecting antagonism of cucumber powdery mildew by Stephanoascus flocculosus and s. rugulosus", 《MYCOL. RES.》 * |
| 司美茹等: "几丁质酶产生菌的筛选及其发酵液对病原真菌的拮抗作用", 《现代农业科学》 * |
| 范瑛阁等: "黄瓜白粉病生防菌的筛选及广谱性测定", 《北方园艺》 * |
| 鹿秀云等: "黄瓜白粉病拮抗细菌的筛选与鉴定及其防病机理", 《中国生物防治》 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Pour et al. | Investigating the formulation of alginate-gelatin encapsulated Pseudomonas fluorescens (VUPF5 and T17-4 strains) for controlling Fusarium solani on potato | |
| CN101891548B (zh) | 一种三株地衣芽孢杆菌制作的多效微生物菌肥 | |
| CN103320327B (zh) | 一种淡紫拟青霉及其培养方法和应用 | |
| KR20210057812A (ko) | 유해한 대기 가스를 줄일 뿐만 아니라 탄소 이용 및/또는 격리를 향상시키기 위한 물질 및 방법 | |
| JP2017534671A (ja) | 微生物組成物及びその使用方法 | |
| CN101220335B (zh) | 一种防治烟草黑胫病的菌株及其菌剂 | |
| BR122020001306B1 (pt) | Métodos e composições de fermentação bacteriana | |
| CN107365725A (zh) | 一种有机物料腐熟剂及其制备方法 | |
| CN101717301A (zh) | 一种胶囊型微生物肥料及制备方法 | |
| Xu et al. | Autotoxicity in Pogostemon cablin and their allelochemicals | |
| CN102524307A (zh) | 防治根结线虫的复合微生物菌剂及其制备方法 | |
| CN102174431B (zh) | 防治西瓜细菌性果斑病生防菌株 | |
| CN108925586A (zh) | 一种提高植物病虫害防治效果的微生物组合制剂 | |
| Bao et al. | Potential applicability of a cyanobacterium as a biofertilizer and biopesticide in rice fields | |
| de Araujo Avila et al. | Use of efficient microorganisms in agriculture | |
| CN102742607A (zh) | 一种淡紫拟青霉真菌孢子油悬浮剂及其制备方法和应用 | |
| Ramadhani et al. | The effect of the combination of arbuscular mycorrhiza and rhizobacteria and doses of NPK fertilizer on the growth of Sorghum bicolor (L.) Moench | |
| KR101481767B1 (ko) | 당밀 발효 부산물을 이용한 토양개량용 미생물 제제 | |
| CN105112325A (zh) | 高效降解烯酰吗啉的蜡状芽孢杆菌菌株wl08及其应用及使用方法 | |
| CN100401897C (zh) | 防治温室蔬菜疫病的复合菌剂 | |
| CN104814041A (zh) | 一种防治黄瓜白粉病的微生物源杀菌剂 | |
| CN104109647B (zh) | 一种复合根瘤菌剂及其制备和应用 | |
| CN113875464A (zh) | 一种利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法 | |
| CN109112163B (zh) | 一株戊糖乳杆菌发酵液及其抑制辣椒疫霉菌的应用 | |
| JP2009007220A (ja) | 抗病原性及び／又は害虫防除性有機発酵菌体肥料 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| EXSB | Decision made by sipo to initiate substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20150805 |