CN104807791A - 一种基于量子点-金纳米组装超结构对双酚a进行检测的方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于分析化学领域，涉及一种基于量子点-金纳米组装超结构对双酚A进行检测的方法。首先分别制备了荧光量子点及金纳米颗粒，通过在纳米材料表面修饰DNA，并以DNA分子为模板制备量子点-金可控纳米组装超结构，利用双酚A与量子点表面修饰的核酸适配体的特异性识别，使得量子点从组装体中解离，通过体系中荧光强度的变化对双酚A浓度进行检测，双酚A的检测线为1.64pg/mL，线性范围为1-500pg/mL。本发明方法能特异性地对双酚A进行快速、高灵敏检测，为食品包装材料中有害物的痕量检测提供了一种有效的方法。

Description

一种基于量子点-金纳米组装超结构对双酚A进行检测的方法

技术领域

本发明属于分析化学领域，涉及一种基于量子点-金纳米组装超结构对双酚A进行检测的方法。

背景技术

双酚A(Bisphenol A，简称BPA)，化学名称2，2-二(4-羟基苯基)丙烷，是聚碳酸酯、环氧树脂以及聚氯乙烯树脂合成的增塑剂，目前已广泛用于罐头食品、饮料包装、奶瓶、水瓶等数百种日用品中。双酚A虽属低毒性化学物，但由于其化学结构类似雌二醇和乙稀雌酴，因而和其他环境激素一样，BPA能模仿或干扰内源性雌激素，即使很低的剂量也能使动物产生雌性早熟、精子数下降、前列腺增生等作用。此外，有资料显示双酚A具有一定的胚胎毒性和致畸性，可明显增加动物卵巢癌、前列腺癌、白血病等癌症的发生。由于双酚A在自然界中广泛存在，且难以降解，能够通过食物链、食品包装容器以及塑料薄膜渗入到食物中，危害人类健康。因此，发明一种能够快速、高灵敏检测双酚A的方法是非常重要的。

传统双酚A的检测方法大多采用仪器法(如：气相法、液相法)，但这些方法存在对样品前处理要求高、设备昂贵、工作量大、成本高等缺点，已不能满足当前食品安全检测的要求。为此，开发一种快速、方便、低成本、高灵敏的新型双酚A检测方法是非常有必要的。量子点是一种由II-VI族或III-V族元素组成的直径在100nm以内的微小荧光颗粒，基于量子尺寸效应和介电限域效应，该材料能够在一定激发光的照射下发射出不同颜色的光。与染料相比，量子点的荧光强度高，荧光寿命长，具有宽的激发波长和窄的发射波长等优点，目前已被广泛用于传感检测、生物成像、载药、疾病诊断等领域。但是由于量子点本身尺寸小(通常在3-5nm)、水相中不稳定，因而很难实现可控定向组装。基于DNA分子对量子点在纳米尺寸范围内进行可控定向排布，并利用金纳米颗粒与量子点之间的荧光共振能量转移，开发新型荧光传感器用于双酚A的快速、高灵敏检测是一种技术创新发展方向。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术中量子点定向组装难、可控程度低等问题，提供一种基于DNA分子模板的量子点-金纳米组装超结构可控制备方法，并基于该纳米组装体特殊的光学性质开发用于快速检测双酚A的荧光传感器。

本发明的目的通过以下技术方案实现

1.本发明提供一种基于量子点-金纳米组装超结构对双酚A进行检测的方法，该方法以DNA分子为模板制备量子点-金纳米组装超结构，量子点表面修饰的DNA内嵌有目标物的适配体序列，目标物通过与适配体结合使得量子点从纳米组装体中解离，通过组装体荧光强度的变化对目标物浓度进行检测。

量子点通过表面DNA分子的互补杂交定向偶联在金纳米颗粒表面，形成以金纳米颗粒为核，量子点为壳的空间纳米组装超结构；当距离小于10纳米时，量子点的荧光会被金纳米颗粒淬灭；当超过10纳米的距离时，量子点的荧光得到恢复。当检测溶液中存在双酚A时，双酚A能与内嵌在DNA2骨架内自身的核酸适配体结合，使得量子点从金纳米颗粒表面解离，纳米组装结构被破坏，从而使此量子点的荧光信号明显增强，根据荧光信号强度与双酚A浓度建立标准曲线，可以对双酚A进行定性、定量检测。

2.上述1提供的检测方法，所述目标物为双酚A，其适配体序列为：CCGGTGGGTGGTCAGGTGGGATAGCGTTCCGCGTATGGCCCAGCGCATCACGGGTTCGCACCA。

3.上述2提供的检测方法，量子点-金纳米组装超结构由两种不同纳米颗粒-DNA复合物组装而成：金纳米颗粒表面修饰DNA即Au-DNA1，量子点表面修饰DNA即QD-DNA2；DNA2嵌入了双酚A的核酸适配体序列；

其中，DNA1序列为SH-(A)₆TGGTGCGAACCCGTGATGCGCTGG，DNA2序列为NH₂-CCGGTGGGTGGTCAGGTGGGATAGCGTTCCGCGTATGGCCCAGCGCATCACGGGTTCGCACCA。

4.上述3提供的检测方法，金纳米颗粒与表面修饰DNA1的摩尔比为1∶200；量子点与表面修饰DNA2的摩尔比为1∶4。

5.上述4提供的检测方法，其中，金纳米颗粒粒径为20-25nm；量子点粒径为3-5nm。

6.上述1-5任一项所述的量子点-金纳米组装超结构的构建方法，该方法具体包括如下步骤

1)纳米颗粒表面修饰DNA：

初始浓度为5-10nM，体积为250-500uL金纳米颗粒溶液，在转速7500-8000r/min下离心10-15min，加100-200uL 0.5倍的TBE缓冲液，再向金纳米颗粒溶液中加入5-10uL，100uM的DNA1，再加入1.5-2uL 5M NaCl溶液，反应3h后加入2.8-3.2uL 5M NaCl溶液，3h后加入3.8-4uL 5M NaCl，3h后加入5.7-6uL5M NaCl溶液，3h后加入11-12uL 5M NaCl溶液，室温震荡反应过夜，7500-8000r/min下离心10-15min，除去未偶联的DNA分子，形成金纳米颗粒-DNA1复合物即Au-DNA1。

2)量子点表面修饰DNA：

初始浓度为2.5-5uM，体积为100-200uL的量子点水溶液，向其中加入2.5-5uL，200mM的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，再加入20-40uL，100uM的DNA2，室温避光震荡反应3-5h，用分子量为10kDa的超滤管纯化2-3次，除去未偶联的DNA分子，形成量子点-DNA2复合物即QD-DNA2。

3)量子点-金纳米组装超结构的制备

步骤1)、2)制备的两种纳米颗粒-DNA的复合物：Au-DNA1，QD-DNA2，等体积混合，并加入2-4uL 5M的NaCl溶液，置于水浴锅中90度反应3-8min，快速冷却至室温，形成量子点-金纳米组装超结构。

7.上述6提供的构建方法，具体包括如下步骤：

1)纳米颗粒表面修饰DNA：

制备好的金纳米颗粒溶液取500uL，转速8000r/min，离心10min，加200uL0.5倍TBE缓冲液，向其中加入10uL，100uM的DNA1，混匀后向体系中加入2uL 5M NaCl溶液，3h后加入3.2uL 5M NaCl溶液，3h后加入4uL 5M NaCl，3h后加入6uL 5M NaCl溶液，3h后加入12uL 5M NaCl溶液，室温震荡反应过夜后，8000r/min离心10min，除去未偶联的DNA分子，形成金纳米颗粒-DNA1复合物即Au-DNA1。

2)量子点表面修饰DNA：

制备好的量子点溶液取200uL，向其中加入5uL，200mM的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，避光反应15min后，再加入40uL，100uM的DNA2，室温避光震荡反应5h，用分子量为10kDa的超滤管纯化3次，过滤除去未偶联的DNA分子，形成量子点-DNA2复合物即QD-DNA2。

3)量子点-金纳米组装超结构的制备

步骤1)、2)制备的两种纳米颗粒-DNA的复合物：Au-DNA1，QD-DNA2，各取200uL等体积混合均匀，加入4uL 5M的NaCl溶液，置于水浴锅中90度反应5min，快速冷却至室温，形成量子点-金纳米组装超结构。

8.上述7提供的构建方法，其中，金纳米颗粒合成的步骤为：

洁净的锥形瓶中依次加入190mL超纯水，10mL 0.2％氯金酸溶液，加热搅拌至沸腾，7-10min后加入3.6mL 1％柠檬酸三钠溶液，溶液从无色变为红色后，停止加热，继续搅拌15min，制成金纳米颗粒。

9.上述8提供的构建方法，其中，量子点的合成步骤为：

依次加入390mg Te粉，189mg硼氢化钠，4mL超纯水，室温搅拌反应5h直至黑色的Te粉完全消失，并产生白色硼酸钠晶体，在氮气保护下，将与0.5M的稀硫酸反应生成的H₂Te通入到NaOH溶液中，制得NaHTe前驱体。取一洁净的三口烧瓶，依次加入2.6g CdCl₂·2.5H₂O，148mL水，0.5mL 98％的3-巯基丙酸溶液，用NaOH调节pH至7.5左右，再加入NaHTe前驱体，160度加热回流80min，得到橙色量子点。

有益效果：

1.通过核酸分子碱基互补配对识别，在纳米尺度范围内对量子点的空间排布进行精确调控，从而实现量子点-金纳米组装超结构的可控制备。在整个组装过程中，体系中没有出现大片的团聚现象，从而有效避免了因非特异性聚集对检测体系的干扰。

2.利用适配体和目标物之间的特异性识别，通过目标物的加入从而有效调控量子点与金纳米颗粒的空间距离，使得量子点的荧光信号得到恢复，显著提高了检测方法的特异性和灵敏度；在DNA分子中插入不同的适配体可以检测不同的目标产物。

3.利用纳米组装体空间结构变化产生的荧光信号，建立了双酚A的荧光传感检测新方法，双酚A的最小检测浓度为1.64pg/mL，灵敏度在1pg/mL-500pg/mL，远高于一般的纳米传感检测法(Ultrasensitive one-step rapid visualdetection of bisphenol A in water samples by label-free aptasensor，Biosensors&Bioelectronics 39(2013)26-30，检测线为0.1ng/mL)。

附图说明

图1：双酚A加入前的量子点-金纳米组装超结构透射电镜图

图2：双酚A加入后的量子点-金纳米组装超结构透射电镜图；

图3：纳米组装体中加入不同浓度双酚A后的荧光光谱图；双酚A的浓度依次为0pg/mL，1pg/mL，5pg/mL，10pg/mL，50pg/mL，100pg/mL，500pg/mL；

图4：双酚A荧光检测标准曲线图；

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步说明，下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照本领域的公知手段。

实验中所用DNA的序列

实施例1

(1)金纳米颗粒的合成

金纳米颗粒的制备方法：取一洁净的锥形瓶，依次加入190mL超纯水，10mL 0.2％氯金酸溶液，加热搅拌溶液至沸腾，7-10min后快速加入3.6mL 1％柠檬酸三钠溶液，溶液从无色变为红色后，停止加热，继续搅拌15min，制成金纳米颗粒，此时金纳米颗粒的浓度为10nM。

(2)量子点的合成

取一洁净的锥形瓶，依次加入390mg Te粉，189mg硼氢化钠，4mL超纯水，室温搅拌反应5h直至黑色的Te粉完全消失，并产生白色硼酸钠晶体，在氮气保护下，将与0.5M的稀硫酸反应生成的H₂Te通入到NaOH溶液中，制得NaHTe前躯体。取一洁净的三口烧瓶，依次加入2.6g CdCl₂·2.5H₂O，148mL水，0.5mL98％的3-巯基丙酸，磁力搅拌下氮气脱氧30min，在持续氮气保护下，用1M的NaOH调节溶液pH至7.5左右，加入制备好的NaHTe溶液，160度加热回流80min，得到橙红色量子点，发射波长为600nm，此时量子点的浓度为10uM，经过稀释配制达到量子点表面修饰DNA时需求的浓度。

(3)纳米颗粒表面修饰DNA

将步骤(1)制备好的金纳米颗粒溶液取250uL，转速7500r/min，离心10min，加100uL 0.5倍TBE缓冲液，向其中加入5uL 100uM的DNA1，混匀后向体系中加入1.5uL 5M NaCl溶液，反应3h后加入2.8uL 5M NaCl溶液，3h后加入3.8uL 5M NaCl，反应3h后加入5.7uL 5M NaCl溶液，反应3h后加入11uL 5M NaCl溶液，室温震荡反应过夜后，7500r/min离心10min，除去未偶联的DNA分子，形成金纳米颗粒-DNA1复合物。

将步骤(2)制备好的量子点溶液取100uL，向其中加入2.5uL 200mM的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，避光反应15min后，再加入20uL100uM的DNA2，室温避光震荡反应3h，用分子量为10kDa的超滤管纯化2次，除去未偶联的DNA分子，形成量子点-DNA2复合物。

(4)量子点-金纳米超结构的制备

步骤(3)制备的两种纳米颗粒-DNA的复合物：Au-DNA1，QD-DNA2，等体积混合，并加入4uL 5M的NaCl溶液，置于水浴锅中90度反应5min，快速冷却至室温，形成量子点-金纳米组装超结构。加入待检测的目标物双酚A，目标物能与量子点表面DNA2骨架内自身的核酸适配体结合，使得量子点从金纳米颗粒周围解离，金纳米颗粒对量子点的荧光淬灭作用减弱，量子点的荧光信号明显增强，根据量子点的荧光信号强度与目标物浓度建立标准曲线。

实施例2

(1)金纳米颗粒的合成

金纳米颗粒的制备方法：取一洁净的锥形瓶，依次加入190mL超纯水，10mL 0.2％氯金酸溶液，溶液搅拌并加热至沸腾，7-10min后快速加入3.6mL 1％柠檬酸三钠溶液，溶液从无色变为红色后，停止加热，继续搅拌15min，制成金纳米颗粒。

(2)量子点的合成

取一洁净的锥形瓶，依次加入390mg Te粉，189mg硼氢化钠，4mL超纯水，室温搅拌反应5h直至黑色的Te粉完全消失，并产生白色硼酸钠晶体，在氮气保护下，将与0.5M的稀硫酸反应生成的H₂Te通入到NaOH溶液中制得NaHTe前躯体。取一洁净的三口烧瓶，依次加入2.6g CdCl₂·2.5H₂O，148mL水，0.5mL98％的3-巯基丙酸，磁力搅拌下氮气脱氧30min，在持续氮气保护下，用1M的NaOH调节溶液pH至7.5左右，加入制备好的NaHTe溶液，160度加热回流80min，得到橙红色量子点，发射波长为600nm，此时量子点的浓度为10uM。

(3)纳米颗粒表面修饰DNA

将步骤(1)制备好的金纳米颗粒溶液取500uL，转速8000r/min，离心15min，加200uL 0.5倍TBE缓冲液，向其中加入10uL 100uM的DNA1，混匀后向体系中加入2uL 5M NaCl溶液，3h加入3.2uL 5M NaCl溶液，3h后加入4uL 5M NaCl，反应3h后加入6uL 5M NaCl溶液，反应3h后加入12uL 5M NaCl溶液，室温震荡反应过夜，8000r/min下离心15min，除去未偶联的DNA分子，形成金纳米颗粒-DNA1复合物即Au-DNA1。

将步骤(2)制备好的量子点溶液取200uL，向其中加入5uL 200mM的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，避光反应15min后，再加入40uL 100uM的DNA2，室温避光震荡反应5h，用分子量为10kDa的超滤管纯化3次，除去未偶联的DNA分子，形成量子点-DNA2复合物。

(4)量子点-金纳米超结构的制备

步骤(3)制备的两种纳米颗粒-DNA的复合物：Au-DNA1，QD-DNA2，等体积混合，并加入4uL 5M的NaCl溶液，置于水浴锅中90度反应5min，快速冷却至室温，形成量子点-金纳米组装超结构。加入待检测的目标物双酚A，目标物能与量子点表面DNA2骨架内自身的核酸适配体结合，使得量子点从金纳米颗粒周围解离，金纳米颗粒对量子点的荧光淬灭作用减弱，量子点的荧光信号明显增强，根据量子点的荧光信号强度与目标物浓度建立标准曲线。

(5)双酚A荧光传感检测体系的建立

基于量子点-金纳米组装超结构双酚A荧光传感检测体系的构建，具体步骤为：向制备的量子点-金纳米组装超结构中加入不同浓度(0pg/mL，1pg/mL，5pg/mL，10pg/mL，50pg/mL，100pg/mL，500pg/mL)的双酚A溶液。此时，双酚A能与内嵌在DNA2骨架内自身的核酸适配体结合，使得量子点从金纳米颗粒表面解离，纳米组装结构被破坏(如图2所示)，从而使此量子点的荧光信号明显增强(如图3所示)，根据600nm处的荧光信号强度与双酚A浓度建立标准曲线。如图4所示，本实验中，双酚A的检测限为1.64pg/mL，线性范围1pg/mL-500pg/mL。

实施例3

(1)金纳米颗粒的合成

金纳米颗粒的制备方法：取一洁净的锥形瓶，依次加入190mL超纯水，10mL 0.2％氯金酸溶液，溶液搅拌并加热至沸腾，7-10min后快速加入3.6mL 1％柠檬酸三钠溶液，溶液从无色变为红色后，停止加热，继续搅拌15min，制成金纳米颗粒。

(2)量子点的合成

取一洁净的锥形瓶，依次加入390mg Te粉，189mg硼氢化钠，再加入4mL超纯水，室温搅拌反应5h直至待黑色的Te粉完全消失，并产生白色硼酸钠晶体，在氮气保护下，将与0.5M的稀硫酸反应生成的H₂Te通入到NaOH溶液中，得到0.15M的NaHTe。取一洁净的三口烧瓶，依次加入CdCl₂·2.5H₂O，148mL水，0.5mL 3-巯基丙酸，磁力搅拌下氮气脱氧30min，在持续氮气保护下，用1M的NaOH调节溶液pH至7.5左右，加入新制备好的NaHTe溶液，160度加热回流80min，得到橙红色量子点，发射波长为600nm。

(3)纳米颗粒表面修饰DNA

将步骤(1)制备好的金纳米颗粒溶液取500uL，转速8000r/min，离心10min，加0.5倍TBE缓冲液浓缩至200uL，向其中加入10uL 100uM的DNA1，混匀后向体系中加入2uL 5M NaCl溶液，3h后加入3.2uL 5M NaCl溶液，3h后加入4uL 5M NaCl，3h后加入6uL 5M NaCl溶液，3h后加入12uL 5M NaCl溶液，室温震荡反应过夜，离心除去未偶联的DNA分子，形成金纳米颗粒-DNA1复合物。

将步骤(2)制备好的量子点溶液取200uL，向其中加入5uL 200mM的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)，避光反应15min后，再加入40uL 100uM的DNA2，室温避光震荡反应5h，膜过滤除去未偶联的DNA分子，形成量子点-DNA2复合物。

(4)量子点-金纳米超结构的制备

步骤(3)制备的两种纳米颗粒-DNA的复合物：Au-DNA1，QD-DNA2，等体积混合，并加入4uL 5M的NaCl溶液，置于水浴锅中90度反应5min，快速冷却至室温，形成量子点-金纳米组装超结构。通过透射电镜对量子点-金纳米组装体的几何结构进行表征，如图1所示：量子点定向排布在金纳米颗粒周围，形成以金颗粒为核，量子点为壳的纳米组装超结构。

(5)双酚A荧光传感检测体系的建立

基于量子点-金纳米组装超结构双酚A荧光传感检测体系的构建，具体步骤为：向制备的量子点-金纳米组装超结构中加入不同浓度(0pg/mL，1pg/mL，5pg/mL，10pg/mL，50pg/mL，100pg/mL，500pg/mL)的双酚A溶液。此时，双酚A能与内嵌在DNA2骨架内自身的核酸适配体结合，使得量子点从金纳米颗粒表面解离，纳米组装结构被破坏(如图2所示)，从而使此量子点的荧光信号明显增强(如图3所示)，根据600nm处的荧光信号强度与双酚A浓度建立标准曲线。如图4所示，本实验中，双酚A的检测限为1.64pg/mL，线性范围1pg/mL-500pg/mL。

可以知道，上述实施例仅为了说明发明原理而采用的示例性实施方式，然而本发明不仅限于此，本领域技术人员在不脱离本发明实质情况下，可以做出各种改进和变更，这些改进和变更也属于本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种基于量子点-金纳米组装超结构对双酚A进行检测的方法，其特征在于：该方法以DNA分子为模板制备量子点-金纳米组装超结构，量子点表面修饰的DNA内嵌有目标物的适配体序列，目标物通过与适配体结合使得量子点从纳米组装体中解离，通过组装体荧光强度的变化对目标物浓度进行检测。

2.权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述目标物为双酚A，其适配体序列为：CCGGTGGGTGGTCAGGTGGGATAGCGTTCCGCGTATGGCCCAGCGCATCACGGGTTCGCACCA。

3.权利要求2所述的检测方法，其特征在于：量子点-金纳米组装超结构由两种不同纳米颗粒-DNA复合物组装而成：金纳米颗粒表面修饰DNA即Au-DNA1，量子点表面修饰DNA即QD-DNA2；DNA2嵌入了双酚A的核酸适配体序列；

其中，DNA1序列为SH-(A)₆TGGTGCGAACCCGTGATGCGCTGG，DNA2序列为NH₂-CCGGTGGGTGGTCAGGTGGGATAGCGTTCCGCGTATGGCCCAGCGCATCACGGGTTCGCACCA。

4.权利要求3所述的检测方法，其特征在于：金纳米颗粒与表面修饰DNA1的摩尔比为1∶200；量子点与表面修饰DNA2的摩尔比为1∶4。

5.权利要求4所述的检测方法，其特征在于：其中，金纳米颗粒粒径为20-25nm；量子点粒径为3-5nm。

6.权利要求1-5任一项所述的量子点-金纳米组装超结构的构建方法，其特征在于：该方法具体包括如下步骤：

1)纳米颗粒表面修饰DNA：

初始浓度为5-10nM，体积为250-500uL金纳米颗粒溶液，在转速7500-8000r/min下离心10-15min，加100-200uL 0.5倍的TBE缓冲液，再向金纳米颗粒溶液中加入5-10uL，100uM的DNA1，再加入1.5-2uL 5M NaCl溶液，反应3h后加入2.8-3.2uL 5M NaCl溶液，3h后加入3.8-4uL 5M NaCl，3h后加入5.7-6uL5M NaCl溶液，3h后加入11-12uL 5M NaCl溶液，室温震荡反应过夜，7500-8000r/min下离心10-15min，除去未偶联的DNA分子，形成金纳米颗粒-DNA1复合物即Au-DNA1。

2)量子点表面修饰DNA：

初始浓度为2.5-5uM，体积为100-200uL的量子点水溶液，向其中加入2.5-5uL，200mM的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，再加入20-40uL，100uM的DNA2，室温避光震荡反应3-5h，用分子量为10kDa的超滤管纯化2-3次，除去未偶联的DNA分子，形成量子点-DNA2复合物即QD-DNA2。

3)量子点-金纳米组装超结构的制备

步骤1)、2)制备的两种纳米颗粒-DNA的复合物：Au-DNA1，QD-DNA2，等体积混合，并加入2-4uL 5M的NaCl溶液，置于水浴锅中90度反应3-8min，快速冷却至室温，形成量子点-金纳米组装超结构。

7.权利要求6所述的构建方法，其特征在于：该方法具体包括如下步骤：

1)纳米颗粒表面修饰DNA：

制备好的金纳米颗粒溶液取500uL，转速8000r/min，离心10min，加200uL0.5倍TBE缓冲液，向其中加入10uL，100uM的DNA1，混匀后向体系中加入2uL 5M NaCl溶液，3h后加入3.2uL 5M NaCl溶液，3h后加入4uL 5M NaCl，3h后加入6uL 5M NaCl溶液，3h后加入12uL 5M NaCl溶液，室温震荡反应过夜后，8000r/min离心10min，除去未偶联的DNA分子，形成金纳米颗粒-DNA1复合物即Au-DNA1。

2)量子点表面修饰DNA：

制备好的量子点溶液取200uL，向其中加入5uL，200mM的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，避光反应15min后，再加入40uL，100uM的DNA2，室温避光震荡反应5h，用分子量为10kDa的超滤管纯化3次，过滤除去未偶联的DNA分子，形成量子点-DNA2复合物即QD-DNA2。

3)量子点-金纳米组装超结构的制备

步骤1)、2)制备的两种纳米颗粒-DNA的复合物：Au-DNA1，QD-DNA2，各取200uL等体积混合均匀，加入4uL 5M的NaCl溶液，置于水浴锅中90度反应5min，快速冷却至室温，形成量子点-金纳米组装超结构。

8.权利要求7所述的构建方法，其特征在于：金纳米颗粒合成的步骤为：

洁净的锥形瓶中依次加入190mL超纯水，10mL 0.2％氯金酸溶液，加热搅拌至沸腾，7-10min后加入3.6mL 1％柠檬酸三钠溶液，溶液从无色变为红色后，停止加热，继续搅拌15min，制成金纳米颗粒。

9.权利要求8所述的构建方法，其特征在于：量子点的合成步骤为：

依次加入390mg Te粉，189mg硼氢化钠，4mL超纯水，室温搅拌反应5h直至黑色的Te粉完全消失，并产生白色硼酸钠晶体，在氮气保护下，将与0.5M的稀硫酸反应生成的H₂Te通入到NaOH溶液中，制得NaHTe前驱体。取一洁净的三口烧瓶，依次加入2.6g CdCl₂·2.5H₂O，148mL水，0.5mL 98％的3-巯基丙酸溶液，用NaOH调节pH至7.5左右，再加入NaHTe前驱体，160度加热回流80min，得到橙色量子点。