CN104804998B - 一种质粒提取装置 - Google Patents
一种质粒提取装置 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104804998B CN104804998B CN201510079177.XA CN201510079177A CN104804998B CN 104804998 B CN104804998 B CN 104804998B CN 201510079177 A CN201510079177 A CN 201510079177A CN 104804998 B CN104804998 B CN 104804998B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- test tube
- extraction device
- plasmid extraction
- cylinder
- leading screw
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 title claims abstract description 88
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims abstract description 64
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims abstract description 20
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 46
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 claims description 29
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 24
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 24
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 24
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 22
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 22
- 230000037361 pathway Effects 0.000 claims description 13
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 12
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 8
- 239000004744 fabric Substances 0.000 claims description 8
- 230000005611 electricity Effects 0.000 claims 2
- 238000009434 installation Methods 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 17
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000012149 elution buffer Substances 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 7
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 6
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 2
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 6-methoxy-1,2,3,4-tetrahydroquinoline Chemical compound N1CCCC2=CC(OC)=CC=C21 FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000208340 Araliaceae Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 description 1
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000005336 cracking Methods 0.000 description 1
- 238000007599 discharging Methods 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
- C12N15/1003—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor
- C12N15/1006—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor by means of a solid support carrier, e.g. particles, polymers
- C12N15/101—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor by means of a solid support carrier, e.g. particles, polymers by chromatography, e.g. electrophoresis, ion-exchange, reverse phase
Abstract
本发明公开了一种质粒提取装置,属于实验仪器领域。所述质粒提取装置包括:第一试管和布置于所述第一试管下方的第二试管,所述第一试管包括:第一试管筒、空心的套筒和轴柱,所述第一试管筒的顶部设置有第一通孔和注入孔。所述第二试管包括:过滤管、套设在所述过滤管外部的吸附管和套设在所述吸附管外部的第二试管筒。本发明实施例提供的质粒提取装置避免了将样品反复放入离心机再取出的过程,节省了操作时间,整个提取过程可在几分钟内完成。
Description
技术领域
本发明涉及实验仪器领域,特别涉及一种质粒提取装置。
背景技术
质粒是一种染色体外的稳定遗传因子。质粒可以在细菌体外被人工有目的地加入已知的或未知的DNA片段,形成重组的“质粒DNA”,再将这种人工合成的新的重组的“质粒DNA”打入到细菌体内并随着细菌的大量地繁殖而繁殖,然后收集这种大量的细菌,用特殊的方法将新的重组的“质粒DNA”从细菌体内提取或分离出来,从而获得相对大量的(几微克或几克)的有生物活性的新的重组的“质粒DNA”。这种重组的“质粒DNA”便可以被用做各种科学实验。
重组的“质粒DNA”多通过试剂盒进行提取,在其提取的过程需要反复离心提取以及反复漂洗,使得重组的“质粒DNA”的提取过程耗时,一般需要45分钟左右。
发明内容
为了解决现有技术提取重组的“质粒DNA”耗时的问题,本发明实施例提供了一种质粒提取装置。所述技术方案如下:
本发明实施例提供了一种质粒提取装置,所述质粒提取装置包括:第一试管和布置于所述第一试管下方的第二试管,所述第一试管包括:第一试管筒、空心的套筒和轴柱,所述第一试管筒的顶部设置有第一通孔和注入孔,所述套筒的一端位于所述第一试管筒内,所述套筒的位于所述第一试管筒内的一端安装有搅拌板,所述套筒的另一端由所述第一通孔伸出所述第一试管筒外,所述第一试管筒的底部设置有第二通孔,所述轴柱的一端穿过所述套筒的内部与堵头连接,所述堵头布置在所述第二通孔内,所述堵头的尺寸与所述第二通孔的尺寸相配合,所述轴柱的轴线方向与所述套筒的轴线方向相同,所述轴柱的另一端由所述套筒的顶部伸出。
所述第二试管包括:过滤管、套设在所述过滤管外部的吸附管和套设在所述吸附管外部的第二试管筒,所述第二通孔通过所述过滤管与所述第二试管筒连通,所述吸附管的底部布置有DNA吸附材料,所述第二试管筒的底部设置有出液口。
具体地,所述质粒提取装置还包括真空箱,所述真空箱包括:壳体、第三试管、推送杆和真空箱驱动装置,所述第三试管位于所述壳体内部,所述推送杆的一端与所述真空箱驱动装置传动连接,所述推送杆的另一端穿过所述壳体固定在所述第三试管上,所述壳体的顶部设置有进液通道,所述进液通道的内壁上设置有内螺纹,所述出液口上设置有漏管,所述漏管与所述出液口连通,所述漏管的外壁上设置有套管,所述套管的外表面设置有与所述进液通道上的内螺纹相配合的外螺纹,所述第二试管通过所述内螺纹和所述外螺纹安装在所述进液通道上,当所述质粒提取装置收取质粒时,所述真空箱驱动装置驱动所述推送杆将所述第三试管移动至所述漏管的下方。
进一步地,所述真空箱驱动装置包括第一电机、安装在所述第一电机的输出轴上的第一联轴器、与所述第一联轴器传动连接的第一丝杠、安装在所述第一丝杠上且与所述第一丝杠相配合的第一丝杠螺母和第一导轨,所述第一丝杠螺母安装于所述第一丝杠上,且所述第一丝杠螺母与所述第一导轨滑动连接,所述推送杆的一端固定在所述第一丝杠螺母上,所述推送杆的另一端与所述第三试管连接。
具体地,所述质粒提取装置还包括支架,所述支架上设置有试管上托板和试管下托板,所述第一试管筒上分别设置有凹槽和漏斗型的外沿,所述试管上托板和所述试管下托板上分别设置有与所述凹槽和所述外沿相配合的孔,所述第一试管筒通过所述凹槽和所述外沿安装于所述试管上托板和所述试管下托板上。
具体地,所述质粒提取装置还包括套筒驱动装置,所述套筒驱动装置包括:第二驱动装置、安装在所述第二驱动装置的输出轴上的第二联轴器、与所述第二联轴器传动连接的第二丝杠、安装在所述第二丝杠上且与所述第二丝杠相配合的第二丝杠螺母和固定在所述第二丝杠螺母上的拔插,所述第二丝杠的轴线方向和所述套筒的轴线方向相同,所述套筒上设置有第一把手,所述拔插安装在所述第一把手上。
进一步地,所述质粒提取装置还包括轴柱驱动装置,所述轴柱驱动装置包括:固定在所述支架上的第三驱动装置、安装在所述第三驱动装置的输出轴上的第三联轴器、与所述第三联轴器传动连接的传动轴、安装在所述传动轴上的偏心轮、固定在所述轴柱上的顶杆和安装在所述顶杆上且与所述偏心轮传动连接的轴承,所述偏心轮的旋转方向所在的平面上与所述轴柱的轴线所在平面平行布置,所述支架上设置有通孔,所述顶杆穿过所述通孔与所述轴柱传动连接,所述支架与所述轴承之间布置有弹簧。
具体地,所述质粒提取装置还包括注入装置,所述注入装置包括:第四驱动装置、安装在所述第四驱动装置的输出轴上的第四联轴器、与所述第四联轴器传动连接的第四丝杠、安装在所述第四丝杠上且与所述第四丝杠相配合的第四丝杠螺母和缸筒,所述第四丝杠螺母和所述缸筒的活塞杆传动连接,所述缸筒的无杆腔上设置有注液管和与所述注入孔连通的导管。
进一步地,所述质粒提取装置包括多个并排布置的所述缸筒和移动装置,所述移动装置包括第五驱动装置、安装在所述第五驱动装置输出轴上的第五丝杠、与所述第五丝杠相配合的第五丝杠螺母和固定在所述第五丝杠螺母上的托板,所述第五丝杠的轴线方向分别与所述缸筒的轴线方向和所述轴柱的轴线方向相互垂直,所述注入装置固定在所述托板上。
具体地,所述质粒提取装置还包括安装在所述第二试管筒顶部的初滤管,所述初滤管上设置有筛网,所述筛网布置于所述过滤管的上方。
进一步地,所述第二试管筒的顶部设置有外螺纹,所述初滤管底部设置有与所述外螺纹相配合的内螺纹,所述初滤管通过所述内螺纹和所述外螺纹安装在所述第二试管筒的顶部。
本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是:本发明实施例提供的质粒提取装置,通过移动套筒可以使反应液与样品充分混合,再通过移动轴柱将混合充分的液体由第二通孔流至第二试管内,经过第二试管的过滤管能够实现过滤的目的,同时,第二试管内的吸附管可以吸附质粒DNA,废液由出液口排出,通过加入洗脱缓冲液TB,可以使吸附在吸附管上的质粒DNA随洗脱缓冲液TB一同排出,本发明实施例提供的质粒提取装置避免了使用离心机,从而避免了反复在离心机中取放的操作,节省了操作时间,整个提取过程可在几分钟内完成。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案,下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例提供的第一试管的结构示意图;
图2是本发明实施例提供的第一试管的横截面结构示意图;
图3是本发明实施例提供的第二试管的结构示意图;
图4是本发明实施例提供的质粒提取装置的侧视结构示意图;
图5是本发明实施例提供的质粒提取装置的主视结构示意图;
图6是本发明实施例提供的拔插和第一把手相配合的结构示意图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合附图对本发明实施方式作进一步地详细描述。
实施例
本发明实施例提供了一种质粒提取装置,如图1所示,该质粒提取装置包括:第一试管1和布置于第一试管1下方的第二试管2,第一试管1包括:第一试管筒3、空心的套筒4和轴柱5,第一试管筒3的顶部设置有第一通孔7(参见图2)和注入孔7a,套筒4的一端位于第一试管筒3内,套筒4的位于第一试管筒3内的安装有搅拌板6,套筒4的另一端由第一通孔7伸出第一试管筒3外,第一试管筒3的底部设置有第二通孔8,轴柱5的一端穿过套筒4的内部与堵头9连接,堵头9布置在第二通孔8内,堵头9的尺寸与第二通孔8的尺寸相配合,轴柱5的轴线方向与套筒4的轴线方向相同,轴柱5的另一端由套筒4的顶部伸出。
如图3所示,第二试管2包括:过滤管10、套设在过滤管10外部的吸附管11和套设在吸附管11外部的第二试管筒13,第二通孔8通过过滤管10与第二试管筒13连通,吸附管11的底部布置有DNA吸附材料11a,第二试管筒13的底部设置有出液口21。
其中,过滤管10的顶部可以设置有向外延伸的外沿,吸附管11的内壁上可以设置有安置过滤管10外沿的凸起,过滤管10通过其外沿能够放置于该凸起上,过滤管10可以通过同样的方法布置于第二试管筒13上。此外,第一试管1和第二试管2可以并排布置多个,且第一试管1布置于第二试管2的上方,第一试管1和第二试管2的数量可根据实际需要检查的样品数量进行调整。吸附管11用于吸附质粒。
在本实施例中,搅拌板6可以为圆环型,搅拌板6的内环安装于套筒4上。
具体地,如图4所示,质粒提取装置还可以包括真空箱16,真空箱16包括:壳体17、第三试管18、推送杆26和真空箱驱动装置,第三试管18位于壳体17内部,推送杆26的一端与真空箱驱动装置传动连接,推送杆26的另一端穿过壳体17固定在第三试管18上,壳体17的顶部设置有进液通道19,进液通道19的内壁上设置有内螺纹,出液口21上设置有漏管20,漏管20与出液口21连通,漏管20的外壁上设置有与进液通道19上的内螺纹相配合的外螺纹,第二试管2通过内螺纹安装在进液通道19上,漏管20的内壁为可以漏斗型,当质粒提取装置收取质粒时,真空箱驱动装置驱动推送杆26将第三试管18移动至漏管20的下方。当质粒提取装置不收取质粒(如收取废液)时,真空箱驱动装置可驱动第三试管18移动至漏管20的下方以外的位置。该真空箱16能够提供负压,在第二试管2排液时,能够使第二试管2内的质粒及废液被抽出,并减少第二试管2管壁上的残存物,保证由第二试管2排出的质粒较为纯净。其中,真空箱驱动装置可以为一个把手,通过手动推拉推送杆26实现移动。
此外,如图5所示,真空箱16的侧壁上的顶部可以布置有用于控制真空箱16的真空度的第一球阀56,真空箱16的侧壁上的底部还可以布置有用于排出废液的第二球阀57。真空箱16的内部可以设置有水槽,水槽与第二球阀57连通。
进一步地,如图4所示,真空箱驱动装置可以包括第一电机22、安装在第一电机22的输出轴上的第一联轴器23、与第一联轴器23传动连接的第一丝杠24、安装在第一丝杠24上且与第一丝杠24相配合的第一丝杠螺母25和第一导轨27,第一导轨27的轴线方向与第一丝杠24的轴线方向相同,第一丝杠螺母25安装于第一丝杠24上,且第一丝杠螺母25与第一导轨27滑动连接,推送杆26的一端固定在第一丝杠螺母25上,推送杆26的另一端与第三试管18连接。此外,该真空箱16还可以采用手动的方式推拉推送杆26从而实现推拉第三试管18的目的。第一导轨27能够保证第一丝杠螺母25的运动方向为直线,且通过安装第一导轨27能够使第一丝杠螺母25的运行更平稳。此外,可以在第一丝杠螺母25上设置滑块,将滑块安装于第一导轨27上。
具体地,如图1和图4所示,质粒提取装置还可以包括支架28,支架28上可以设置有试管上托板29和试管下托板30,第一试管筒3上分别设置有凹槽31和漏斗型的外沿,试管上托板29和试管下托板30上分别设置有与凹槽31和外沿相配合的孔,第一试管筒3通过凹槽31和外沿安装于试管上托板29和试管下托板30上。其中,试管上托板29和试管下托板30的侧壁上可以设置有限位凸起,支架28上还可以设置有安装槽,且安装槽的尺寸分别与试管上托板29和试管下托板30的尺寸相配合,安装槽的侧壁上可以设置有与该限位凸起相配合的限位槽,限位凸起和限位槽的配合能够保证第一试管1稳固的安装在支架28上。在组装质粒提取装置时,可以先将第一试管1安装在试管上托板29和试管下托板30上,再将试管上托板29和试管下托板30安装于支架28上。
具体地,如图4和图6所示,质粒提取装置还可以包括套筒驱动装置,套筒驱动装置可以包括:第二电机39、安装在第二电机39的输出轴上的第二联轴器40、与第二联轴器40传动连接的第二丝杠41、安装在第二丝杠41上且与第二丝杠41相配合的第二丝杠螺母42和固定在第二丝杠螺母42上的拔插43,第二丝杠41的轴线方向和套筒4的轴线方向相同,套筒4上可以设置有第一把手44,拔插43安装在第一把手44上。此外,该套筒4还可以通过手动的方式上下移动。其中,拔插43固定第二丝杠螺母42的一端上可以设置有插口,第一把手44可以布置于该插口内。
进一步地,如图5所示,质粒提取装置还可以包括轴柱驱动装置,轴柱驱动装置可以包括:第三电机32、安装在第三电机32的输出轴上的第三联轴器33、与第三联轴器33传动连接的传动轴34、安装在传动轴34上的偏心轮35、固定在轴柱5上的顶杆37和安装在顶杆37上且与偏心轮35传动连接的轴承36,偏心轮35的旋转方向所在的平面与轴柱5的轴线所在平面重合,支架28上设置有通孔,顶杆37穿过通孔与轴柱5传动连接,支架28与轴承36之间布置有弹簧38。此外,该轴柱5还可以通过手动的方式上下移动。顶杆37与轴柱5之间可通过法兰36a连接,此外,在轴柱5上可以安装有第二把手,顶杆37通过第二把手与轴柱5连接。偏心轮35在运动的过程中,可以通过顶杆37挤压轴柱5,实现轴柱5的向下运动,同时弹簧38被挤压,随着偏心轮35的转动,偏心轮35不再挤压轴柱5时,弹簧38能够帮助轴柱5复位。此外,在顶杆37上可以设置两个吊耳,用于安装轴承36。在本实施例中,第一试管1可以布置6个,那么,偏心轮35、顶杆37和轴承36的数量均匀与第一试管1的数量相同,即均为6个。
在本实施例中,拔插43上还可以安装有拔插滑块58,支架28上安装有与拔插滑块58相配合的滑轨59,且该滑轨59的轴线方向与第二丝杠41的轴线平行布置。
具体地,质粒提取装置还包括注入装置,注入装置包括:第四电机45、安装在第四电机45的输出轴上的第四联轴器46、与第四联轴器46传动连接的第四丝杠47、安装在第四丝杠47上且与第四丝杠47相配合的第四丝杠螺母48、缸筒49和注入装置导轨12,第四丝杠螺母48和缸筒49的活塞杆传动连接,缸筒49的无杆腔上设置有注液管50和与注入孔7a连通的导管51,第四丝杠螺母48安装在注入装置导轨12上,注入装置导轨12的轴线与第四丝杠47的轴线平行布置。其中,注液管50和导管51上可以分别布置有单向阀50a,该单向阀50a用于防止缸筒49内的试剂回流。其中,在第四丝杠螺母48与缸筒49的活塞杆传动接触,即第四丝杠螺母48可以推动缸筒49的活塞杆向缸筒49的无杆腔方向移动,从而实现即将缸筒49内的试剂挤出的目的。
具体地,注入装置还可以包括两个支板63,注入装置导轨12的两端分别固定在两个支板63上,两个支板63可以布置在支架28上,
进一步地,如图4和图5所示,质粒提取装置可以包括多个并排布置的缸筒49和移动装置,移动装置包括第五电机52、安装在第五电机52输出轴上的第五丝杠53、与第五丝杠53相配合的第五丝杠螺母54和固定在第五丝杠螺母54上的托板55,第五丝杠53的轴线方向分别与缸筒49的轴线方向和轴柱5的轴线方向相互垂直,注入装置固定在托板55上。其中,多个并排布置的缸筒49用于容纳多种试剂,防止试剂相互污染。其中,缸筒49可以为多个,多个缸筒49可以分别容纳溶液P1、溶液P2、溶液P3、溶液P4、异丙醇、平衡液BL、去蛋白液PD、漂洗液PW和洗脱缓冲液TB。
具体地,本实施例中的质粒提取装置还可以包括安装在第二试管筒13顶部的初滤管14,初滤管14上设置有筛网15,筛网15布置于过滤管10的上方。其中过滤管10上的滤网相比初滤管14上的筛网15密一些,初滤管14可以过滤较大的杂质,过滤管10可以进一步过滤体积小的杂质。
进一步地,第二试管筒13的顶部设置有外螺纹,初滤管14底部设置有与外螺纹相配合的内螺纹,初滤管14通过内螺纹和外螺纹安装在第二试管筒13的顶部。通过螺纹连接能够简单快速的实现拆卸。
此外,第二电机39、第三电机32和第四电机45均可以固定在支架28上。在本实施例中,托板55可以布置于支架28的水平板60上,在水平板60与托板55可以布置有导向装置,如图4所示,该导向装置还可以包括第二导轨61和第二滑块62,移动装置可以布置于水平板60与托板55的中部,导向装置可以为两个,布置于水平板60与托板55的两侧,且两个导向装置的第二导轨61的轴线均与移动装置的第五丝杠53的轴线平行布置。此外,两个导向装置还能保证托板55运行平稳。
采用本发明实施例提供的质粒提取装置提取质粒的过程如下:
工作原理为通过驱动缸筒49的活塞杆运动,将缸筒49内的试剂通过导管51注入到第一试管1中,可通过手动或电机驱动套筒4上下移动实现液体的混合以及质粒DNA的分离,再通过手动或电机驱动轴柱5向上移动,使液体由第二通孔8流至第二试管2中,大块固体可通过过滤管10过滤掉,而质粒则留在了吸附管11里,废液由吸附管11流出。此外,流出的废液可以通过真空箱16抽入真空箱16内,若准备收集质粒,则可以通过第一电机22移动推送杆26,并将第三试管18移动至第二试管2下方,通过抽真空将质粒抽入第三试管18内,得到提取的质粒。
本实施例中提供的具体质粒提取步骤包括:
准备工作:
1、用相应的试剂通过注液管50装入缸筒49内,试剂包括:溶液P1、溶液P2、溶液P3、溶液P4、异丙醇、平衡液BL、去蛋白液PD、漂洗液PW和洗脱缓冲液TB。
2、取25-30ml过夜培养的菌液加入离心管中,经12,000rpm(~13,400×g)离心1min,除去上清液,保留沉淀。加入1ml溶液P1于离心管中并充分彻底地悬浮细菌沉淀。将细菌悬浮液转入到第一试管1中(该步骤在质粒提取装置外操作)。
3、第二试管2的漏管20安装于真空箱16的进液通道19上。
4、向吸附管11里加入1ml的平衡液BL(平衡吸附柱CP4)。
5、将装有细菌悬浮液的第一试管1装到试管上托板29和试管下托板30上,并安装于支架28上。
质粒提取:
1、驱动第五电机52,移动托板55使第五丝杠螺母54移动至装有溶液P2的缸筒49的活塞杆处,驱动第四电机45,使第四丝杠螺母48沿第四丝杠47移动,将缸筒49内的溶液P2通过注入孔7a向第一试管1中加入1ml(5秒完成),上下移动第一试管1的套筒4共10次(1秒/次、共10秒),静置3分钟。通过移动套筒4,套筒4上的搅拌板6能够使细菌与溶液P2充分地混合并使菌体完全裂解。若有多个样品时,可继续移动托板55,向下一个第一试管1中加入1ml溶液P2。
2、驱动第五电机52,移动托板55使第五丝杠螺母54移动至装有溶液P4的缸筒49的活塞杆处,驱动第四电机45,使第四丝杠螺母48沿第四丝杠47移动,将缸筒49内的溶液P4通过注入孔7a向第一试管1中加入1ml(5秒完成),上下移动第一试管1的套筒4共10次(1秒/次、共10秒)。溶液P4可以使细胞的蛋白和染色体等杂物凝固成白色絮状物。
3、驱动第五电机52,移动托板55使第五丝杠螺母54移动至装有异丙醇的缸筒49的活塞杆处,驱动第四电机45,使第四丝杠螺母48沿第四丝杠47移动,将缸筒49内的异丙醇通过注入孔7a向第一试管1中加入0.3ml(5秒完成),上下移动第一试管1的套筒4共10次(1秒/次、共10秒)。异丙醇可使质粒的DNA和RNA易于沉淀。
4、将第一试管1的轴柱5向下压低(可压低2cm)使堵头9脱离第二通孔8(5秒完成),等候30秒。第一试管1内的液体通过第二通孔8流向下面的第二试管2的初滤管14内,细胞裂解后产生的白色絮状物等杂物被初滤管14收集,液体再流至过滤管10内,过滤管10能够进一步收集杂物,此时,含质粒DNA的液体通过过滤管10流入吸附管11上并被DNA吸附材料11a吸附住,杂物等通过DNA吸附材料11a后流向真空箱16内。
5、驱动第五电机52,移动托板55使第五丝杠螺母54移动至装有去蛋白液PD的缸筒49的活塞杆处,驱动第四电机45,使第四丝杠螺母48沿第四丝杠47移动,将缸筒49内的去蛋白液PD向第一试管1中加入1ml(5秒完成),重复此过程一次,共10秒。去蛋白液PD由第一试管1流入第二试管2内的吸附管11处,去蛋白液PD能够清洗掉DNA吸附材料11a里的蛋白质。
6、向第一试管1中加入1ml漂洗液PW(5秒完成),重复此过程一次,共10秒。漂洗液PW可清洗掉DNA吸附材料11a里的其它的电解质等杂质。
7、等候1分钟后暂停真空机16的工作1分钟(即真空机16内保持常压状态1分钟)。首先使第二试管2内的漂洗液PW被真空完全抽干净,然后使真空箱16处于真空的状态。
8、将真空箱16内的第三试管18移至漏管20下方(5秒完成)。
9、向第一试管1中加入0.3ml洗脱缓冲液TB(5秒完成),等候50秒,使真空箱16处于真空状态1分钟后关闭,在关闭的同时,再将第三试管18移动至漏管20的下方以外的位置,质粒DNA收集于第三试管18内。其中,洗脱缓冲液TB可以洗脱掉DNA吸附材料11a里的质粒DNA,质粒DNA会随着洗脱缓冲液TB流入第三试管18内,在加入了洗脱缓冲液TB后等候了50秒,使洗脱更充分。
本发明实施例提供的质粒提取装置,通过移动套筒可以使反应液与样品充分混合,再通过移动轴柱将混合充分的液体由第二通孔流至第二试管内,经过第二试管的过滤管能够实现过滤的目的,同时,第二试管内的吸附管可以吸附质粒DNA,废液由出液口排出,通过加入洗脱缓冲液TB,可以使吸附在吸附管上的质粒DNA随洗脱缓冲液TB一同排出,本发明实施例提供的质粒提取装置避免了使用离心机,从而避免了反复在离心机中取放的操作,节省了操作时间,整个提取过程可在几分钟内完成。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种质粒提取装置,其特征在于,所述质粒提取装置包括:第一试管和布置于所述第一试管下方的第二试管,所述第一试管包括:第一试管筒、空心的套筒和轴柱,所述第一试管筒的顶部设置有第一通孔和注入孔,所述套筒的一端位于所述第一试管筒内,所述套筒的位于所述第一试管筒内的一端安装有搅拌板,所述套筒的另一端由所述第一通孔伸出所述第一试管筒外,所述第一试管筒的底部设置有第二通孔,所述轴柱的一端穿过所述套筒的内部与堵头连接,所述堵头布置在所述第二通孔内,所述堵头的尺寸与所述第二通孔的尺寸相配合,所述轴柱的轴线方向与所述套筒的轴线方向相同,所述轴柱的另一端由所述套筒的顶部伸出;
所述第二试管包括:过滤管、套设在所述过滤管外部的吸附管和套设在所述吸附管外部的第二试管筒,所述第二通孔通过所述过滤管与所述第二试管筒连通,所述吸附管的底部布置有DNA吸附材料,所述第二试管筒的底部设置有出液口。
2.根据权利要求1所述的质粒提取装置,其特征在于,所述质粒提取装置还包括真空箱,所述真空箱包括:壳体、第三试管、推送杆和真空箱驱动装置,所述第三试管位于所述壳体内部,所述推送杆的一端与所述真空箱驱动装置传动连接,所述推送杆的另一端穿过所述壳体固定在所述第三试管上,所述壳体的顶部设置有进液通道,所述进液通道的内壁上设置有内螺纹,所述出液口上设置有漏管,所述漏管与所述出液口连通,所述漏管的外壁上设置有套管,所述套管的外表面设置有与所述进液通道上的内螺纹相配合的外螺纹,所述第二试管通过所述内螺纹和所述外螺纹安装在所述进液通道上,当所述质粒提取装置收取质粒时,所述真空箱驱动装置驱动所述推送杆将所述第三试管移动至所述漏管的下方。
3.根据权利要求2所述的质粒提取装置,其特征在于,所述真空箱驱动装置包括第一电机、安装在所述第一电机的输出轴上的第一联轴器、与所述第一联轴器传动连接的第一丝杠、安装在所述第一丝杠上且与所述第一丝杠相配合的第一丝杠螺母和第一导轨,所述第一导轨的轴线方向与所述第一丝杠的轴线方向相同,所述第一丝杠螺母安装于所述第一丝杠上,且所述第一丝杠螺母与所述第一导轨滑动连接,所述推送杆的一端固定在所述第一丝杠螺母上,所述推送杆的另一端与所述第三试管连接。
4.根据权利要求1所述的质粒提取装置,其特征在于,所述质粒提取装置还包括支架,所述支架上设置有试管上托板和试管下托板,所述第一试管筒上分别设置有凹槽和漏斗型的外沿,所述试管上托板和所述试管下托板上分别设置有与所述凹槽和所述外沿相配合的孔,所述第一试管筒通过所述凹槽和所述外沿安装于所述试管上托板和所述试管下托板上。
5.根据权利要求1所述的质粒提取装置,其特征在于,所述质粒提取装置还包括套筒驱动装置,所述套筒驱动装置包括:第二电机、安装在所述第二电机的输出轴上的第二联轴器、与所述第二联轴器传动连接的第二丝杠、安装在所述第二丝杠上且与所述第二丝杠相配合的第二丝杠螺母和固定在所述第二丝杠螺母上的拔插,所述第二丝杠的轴线方向和所述套筒的轴线方向相同,所述套筒上设置有第一把手,所述拔插安装在所述第一把手上。
6.根据权利要求4所述的质粒提取装置,其特征在于,所述质粒提取装置还包括轴柱驱动装置,所述轴柱驱动装置包括:第三电机、安装在所述第三电机的输出轴上的第三联轴器、与所述第三联轴器传动连接的传动轴、安装在所述传动轴上的偏心轮、固定在所述轴柱上的顶杆和安装在所述顶杆上且与所述偏心轮传动连接的轴承,所述偏心轮的旋转方向所在的平面上与所述轴柱的轴线所在平面平行布置,所述支架上设置有通孔,所述顶杆穿过所述通孔与所述轴柱传动连接,所述支架与所述轴承之间布置有弹簧。
7.根据权利要求1所述的质粒提取装置,其特征在于,所述质粒提取装置还包括注入装置,所述注入装置包括:第四电机、安装在所述第四电机的输出轴上的第四联轴器、与所述第四联轴器传动连接的第四丝杠、安装在所述第四丝杠上且与所述第四丝杠相配合的第四丝杠螺母、用于容纳试剂的缸筒和注入装置导轨,所述第四丝杠螺母和所述缸筒的活塞杆传动连接,所述缸筒的无杆腔上设置有注液管和与所述注入孔连通的导管,所述第四丝杠螺母滑动安装在所述注入装置导轨上,所述注入装置导轨的轴线与所述第四丝杠的轴线平行布置。
8.根据权利要求7所述的质粒提取装置,其特征在于,所述质粒提取装置包括多个并排布置的所述缸筒和移动装置,所述移动装置包括第五电机、安装在所述第五电机输出轴上的第五丝杠、与所述第五丝杠相配合的第五丝杠螺母和固定在所述第五丝杠螺母上的托板,所述第五丝杠的轴线方向分别与所述缸筒的轴线方向和所述轴柱的轴线方向相互垂直,所述注入装置固定在所述托板上。
9.根据权利要求1所述的质粒提取装置,其特征在于,所述质粒提取装置还包括安装在所述第二试管筒顶部的初滤管,所述初滤管上设置有筛网,所述筛网布置于所述过滤管的上方。
10.根据权利要求9所述的质粒提取装置,其特征在于,所述第二试管筒的顶部设置有外螺纹,所述初滤管底部设置有与所述外螺纹相配合的内螺纹,所述初滤管通过所述内螺纹和所述外螺纹安装在所述第二试管筒的顶部。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201510079177.XA CN104804998B (zh) | 2015-02-14 | 2015-02-14 | 一种质粒提取装置 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201510079177.XA CN104804998B (zh) | 2015-02-14 | 2015-02-14 | 一种质粒提取装置 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN104804998A CN104804998A (zh) | 2015-07-29 |
CN104804998B true CN104804998B (zh) | 2017-01-04 |
Family
ID=53690202
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201510079177.XA Expired - Fee Related CN104804998B (zh) | 2015-02-14 | 2015-02-14 | 一种质粒提取装置 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN104804998B (zh) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110272807B (zh) * | 2018-03-13 | 2020-11-24 | 武汉医蒂生物科技有限公司 | 一种核酸提取纯化正压装置 |
CN110272808B (zh) * | 2018-03-13 | 2020-10-16 | 武汉医蒂生物科技有限公司 | 一种核酸提取系统 |
CN108998348B (zh) * | 2018-10-09 | 2021-08-13 | 广东海洋大学 | 一种水稻基因dna组提取装置 |
CN110922477B (zh) * | 2019-12-25 | 2023-04-25 | 天津奇特尔生物科技有限公司 | 一种抗体制备装置及操作方法 |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE50012916D1 (de) * | 2000-03-07 | 2006-07-20 | A L P Technology Ag | Autoklavierbarer Annularchromatograph |
CN101307290A (zh) * | 2008-04-08 | 2008-11-19 | 上海理工大学 | 移液枪装置 |
CN101284249A (zh) * | 2008-05-12 | 2008-10-15 | 杭州电子科技大学 | 一种无交叉感染微量试剂精密加注装置 |
CN101602022B (zh) * | 2009-07-20 | 2011-08-17 | 中国检验检疫科学研究院 | 一种自动旋转加液取液定容装置 |
CN201978922U (zh) * | 2011-02-14 | 2011-09-21 | 四川迈克生物科技股份有限公司 | 一种用于固液分离的自动化反应清洗装置 |
CN102249072B (zh) * | 2011-06-18 | 2016-06-01 | 津伦(天津)精密机械股份有限公司 | 盛工件筐围绕水平轴旋转的回转处理机系统 |
EP2942900B1 (en) * | 2013-01-21 | 2020-03-04 | Huawei Technologies Co., Ltd. | Method, device, and system for improving network security |
CN103990504B (zh) * | 2014-05-27 | 2017-01-11 | 广州冠科生物科技有限公司 | 一种全自动移液装置 |
-
2015
- 2015-02-14 CN CN201510079177.XA patent/CN104804998B/zh not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN104804998A (zh) | 2015-07-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN104804998B (zh) | 一种质粒提取装置 | |
CN105296327B (zh) | 一种核酸提取装置及其提取方法 | |
WO2016192012A1 (zh) | 一种质粒纯化系统 | |
CN209519716U (zh) | 一种化工管道污垢清洗剂自动上料混合装置 | |
CN211921010U (zh) | 一种带有内循环结构的污水处理膜生物反应器 | |
CN105435488B (zh) | 卸柱阀和含卸柱阀的自动层析装置及装置用法 | |
CN208972615U (zh) | 一种芝麻清洗装置 | |
CN209020542U (zh) | 一种赤霉酸菌渣烘干用破碎辅助设备 | |
CN208684935U (zh) | 一种细胞分离装置 | |
CN207430889U (zh) | 一种高效型土壤修复淋洗装置 | |
CN207862354U (zh) | 微型核酸纯化装置 | |
CN214060527U (zh) | 一种超大量的生物大分子提取装置 | |
CN209575888U (zh) | 一种分析化学用过滤器 | |
CN210138827U (zh) | 养殖业粪便处理设备 | |
CN211635578U (zh) | 一种分离效果好的中药固液分离装置 | |
CN115136919B (zh) | 一种不同粒级浮游动物的快速分离方法 | |
CN208328533U (zh) | 一种废纸水洗装置 | |
CN209438999U (zh) | 一种用于中药干洗设备的除尘装置 | |
CN209109407U (zh) | 一种中药药液药渣分离机构 | |
CN208140424U (zh) | 一种便携式水样取样器 | |
CN112547513A (zh) | 中药材除杂风选设备及风选方法 | |
CN203408544U (zh) | 旋筒分离器 | |
CN208037372U (zh) | 一种砂石分离机 | |
CN220779179U (zh) | 一种生物制药提取液过滤装置 | |
CN220056375U (zh) | 一种高纯石英砂的酸洗装置 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
EXSB | Decision made by sipo to initiate substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20170104 |
|
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |