CN104800370A - 治疗猪蓝耳病的中草药注射液 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗猪蓝耳病的中草药注射液，该中草药注射液由下述重量份的原料药制成：青蒿1-2份，黄芩2-4份，鱼腥草4-6份，白花蛇舌草4-6份，紫锥菊4-6份，黄芪4-6份，白术2-4份，甘草1-2份。上述原料经过粉碎，配料，三次水煮浸提，合并三次滤液，浓缩后醇沉，调pH，活性炭脱色，吐温-80助溶，按定量加入防腐剂，搅匀，过滤，灌装，灭菌，制成本发明治疗猪蓝耳病的中草药注射液。本发明中草药注射液对治疗猪蓝耳病有很好的效果。

Description

治疗猪蓝耳病的中草药注射液

技术领域

本发明涉及治疗猪病用的中草药制剂，具体涉及一种治疗猪蓝耳病的中草药注射液。

背景技术

猪蓝耳病即猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的猪的一种高度接触性传染病，不同年龄、品种和性别的猪均能感染，但以妊娠母猪和1月龄以内的仔猪最易感染。该病以母猪流产、死胎、弱胎、木乃伊胎以及仔猪呼吸困难、败血症、高死亡率等为主要特征。因发病时部分病猪的特征表现是耳部发紫，故该病又称为“猪蓝耳病”。近年来普遍流行的高致病性猪蓝耳病，是由PRRSV变异株引起的一种急性高致死性传染病，仔猪发病率可达100％、死亡率可达50％以上，母猪流产率可达30％以上，育肥猪也可发病及死亡；PRRSV感染后，首先在局部的易感巨噬细胞中复制，然后迅速向全身淋巴组织和肺扩散，有时也向其他组织扩散。病毒在细胞内增殖，使巨噬细胞破裂，溶解崩溃造成巨噬细胞数量减少，肺泡壁增厚，淋巴组织呈衰竭状态，肺泡巨噬细胞对其他细菌和病毒疫苗的免疫力降低，易继发感染猪瘟病毒(CSFV)、多杀性巴氏杆菌(PM)、链球菌(SS)、猪副嗜血杆菌(HP)、放线杆菌(AS)、支原体(MHR)、圆环病毒(PCV-2)等，这是本病与其他疾病混合或继发感染的根本原因。同时因为毒株的变异导致免疫细胞识别能力降低，而逃避抗体的中和及细胞毒性T细胞的杀伤作用。因此，有效的防治猪蓝耳病的治则是：清热解毒，抗菌消炎，激活免疫系统，恢复巨噬细胞功能，抑制病毒繁殖，促进巨噬细胞摄取、处理和传递抗原，调节和增强T/B细胞的反应能力、增加T/B细胞的数量及促进其发育成熟，使猪在接种疫苗后能获得高水平的免疫应答反应。目前，化学药物增强机体免疫力都不同程度地存在着毒副作用、药物残留和阶段性用药达不到理想效果的弊端。中草药属于天然、绿色药物，对动物及人类安全、无毒副作用，并且能从根本上调节机体免疫功能。目前中草药制剂的研究有了较大发展，治疗猪病的兽用中草药种类也较多，但能够有效治疗猪蓝耳病的中草药注射液尚未见有报道。

发明内容

本发明的目的在于针对上述问题，提供一种能够有效治疗猪蓝耳病的中草药注射液。

本发明的技术方案是：一种治疗猪蓝耳病的中草药注射液，它由下述重量份的原料药制成：青蒿1-2份，黄芩2-4份，鱼腥草4-6份，白花蛇舌草4-6份，紫锥菊4-6份，黄芪4-6份，白术2-4份，甘草1-2份。

本发明治疗猪蓝耳病的中草药注射液优选的原料药重量份是：青蒿2份，黄芩4份，鱼腥草4份，白花蛇舌草4份，紫锥菊4份，黄芪4份，白术2份，甘草1份。

本发明治疗猪蓝耳病的中草药注射液的制备方法包括以下步骤：

(1)按重量份配比分别称取青蒿、黄芩、鱼腥草、白花蛇舌草、紫锥菊、黄芪、白术、甘草中草药饮片，并分别粉碎成中草药粗粉；

(2)取黄芩、黄芪、白术、甘草中草药粗粉，按步骤(1)得到的中草药粗粉总重量的7倍加注射水浸泡20-30min，加热煎煮25-35min，再加入青蒿、鱼腥草、白花蛇舌草、紫锥菊中草药粗粉煎煮25-35min，倾出第一次煮液，再按步骤(1)得到的中草药粗粉总重量的5倍分别加注射水两次煎煮，每次煎煮25-35min，得到第二次煮液和第三次煮液；

(3)合并步骤(2)得到的三次煮液，过滤，浓缩至每毫升注射水含生药1g，得到浓缩煮液；

(4)将步骤(3)得到的浓缩煮液加入3倍重量的浓度为95％的乙醇，边加入边搅拌，静置24h，除去沉淀并回收乙醇，浓缩至每毫升注射水含生药2g，得到浓缩药液；

(5)滴加稀氢氧化钠使步骤(4)得到的浓缩药液的pH达到7.0，按所述浓缩药液重量的0.15％加入活性炭，煮沸25-30min，放置12h，再按所述浓缩药液重量的1％各加入苯甲醇和吐温-80，搅匀，G-3号垂熔玻璃漏斗过滤，滤液用注射水补足至每毫升注射水含生药2g，灌装，灭菌，即得本治疗猪蓝耳病的中草药注射液。

本发明组方中各组份药理功效是：

1.青蒿功效：青蒿别名草蒿、茵陈蒿、邪蒿，香蒿等。性寒、味苦辛，归肝、胆、三焦、肾经。全草含倍半萜类如青蒿素、青蒿素G等，亦含挥发性成分如莰烯、β-莰烯、异蒿酮等，尚含黄酮类成分如山柰黄素、槲皮黄素、黄色黄素，还含香豆素、6-甲氧基-7-羟基香豆素等。青蒿水煎液对表皮葡萄球菌、卡他球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌有较强的抑菌作用，对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、痢疾杆菌、结核秆菌等也有一定的抑制作用。具有清热退蒸，清暑截疟之功效，用于阴虚潮热、黄疸、泻痢等。

2.黄芩功效：黄芩别名山茶根、黄芩茶、土金茶根等。味苦，寒。归肺、胆、脾、大肠、小肠经。黄芩根含黄酮类化合物：黄芩素，黄芩新素，黄芩甙，汉黄芩素，汉黄芩甙，木蝴蝶素A，7-甲氧基黄芩素，二氢木蝴蝶素，白杨素，另外还含β-谷甾醇，菜油甾醇及豆甾醇等有效成分。对痢疾杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、葡萄球菌、溶血性琏球菌等有抑制作用。有清热燥湿，凉血解毒之功效。主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、肺炎等症。

3.鱼腥草功效：鱼腥草别名岑草、蕺菜、菹菜、紫背鱼腥草。性微寒、味苦。归肺、肝、膀胱、大肠经。含挥发油，内含抗菌有效成分癸酰乙醛，月桂醛，a-蒎烯和芳樟醇，甲基正壬基甲酮，樟烯，月桂烯，柠檬烯，乙酸龙脑酯，丁香烯，阿福甙，金丝桃甙，芸香甙。具有清热解毒之功效。用于肺炎、肺脓疡，热痢等。

4.白花蛇舌草功效：白花蛇舌草别名蛇舌草、羊须草、蛇总管等。味微苦，性寒。归胃、大肠、小肠经。含三十一烷、豆固醇、乌索酸、齐墩果酸、黄酮甙及百合蛇舌草素等。具清热解毒，利湿通淋之功效。用于肺热喘咳、咽喉肿痛、肠痈、疖肿疮疡、热淋涩痛、水肿、痢疾、肠炎、湿热黄疸等症。

5.紫锥菊功效：紫锥菊别名紫锥花、紫松果菊、紫花松果菊。性微寒，味辛、苦，归肺、肝经。含有多糖、黄酮、咖啡酸的衍生物、精油、多炔、烷基胺和生物碱。有免疫刺激作用，减少发炎，帮助机体对抗细菌和病毒。用紫锥菊饲喂动物，可提高嗜中性粒细胞的吞噬能力及外周淋巴细胞的数量，有效刺激动物机体的免疫活性；将紫锥菊根制成饲料添加剂喂鸡，可明显增加实验组体重和降低球虫的感染率。

6.黄芪功效：黄芪别称棉芪，黄耆，独椹，蜀脂，百本。味甘，微温。归肺，脾，肝，肾经。含皂甙、黄酮、多糖、多种氨基酸、叶酸及硒、锌、铜等多种微量元素，具有增强机体免疫功能、保肝、利尿、降压、抗衰老、抗缺氧、抗辐射、抗应激、耐低温和耐高温作用。动物试验证明，能够增加网状内皮系统的吞噬功能，促进抗体形成，提高E-玫瑰花环率，促进T细胞的分化与成熟，增强NK细胞的细胞毒活性，诱导产生干扰素，对动物流感病毒、腺病毒等所致的细胞病变有抑制作用。有益气固表、敛汗固脱、托疮生肌、利水消肿之功效。用于治疗气虚乏力，中气下陷，表虚自汗，痈疽难溃，久溃不敛，血虚萎黄，内热消渴等症。

7.白术功效：白术别名于术、冬术、冬白术、浙术、云术、台白术、山蓟、天蓟、杭白术等。性味苦甘、温、无毒。归脾、胃经。根茎含挥发油，内有α-及β-葎草烯，β-榄香醇，苍术酮，3β-乙酰氧基苍术酮，芹子二烯酮等。还含倍半萜内酯化合物：苍术内酯-Ⅰ、-Ⅱ、-Ⅲ及8β-乙氧基苍术内酯-Ⅱ。又含多炔类化合物。另含东莨菪素，果糖，具免疫活性的甘露聚糖AM-3，以及天冬氨酸等氨基酸。白术能增强网状内皮系统的吞噬功能，对小鼠网状内皮系统呈活化作用,促进小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能，使巨噬细胞的吞噬百分率，吞噬指数及其溶酶体消化平均较对照组显著增加。具补脾益胃，燥湿和中之功效。用于脾胃气弱，不思饮食。

8.甘草功效：甘草别名甜草根、红甘草、粉甘草。性平，味甘，归十二经。甘草主要含甘草酸、甘草甜素、24-羟基甘草次酸、甘草黄酮、甘草素、异甘草素、甘草多糖等成分，具有抗溃疡、促进胰腺分泌、保肝、降脂、调节巨噬细胞的吞噬功能等作用。甘草酸是天然解毒剂，可用于机体抗衰老、增强免疫力、维持水盐代谢平衡等。

本发明组方依据：本组方以扶正祛邪，增强猪抗病、防病能力，提高免疫力为原则。方中青蒿、黄芩为清热、解毒主药；黄芩、鱼腥草、白花蛇舌草为清热、解毒、抗菌、消炎辅药，紫锥菊具有免疫刺激作用，减少发炎，而且可帮助机体对抗细菌和病毒；黄芪、白术有补中益气，生津养血，扶正祛邪，调节机体免疫功能；甘草甘温益气、和中健脾，通行十二经络，调和诸药。方中诸药相和，共奏清热解毒，抗菌消炎，提高机体免疫力和抗病能力的功效。为增强治疗效果，制成注射液。

本发明中草药注射液适用于由猪蓝耳病病毒及其因猪蓝耳病病毒感染引起的各种细菌的继发感染。

本发明中草药注射液具有清热解毒、抗菌消炎功效，能增强猪抗病、防病能力，提高免疫力，作为治疗猪蓝耳病的中草药制剂，具有良好的效果。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明。

实施例：

1、分别称取原料药(饮片)：青蒿100g，黄芩200g，鱼腥草200g，白花蛇舌草200g，紫锥菊200g，黄芪200g，白术100g，甘草50g。

2、将上述原料药分别粉碎成中草药粗粉；

3、将黄芩、黄芪、白术、甘草四味中草药粗粉混合，加水7000mL浸泡1h后，文火煎煮30min，再放入青蒿、鱼腥草、白花蛇舌草、紫锥菊中草药粗粉，文火煎煮30min，得到第一次煮液，然后再每次加水5000mL煎煮二次，每次煎煮30min，得到第二次煮液和第三次煮液；

4、合并上述三次煮液，过滤，浓缩至每毫升注射水含生药1g，得到浓缩煮液，然后加入浓度为95％的乙醇1500mL，边加入边搅拌，静置24h，去沉淀取上清液，蒸去乙醇，浓缩至每毫升注射水含生药2g，得到浓缩药液；

5、滴加稀氢氧化钠使上述浓缩药液的pH达到7.0，加该浓缩药液重量0.15％的活性炭煮沸30min，放置12h，过滤，按该浓缩药液重量各加入1％的苯甲醇和吐温-80，搅匀，G-3号垂榕玻璃漏斗过滤，滤液用注射水补足500mL，灌装每瓶10mL，100℃、30min灭菌，即得本治疗猪蓝耳病的中草药注射液。

利用本发明中草药注射液进行的一些试验情况如下：

1、本发明中草药注射液对PRRSV的抑制作用

中药有效成分抗病毒作用的机理，一般认为主要有2条途径，一是直接杀灭病毒，二是抑制病毒的繁殖。本实验按抑制病毒的繁殖途径设计了1组试验，即先接种病毒后加本发明中草药注射液以观察中草药样品能否对细胞内的PRRSV起抑制作用，即抑制其生物合成及成熟释放。本发明中草药注射液对PRRSV的抑制作用测定实验是这样实现的：将100TCID50PRRSV接种至长成单层猴胚胎肾上皮细胞(Marc-145)的96孔细胞培养板上，0.1mL/孔，37℃吸附1.5h，弃去PRRSV液，用磷酸盐缓冲液PBS液洗2次，加入倍比稀释的本发明中草药主要单味中药如青蒿、黄芩、鱼腥草、白花蛇舌草、紫锥菊和本发明中草药注射液，0.1mL/孔，每个稀释度重复4孔，另设细胞对照和PRRSV对照，5％CO2培养箱37℃培养，结果见表1。试验结果表明，本发明中草药注射液主要单味中药如青蒿、黄芩、鱼腥草、白花蛇舌草、紫锥菊对PRRSV在Marc-145细胞上的增殖具有明显的抑制作用，5种单味中药提取物分别在0.25mg/mL、0.25mg/mL、0.25mg/mL、0.125mg/mL浓度时仍具有显著的抑制CPE作用，其中紫锥菊水提物对PRRSV引起的细胞病变CPE最小抑制浓度最低，为0.0625mg/mL；本发明中草药注射液对PRRSV引起的CPE最小抑制浓度也最低，为0.0625mg/mL。

表1本发明中草药注射液对PRRSV在Marc-145细胞上增殖的抑制作用

注:-为正常Marc-145细胞；+为25％的细胞出现细胞病变CPE；++为50％的细胞出现细胞病变CPE；+++为75％的细胞出现细胞病变CPE；++++为100％的细胞出现细胞病变CPE。

2、本发明中草药注射液对猪蓝耳病的治疗效果

2.1分组治疗：取经实验室诊断为猪蓝耳病病猪60头平均分成3组，分别放入3个隔离猪舍内。3个隔离猪舍内猪群分别为本发明中草药注射液组(20头)，用本发明中草药注射液注射给药10mL；干扰素组(20头)，注射干扰素5mL；抗生素对照组(20头)，每头肌肉注射头孢噻肟钠1支；以上各组均每天用药2次，连用5d。另有空白对照组(10头)放在远离病猪群另一猪舍内，不给药。

2.2疗效判定：观察猪的精神、采食、体温、呼吸、皮肤和耳朵颜色及死亡等情况，按如下标准判断疗效。治愈：用药后呼吸平稳，精神、饮食、体温、皮肤和耳朵颜色恢复正常。好转：用药后症状明显减轻，呼吸、精神、体温、饮食好转。无效：用药后症状不减轻，甚至加重或死亡。总有效率＝治愈率+好转率。

2.3治疗结果：本发明中草药注射液治愈率和总有效率均显著高于抗生素组和不治疗的空白对照组，但和干扰素组相比差异不显著，表明本发明中草药注射液对猪繁殖与呼吸综合征有疗效，各组的治疗效果见表2。

表2各组的治疗效果(％)

使用本发明中草药注射液治疗猪蓝耳病有较好的疗效，和干扰素相似，高于抗生素对照和空白对照。通过各项试验表明，本发明中草药注射液，对猪蓝耳病有明显的治疗效果。

Claims (2)

1.一种治疗猪蓝耳病的中草药注射液，其特征在于它由下述重量份的原料药制成：青蒿1-2份，黄芩2-4份，鱼腥草4-6份，白花蛇舌草4-6份，紫锥菊4-6份，黄芪4-6份，白术2-4份，甘草1-2份。

2.根据权利要求1所述的治疗猪蓝耳病的中草药注射液，其特征在于它由下述重量份的原料药制成：青蒿2份，黄芩4份，鱼腥草4份，白花蛇舌草4份，紫锥菊4份，黄芪4份，白术2份，甘草1份。