CN104784299A - 一种含地锦草苦参和黄芩的发酵中药组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种含地锦草苦参和黄芩的发酵中药组合物及其制备方法,它由地锦草25~35%,黄芩15~25%,苦参15~25%,苍术15~25%,陈皮5~15%组成。本发明含地锦草、苦参和黄芩的发酵中药组合物可以制备成颗粒剂或提取液的制剂,对于雏鸡,分别用于拌料给药和饮水给药。本发明的试验结果显示:含地锦草、苦参和黄芩的发酵中药组合物对防治雏鸡大肠杆菌病、减少雏鸡死亡有显著的作用。
Description
技术领域
本发明涉及发酵中药组合物技术领域,更具体地说,是涉及适用于防治雏鸡大肠杆菌病的含地锦草、苦参和黄芩的发酵中药组合物及其制备方法与应用。
背景技术
鸡大肠杆菌病由大肠埃希氏菌的某些血清型菌株所引起的一类传染病的总称,发病率11%-69%,死亡率3.8%-72.9%,致死率40.2%-90.3%,是危害养鸡业的重要细菌性传染病之一,给养鸡业发展带来了巨大的经济损失。
目前药物防治鸡大肠杆菌病的抗菌药物因长期、大剂量或重复地在饲料中添加,已造成大肠杆菌对抗生素的严重耐药。有研究表明,从临床分离20 株致病性鸡大肠杆菌对青霉素、链霉素、氨苄青霉素、红霉素、痢特灵和痢菌净有较强的耐药性,且随时间推移,大肠杆菌的耐药性大幅度上升,多重耐药菌株迅速增加,耐药谱增宽,对常用抗生素广谱耐药,多数呈6 种以上联合耐药。
中草药对鸡大肠杆菌病可通过抗病原、免疫调节和抗细菌毒素等方面发挥综合作用。用中草药防治鸡大肠杆菌病临床上已取得良好效果。如杨安龙以加味三黄汤散剂添加到饲料中,对禽大肠杆菌病,预防保护率达99.4%,治愈率达78.2%。
中药发酵技术是近年来国内中药研究的热点,通过发酵,可改变某些中药的毒性、提高药效、加速吸收、改善口味等,还可通过发酵对中药中的成分进行结构修饰,从而改变药性,甚至得到新的有效成分,扩大药物的应用范围。
选择对养鸡业危害较大的鸡大肠杆菌病作为防治对象,研究中药组合及其发酵工艺,通过饲料添加,改善消化道微环境,提高鸡的抗病力,并通过抗菌活性成分的更有效释放,消除病原,达到对大肠杆菌病的预防和治疗效果,从而在鸡的养殖过程中减少抗生素类药物的使用,减少畜产品中抗生素残留,促进食品卫生与安全。
发明内容
本发明公开了一种含地锦草、苦参和黄芩的发酵中药组合物,其特征在于,它是按下述比例组成(w/w):
地锦草25~35%,黄芩15~25%,苦参15~25%,苍术15~25%,陈皮5~15%。
本发明进一步公开了含地锦草、苦参和黄芩的发酵中药组合物的制备方法,它是按如下的步骤进行:
(1)陈皮的发酵:将处方量的陈皮粉碎,过60目筛,按每8克陈皮加入100毫升MRS液体培养基的比例配制发酵培养基, 121℃灭菌20分钟后加入1-20%(w/w)乳酸菌(Lactobacillus plantarum)发酵,发酵时间18-36小时,温度20-35℃;所述的MRS液体培养基指的是:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母膏5g,柠檬酸氢二胺2g,葡萄糖5g,乙酸钠2g,吐温80 1g,磷酸氢二钾2g,七水硫酸镁0.2g,硫酸锰0.05g,蒸馏水1000ml;
(2)发酵中药颗粒:将除陈皮外的各味中药粉碎,过60目筛,与陈皮发酵物混合制得含地锦草、苦参和黄芩的混合物,加入混合物3倍重量的淀粉,制成含药量为25%(w/w)的颗粒或
(3)发酵中药提取液:将除陈皮外的各味中药混合,加中药混合物8~10倍重量水煎煮提取2 次,每次30分钟,滤过,滤液浓缩至500ml,滤过备用;再将陈皮发酵物加水500ml,充分搅拌,滤过,取滤液500ml,与前述备用中药浓缩液混合,制成含量为50%(w/w)的发酵中药提取液。
本发明更进一步公开了含地锦草、苦参和黄芩的发酵中药组合物在制备防治雏鸡大肠杆菌病、减少雏鸡死亡中的应用。本发明的试验结果显示,对人工感染大肠杆菌的雏鸡保护率达到93.75%,同时对健康雏鸡可提高日增重,促进雏鸡的生长。
本发明中所采用的各味中药材的性能如下:
黄芩、苦参清热燥湿止痢;地锦草清热解毒治痢;苍术燥湿健脾;陈皮健脾理气。此外,组方中以苍术温热之性制约苦参、黄芩寒凉之性,以避免苦寒之品伤及脾胃。
黄芩常用于治疗湿热型下痢,主要与其抗菌作用有关。黄芩水煎液对痢疾杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、霍乱弧菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎双球菌、白喉杆菌等有抑制作用。黄芩醇浸液对大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌有抑制作用。各产地黄芩抗菌、抗炎、解热与镇静方面均表现良好的药理活性。以中药黄芩与止痢灵(主要成分为白头翁、黄柏和苦参)联合应用对大肠杆菌携带的R质粒具有消除作用,细菌表现为多重耐药性的丢失。
苦参体外具有抗菌作用。其有效成分苦参总碱对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌和白色念珠菌具有抗菌作用。苦参碱口服后能显著延长首次黑粪排出的时间,对由蓖麻油引起的湿粪排出时间有明显的延缓作用,对小鼠给药后一定时间内排出粪粒数显著减少,表明苦参碱可通过抑制肠蠕动起到止泻作用。
地锦草鲜汁、水煎剂、醇提物、水煎醇提物具广谱抗菌作用,体外对多种痢疾杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、绿脓杆菌、肠炎杆菌、猪霍乱沙门氏菌、白喉杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、溶血链球菌、卡他球菌、钩端螺旋体等有抑制杀灭作用。
苍术挥发油对表皮葡萄球菌、金葡菌、甲型链球菌、乙型链球菌、肺炎球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌均有抑菌作用。苍术70%乙醇提取物对小鼠胃排空、小肠推进有明显抑制作用。
陈皮能抑制肠道收缩、抑制小肠推进运动,具有止泻功效。陈皮挥发油能促进大鼠正常胃液的分泌,有助于消化。陈皮水煎液体外能使唾液淀粉酶活性增高。
乳酸菌是动物肠道内的主要有益菌,对动物的健康起着非常重要的作用。主要发挥促生长、调节肠道微生态平衡、增加免疫力等益生作用。研究发现,在饲料中添加乳酸菌微生态制剂能够提高肉仔鸡日增重、降低料重比从而改善生长性能。
本发明公开的含地锦草、苦参和黄芩的发酵中药组合物所具有的功效在于:
(1)对于已感染致病性大肠杆菌的鸡群,使用本发明公开的发酵中药组合物,可降低雏鸡发病率,显著减少病鸡死亡,对于鸡大肠杆菌病导致的腹泻有良好的治疗作用,可作为治疗药物使用。
(2)对于未感染大肠杆菌的健康鸡群,本发明公开的发酵中药组合物可提高雏鸡日增重,促进雏鸡的生长,可作为防病促生长添加剂使用。
具体实施方式
下面结合实施例说明本发明,这里所述实施例的方案,不限制本发明,本领域的专业人员按照本发明的精神可以对其进行改进和变化,所述的这些改进和变化都应视为在本发明的范围内,本发明的范围和实质由权利要求来限定。其中地锦草,黄芩,苦参,苍术,陈皮,乳酸菌(Lactobacillus plantarum)均为市售。
本发明按照下表中各实施例进行配比,单位:g(%)
以实施例1来详述制备方法:
1、发酵中药颗粒的制备:
步骤一 将方中陈皮粉碎,过60目筛,按每8克陈皮加入100毫升MRS液题培养基(包含:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母膏5g,柠檬酸氢二胺2g,葡萄糖5g,乙酸钠2g,吐温80 1g,磷酸氢二钾2g,七水硫酸镁0.2g,硫酸锰0.05g,蒸馏水1000ml。)的比例配制发酵培养基, 121℃灭菌20分钟后加入10%(w/w)乳酸菌(Lactobacillus plantarum)发酵,发酵时间24小时,温度35℃。
步骤二 将其余各味中药粉碎,过60 目筛。
步骤三 将中药粉与发酵陈皮混合,加1500克淀粉,制成含生药25%的颗粒备用。
2、发酵中药提取液的制备
步骤一 将方中陈皮粉碎,过60目筛,按每8克陈皮加入100毫升MRS液题培养基(包含:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母膏5g,柠檬酸氢二胺2g,葡萄糖5g,乙酸钠2g,吐温80 1g,磷酸氢二钾2g,七水硫酸镁0.2g,硫酸锰0.05g,蒸馏水1000ml。)的比例配制发酵培养基, 121℃灭菌20分钟后加入10%(w/w)乳酸菌(Lactobacillus plantarum)发酵,发酵时间24小时,温度35℃。
步骤二 将其余各味中药加水4-5升,煎煮提取2 次,每次30分钟,滤过,滤液浓缩至500ml,滤过,备用。
步骤三 将陈皮发酵物加水500ml,充分搅拌,滤过,取滤液500ml。
步骤四 将陈皮发酵物滤液与中药提取液混合,制成50%浓度的发酵中药提取液。
本发明的安全性:以临床推荐剂量的5倍量(1.0g/只天)连续给药7天投胃灌服,对雏鸡无致死作用,且增重是对照组的2.65倍(17.2g/6.5g),表明地锦苦芩发酵物颗粒对雏鸡使用安全剂量可达16g/kgbw/天,同时有促进生长的作用。
本发明的应用
发酵地锦苦芩组合对人工感染鸡大肠杆菌病模型的临床药效
将144只鸡平均分为9组,每组16只为1笼,公母各半。
1药物剂量设置及给药方法
1.1发病前给药 设地锦苦芩发酵颗粒(见实施例1,含量25%)高、中、低3个剂量组,在攻菌前3天给药,按每天0.6g/只、0.4g/只和0.2g/只剂量,分2次给药。地锦苦芩颗粒(含量25%)同样设置作为对比。对照药物盐酸环丙沙星颗粒(含量4mg/g)给药剂量为每天每只鸡0.25g,分2次给药。见表1。
1.2 发病后给药 攻菌4小时后,各组鸡只开始发病时,改用饮水给药。给药剂量为,地锦苦芩发酵物提取液(浓度50%)高中低剂量组分别为每天0.3ml/只、0.2ml/只和0.1ml/只,分2次给药。地锦苦芩提取液(浓度50%)高中低剂量组给药剂量同上。盐酸环丙沙星溶液(含量5mg/ml)给药剂量为每天0.1ml/只。连用3天。见表2。
表2 分组与剂量设置(提取液)
2 试验结果
试验结果,如表3所示,地锦苦芩发酵物高剂量组、地锦苦芩发酵物中剂量组、地锦苦芩发酵物低剂量组、地锦苦芩高剂量组、地锦苦芩中剂量组、地锦苦芩低剂量组、盐酸环丙沙星对照组、攻菌对照组和空白对照组雏鸡保护率分别为75.00%、75.00%、93.75%、68.75%、68.75%、75.00%、75.00%、56.25%、100.00%,各给药组与模型对照组比较,差异显著或极显著(p<0.05-p<0.001)。地锦苦芩发酵物与未发酵物对鸡大肠杆菌病人工模型均有较好的治疗作用。其中发酵中药低剂量组作用最好,可作为临床推荐剂量。
表3 地锦苦芩发酵物对鸡大肠杆菌病人工模型的疗效统计 只、%
注:右键标注相同字母的两组间比较差异不显著(p>0.5),标注不同字母的两组间比较差异显著或极显著(p<0.05,p<0.01,p<0.001)
本发明不局限于具体实施例中,凡是在本发明宗旨内的任何改进均落入本发明的保护范围。
Claims (4)
1.一种含地锦草、苦参和黄芩的发酵中药组合物,其特征在于,它是由下述比例组成(w/w):
地锦草25~35%,黄芩15~25%,苦参15~25%,苍术15~25%,陈皮5~15%。
2.权利要求1所述含地锦草、苦参和黄芩的发酵中药组合物的制备方法,其特征在于按如下的步骤进行:
(1)陈皮的发酵:将处方量的陈皮粉碎,过60目筛,按每8克陈皮加入100毫升MRS液体培养基的比例配制发酵培养基, 121℃灭菌20分钟后加入1-20%(w/w)乳酸菌(Lactobacillus plantarum)发酵,发酵时间18-36小时,温度20-35℃;所述的MRS液体培养基指的是:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母膏5g,柠檬酸氢二胺2g,葡萄糖5g,乙酸钠2g,吐温80 1g,磷酸氢二钾2g,七水硫酸镁0.2g,硫酸锰0.05g,蒸馏水1000ml;
(2)发酵中药颗粒:将除陈皮外的各味中药粉碎,过60目筛,与陈皮发酵物混合制得含地锦草、苦参和黄芩的混合物,加入混合物3倍重量的淀粉,制成含药量为25%(w/w)的颗粒或
(3)发酵中药提取液:将除陈皮外的各味中药混合,加中药混合物8~10倍重量水煎煮提取2 次,每次30分钟,滤过,滤液浓缩至500ml,滤过备用;再将陈皮发酵物加水500ml,充分搅拌,滤过,取滤液500ml,与前述备用中药浓缩液混合,制成含量为50%(w/w)的发酵中药提取液。
3.权利要求1所述含地锦草、苦参和黄芩的发酵中药组合物在制备防治雏鸡大肠杆菌病、减少雏鸡死亡中的应用。
4.权利要求1所述含地锦草、苦参和黄芩的发酵中药组合物在制备提高雏鸡日增重,促进雏鸡生长中的应用。
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