CN104758240B - 一种装载紫杉醇的纳米药物复合体及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种装载紫杉醇的纳米药物复合体，包括紫杉醇和纳米药物载体，该纳米药物载体为氨基聚二醇单甲醚修饰的氧化石墨烯。本发明还提供了该装载紫杉醇的纳米药物复合体的制备方法，将氨基聚二醇单甲醚通过酰胺共价键修饰到氧化石墨烯的表面，得到纳米药物载体，并通过π‑π作用吸附紫杉醇，得到所述纳米药物复合体。本发明提供的纳米药物复合体的制备方法简单可行、成本低，解决了现有紫杉醇的剂型中使用聚氧乙烯蓖麻油作助溶剂毒副作用大及剂型制备复杂的问题；所述纳米药物复合体具有很好的水溶性、稳定性和生物相容性，毒副作用小，安全性好，能较好地杀死肿瘤细胞的作用，提高了紫杉醇的治疗效果。
Description
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种装载紫杉醇的纳米药物复合体及其制备方法。
背景技术
紫杉醇(PTX)是一种天然抗肿瘤药物，广泛用于卵巢癌、乳腺癌、肺癌等多种肿瘤的治疗。但由于PTX难溶于水、生物利用度低，半衰期短及毒性大，临床上需要开发紫杉醇的剂型，以提高其对肿瘤的靶向疗效。
临床应用的PTX的剂型主要有PTX注射液、PTX脂质体。而紫杉醇注射液剂型，需要采用助溶剂聚氧乙烯蓖麻油与乙醇的混合溶液来增加PTX的溶解性，所用助溶剂聚氧乙烯蓖麻油易致高敏性、神经毒性等不良反应，限制了其在临床上的应用。而紫杉醇脂质体，生物相容性好，避免了助溶剂聚氧乙烯蓖麻油带来的毒副作用，但纳米脂质体的合成工艺复杂、成本较高，且纳米脂质体不具有多功能可修饰性，很难再修饰上生物靶向分子等。
因此，有必要提供一种工艺简单、生物相容性性好且稳定、可修饰性强、毒副作用小、对肿瘤细胞疗效高的紫杉醇新剂型。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种装载紫杉醇的纳米药物复合体及其制备方法，用以解决现有技术中紫杉醇的剂型使用助溶剂毒副作用大及剂型制备复杂的问题。
第一方面，本发明提供了一种装载紫杉醇的纳米药物复合体，所述装载紫杉醇的纳米药物复合体包括紫杉醇和纳米药物载体，其中，所述纳米药物载体为氨基聚二醇单甲醚(mPEG-NH2)修饰的氧化石墨烯(NGO-PEG)，所述mPEG-NH2通过酰胺键结合在所述氧化石墨烯的表面，所述紫杉醇通过非共价键结合在所述纳米药物载体表面。
优选地，所述纳米药物载体NGO-PEG与紫杉醇PTX的质量比为0.5-1:1。
优选地，所述氧化石墨烯为经过羧基化处理的氧化石墨烯。
优选地，所述mPEG-NH2与氧化石墨烯的质量比为1-5:1。
优选地，所述氧化石墨烯为直径50-120nm的单层氧化石墨烯。
如本发明所述的，所述直径指的是石墨烯片层结构的平均宽度。
较多层的氧化石墨烯而言，单层结构的氧化石墨烯性质稳定，不易聚集，且更利于载药，对药物的负载率更大。
优选地，所述mPEG-NH2的分子量为5000-10000；更优选地，所述mPEG-NH2的分子量为5000。
所述紫杉醇药物中含有π键，可与氧化石墨烯表面的芳香环结构通过π-π共轭作用吸附在一起。
第二方面，本发明还提供了一种装载紫杉醇的纳米药物复合体的制备方法，包括如下步骤：
(1)制备纳米药物载体溶液：
取氧化石墨烯，进行羧基化处理，得到羧基化的氧化石墨烯(NGO-COOH)的水溶液，向所述水溶液中加入缩合剂、催化剂，并超声分散，再加入氨基聚二醇单甲醚(mPEG-NH2)，在室温、搅拌条件下进行酰胺化反应8-24h，得到第一反应液，将第一反应液转进行分段离心、洗涤，得到的上清液为氨基聚二醇单甲醚(mPEG-NH2)修饰的氧化石墨烯溶液，即纳米药物载体溶液(NGO-PEG)；
(2)制备装载紫杉醇的纳米药物复合体：
称取紫杉醇，溶于有机溶剂，加入上述纳米药物载体溶液(NGO-PEG)，混合均匀，在室温下搅拌1-3h，得到第二反应液，将所述第二反应液离心去除多余的药物和溶剂，得到装载紫杉醇的纳米药物复合体(NGO-PEG-PTX)，其中，所述纳米药物载体为氨基聚二醇单甲醚修饰的氧化石墨烯，所述氨基聚二醇单甲醚通过酰胺键结合在所述氧化石墨烯的表面，所述紫杉醇通过非共价键结合在所述纳米药物载体表面。
优选地，所述步骤(2)中，NGO-PEG与紫杉醇PTX的质量比为0.5-1:1。
优选地，所述步骤(1)中，mPEG-NH2与氧化石墨烯的质量比为1-5:1。
优选地，所述氧化石墨烯为直径50-120nm的单层氧化石墨烯。
优选地，所述mPEG-NH2的分子量为5000-10000；更优选地，所述mPEG-NH2的分子量为5000。
优选地，所述步骤(1)中，超声分散的时间为5-20min。
如本分发明所述，步骤(1)中酰胺化反应，是采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二酰亚胺盐酸盐(EDC)作缩合剂，N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)作催化剂。
所述步骤(2)中，所述有机溶剂为两亲性溶剂，且细胞毒性极小，可通过控制紫杉醇在有机溶剂中的浓度来控制毒性。
优选地，所述步骤(2)中，所述有机溶剂为二甲基亚砜(DMSO)。
所述有机溶剂用于溶解抗癌药物，并与NGO-PEG水溶液形成均相的体系，且所用溶剂DMSO的细胞毒性极小。
优选地，所述步骤(1)中，所述分段离心是先在转速为6000rpm下，低速离心30min，再在转速为12000rpm下，高速离心30min。
优选地，本发明中，将第一、第二反应液转移至超滤离心管进行离心，所述超滤离心管的截留分子量为30-50kDa。
氧化石墨烯(GO)一种新兴的碳纳米材料，具有独特的一维片层结构和大的比面积，其基本结构单元为苯六元环，表面还有一些含氧官能团，以环氧基、羟基、羧基等为主。没有修饰过的氧化石墨烯在水溶液或生理环境下的稳定性很差，容易发生团聚。本发明采用氨基封端的PEG对GO进行表面修饰，一方面可改善石墨烯的亲水性，并提高生物相容性；另一方面，可降低生物体内网状内皮系统对所述纳米药物复合体的识别，延长半衰期。
如本发明所述的，羧基化的氧化石墨烯是采用如下方法制备：
取商用或合成的氧化石墨烯，加水，并于水浴中超声分散1-3h，得到纳米氧化石墨烯(NGO)的胶体溶液；分别将1.2g氢氧化钠和1.0g氯乙酸加入到NGO的胶体溶液中，超声破碎1-3h，得到反应混合液；将所述反应混合液转移至透析袋中，用去离子水透析至透析外液的pH值为中性，得到羧基化的氧化石墨烯(NGO-COOH)。
本发明中，所述纳米药物载体NGO-PEG还可用于负载其他疏水或亲水性的芳香族抗肿瘤药物。如多烯紫杉醇、白藜芦醇、易瑞沙、喜树碱、长春碱、布洛芬、阿霉素、顺铂、5-氟尿嘧啶等。芳香族抗肿瘤药物分子中含有π键，可与氧化石墨烯表面的芳香环结构通过π-π共轭作用吸附在一起。
另外，所用纳米氧化石墨烯表面的含氧官能团和芳香环结构，还可以通过共价或非共价作用修饰上其他功能基团，比如悬浮剂(如聚乙二醇、明胶、壳聚糖等)、肿瘤靶向分子(如叶酸、甲胎蛋白抗体等)、荧光标记物(如异硫氰酸酯)等，可进一步增加所述纳米复合体的主动靶向性和多功能性。
本发明将氨基聚二醇单甲醚(mPEG-NH2)通过酰胺共价键修饰到氧化石墨烯的表面，得到水溶性较好且稳定的NGO-PEG，并由NGO-PEG作为纳米药物载体，通过π-π共轭作用吸附芳香族药物紫杉醇，得到装载紫杉醇的纳米药物复合体。本发明具有以下有益效果：
(1)所述纳米药物复合体的制备方法简单可行、成本低，且能够避免使用具有毒副作用的助溶剂聚氧乙烯蓖麻油；
(2)修饰后的氧化石墨烯作为药物载体，其毒性低，表面积大，可通过π-π共轭作用、氢键、亲疏水作用等范德华力与紫杉醇作用，药物的负载量大，且不破坏药物的结构；
(3)由于有氨基封端的PEG的修饰，所述纳米复合体具有很好的水溶性、稳定性和生物相容性，毒性小，安全性好，可浓集于肿瘤部位，并在肿瘤组织的酸性条件下缓释出紫杉醇，能高效地杀死肿瘤细胞，降低了对正常细胞的毒副作用。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例氨基聚二醇单甲醚修饰的氧化石墨烯(NGO-PEG)和氧化石墨烯(NGO)的红外光谱图；
图2为本发明实施例1异硫氰酸荧光素(FITC)标记的药物载体NGO-PEG-FITC的细胞内吞结果图；
图3为本发明实施例1中紫杉醇PTX、载体NGO-PEG、纳米药物复合体NGO-PEG-PTX的紫外光谱图；
图4为本发明实施例1纳米药物复合体NGO-PEG-PTX水溶液的照片；
图5为本发明实施例1纳米药物复合体(NGO-PEG-PTX)的原子力显微镜的表征结果图；
图6为本发明实施例纳米药物复合体NGO-PEG-PTX、载体NGO-PEG、药物PTX对小鼠乳腺癌细胞的细胞活性实验结果图。
具体实施方式
下面将对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种装载紫杉醇的纳米药物复合体的制备方法，包括如下步骤：
(1)制备纳米药物载体溶液：
取氧化石墨烯，进行羧基化处理，得到羧基化的氧化石墨烯(NGO-COOH)的水溶液(浓度为1mg/mL)，取20mL，加盐酸调pH为5.6，将8mg的N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和10mg的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二酰亚胺盐酸盐(EDC)加入到NGO-COOH中，超声分散5min，加入100mg氨基聚二醇单甲醚(mPEG-NH2，分子量为5000)，在室温、搅拌条件下进行酰胺化反应12h，得到第一反应液，将第一反应液转移至超滤离心管(截留分子量为30kDa)，先在6000rpm转速下低速离心30min，用去离子水洗涤，重复上述离心、洗涤过程3次，再在12000rpm高速转速下离心30min，得到的上清液为氨基聚二醇单甲醚修饰的氧化石墨烯溶液，即纳米药物载体溶液(NGO-PEG)；
图1为氨基聚二醇单甲醚修饰的氧化石墨烯(NGO-PEG)和氧化石墨烯(NGO)的红外光谱图：从图中可看出，相对于NGO而言，载体NGO-PEG在2880和1720cm-1处有特征吸收峰，其中2880cm-1处的峰表示PEG聚合单元中-CH2-的伸缩振动峰,1720cm-1是酰胺吸收带的特征峰。从图1的红外谱图结果可以表明，PEG-NH2成功通过酰胺键连接到了氧化石墨烯上，即制备得到了载体NGO-PEG。
图2是荧光标记的药物载体NGO-PEG-FITC的细胞内吞结果图：
本发明以芳香族化合物异硫氰酸荧光素(FITC)作荧光标记物，考察药物载体NGO-PEG被小鼠乳腺癌细胞(4T1)的细胞内吞情况，并用单独的FITC作对照，操作步骤如下：
将4T1细胞接种于6孔细胞培养板中，细胞培养24h贴壁后，弃去陈旧培养基，用PBS(磷酸盐缓冲液)冲洗2次，之后向每孔分别加入1mL(浓度为200μg/mL)的NGO-PEG-FITC、FITC，在37℃孵育2h后，观察4T1细胞中的FITC的荧光，并用荧光显微镜拍摄明场和荧光模式下的照片，并对各组照片进行重叠组合处理。
其中，NGO-PEG-FITC的制备如下：
称取4mg FITC溶于1mL DMSO，加入1mL步骤(1)中1mL纳米药物载体溶液(NGO-PEG)，混合均匀，在室温下搅拌1h，得到反应混合液，将所述反应混合液用截留分子量为30000的超滤离心管在6000rpm转速下离心30min，去除多余的药物和溶剂，得到荧光标记的纳米药物载体(NGO-PEG-FITC)。
从图2可以看出，在用NGO-PEG-FITC孵育4T1细胞2h后，4T1细胞内可以观察到FITC较强的绿色荧光，说明NGO-PEG-FITC能很好地被内吞进细胞，这主要是由于氨基封端的PEG的修饰，NGO-PEG-FITC可通过肿瘤细胞的高通透性和滞留效应，浓集于肿瘤部位，因此4T1细胞被标记上FITC的特征绿色荧光；而未用载体NGO-PEG负载的FITC(对照组)，由于是疏水性的，生物相容性不好，不能很好地被对4T1细胞内吞，因此几乎观察不到FITC的荧光。细胞内吞结果表明，载体NGO-PEG具有很好的生物相容性，可以用作纳米药物载体来负载药物。
(2)制备装载紫杉醇的纳米药物复合体：
称取5mg紫杉醇PTX，溶于0.5mL二甲基亚砜(DMSO)，加入2mL上述纳米药物载体溶液(NGO-PEG)(浓度为1mg/mL)，混合均匀，在4℃下搅拌1h，得到第二反应液，将所述第二反应液用截留分子量为30000的超滤离心管在6000rpm转速下离心30min，去除多余的药物和溶剂，得到装载紫杉醇的纳米药物复合体(NGO-PEG-PTX)，其中，所述纳米药物载体为氨基聚二醇单甲醚修饰的氧化石墨烯，所述氨基聚二醇单甲醚通过酰胺键结合在所述氧化石墨烯的表面，所述紫杉醇通过非共价键结合在所述纳米药物载体表面。
本实施例中，NGO-PEG与紫杉醇PTX的质量比为0.4:1；mPEG-NH2与氧化石墨烯的质量比为5:1。
其中，羧基化的氧化石墨烯是采用如下方法制备：
取20mg氧化石墨烯，加10mL水，并于水浴中超声分散2h(超声功率为800W)，得到纳米氧化石墨烯(NGO)的胶体溶液；分别将1.2g氢氧化钠和1.0g氯乙酸加入到NGO的胶体溶液中，超声破碎3h(超声功率为500W)，得到反应混合液，此时NGO表面的羟基和环氧基转化为-COONa；将所述反应混合液稀释至1mg/mL，并转移至透析袋中，用去离子水透析至透析外液的pH值为中性，得到羧基化的氧化石墨烯(NGO-COOH)。
图3为PTX、NGO-PEG、NGO-PEG-PTX的紫外光谱图：从图中可以看出，PTX的吸收峰在230nm，NGO-PEG在200-500nm的范围内都有吸收，其主要吸收峰的峰值在230nm(苯六元环上π电子的吸收)，与PTX的重合；而NGO-PEG-PTX在200-250nm范围内的峰型与单独的PTX一样，吸收峰的峰值也位于230nm，260nm以后NGO-PEG-PTX与NGO-PEG的吸收谱图基本吻合。以上结果可以说明，载体NGO-PEG成功装载上了紫杉醇PTX。
图4为NGO-PEG-PTX水溶液在日光灯下的照片：从图中看出，NGO-PEG-PTX水溶液澄清透彻，可在4℃放置3个月而不发生聚沉现象，说明水溶液中稳定性好，为其能够作为紫杉醇的新剂型而生物应用打下了基础。
图5为纳米药物复合体(NGO-PEG-PTX)的原子力显微镜的表征结果图：从图中可以看出，NGO-PEG-PTX的粒径属于纳米级，并通过电镜照片的初步统计，算出NGO-PEG-PTX的平均粒径为55nm。尺寸大小合适，可顺利地进入细胞组织，避免被巨噬细胞吞噬。
图6为NGO-PEG-PTX的细胞活性实验结果图：采用MTT(噻唑蓝)比色分析法评价测定纳米药物复合体对小鼠乳腺癌细胞(4T1)的抗癌效果，并用药物载体NGO-PEG和单纯的抗癌药物PTX作对照，步骤如下：
将4T1细胞接种于96孔细胞培养板中，细胞培养24h贴壁后，弃去陈旧培养基，用PBS(磷酸盐缓冲液)冲洗2次，分别加入0，10，20μg/mL的NGO-PEG-PTX水溶液、NGO-PEG水溶液、PTX的DMSO溶液，与癌细胞共同培养24h；之后向每孔加入10μL含MTT的磷酸盐缓冲溶液，在37℃孵育0.5h后；弃去每孔的上层清液，每孔加入100μL的二甲基亚砜(DMSO)溶解蓝紫色结晶物，振荡10min，用酶标仪测定各孔在490nm波长的吸光度。
图6的癌细胞的活性结果表明，单纯的纳米药物载体NGO-PEG对细胞几乎无毒性，不能杀死细胞，而纳米药物复合体NGO-PEG-PTX对小鼠乳腺癌细胞具有明显的药物疗效，20g/mL的NGO-PEG-PTX能够抑制75％的癌细胞的活性，且细胞毒性大于单纯的PTX。这证明合成的纳米药物复合体(NGO-PEG-PTX)具有很好的抗癌效果。
实施例2
一种装载紫杉醇的纳米药物复合体的制备方法，包括如下步骤：
(1)制备纳米药物载体溶液：
取氧化石墨烯，进行羧基化处理，得到羧基化的氧化石墨烯(NGO-COOH)的水溶液(浓度为1mg/mL)，取20mL，加盐酸调pH为5.6，将8mg的N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和10mg的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二酰亚胺盐酸盐(EDC)加入到NGO-COOH中，超声分散20min，加入20mg氨基聚二醇单甲醚(mPEG-NH2，分子量为5000)，在室温、搅拌条件下进行酰胺化反应8h，得到第一反应液，将第一反应液转移至超滤离心管(截留分子量为50kDa)，先在6000rpm转速下离心30min，用去离子水洗涤，重复上述过程3次，再在12000rpm转速下离心30min，得到的上清液为氨基聚二醇单甲醚修饰的氧化石墨烯溶液，即纳米药物载体溶液(NGO-PEG)；
(2)制备装载紫杉醇的纳米药物复合体：
称取4mg抗癌药物紫杉醇PTX，溶于0.5mL二甲基亚砜(DMSO)，加入2mL上述纳米药物载体溶液(NGO-PEG)(浓度为1mg/mL)，混合均匀，在室温下搅拌3h，得到第二反应液，将所述第二反应液用截留分子量为50kDa的超滤离心管在6000rpm转速下离心30min，去除多余的药物和溶剂，得到装载紫杉醇的纳米药物复合体(NGO-PEG-PTX)，其中，所述纳米药物载体为氨基聚二醇单甲醚修饰的氧化石墨烯，所述氨基聚二醇单甲醚通过酰胺键结合在所述氧化石墨烯的表面，所述紫杉醇通过非共价键结合在所述纳米药物载体表面。
本实施例2中，NGO-PEG与紫杉醇PTX的质量比为0.5:1；mPEG-NH2与氧化石墨烯的质量比为1:1。
其中，羧基化的氧化石墨烯是采用如下方法制备：
取20mg氧化石墨烯，加10mL水，并于水浴中超声分散1h(超声功率为800W)，得到纳米氧化石墨烯(NGO)的胶体溶液；分别将1.2g氢氧化钠和1.0g氯乙酸加入到NGO的胶体溶液中，超声破碎2h(超声功率为500W)，得到反应混合液，此时NGO表面的羟基和环氧基转化为-COONa；将所述反应混合液稀释至1mg/mL，并转移至透析袋中，用去离子水透析至透析外液的pH值为中性，得到羧基化的氧化石墨烯(NGO-COOH)。
实施例3
一种装载紫杉醇的纳米药物复合体的制备方法，包括如下步骤：
(1)制备纳米药物载体溶液：
取氧化石墨烯，进行羧基化处理，得到羧基化的氧化石墨烯(NGO-COOH)的水溶液(浓度为1mg/mL)，取20mL，加盐酸调pH为5.6，将8mg的N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和10mg的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二酰亚胺盐酸盐(EDC)加入到NGO-COOH中，超声分散15min，加入60mg氨基聚二醇单甲醚(mPEG-NH2，分子量为5000)，在室温、搅拌条件下进行酰胺化反应24h，得到第一反应液，将第一反应液转移至超滤离心管(截留分子量为40kDa)，先在6000rpm转速下离心30min，用去离子水洗涤，重复上述过程3次，再在12000rpm转速下离心30min，得到的上清液为氨基聚二醇单甲醚修饰的氧化石墨烯溶液，即纳米药物载体溶液(NGO-PEG)；
(2)制备装载紫杉醇的纳米药物复合体：
称取2mg抗癌药物紫杉醇PTX，溶于0.5mL二甲基亚砜(DMSO)，加入2mL上述纳米药物载体溶液(NGO-PEG)(浓度为1mg/mL)，混合均匀，在室温下搅拌3h，得到第二反应液，将所述第二反应液用截留分子量为40kDa的超滤离心管在6000rpm转速下离心30min，去除多余的药物和溶剂，得到装载紫杉醇的纳米药物复合体(NGO-PEG-PTX)，其中，所述纳米药物载体为氨基聚二醇单甲醚修饰的氧化石墨烯，所述氨基聚二醇单甲醚通过酰胺键结合在所述氧化石墨烯的表面，所述紫杉醇通过非共价键结合在所述纳米药物载体表面。
本实施例3中，NGO-PEG与紫杉醇PTX的质量比为1:1；mPEG-NH2与氧化石墨烯的质量比为3:1。
其中，羧基化的氧化石墨烯是采用如下方法制备：
取20mg氧化石墨烯，加10mL水，并于水浴中超声分散3h(超声功率为500W)，得到纳米氧化石墨烯(NGO)的胶体溶液；分别将1.2g氢氧化钠和1.0g氯乙酸加入到NGO的胶体溶液中，超声破碎1h(超声功率为800W)，得到反应混合液，此时NGO表面的羟基和环氧基转化为-COONa；将所述反应混合液稀释至1mg/mL，并转移至透析袋中，用去离子水透析至透析外液的pH值为中性，得到羧基化的氧化石墨烯(NGO-COOH)。
本发明提供的装载紫杉醇的纳米药物复合体的制备方法简单可行、成本低，且能够避免使用具有毒副作用的助溶剂聚氧乙烯蓖麻油；所述纳米复合体具有很好的水溶性、稳定性和生物相容性，毒副作用小，安全性好，可通过肿瘤细胞的高通透性和滞留效应，浓集于肿瘤部位，能高效地杀死肿瘤细胞，提高了紫杉醇药物的治疗效果。
此外，氧化石墨烯在近红外区有吸收，因此纳米药物复合体NGO-PEG-PTX不仅可以通过紫杉醇的药物治疗作用杀死癌细胞，还可以结合石墨烯载体的光热效应，作为光热治疗的光热试剂，从而达到同一种材料从多种途径来治疗肿瘤的效果。
本发明中，所述纳米药物载体NGO-PEG还可用于负载其他疏水或亲水性的芳香族抗肿瘤药物。如多烯紫杉醇、白藜芦醇、易瑞沙、喜树碱、长春碱、布洛芬、阿霉素、顺铂、5-氟尿嘧啶等。芳香族抗肿瘤药物分子中含有π键，可与氧化石墨烯表面的芳香环结构通过π-π共轭作用吸附在一起。
另外，所用纳米氧化石墨烯表面的含氧官能团和芳香环结构，还可以通过共价或非共价作用修饰上其他功能基团，比如悬浮剂(如聚乙二醇、明胶、壳聚糖等)、肿瘤靶向分子(如叶酸、甲胎蛋白抗体等)、荧光标记物(如异硫氰酸酯)等，可进一步增加所述纳米复合体的主动靶向性和多功能性。
以上对本发明做了详尽的描述，其目的在于让熟悉此领域技术的人士能够了解本发明的内容并加以实施，并不能以此限制本发明的保护范围，凡根据本发明的精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围内。
Claims (8)
1.一种装载紫杉醇的纳米药物复合体，其特征在于，所述装载紫杉醇的纳米药物复合体包括紫杉醇和纳米药物载体，其中，所述纳米药物载体为氨基聚二醇单甲醚修饰的氧化石墨烯，所述氨基聚二醇单甲醚通过酰胺键结合在所述氧化石墨烯的表面，所述紫杉醇通过非共价键结合在所述纳米药物载体表面；所述氨基聚二醇单甲醚与氧化石墨烯的质量比为1-5:1。
2.如权利要求1所述的纳米药物复合体，其特征在于，所述纳米药物载体与紫杉醇的质量比为0.5-1:1。
3.如权利要求1所述的纳米药物复合体，其特征在于，所述氨基聚二醇单甲醚的重均分子量为5000-10000。
4.一种装载紫杉醇的纳米药物复合体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)制备纳米药物载体溶液：
取氧化石墨烯，进行羧基化处理，得到羧基化的氧化石墨烯的水溶液，向所述水溶液中加入缩合剂、催化剂，并超声分散，再加入氨基聚二醇单甲醚，在室温、搅拌条件下进行酰胺化反应8-24h，得到第一反应液，将第一反应液进行分段离心、洗涤，得到的上清液为氨基聚二醇单甲醚修饰的氧化石墨烯溶液，即纳米药物载体溶液；所述氨基聚二醇单甲醚与氧化石墨烯的质量比为1-5:1；
(2)制备装载紫杉醇的纳米药物复合体：
称取紫杉醇，溶于有机溶剂，并加入上述纳米药物载体溶液，混合均匀，在室温下搅拌1-3h，得到第二反应液，将所述第二反应液离心去除多余的药物和溶剂，得到装载紫杉醇的纳米药物复合体，其包括紫杉醇和纳米药物载体，其中，所述纳米药物载体为氨基聚二醇单甲醚修饰的氧化石墨烯，所述氨基聚二醇单甲醚通过酰胺键结合在所述氧化石墨烯的表面，所述紫杉醇通过非共价键结合到所述纳米药物载体表面。
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述氨基聚二醇单甲醚修饰的氧化石墨烯与紫杉醇的质量比为0.5-1:1。
6.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，超声分散的时间为5-20min。
7.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述分段离心是先在转速为6000rpm下，低速离心30min，再在转速为12000rpm下，高速离心30min。
8.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，有机溶剂为二甲基亚砜。
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