CN104688955A - 一种治疗冠心病心绞痛的中药提取物及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于中药提取物领域，涉及一种治疗冠心病心绞痛的海韭菜提取物。该提取物是采用如下方法制备的：（1）将干燥的海韭菜粉碎，加40%～60%乙醇，于水浴回流提取，提取液回收乙醇，得到海韭菜总提取物浸膏；（2）将得到的海韭菜总提取物浸膏用DM-301型大孔吸附树脂进行柱层析分离，树脂柱径高比为1：7～9，上样体积6BV～8BV，用4BV～6BV水洗脱除杂，以乙酸乙酯：丙酮=5：1的洗脱剂7BV～9BV洗脱，流速为2BV/h～4BV/h，收集洗脱液，洗脱液浓缩，干燥，即得。

Description

一种治疗冠心病心绞痛的中药提取物及其制备方法与应用

技术领域：

本发明属于中药提取物领域，涉及一种治疗冠心病心绞痛的海韭菜提取物。

技术背景：

冠状动脉粥样硬化性心脏病是冠状动脉血管发生动脉粥样硬化病变而引起血管腔狭窄或阻塞，造成心肌缺血、缺氧或坏死而导致的心脏病，常常被称为“冠心病”。但是冠心病的范围可能更广泛，还包括炎症、栓塞等导致管腔狭窄或闭塞。世界卫生组织将冠心病分为5大类：无症状心肌缺血（隐匿性冠心病）、心绞痛、心肌梗死、缺血性心力衰竭（缺血性心脏病）和猝死5种临床类型。临床中常常分为稳定性冠心病和急性冠状动脉综合征。

1987年～1993年我国多省市35～64岁人群调查（中国MONICA）发现，最高发病率为108.7/10万（山东青岛），最低为3.3/10万（安徽滁州），有较显著的地区差异，北方省市普遍高于南方省市。冠心病的患病率城市为1.59%，农村为0.48%，合计为0.77%，呈上升趋势。冠心病在美国和许多发达国家排在死亡原因的第一位。然而，美国从20世纪60年代开始，出现冠心病死亡率下降趋势。得益于60-80年代美国所进行的降低冠心病危险因素的努力，主要是控制危险因素和改进心肌梗死的治疗。2009年中国城市居民冠心病死亡粗率为94.96/10万，农村为71.27/10万，城市高于农村，男性高于女性。

冠心病的危险因素包括可改变的危险因素和不可改变的危险因素。了解并干预危险因素有助于冠心病的防治。可改变的危险因素有：高血压，血脂异常（总胆固醇过高或低密度脂蛋白胆固醇过高、甘油三酯过高、高密度脂蛋白胆固醇过低）、超重/肥胖、高血糖/糖尿病，不良生活方式包括吸烟、不合理膳食（高脂肪、高胆固醇、高热量等）、缺少体力活动、过量饮酒，以及社会心理因素。不可改变的危险因素有：性别、年龄、家族史。此外，与感染有关，如巨细胞病毒、肺炎衣原体、幽门螺杆菌等。

冠心病的发作常常与季节变化、情绪激动、体力活动增加、饱食、大量吸烟和饮酒等有关。

1.症状

（1）典型胸痛 因体力活动、情绪激动等诱发，突感心前区疼痛，多为发作性绞痛或压榨痛，也可为憋闷感。疼痛从胸骨后或心前区开始，向上放射至左肩、臂，甚至小指和无名指，休息或含服硝酸甘油可缓解。胸痛放散的部位也可涉及颈部、下颌、牙齿、腹部等。胸痛也可出现在安静状态下或夜间，由冠脉痉挛所致，也称变异型心绞痛。如胸痛性质发生变化，如新近出现的进行性胸痛，痛阈逐步下降，以至稍事体力活动或情绪激动甚至休息或熟睡时亦可发作。疼痛逐渐加剧、变频，持续时间延长，祛除诱因或含服硝酸甘油不能缓解，此时往往怀疑不稳定心绞痛。

心绞痛的分级：国际上一般采用CCSC加拿大心血管协会分级法。

Ⅰ级：日常活动，如步行，爬梯，无心绞痛发作。

Ⅱ级：日常活动因心绞痛而轻度受限。

Ⅲ级：日常活动因心绞痛发作而明显受限。

Ⅳ级：任何体力活动均可导致心绞痛发作。

发生心肌梗死时胸痛剧烈，持续时间长（常常超过半小时），硝酸甘油不能缓解，并可有恶心、呕吐、出汗、发热，甚至发绀、血压下降、休克、心衰。

（2）需要注意 一部分患者的症状并不典型，仅仅表现为心前区不适、心悸或乏力，或以胃肠道症状为主。某些患者可能没有疼痛，如老年人和糖尿病患者。

（3）猝死 约有1/3的患者首次发作冠心病表现为猝死。

（4）其他 可伴有全身症状，如发热、出汗、惊恐、恶心、呕吐等。合并心力衰竭的患者可出现

2.体征

心绞痛患者未发作时无特殊。患者可出现心音减弱，心包摩擦音。并发室间隔穿孔、乳头肌功能不全者，可于相应部位听到杂音。心律失常时听诊心律不规则。

冠心病的治疗包括：①生活习惯改变：戒烟限酒，低脂低盐饮食，适当体育锻炼，控制体重等；②药物治疗：抗血栓（抗血小板、抗凝），减轻心肌氧耗（β受体阻滞剂），缓解心绞痛（硝酸酯类），调脂稳定斑块（他汀类调脂药）；③血运重建治疗：包括介入治疗（血管内球囊扩张成形术和支架植入术）和外科冠状动脉旁路移植术。药物治疗是所有治疗的基础。介入和外科手术治疗后也要坚持长期的标准药物治疗。对同一病人来说，处于疾病的某一个阶段时可用药物理想地控制，而在另一阶段时单用药物治疗效果往往不佳，需要将药物与介入治疗或外科手术合用。

冠心病的治疗：

1.药物治疗

目的是缓解症状，减少心绞痛的发作及心肌梗死；延缓冠状动脉粥样硬化病变的发展，并减少冠心病死亡。规范药物治疗可以有效地降低冠心病患者的死亡率和再缺血事件的发生，并改善患者的临床症状。而对于部分血管病变严重甚至完全阻塞的病人，在药物治疗的基础上，血管再建治疗可进一步降低患者的死亡率。

（1）硝酸酯类药物 本类药物主要有：硝酸甘油、硝酸异山梨酯（消心痛）、5－单硝酸异山梨酯、长效硝酸甘油制剂（硝酸甘油油膏或橡皮膏贴片）等。硝酸酯类药物是稳定型心绞痛患者的常规用药。心绞痛发作时可以舌下含服硝酸甘油或使用硝酸甘油气雾剂。对于急性心肌梗死及不稳定型心绞痛患者，先静脉给药，病情稳定、症状改善后改为口服或皮肤贴剂，疼痛症状完全消失后可以停药。硝酸酯类药物持续使用可发生耐药性，有效性下降，可间隔8～12小时服药，以减少耐药性。

（2）抗血栓药物 包括抗血小板和抗凝药物。抗血小板药物主要有阿司匹林、氯吡格雷（波立维）、替罗非班等，可以抑制血小板聚集，避免血栓形成而堵塞血管。阿司匹林为首选药物，维持量为每天75～100毫克，所有冠心病患者没有禁忌证应该长期服用。阿司匹林的副作用是对胃肠道的刺激，胃肠道溃疡患者要慎用。冠脉介入治疗术后应坚持每日口服氯吡格雷，通常半年～1年。

抗凝药物包括普通肝素、低分子肝素、璜达肝癸钠、比伐卢定等。通常用于不稳定型心绞痛和心肌梗死的急性期，以及介入治疗术中。

（3）纤溶药物 溶血栓药主要有链激酶、尿激酶、组织型纤溶酶原激活剂等，可溶解冠脉闭塞处已形成的血栓，开通血管，恢复血流，用于急性心肌梗死发作时。

（4）β－阻滞剂 β受体阻滞剂即有康心绞痛作用，又能预防心律失常。在无明显禁忌时，β受体阻滞剂是冠心病的一线用药。常用药物有：美托洛尔、阿替洛尔、比索洛尔和兼有α受体阻滞作用的卡维地洛、阿罗洛尔（阿尔马尔）等，剂量应该以将心率降低到目标范围内。β受体阻滞剂禁忌和慎用的情况有哮喘、慢性气管炎及外周血管疾病等。

（5）钙通道阻断剂 可用于稳定型心绞痛的治疗和冠脉痉挛引起的心绞痛。常用药物有：维拉帕米、硝苯地平控释剂、氨氯地平、地尔硫卓等。不主张使用短效钙通道阻断剂，如硝苯地平普通片。

（6）肾素血管紧张素系统抑制剂 包括血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）、血管紧张素2受体拮抗剂（ARB）以及醛固酮拮抗剂。对于急性心肌梗死或近期发生心肌梗死合并心功能不全的患者，尤其应当使用此类药物。常用ACEI类药物有：依那普利、贝那普利、雷米普利、福辛普利等。如出现明显的干咳副作用，可改用血管紧张素2受体拮抗剂。ARB包括：缬沙坦、替米沙坦、厄贝沙坦、氯沙坦等。用药过程中要注意防止血压偏低。

（7）调脂治疗 调脂治疗适用于所有冠心病患者。冠心病在改变生活习惯基础上给予他汀类药物，他汀类药物主要降低低密度脂蛋白胆固醇，治疗目标为下降到80mg/dl。常用药物有：洛伐他汀、普伐他汀、辛伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀等。最近研究表明，他汀类药物可以降低死亡率及发病率。

2.经皮冠状动脉介入治疗（PCI）

经皮冠状动脉腔内成形术（PTCA）应用特制的带气囊导管，经外周动脉（股动脉或桡动脉）送到冠脉狭窄处，充盈气囊可扩张狭窄的管腔，改善血流，并在已扩开的狭窄处放置支架，预防再狭窄。还可结合血栓抽吸术、旋磨术。适用于药物控制不良的稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛和心肌梗死患者。心肌梗死急性期首选急诊介入治疗，时间非常重要，越早越好。

3.冠状动脉旁路移植术（简称冠脉搭桥术，CABG）

冠状动脉旁路移植术通过恢复心肌血流的灌注，缓解胸痛和局部缺血、改善患者的生活质量，并可以延长患者的生命。适用于严重冠状动脉病变的患者，不能接受介入治疗或治疗后复发的病人，以及心肌梗死后心绞痛，或出现室壁瘤、二尖瓣关闭不全、室间隔穿孔等并发症时，在治疗并发症的同时，应该行冠状动脉搭桥术。手术的选择应该由心内、心外科医生与患者共同决策。

本发明提供了一种治疗冠心病心绞痛的海韭菜提取物。本发明所述的海韭菜为水麦冬科水麦冬属植物圆果水麦冬Triglochin maritimum L.的全草。

发明内容：

本发明的目的是提供一种海韭菜提取物。

本发明的另一目的是提供该提取物的制备方法。

本发明的还提供该提取物在制备治疗冠心病心绞痛以及风湿性关节炎症药物中的应用。

本发明的目的是通过以下方式实现的：

一种治疗冠心病心绞痛的海韭菜提取物，该海韭菜提取物是采用如下方法制备的：

（1）将干燥的海韭菜粉碎，加15～25倍量40%～60%乙醇，于60℃～70℃水浴回流提取2次～4次，每次70min～80min，合并提取液，回收乙醇，得到海韭菜总提取物浸膏；

（2）将得到的海韭菜总提取物浸膏用DM-301型大孔吸附树脂进行柱层析分离，树脂柱径高比为1：7～9，上样体积6BV～8BV，用4BV～6BV水洗脱除杂，以乙酸乙酯：丙酮=5：1的洗脱剂7BV～9BV洗脱，流速为2BV/h～4BV/h，收集洗脱液，洗脱液浓缩，干燥，即得。

所述海韭菜提取物优选是采用如下方法制备的：

（1）将干燥的海韭菜粉碎，加15倍量60%乙醇，于60℃水浴回流提取4次，每次70min，合并提取液，回收乙醇，得到海韭菜总提取物浸膏；

（2）将得到的海韭菜总提取物浸膏用DM-301型大孔吸附树脂进行柱层析分离，树脂柱径高比为1：7，上样体积8BV，用4BV水洗脱除杂，以乙酸乙酯：丙酮=5：1的洗脱剂9BV洗脱，流速为2BV/h，收集洗脱液，洗脱液浓缩，干燥，即得。

所述海韭菜提取物还可以优选采用如下方法制备：

（1）将干燥的海韭菜粉碎，加25倍量40%乙醇，于70℃水浴回流提取2次，每次80min，合并提取液，回收乙醇，得到海韭菜总提取物浸膏；

（2）将得到的海韭菜总提取物浸膏用DM-301型大孔吸附树脂进行柱层析分离，树脂柱径高比为1：9，上样体积6BV，用6BV水洗脱除杂，以乙酸乙酯：丙酮=5：1的洗脱剂7BV洗脱，流速为4BV/h，收集洗脱液，洗脱液浓缩，干燥，即得。

所述海韭菜提取物还可以优选采用如下方法制备：

（1）将干燥的海韭菜粉碎，加20倍量50%乙醇，于65℃水浴回流提取3次，每次75min，合并提取液，回收乙醇，得到海韭菜总提取物浸膏；

（2）将得到的海韭菜总提取物浸膏用DM-301型大孔吸附树脂进行柱层析分离，树脂柱径高比为1：8，上样体积7BV，用5BV水洗脱除杂，以乙酸乙酯：丙酮=5：1的洗脱剂8BV洗脱，流速为3BV/h，收集洗脱液，洗脱液浓缩，干燥，即得。

所述的海韭菜提取物，其特征在于，该海韭菜提取物采用药学中常规的制药方法制备成口服制剂。

所述口服制剂优选制备为片剂、丸剂、硬胶囊剂、颗粒剂、口服液。

所述海韭菜提取物可采用如下方法制备为硬胶囊剂：取海韭菜提取物，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，装入硬胶囊，即得。

所述海韭菜提取物可采用如下方法制备为片剂：取海韭菜提取物，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，制成颗粒，干燥，压制成片，即得。

本发明所述的海韭菜提取物可用于在制备治疗冠心病心绞痛药物或保健品。

本发明所述的海韭菜提取物还可用于在制备治疗风湿性关节炎症药物或保健品。

本发明所属的乙醇浓度均为体积浓度。

为了更好地理解本发明，发明人提供以下研究资料，说明本发明的技术效果。

实验一：海韭菜提取物治疗冠心病的实验研究

1.1材料

SPF级雄性SD大鼠72只（180±10）g，购于烟台大学实验动物中心；海韭菜提取物小剂量（生药浓度：3.57g/mL），海韭菜提取物中剂量（生药浓度：7.14g/mL），海韭菜提取物大剂量（生药浓度：14.28g/mL）：参照本发明实施例1制备；舒降之为杭州默沙东制药有限公司产品。高脂饲料委托中国科学院上海斯莱克实验动物有限责任公司加工。单核细胞趋化蛋白-1多克隆抗体，P-选择素多克隆抗体，基质金属蛋白酶-9多克隆抗体，基质金属蛋白酶抑制因子-1购自上海天鸿生物科技有限公司。

1.2方法

将72只雄性SD大鼠随机分为6组，每组12只，分别为空白组，模型组，海韭菜提取物小剂量组（治疗组1），海韭菜提取物中剂量组（治疗组2），海韭菜提取物大剂量组（治疗组3），舒降之组（对照组），组间暴露无差异。大鼠动脉粥样硬化模型制备方法为150g维生素D3（VitD3，每克含VitD310万IU）溶解于375mL蒸馏水中，配制成0.4g/mL，即4万IU/mL的溶液。高脂饲料配方为：82.3%大鼠标准饲料、2%胆固醇、0.5%胆酸钠、10%猪油、0.2%丙基硫氧嘧啶、5%白砂糖。除空白组外，其他各组按70万IU/kg的总剂量灌胃给予VitD3，分3天给完，之后每天喂高脂饲料15g，喂养57天。空白组和模型组均灌服双蒸水5mL/（kg?d）；治疗组1灌服海韭菜提取物小剂量15.03g/（kg?d）；治疗组2灌服海韭菜提取物中剂量30.06g/（kg?d）；治疗组3灌服海韭菜提取物大剂量61.02g/（kg?d）；舒降之组灌服舒降之1.7mg/（kg?d），以上各药均用双蒸水配制成溶液按5mL/（kg?d）剂量灌服。VitD3灌胃3天结束后，第4天开始治疗，疗程为57天。用药57天后，以100mg/kg氯胺酮腹腔注射麻醉大鼠，打开腹腔，腹主动脉取血后即刻分离胸主动脉，每组动物随机取6只。胸主动脉甲醛固定，石蜡包埋切片，常规行HE染色，光学显微镜下观察主动脉的形态（包括斑块结构、内膜突起变形、泡沫细胞、钙化），以-、+、++、+++，分别表示无病变、轻度、中度、重度。利用IMS细胞图象分析系统检测内膜厚度及泡沫细胞面积百分比。免疫组化检测胸主动脉中MMP-9蛋白、MMP-9/TMP-1蛋白比值的表达。采用石蜡包埋常规切片，SP法，MMP-9mAb以1:50稀释；TMP-1mAb以1:50稀释；稀释DAB显色，苏木素复染。显微镜下观察，阴性呈紫蓝色，阳性呈棕黄色。在高倍镜下（×400倍）观察每组切片主动脉，随机选取3个视野，测其阳性染色在整个视野（全视场定为351000）中所占面积百分比，取其平均值表示每张切片的阳性面积比，统计每组免疫组化阳性面积百分比。

1.3结果

（1）主动脉形态学变化：各组动物胸主动脉经HE染色在显微镜观察发现：模型组可见内膜细胞增生及内皮下出现淡染的空泡细胞等AS早期病变，有些部位可见中膜平滑肌细胞增生明显、细胞排列紊乱或隆起呈斑块状结构，有些部位中膜有明显的钙化形成，钙化区周围出现泡沫样细胞。各治疗组、对照组与模型组相比有不同程度改善，见表1。

表1不同组别大鼠胸主动脉的病理分析

组别	斑块结构	内膜突起变形	泡沫细胞	钙化
					空白组	0	0-+	0	0
模型组	+-++	+-+++	++-+++	+-+++
					对照组	0-++	+-++	+-++	0-++
治疗组1	0-+	+	0-+++	0-+++
					治疗组2	+	+-++	+-++	0-+
治疗组3	0-+	+	+-+++	0-++

（2）主动脉内膜厚度：用图像分析仪检测的胸主动脉壁内膜厚度，模型组、对照组、治疗组内膜厚度都有不同程度增厚，与空白组相比均有显著性差异（P<0.01）。各治疗组、对照组内膜厚度较模型组相比，均有不同程度变薄，差异也有统计学意义，治疗组1（P<0.05），其余治疗组、对照组（P<0.01）。对照组与治疗组相比，内膜厚度改善无统计学意义（P>0.05）。见表2、图1。

表2不同组别大鼠胸主动脉内膜厚度（40×10）

组别	动物数（只）	内膜厚度（μm）
			空白组	6	11.84±3.68
模型组	6	48.41±14.61**
			对照组	6	24.03±8.49**△△
治疗组1	6	30.69±18.17**△#
			治疗组2	6	17.62±5.62**△△#
治疗组3	6	22.86±8.82**△△#

注：组间比较：各组与空白组比较，**P<0.01；模型组与治疗组、对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01；对照组与治疗组比较，#P>0.05。

（3）主动脉泡沫细胞面积百分比：用图像分析仪检测的胸主动脉泡沫细胞面积百分比，各组与空白组相比均有明显增多，差异显著（P<0.01）。治疗组、对照组与模型组相比，泡沫细胞面积百分比均有不同程度减少，有统计学意义（P<0.05）。各治疗组与对照组相比，仅治疗组2泡沫细胞面积百分比无统计学意义（P>0.05）。见表3。

表3不同组别大鼠胸主动脉内膜泡沫细胞面积和泡沫细胞百分比（40×10）

组别	动物数（只）	泡沫细胞面积（Pixel）	泡沫细胞百分比（%）
				空白组	6	12750.22±1812.5	13.64±0.54
模型组	6	125909.78±20057.47	35.87±5.71**
				对照组	6	51569.22±15035.37	14.69±4.28**△△
治疗组1	6	77425.17±20511.47	22.05±5.84**△△☆
				治疗组2	6	51842.94±12841.93	14.77±3.66**△△#
治疗组3	6	102047.70±22067.76	29.07±6.29**△☆

注：组间比较：各组与空白组比较，**P<0.01；模型组与治疗组、对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01；对照组与治疗组比较，☆P<0.01，#P>0.05。

（4）主动脉MMP-9蛋白表达：空白组与模型组、治疗组、对照组相比MMP-9阳性面积百分比显著下降（P<0.01）；模型组与治疗组、对照组相比，MMP-9的阳性面积百分比明显升高，均有统计学意义（P<0.01）。对照组与各治疗组相比MMP-9的表达无统计学意义（P>0.05）。见表4。

表4不同组别大鼠胸主动脉内膜MMP-9表达

组别	动物数（只）	MMP-9（Pixel）
			空白组	6	9079.39±960.55
模型组	6	53889.28±5161.19**
			对照组	6	28166.94±14776.99**△△
治疗组1	6	22446.06±2539.73**△△#
			治疗组2	6	18624.78±2075.06**△△#
治疗组3	6	18422.61±3158.40**△△#

注：组间比较：各组与空白组比较，**P<0.01，☆P>0.05；模型组与治疗组、对照组比较，△△P<0.01；对照组与治疗组比较，#P>0.05。

（5）MMP-9/TMP-1蛋白表达比值的影响：空白组MMP-9/TMP-1蛋白表达比值水平低于模型组、对照组（P<0.01）。空白组MMP-9/TMP-1蛋白表达比值水平高于治疗组2。空白组MMP-9/TMP-1蛋白表达比值水平与治疗组1、治疗组3间比较无显著统计学差异（P>0.05）。模型组MMP-9/TMP-1蛋白表达比值水平均高于治疗组、对照组（P<0.01）。对照组MMP-9/TMP-1蛋白表达比值水平均高于所有治疗组，见表5。

表5不同组别大鼠MMP-9/TMP-1比值的变化

组别	动物数（只）	MMP9/TMP1
			空白组	18	0.62±0.12
模型组	18	2.82±0.59**△△
			对照组	18	1.55±0.88**#
治疗组1	18	0.63±0.13☆
			治疗组2	18	0.49±0.79*
治疗组3	18	0.68±0.22☆

注：组间比较：各组与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01，☆P>0.05；模型组与治疗组、对照组比较，△△P<0.01；对照组与治疗组比较，#P<0.05。

3结论

海韭菜提取物具有益气养阴、活血通阳之功效，可改善冠心病心绞痛患者临床症状、心肌缺血。动物实验也表明：具有动脉粥样硬化模型的大鼠存在血管内膜细胞增生及内皮下出现感染的空泡细胞等AS早期病变，出现以MMP-9升高为主的MMP-9/TMP-1失衡状态。海韭菜提取物是通过降低MMP-9的蛋白表达，调节MMP-9/TMP-1失衡状态，改善血管内膜细胞增生，减轻动脉粥样硬化病变程度。

实验二：海韭菜提取物治疗冠心病心绞痛的临床疗效

 1 对象与方法

1.1 研究对象

选择2011年8月至2013年11月收治的冠心病心绞痛患者28 例，入选标准：符合冠心病心绞痛的诊断标准；年龄在38～70岁；自愿配合治疗；无严重并发症与精神疾病。其中男18例，女10例；病程最短1年，最长8年，平均（4.26±0.45）年；年龄最小42 岁，最大70岁，平均年龄（55.21±2.64）岁。根据治疗方法的不同分为治疗组与对照组各14例，两组的性别、年龄与病程对比无明显差异（P>0.05）。

1.2 治疗方法

两组都给予介入治疗，术前口服氯吡格雷（杭州赛诺圣德拉堡民生制药有限公司）75 mg/d，3～5 d；术前3d口服阿司匹林（拜耳医药保健有限公司）300 mg/d。术中经动脉鞘管注入肝素6000U～8 000U。然后行球囊预扩张，置入支架，放置雷帕霉素Firebird 支架（上海微创公司架），完全覆盖相关血管病变。在此基础上治疗组加用海韭菜提取物一次0.5g，一日2次，持续 14d。

    1.3 观察指标

①疗效标准：显效：治疗后症状、体征明显改善，心绞痛发作次数减少80%以上。有效：治疗后症状、体征明显改善，心绞痛发作次数减少50%以上。无效：治疗后症状、体征与心绞痛状况都无明显变化。

②所有患者在治疗后进行超声心动图检查，采用 Simpson双面法测量左心室射血分数（LVEF），应用心尖四腔心切面脉冲多普勒测量二尖瓣血流频谱舒张早期速度（E）和舒张晚期速度（A）。

1.4 统计方法

使用 SPSS 16.0 软件进行分析，疗效对比采用χ²分析，LVEF、E值与 A 值数据采用（x±s）表示与 t 检验，P<0.05 代表差异有统计学意义。

2 结果

2.1 总体疗效

所有患者都完成治疗，治疗组与对照组的有效率分别为92.9%和 78.6%，组间对比差异有统计学意义（P<0.05）。 见表6。

表6 两组疗效对比（n）

组别	例数	显效	有效	无效	总有效率（%）
						治疗组	14	10	3	1	92.9
对照组	14	7	4	3	78.6
						P					<0.05

2.2 超声心动图情况

所有患者治疗后都进行超声心动图观察，结果显示治疗组的LVEF、E 值与 A 值明显高于对照组，对比差异有统计学意义（P<0.05）。见表7。

表7 两组超声心动图情况对比

组别	LVEF	E 值（cm/s）	A 值（cm/s）
				治疗组（n=14）	66.37±2.37	0.85±0.15	0.71±0.02
对照组（n=14）	62.11±3.34	0.69±0.13	0.61±0.08
				P	<0.05	<0.05	<0.05

3 结论

海韭菜提取物可明显改善胸闷、心悸、气短症状，针对各个致病因素进行全方位治疗。能对缺血缺氧心肌具有明显的保护作用、抗心律失常、对血压及血管的影响。本研究所有患者都完成治疗，治疗组与对照组的有效率分别为92.9%和 78.6%，组间对比差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后治疗组的 LVEF、E 值与 A 值明显高于对照组，对比差异有统计学意义（P<0.05）。可见，海韭菜提取物能够治疗冠心病心绞痛。

具体实施方式：

实施例1：

（1）将干燥的海韭菜粉碎20kg，加20倍量50%乙醇，于65℃水浴回流提取3次，每次75min，合并提取液，回收乙醇，得到海韭菜总提取物浸膏；

（2）将得到的海韭菜总提取物浸膏用DM-301型大孔吸附树脂进行柱层析分离，树脂柱径高比为1：8，上样体积7BV，用5BV水洗脱除杂，以乙酸乙酯：丙酮=5：1的洗脱剂8BV洗脱，流速为3BV/h，收集洗脱液，洗脱液浓缩，干燥，得海韭菜提取物11.2g。

实施例2：

（1）将干燥的海韭菜粉碎20kg，加15倍量60%乙醇，于60℃水浴回流提取4次，每次70min，合并提取液，回收乙醇，得到海韭菜总提取物浸膏；

（2）将得到的海韭菜总提取物浸膏用DM-301型大孔吸附树脂进行柱层析分离，树脂柱径高比为1：7，上样体积8BV，用4BV水洗脱除杂，以乙酸乙酯：丙酮=5：1的洗脱剂9BV洗脱，流速为2BV/h，收集洗脱液，洗脱液浓缩，干燥，得海韭菜提取物11.5g。

实施例3：

（1）将干燥的海韭菜粉碎20kg，加25倍量40%乙醇和可溶性淀粉5g，于70℃水浴回流提取2次，每次80min，合并提取液，回收乙醇，得到海韭菜总提取物浸膏；

（2）将得到的海韭菜总提取物浸膏用DM-301型大孔吸附树脂进行柱层析分离，树脂柱径高比为1：9，上样体积6BV，用6BV水洗脱除杂，以乙酸乙酯：丙酮=5：1的洗脱剂7BV洗脱，流速为4BV/h，收集洗脱液，洗脱液浓缩，干燥，得海韭菜提取物11.3g。

实施例4：片剂

    取海韭菜提取物，加入适量淀粉，混匀，制成颗粒，干燥，压制成片，包衣，即得。

实施例5：片剂

取海韭菜提取物，加入适量糊精，混匀，压片，即得。

实施例6：硬胶囊剂

取海韭菜提取物，加入适量糊精，混匀，制成颗粒，装入胶囊，制成硬胶囊剂，即得。

Claims (10)

1.一种治疗冠心病心绞痛的海韭菜提取物，其特征在于，该海韭菜提取物是采用如下方法制备的：

（1）将干燥的海韭菜粉碎，加15～25倍量40%～60%乙醇，于60℃～70℃水浴回流提取2次～4次，每次70min～80min，合并提取液，回收乙醇，得到海韭菜总提取物浸膏；

（2）将得到的海韭菜总提取物浸膏用DM-301型大孔吸附树脂进行柱层析分离，树脂柱径高比为1：7～9，上样体积6BV～8BV，用4BV～6BV水洗脱除杂，以乙酸乙酯：丙酮=5：1的洗脱剂7BV～9BV洗脱，流速为2BV/h～4BV/h，收集洗脱液，洗脱液浓缩，干燥，即得。

2.如权利要求1所述的海韭菜提取物，其特征在于，该海韭菜提取物是采用如下方法制备的：

（1）将干燥的海韭菜粉碎，加15倍量60%乙醇，于60℃水浴回流提取4次，每次70min，合并提取液，回收乙醇，得到海韭菜总提取物浸膏；

（2）将得到的海韭菜总提取物浸膏用DM-301型大孔吸附树脂进行柱层析分离，树脂柱径高比为1：7，上样体积8BV，用4BV水洗脱除杂，以乙酸乙酯：丙酮=5：1的洗脱剂9BV洗脱，流速为2BV/h，收集洗脱液，洗脱液浓缩，干燥，即得。

3.如权利要求1所述的海韭菜提取物，其特征在于，该海韭菜提取物是采用如下方法制备的：

（1）将干燥的海韭菜粉碎，加25倍量40%乙醇，于70℃水浴回流提取2次，每次80min，合并提取液，回收乙醇，得到海韭菜总提取物浸膏；

（2）将得到的海韭菜总提取物浸膏用DM-301型大孔吸附树脂进行柱层析分离，树脂柱径高比为1：9，上样体积6BV，用6BV水洗脱除杂，以乙酸乙酯：丙酮=5：1的洗脱剂7BV洗脱，流速为4BV/h，收集洗脱液，洗脱液浓缩，干燥，即得。

4.如权利要求1所述的海韭菜提取物，其特征在于，该海韭菜提取物是采用如下方法制备的：

（1）将干燥的海韭菜粉碎，加20倍量50%乙醇，于65℃水浴回流提取3次，每次75min，合并提取液，回收乙醇，得到海韭菜总提取物浸膏；

（2）将得到的海韭菜总提取物浸膏用DM-301型大孔吸附树脂进行柱层析分离，树脂柱径高比为1：8，上样体积7BV，用5BV水洗脱除杂，以乙酸乙酯：丙酮=5：1的洗脱剂8BV洗脱，流速为3BV/h，收集洗脱液，洗脱液浓缩，干燥，即得。

5.如权利要求1～4任意一项所述的海韭菜提取物，其特征在于，该海韭菜提取物采用药学中常规的制药方法制备成口服制剂。

6.如权利要求5所述的海韭菜提取物，其特征在于，该海韭菜提取物采用药学中常规的制药方法制备成片剂、丸剂、硬胶囊剂、颗粒剂、口服液。

7.如权利要求6所述的海韭菜提取物，其特征在于，该海韭菜提取物采用如下方法制备：取海韭菜提取物，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，装入硬胶囊，即得。

8.如权利要求6所述的海韭菜提取物，其特征在于，该海韭菜提取物采用如下方法制备：取海韭菜提取物，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，制成颗粒，干燥，压制成片，即得。

9.如权利要求1～4任意一项所述的海韭菜提取物，其特征在于，该海韭菜提取物在制备治疗冠心病心绞痛药物或保健品中的应用。

10.如权利要求1～4任意一项所述的海韭菜提取物，其特征在于，该海韭菜提取物在制备治疗风湿性关节炎症药物或保健品中的应用。