CN104688693A - 注射用氢溴酸高乌甲素粉针剂药物组合物和制法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种注射用氢溴酸高乌甲素粉针剂药物组合物和制法。具体地说，本发明第一方面公开了一种注射用氢溴酸高乌甲素粉针剂药物组合物，其中包含氢溴酸高乌甲素、甘露醇、和任选的酸碱调节剂。该粉针剂中包含的物料以每4重量份的氢溴酸高乌甲素计，甘露醇的量为5-100重量份，并且该冻干粉针剂用注射用水溶解成含氢溴酸高乌甲素4mg/ml浓度的溶液时，该溶液的pH值在5.5～6.5范围内。本发明注射用氢溴酸高乌甲素粉针剂药物组合物可用于疼痛特别是用于中度以上疼痛的药物，并且具有良好的药学性质。

Description

注射用氢溴酸高乌甲素粉针剂药物组合物和制法

技术领域

本发明属于医药制剂技术领域，涉及一种可用于疼痛特别是用于中度以上疼痛的药物，特别是涉及一种注射用氢溴酸高乌甲素粉针剂药物组合物，以及它们的制备方法。该注射用氢溴酸高乌甲素粉针剂药物组合物具有良好的药学性质。

背景技术

高乌甲素(Lappaconite Hydrobromide，C32H44N2O8·HBr·H2O)是从毛茛科植物高乌头(Aconitum sinomonatum)的根中提取得到的二萜类生物碱有效成分拉巴乌头碱，临床上常用其氢溴酸盐，即氢溴酸高乌甲素，英文名Lappaconite Hydrobromide，化学名：(1a,14a,16b)-20-乙基-1,14,16-三甲氧乌头烷-4,8,9-三醇4-[2-(乙酰氨基)苯甲酸酯氢溴酸盐一水化合物，分子式C32H44N2O8·HBr·H2O，分子量683.64，化学结构式为

HBr，H2O

氢溴酸高乌甲素首次于1982年经我国药政部门批准，成为国内首创的非成瘾性镇痛药，且是卫生部《癌症病人三阶梯止痛疗法的指导原则》中推荐的中度止痛药。主要是通过阻滞电压依从性的钠离子通道，抑制神经传导，抑制突触前膜对去甲肾上腺素的重摄取，使突触间的去甲肾上腺素增加，从而抑制传入纤维P物质的释放，而发挥镇痛效应。其镇痛强度是氨基比林的7倍，与度冷丁相比镇痛效果相当，但维持时间长，是优良的非成瘾性镇痛药，无致畸胎致突变作用，也不会发生蓄积中毒。氢溴酸高乌甲素在临床上用于胃肠溃疡、胃炎、肝炎、胆囊炎、风湿病、坐骨神经痛、牙痛、术后疼痛、癌痛等症。其镇痛效果与哌替啶相当，虽然起效时间较慢，但药效维持时间较长。此外，氢溴酸高乌甲素还具有局部麻醉、降温、解热和抗炎作用。

目前临床上有片剂、贴剂、小容量注射液、大容量注射液、冻干粉针剂等剂型使用。现有技术亦有诸多关于氢溴酸高乌甲素相关技术的研究报道。

例如，CN1074117A(92100233.5，金山)公开了属于膜控释型经皮给药制剂高乌甲素贴片的配方与制备工艺。该制剂包括有保护层、压敏胶层、控释层、贮药库胶层及背衬层。当投药后能在短时间内达到有效治疗的血药浓度，随后由于控释(膜)层的作用药物以恒速进入体内产生类似于静脉滴注的稳态血药浓度。投药12小时内本贴片制剂与高乌甲素注射剂有同等效果。对其它顽固性疼痛(风湿痛、头痛)效果更为显著。据信该制剂稳定性可达2年之久。

CN101062034A(200710068782.2，浙大)公开了一种氢溴酸高乌甲素透皮凝胶剂，其原料组成为，氢溴酸高乌甲素0.5-2.5％，透皮吸收促进剂0～3％，凝胶基质材料1-3％，乙醇8～40％，水为余量。该发明还公开了上述凝胶剂的制备方法:取凝胶基质材料，加水使之溶胀，氢溴酸高乌甲素溶解在乙醇中，然后把溶液加入到基质材料中，均匀混合后，加透皮吸收促进剂，然后用水定量，不断搅拌，使之成均匀透明状凝胶。据信该发明提供的氢溴酸高乌甲素透皮凝胶剂具有良好皮肤渗透性，可用于镇痛经皮给药治疗。

CN101574331A(200910118928.9，奇正)公开了一种高乌甲素透皮贴片及其制备方法，该贴片包括背衬层、药库层和保护层三部分，其中药库层的原料组成为:高乌甲素和压敏胶，或者再加入适量的透皮促进剂最终制成高乌甲素贴片。据信该发明高乌甲素贴片使用方便、生物利用度高、作用持久，避免了肝脏的“首过效应”和胃肠道的破坏，降低了药物的毒性和副作用，提高了药物的生物利用度和治疗的安全性，在抗炎、镇痛方面效果显著。

CN101062019A(200710068781.8，浙大)提供了一种氢溴酸高乌甲素透皮贴片，其药库层组成为:氢溴酸高乌甲素4.7-5.3％，透皮吸收促进剂0-9.6％，压敏胶丙烯酸树脂85-95％。其制备方法为:将氢溴酸高乌甲素加入乙醇中，超声溶解后，再加入压敏胶及促进剂，超声溶解混匀成溶液，然后采用流涎工艺，把溶液涂布在背衬层上，至溶剂自然挥干后，放入80℃烘箱中烘干固化，冷却后盖上保护层即得。据信该发明提供的氢溴酸高乌甲素透皮贴片用药方便，镇痛效果好，透皮速率最高可达0.34ΜG/CM²·H。

CN101961318A(201010284473.0，南大)公开了一种高乌甲素注射用缓释微球，其特征在于由微球重量的9.1％～50.0％高乌甲素和微球重量的90.9％～50.0％的生物可降解高分子材料组成，微球直径为1～250μm。据信该发明的优点是:(1)药物包封率高、载药量大，微球粒度分布均一；(2)药物缓释周期较长，释放平稳，突释效应较小，将该发明所制备的微球粉末分散在生理盐水中，供肌肉或皮下注射，可减少给药次数，方便患者，提高患者依从性，提高镇痛药物高乌甲素的疗效；(3)高乌甲素包裹在微球中可提高其光稳定性，载药微球以固态粉末保存可防止高乌甲素水解；(4)制备方法简单，制备工艺稳定可行，容易实现工业化生产。

CN102885812A(201210390054.4，南大)提供了一种氢溴酸高乌甲素缓释片及其制备方法，其重量组成为：氢溴酸高乌甲素10％～15％、羟丙甲纤维素20％～50％、稀释剂40％～70％、硬脂酸镁0.5％～2％。其制备方法为：将氢溴酸高乌甲素与羟丙甲纤维素和稀释剂混合，加入适量90％乙醇溶液制软材，20目筛制粒，60℃干燥2小时，18目筛整粒，加入硬脂酸镁混匀后压片即得氢溴酸高乌甲素缓释片。据信该发明生产工艺简单，提供的氢溴酸高乌甲素缓释片具有12小时持续释放药物，从而减少患者口服给药的次数，提高患者服药依从性等优点。

CN103315979A(201210086715.4，白云山)公开了一种高乌甲素缓释制剂组合物及其制备方法，其含有高乌甲素、丙烯酸树脂II号、选自羟丙甲纤维素、乙基纤维素或者甲基纤维素的缓释基质、粘合剂、填充剂，其特征在于高乌甲素∶丙烯酸树脂II号∶缓释基质重量比为1∶0.01-0.1∶0.05-2。据信该发明提供的高乌甲素缓释制剂可以延缓主药的释放速度，减少药品的服用次数，提高病人的顺应性。据信该发明提供的高乌甲素缓释制剂组合物制备工艺质量可控性和稳定性好。

CN 1686120A(200510064499.3，正大)涉及一种具有镇痛、局部麻醉、降温、解热和消肿作用的药物组合物，特别涉及以氢溴酸高乌甲素为原料制备而成的一种药物组合物口服制剂。该发明的目的在于补充现有用于治疗中度以上疼痛的口服药物制剂之不足，提供一种生物利用度高，并具有快速释药，快速显效，价格低廉，且在生产中无污染的药物组合物口服制剂氢溴酸高乌甲素滴丸。据信该发明所涉及的氢溴酸高乌甲素滴丸，以氢溴酸高乌甲素为原料，与作为基质的可药用载体一起制备而成。

CN1850077A(200610012451.2，关长安)涉及一种氢溴酸高乌甲素制剂，具体为一种氢溴酸高乌甲素分散片及其制备方法。是由下列原料组成，氢溴酸高乌甲素、微晶纤维素、交联聚维酮、微粉硅胶。将氢溴酸高乌甲素粉碎；微晶纤维素与交联聚维酮分别过筛，再将氢溴酸高乌甲素和微晶纤维素与1/2的重量的交联聚维酮混合均匀，过筛，再加入一定量的乙醇充分混匀制粒，干燥，再加入剩余的交联聚维酮及微粉硅胶混合均匀、压片即可。据信该发明所述的氢溴酸高乌甲素分散片相对与现有的氢溴酸高乌甲素片在被患者服用后，崩解快，溶出度高，所以身体能迅速吸收，起效快。

CN102525896A(201210001734.2，人福)公开了一种氢溴酸高乌甲素的药物组合物，其是氢溴酸高乌甲素的水溶液，并且其pH值为3.5～6.0。据信该发明的药物组合物可用于治疗急、慢性咽炎。

CN102178658A(201110112642.7，三军大)公开了一种氢溴酸高乌甲素口腔崩解片，按重量份计由以下组分组成：氢溴酸高乌甲素5～10份、崩解剂3～10份、填充剂30～100份、矫味剂2～10份、粘合剂0～60份、润滑剂0～3份、胃溶型丙烯酸树脂0～50份；处方中不含有胃溶型丙烯酸树脂的氢溴酸高乌甲素口腔崩解片可采用湿法制粒压片法、干法制粒压片法或直接压片法制备；处方中含有胃溶型丙烯酸树脂的氢溴酸高乌甲素口腔崩解片是将氢溴酸高乌甲素先用胃溶型丙烯酸树脂制成掩味颗粒，再采用湿法制粒压片法、干法制粒压片法或直接压片法制备口腔崩解片；据信该发明的氢溴酸高乌甲素口腔崩解片既具有良好的口感又不影响药物的释放，而且制备工艺简单、收率高、成本低、适合工业化生产。

CN101658495A(200910192553.0，广药)提供了一种氢溴酸高乌甲素固体脂质纳米粒及其制备方法。所述氢溴酸高乌甲素固体脂质纳米粒由以下重量百分比的组分制成:氢溴酸高乌甲素0.1～1％，脂质材料1～8％，磷脂0～5％，乳化剂0.5～10％，余量为水。所述制备方法的步骤为:将乳化剂和水充分混匀制成水相；将氢溴酸高乌甲素、脂质材料和磷脂充分混合熔融制成油相；水相和油相分别加热至65～85℃，在搅拌条件下将水相加到油相中，制成初乳；将初乳高压乳匀得到混悬液；将混悬液置于0～4℃条件下，冷却固化，制得氢溴酸高乌甲素固体脂质纳米粒。据信该发明采用高压乳匀法制备氢溴酸高乌甲素固体脂质纳米粒，无需使用有机溶剂，适合工业化大生产。

CN1600309A(200410059672.6，八达)提供了一种氢溴酸高乌甲素冻干粉针，还提供了氢溴酸高乌甲素冻干粉针的制备方法。该发明提供的冻干粉针含有氢溴酸高乌甲素，还可以含有药学上可接受的载体，据信该发明提供的冻干粉针稳定性好，复溶快。

作为一种主要用于疼痛特别是用于中度以上疼痛的药物，注射给药是非常优选的。而冷冻干燥粉针剂相对于溶液型的注射液有显著的稳定性优势。尽管如此，冷冻干燥粉针剂仍然存在技术困难，例如存在稳定性方面的问题。

因此，本领域仍然期待有新的制备冷冻干燥粉针剂的方法，特别是制备注射用氢溴酸高乌甲素粉针剂药物组合物的新方法，并且期待该注射用氢溴酸高乌甲素粉针剂药物组合物具有优异的药学性质，例如具有优异的稳定性。

发明内容

本发明的目的是提供一种制备冷冻干燥粉针剂的方法，特别是制备注射用氢溴酸高乌甲素粉针剂药物组合物的新方法，并且期待该注射用氢溴酸高乌甲素粉针剂药物组合物具有优异的药学性质，例如具有优异的稳定性。本发明人令人惊奇地发现，具有本发明所述特征的注射用氢溴酸高乌甲素粉针剂药物组合物，其具有优异的药学性质特别是具有优异的化学稳定性。本发明基于此发现而得以完成。

因此，本发明第一方面提供了一种冻干粉针剂，其中包含氢溴酸高乌甲素。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中包含氢溴酸高乌甲素、甘露醇、和任选的酸碱调节剂。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中包含的物料以每4重量份的氢溴酸高乌甲素计，甘露醇的量为5-100重量份，例如7.5-50重量份，例如10-30重量份。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中所述酸碱调节剂的用量是，使该冻干粉针剂用注射用水溶解成含氢溴酸高乌甲素4mg/ml浓度的溶液时，该溶液的pH值在5.0～7.0范围内的量，例如该溶液的pH值在5.5～6.5范围内的量。根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中所述的酸碱调节剂选自氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、或其组合。在一个实施方案中，所述的酸碱调节剂是盐酸溶液或者氢氧化钠溶液，例如1M盐酸溶液或者1M氢氧化钠溶液。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中还包含有机酸或其盐。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中所述有机酸或其盐选自枸橼酸、枸橼酸的碱金属盐、枸橼酸的碱土金属盐、酒石酸、酒石酸的碱金属盐、酒石酸的碱土金属盐。在一个实施方案中，所述有机酸或其盐选自枸橼酸、枸橼酸钠、酒石酸、酒石酸钠。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中包含的物料以每4重量份的氢溴酸高乌甲素计，有机酸或其盐的量为1-20重量份，例如2.5-15重量份，例如5-10重量份。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中包含氢溴酸高乌甲素40重量份、甘露醇5-100重量份(例如7.5-50重量份，例如10-30重量份)、有机酸或其盐1-20重量份(例如2.5-15重量份，例如5-10重量份)、和任选的酸碱调节剂。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中还包含有效量的乙二胺四乙酸二钠。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中包含的物料以每4重量份的氢溴酸高乌甲素计，乙二胺四乙酸二钠的量为0.1-2重量份，例如0.2-1.5重量份，例如0.2-1重量份。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中包含氢溴酸高乌甲素、有机酸或其盐、乙二胺四乙酸二钠、甘露醇、和任选的酸碱调节剂。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中包含氢溴酸高乌甲素40重量份、甘露醇5-100重量份(例如7.5-50重量份，例如10-30重量份)、有机酸或其盐1-20重量份(例如2.5-15重量份，例如5-10重量份)、乙二胺四乙酸二钠0.1-2重量份(例如0.2-1.5重量份，例如0.2-1重量份)、和任选的酸碱调节剂。

众所周知，经低温冷冻-真空干燥而获得的冷冻干燥粉针剂(通常简称为冻干粉针剂或冻干粉针)，其是首先将各物料用溶剂溶解(通常而言是用水溶解)，配制成一溶液，然后使该溶液进行低温冷冻，再进行抽真空、升华、干燥而获得的一种基本无水(通常而言水含量低于5％，特别是通常低于3％)的粉末状物或块状物。因此，该固体冻干物的酸碱度通常通过配制过程调节溶液的pH值来控制；或者可以通过处方调整以使获得的固体冻干物在规定的溶解/稀释程度下控制该溶解/稀释液的pH值来控制(此称为控制固体冻干物的酸碱度)；后一方式通常更为普遍使用，例如药典中所载的诸多冻干粉针剂均以此方式控制制品的酸碱度，而这种方式控制产品的酸碱度通常可以不具体规定酸碱调节剂的处方量，而仅规定终产品的酸碱度即可。同样适用于本发明的是，根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中所述任选的酸碱调节剂的量是，使所制得的冻干粉针剂用注射用水溶解成含氢溴酸高乌甲素4mg/ml浓度的溶液时，该溶液的pH值在5.0～7.0范围内的量，例如该溶液的pH值在5.5～6.5范围内的量。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其基本上是按包括如下的步骤制备的：

(a)称取处方量的氢溴酸高乌甲素和甘露醇、任选的有机酸或其盐、和任选的乙二胺四乙酸二钠，加入适量注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭；

(b)补加注射用水至其处方量，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，必要时用酸碱调节剂调节至pH5.0～7.0，优选pH5.5～6.5；

(c)将药液除菌过滤，灌装于西林瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，压塞，即得。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中步骤(c)所得经过滤的滤液，其中固形物含量为1～10％(w/v)，优选1～7.5％(w/v)，再更优选1～5％。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中还任选地包含其它药学可接受的赋形剂。所述赋形剂例如但不限于甘露醇、乳糖、蔗糖、葡萄糖、山梨醇、甘氨酸、右旋糖苷、氯化钠、及其组合。

进一步地，本发明第二方面提供了制备本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂的方法，其基本上包括以下步骤：

(a)称取处方量的氢溴酸高乌甲素、甘露醇、任选的有机酸或其盐和任选的乙二胺四乙酸二钠，加入适量注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭；

(b)补加注射用水至其处方量，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，必要时用酸碱调节剂调节至pH5.0～7.0，优选pH5.5～6.5；

(c)将药液除菌过滤，灌装于西林瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，压塞，即得。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(c)所得经过滤的滤液，其中固形物含量为1～10％(w/v)，优选1～7.5％(w/v)，再更优选1～5％。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(a)所述适量注射用水是注射用水处方量的约70～90％。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(b)中“补加注射用水至其处方量”中的所述“处方量”的注射用水是氢溴酸高乌甲素重量的100-500倍，例如100-300倍，例如约150倍。此注射用水的量可通过步骤(c)中所述固形物含量而容易地控制。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(a)所述活性炭用量是溶液重量的0.02％～0.5％(w/v)，优选0.05％～0.2％。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(b)中所述酸碱调节剂是选自下列的酸碱调节剂的水溶液：氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、或其组合。这些水溶液的浓度是本领域技术人员公知的，例如1～10％，例如2％～5％。在一个实施方案中，所述的酸碱调节剂是盐酸溶液或者氢氧化钠溶液，例如1M盐酸溶液或者1M氢氧化钠溶液。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(d)中除去水份后所得冷冻干燥物料中水份含量低于10％，优选低于8％，优选低于5％，更优选低于3％。

在本发明上述制备方法的步骤中，虽然其描述的具体步骤在某些细节上或者语言描述上与下文具体实施方式部分的制备例中所描述的步骤有所区别，然而，本领域技术人员根据本发明全文的详细公开完全可以概括出以上所述方法步骤。

本发明的任一方面的任一实施方案，可以与其它实施方案进行组合，只要它们不会出现矛盾。此外，在本发明任一方面的任一实施方案中，任一技术特征可以适用于其它实施方案中的该技术特征，只要它们不会出现矛盾。

下面对本发明作进一步的描述。

本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。

根据本发明的冻干粉针剂，其中的活性成分是具有下式I结构的化合物：

HBr，H2O

在本发明的上述化合物还将包括其可能存在的任一种单一异构体，或者所述化合物可能存在的任意2个以上的异构体以任意比例的混合物。

根据本发明，术语“赋形剂”亦可称为辅料、填充剂等。

本文所用的“药学可接受的赋形剂”指的是可用于配制药物的赋形剂，其对生物体基本上没有不良影响，并且通常是生物体可耐受的。

在本发明中，优选的本发明冻干粉针剂在用水制成每1ml中含式I化合物4mg的溶液后，再根据中国药典2010年版二部附录VI H项下的方法即pH值测定法测定。

虽然本领域技术人员理解，本发明的赋形剂可以是任一种可用于冷冻干燥的赋形剂，特别是甘露醇、乳糖、蔗糖、葡萄糖、山梨醇、甘氨酸、右旋糖苷、氯化钠、及其组合，然而在本发明中，特别优选的赋形剂是甘露醇、乳糖、右旋糖苷等。

冷冻干燥粉针剂的制备过程是本领域技术人员公知的制药工艺，例如如下冻干曲线A和冻干曲线B所示的两种示意性的冻干曲线：

在下文制备冷冻干燥粉针剂中的具体实例中，如未另外特别说明，所用的冻干曲线是冻干曲线A。

冷冻干燥粉针剂中的水含量是一般在8％以下，优选低于5％，更优选低于3％。水份控制可通过适当调整冷冻干燥程序来控制。该冷冻干燥粉针剂中的水份含量可根据许多已知方法来测定，例如干燥失重法。

在本发明中，为了在必要时调节药液的pH值，可以向组合物中加入适当的pH调节剂(在本发明中亦称为酸碱调节剂)。尽管本发明人仅用不具缓冲能力的强酸或强碱溶液例如氢氧化钠水溶液和盐酸水溶液进行调节，然而，本领域技术人员理解，如果用这种不具缓冲能力的pH调节剂处理能满足体系的pH要求，则具有缓冲能力的pH调节剂将更加能够实现本发明目的，因此这些缓冲剂不但能够调节pH值，而且能稳定pH值。因此本发明所列任一pH调节剂或其组合均包括在本发明精神和范围内。

在制备本发明冻干粉针剂时，所配制的药液中，固形物含量为1～10％(w/v)，优选1～7.5％(w/v)，再更优选1～5％。由于冻干粉针剂通常是在管状西林瓶中进行冷冻干燥得到，本领域技术人员理解这种产品在获得成品甚至在供医生使用之前，通常均呈现一个圆饼状，尽管该圆饼的体积理论上讲会比原有水溶液的体积少(稍有缩小)，然而通常这种缩小通常不会缩小到原水溶液体积50％，通常会在原水溶液体积的80-120％之间，更通常在原水溶液体积的90-100％之间，而从终产品西林瓶内可观察到原水溶液液面痕迹(主体饼状物因冻干缩小后残留在瓶壁上的液面痕迹，即便西林瓶中的冻干品因各种原因例如碰撞等原因而呈粉末状，通常仍然可以保留原有的液面痕迹)，据此痕迹亦可估计出该冷冻干燥组合物在冷冻干燥之前的水溶液体积。因此，虽然本发明提供的是一种基本无水的冷冻干燥粉针剂，然而根据该粉针剂仍然可以大致估计出其在配制时，至少在冷冻干燥开始之前的药液体积，根据该估计出的体积以及西林瓶中的干燥终产物的重量，亦可计算到在制备本发明冻干粉针剂时，所配制的药液中的固形物的含量。因此，根据本发明第一方面的冻干粉针剂，其在配制时的药液的固形物含量为1～10％(w/v)，优选1～7.5％(w/v)，再更优选1～5％。

术语“固形物含量”是指固体物质(例如本发明活性化合物及所用的全部赋形剂，重量/克)加入到溶剂(例如注射用水)中，溶解后得到一个溶液，所述固体物质的重量除以终溶液体积的百分数(重量/体积百分数，例如g/100ml)。例如在本发明中，以4g活性化合物和总计20g的其余固体辅料加适量注射用水溶液，配制成终体积为1000ml的溶液，其固形物含量即为2.4％。

在本发明中，符号％，根据其所使用的语境，可以具有本领域技术人员容易理解的含义。例如在提及固形物含量时，该符号表示重量/体积的百分数(w/v，例如g/100ml)；又例如在提及冷冻干燥粉针剂中的“水含量”时，例如水含量在8％以下，此时该符号％表示重量/重量的百分数(w/w，g/100g)。一般而言，在固体分散在液体中时，％表示重量/体积百分数；在固体分散在固体中或者液体分散在固体中(例如粉针的含水量)时，％表示重量/重量百分数。在其它情况下，如无另外说明，符号％表示重量/重量百分数。

在配制本发明的药液时，本领域技术人员公知，可使用例如约0.45um的微孔滤膜进行粗滤过滤，在将药液灌装到西林瓶中之前，可以使用例如约0.22um的微孔滤膜进行精滤过滤以除菌，必要时可以过滤多次。

根据本发明的冻干粉针剂，其为冷冻干燥粉针剂。在一个实施方案中，该冷冻干燥粉针剂为单剂量制剂(例如西林瓶装的粉针剂)，每一单位剂量中活性化合物的量可以例如但不限于约1mg、约2mg、约4mg、约6mg、约8mg、约10mg。

根据本发明的冻干粉针剂，其用注射用水复溶，通常而言复溶时间在30秒内，优选在20秒内，更优选在15秒内。

根据本发明的冻干粉针剂，其用水制成每1ml中含活性化合物4mg的溶液，该溶液的pH值为5.0～7.0。在一个实施方案中，pH值为pH5.5～6.5。

本发明提供的冻干粉针剂可以在在25℃以下干燥处保存至少24个月，可以满足一般的冷冻干燥粉针剂的贮藏要求。

本发明所得冻干粉针剂特别是冷冻干燥粉针剂通常为白色或类白色的冻干块状物或其碎块或其粉末，无臭、味苦，易溶于水。

氢溴酸高乌甲素(lappaconitine)是国内首创的非成瘾性中枢镇痛药，因其镇痛作用强而无成瘾性、无蓄积现象和毒副作用轻而广泛应用于临床各种疼痛，如胃肠溃胃炎、胆囊炎、风湿病、坐骨神经痛、牙痛、术后疼痛、癌痛等。研究发现氢溴酸高乌甲素除了具有强镇痛作用，还具有抗炎消肿、抗心律失常、抗癫痫、抗风湿、抗氧化、抗肿瘤、抗细菌、降温解热、局部麻醉和免疫调节等作用。随着临床的大量应用发现，氢溴酸高乌甲素可引起严重过敏反应、致唾液腺肿大、心律不齐、传导阻滞、甚至心室颤动和耳毒性等不良反应，为临床的应用带来了困惑。

有关氢溴酸高乌甲素的镇痛作用方面。电压依赖性钠钾离子通道核转录因子NF-kB的表达、突触前膜对去甲肾上腺素和5-羟色胺的重摄取、钙离子内流和P物质释放水平等在疼痛的发生、传导、治疗过程中发挥着重要的作用。研究发现氢溴酸高乌甲素能通过影响中枢神经系统电压依赖性钠离子通道来抑制轴突损伤引起的异位放电，发挥阻断神经传导作用；能通过抑制突触前膜对去甲肾上腺素和5-羟色胺的重摄取，使突触间隙含量增加，从而抑制传入纤维P物质和生长抑素的释放而发挥强而持久的镇痛效应；氢溴酸高乌甲素镇痛作用除了与这些机制有关外，还与抑制脑导水管周围灰质和皮质的钙离子内流，以及抑制核因子NF-kB的表达水平有关。Ou等报道氢溴酸高乌甲素也可通过减少神经元P2X3受体的表达及其敏感性来对大鼠背根神经节病理性疼痛发挥镇痛效果。研究发现，氢溴酸高乌甲素作为典型的C19型二帖生物碱其镇痛作用与A环上的叔胺基、C-8位上的乙酰氧基或乙氧基基团、C-14位的芳香酯以及D环的饱和状态有着密切的关系。

有关氢溴酸高乌甲素的抗炎消肿作用方面。机体损伤能诱发炎症细胞产生大量趋化因子，触发机体免疫应答，产生免疫因子；免疫因子可激发、诱导和调控炎症反应，又可激活神经内分泌系统产生应激激素，使机体处于应激状态。资料显示，氢溴酸高乌甲素对二甲苯致小鼠耳壳肿胀，角叉菜胶，甲醛，完全弗氏佐剂所致大鼠足肿胀及琼脂肉芽肿增生均有显著抑制作用，提示氢溴酸高乌甲素具有抗急、慢性炎症的作用。Wang等也报道，在小鼠身上氢溴酸高乌甲素能够明显抑制醋酸诱导的扭体反应、甲醛和热板法引起的疼痛、蛋清诱导的足跖肿胀以及二甲苯引起的耳廓肿胀。Ou等报道给大鼠后肢脚掌膜内注射1ml 2.5％甲醛24h后，注射侧的踝关节及下肢明显肿胀，然后腹腔注射氢溴酸高乌甲素4mg/kg后，可使踝骨关节及下肢肿胀明显消退。这些研究提示氢溴酸高乌甲素可使创伤局部组织的炎性反应，减轻炎性介质生成和吸收减少，阻断了刺激神经内分泌系统和调动免疫系统的起始因素说明，氢溴酸高乌甲素具有抑制术后应激反应和抗急、慢性炎症的作用，为其临床用于治疗风湿性、类风湿性关节炎引起的红肿、疼痛提供了理论依据。

有关氢溴酸高乌甲素的心肌作用方面。众所周知，心脏电信号传导的基础是心肌细胞跨膜离子通道电流，而心肌细胞钠、钾、钙等离子通道顺序开放并保持动态平衡是心脏正常工作的基础。钠、钾、钙等离子通道功能的改变，引起离子通道间平衡失调，心肌电信号传导紊乱，从而诱发心律失常。氢溴酸高乌甲素是一种具有抗心律失常作用的天然化合物，可通过调节电压依赖性钠/钾离子通道和通道上相关蛋白基因的表达；直接或间接抑制心脏的去极化，降低心脏传导系统的兴奋性来发挥其抗心律失常的作用。有研究发现，氢溴酸高乌甲素能通过阻滞电位依赖性钠离子通道来降低心肌收缩力，提高心肌兴奋阈，导致心动过缓或心搏停止，以此发挥其抗心率失常作用。Bryzgalov等在氯化钙和肾上腺素诱发的心律失常模型中发现，氢溴酸高乌甲素邻氨基苯甲酸部分的C-5位被卤素取代时显示更好的抗心律失常效应，而卤素衍代物中生物活性强弱是氯<碘<溴，说明氢溴酸高乌甲素是其卤素衍生物中最佳的抗心率失常药，具有临床应用前景。Vakhitovalu等从基因水平对氢溴酸高乌甲素对心肌作用进行了研究，发现在84个心律失常相关基因中氢溴酸高乌甲素能增加编码钾离子通道基因如kcna6、kcnj1、kcnj4、kcnq2、kcnq4，钙离子通道基因，以及囊泡上乙酰胆碱转运体基因slc18a3翻译时mRNA的表达水平；能减少钠离子通道基因scn8a、钾离子通道基因kcne1和kcns1以及甘氨酸膜转动基因atp4a和slc6a9翻译时mRNA的表达水平；也能影响乙酰胆碱和甘氨酸转运体基因翻译时mRNA的表达水平，从生物分子层面上为氢溴酸高乌甲素的抗心率失常作用提供了依据。

有关氢溴酸高乌甲素其他作用方面。近年研究发现，氢溴酸高乌甲素除了在镇痛、抗心率失常和抗炎消肿方面具有良好作用外，还具有抗癫痫、抗肿瘤、抗细菌、抗氧化和免疫调节等作用。AMERI等研究发现，氢溴酸高乌甲素能通过抑制海马神经元活性来控制癫痫样活动。Solyanik等在观察含氢溴酸高乌甲素的中草药提取物对两种不同转移能力Lewis肺癌细胞增殖和转移的影响时发现，提取物可以抑制高增殖低转移性Lewis肺癌的生长和转移，其中有70％以上原发肿瘤的生长被抑制，细胞88％的转移活性被抑制，说明氢溴酸高乌甲素具有抑制原发肿瘤和转移瘤的生长，抑制肿瘤转移的能力。有学者在研究中发现氢溴酸高乌甲素具有显著的抗菌活性。Shaheen等报道氢溴酸高乌甲素以及其他几个乌头地上部分分离得到的二萜类生物碱具有抗炎、抗氧化和抗酪氨酸酶活性的作用。研究还发现氢溴酸高乌甲素能刺激网状内皮细胞增生，增强白细胞和单核巨噬细胞的吞噬能力；对溃疡有愈合作用；能使患者食欲增加、精神好转、机体免疫指标提高，从而增强机体的免疫力、改善免疫功能。相信随着对氢溴酸高乌甲素研究的深入，在抗癫痫、抗肿瘤和抗炎、抗氧化和免疫调节方面会有更多的报道，在药理作用或作用机制方面会有新的研究成果出现。

有关氢溴酸高乌甲素的临床应用方面。氢溴酸高乌甲素具有显著的镇痛、抗炎消肿、降温解热与局部麻醉作用，其镇痛强度是氨基比林的7倍，与哌替啶相当。因其强镇痛作用和免疫调节作用被选为癌症三阶梯止痛疗法的轻/中度癌痛止痛药，临床可用于轻/中度癌痛止痛和肿瘤患者的化疗辅助药。氢溴酸高乌甲素还能协同吗啡提高其镇痛作用，减少用药量和不良反应。大量临床研究也证明，氢溴酸高乌甲素可用于术中和术后镇痛；如氢溴酸高乌甲素复合芬太尼用于胃、胆囊、脾、结肠手术(腹腔镜手术除外)，复合布托啡诺用于妇科术后静脉镇痛，腹腔镜下卵巢囊肿移除手术后镇痛，复合曲马多用于结肠癌和宫颈癌根治术后的镇痛，单独用于腹部和胆道手术术后镇痛；除了这些氢溴酸高乌甲素还可用于人工流产剖宫产镇痛、带状疱疹性神经痛、硬膜外注射术后镇痛、尿道综合征、软组织损伤和膝关节骨性关节炎、坐骨神经痛等。但随着氢溴酸高乌甲素在临床各种慢性疼痛和顽固性疼痛的广泛应用，

氢溴酸高乌甲素因其特有的药理作用备受关注，随着研究的深入相继发现了其大量的药理作用，为其临床运用提供了理论依据。如今在临床中主要用其强镇痛作用，广泛用于癌症的晚期镇痛和围术期镇痛两方面。无论经硬膜外途径或静脉途径给药，或配伍局麻药物、阿片类药物、单独使用都具有较好的效果。调查发现在我国的癌症患者中有57.1％的患者经常发作或持续性癌痛，有28.2％的患者存在大于7分的重度癌痛，对于这些中晚期癌症患者出现的持续、顽固性疼痛，需要长期使用镇痛药，以达到无痛生存。目前镇痛药物中疗效确切的主要有吗啡和哌替啶，但易产生成瘾性、耐药性和便秘等不良反应；而具有良好的镇痛效果的氢溴酸高乌甲素不易产生耐药性和成瘾性，且口服方便，在癌痛止痛方面具有巨大的应用空间。研究证明，对于临床围术期镇痛患者，将不同剂量的氢溴酸高乌甲素注入硬膜外腔进行镇痛治疗，比静脉注射、肌肉注射和口服等给药法疗效要高，并且没有硬膜外注射吗啡的延迟性呼吸抑制和潜在成瘾性等相关的不良反应和并发症，故氢溴酸高乌甲素可替换吗啡用于临床硬膜外术后镇痛。随着研究的不断深入，氢溴酸高乌甲素的众多药理作用被发现，镇痛范围不断扩大，其临床应用前景广泛被看好，但在临床应用中需要密切关注氢溴酸高乌甲素的不良反应和注意事项，使其临床使用做到安全、有效和合理。

目前临床上使用的氢溴酸高乌甲素冷冻干燥粉针剂适用于中度以上疼痛。其可通过肌内注射和静脉滴注两种方式给药。肌内注射方式：临用前，用0.9％氯化钠或5％葡萄糖注射液适量使其溶解；一次4mg，一日1-2次，或遵医嘱。静脉滴注方式：一日4-8mg，稀释于5％葡萄糖或0.9％氯化钠注射液500ml中静滴。据报道，氢溴酸高乌甲素无成瘾性，动物试验无致畸胎作用，亦不会发生蓄积中毒。急性毒性试验结果：大鼠经口LD50为20mg/Kg：小鼠腹腔注射LD50为9.1mg/Kg，静脉注射LD50为6.9mg/Kg。

具体实施方式

通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述，然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。以下实施例进一步说明本发明，而不是限制本发明。在下面的例子中，使用的pH调节剂(在本发明中亦即酸碱调节剂)，如无另外说明，是1M氢氧化钠溶液或者1M盐酸溶液，其用量是使制备粉针剂时，使冷冻干燥前所配制的溶液的pH值调节至某一规定值或范围，该规定值或范围是冷冻干燥所得干粉用注射用水稀释成含活性成分4mg/ml的溶液所测定的pH值的值或范围。下文制备步骤为了举例的目的，并基于各举例的可比较性而作了某些具体描述，本领域技术人员根据已有知识完全可以从中概括得到本发明制备冻干粉针剂的方法。在下面配液制备各种组合物中，如未另外说明，每批的总配液量为1000ml，但是列明配方时，均以每瓶含氢溴酸高乌甲素4mg的量阐明。

测定方法：

各种样品(包括本发明粉针剂)的含量测定以及有关物质测定方法，参照刘朝霞等文献(刘朝霞，等，HPLC法测定氢溴酸高乌甲素注射液有关物质的研究，药物分析杂志，2009，29(5):795)所载的HPLC法进行，其中色谱条件参见2.1节所载；

测定法：取以玻璃瓶装的本发明冷冻干燥粉针剂供试品(如未另外说明，每瓶含4mg氢溴酸高乌甲素)5瓶，分别加流动相适量使内容物溶解，移至同一20ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为有关物质测试液；另精密量取该有关物质测试液1ml，置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为含量测定测试液；另精密量取该有关物质测试液1ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为有关物质测试用对照溶液；

另取经60℃干燥4小时的氢溴酸高乌甲素对照品约20mg，精密称定，置200ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，另精密量取1ml，置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为含量测定计算用对照品溶液；

分别精密量取有关物质测试液、有关物质测试用对照溶液、含量测定测试液、对照品溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；

根据含量测定测试液、对照品溶液的色谱图，按外标法以峰面积计算每瓶中氢溴酸高乌甲素的含量；根据有关物质测试液、有关物质测试用对照溶液的色谱图，按1％自身对照计算各杂质的含量。

已经发现，所制得的氢溴酸高乌甲素冷冻干燥粉针剂，其有关物质测试液色谱图与上述刘朝霞等文献中图2色谱图呈现典型一致性，即活性成分的Rt为3.64min，另在保留时间2.94min和3.97min处分别出现两个典型的杂质峰，与述刘朝霞等文献一样，它们在本发明中亦分别称为杂质2和杂质3。

化学稳定性考察方法：

本方法可以用于考察本发明各种产品模拟长期贮藏条件下的稳定性特别是化学稳定性。具体方法为：将制得的冷冻干燥粉针剂在45℃下放置4个月，测定试样中氢溴酸高乌甲素的含量[45℃4月，可称为高温平均含量，mg/瓶，测定5瓶的平均值]相对于该试样在20℃下处理相应时间时氢溴酸高乌甲素的含量[20℃4月，可称为常温平均含量，mg/瓶，测定5瓶的平均值]的百分数，可简称为残余含量(％)，计算式如下：

其中，高温平均含量(mg/瓶)和常温平均含量(mg/瓶)是样品经上文所述HPLC法测定得到的每瓶中氢溴酸高乌甲素的含量(5瓶的均值)。

此外，还照上文所述HPLC法测定试样中的有关物质，特别是测定它们的杂质2、杂质3等的含量。对于某一批试样中的某一杂质，计算该杂质在经上述高温处置后的含量增加百分数(％，可简称为“杂质增量”)，计算式如下：

制备例1、制备包含氢溴酸高乌甲素的粉针剂

配方：

氢溴酸高乌甲素	4mg，
		甘露醇	20mg，
pH调节剂	至pH6.0，

注射用水

适量，加至1ml。

制备方法：

(1)称取上表处方中的氢溴酸高乌甲素、甘露醇、以及另外规定量的枸橼酸钠(以获得含有不同量枸橼酸钠的粉针剂)，置于不锈钢桶中，加入处方量约80％的注射用水，使各组分溶解，再按溶液体积加入0.1％(w/v)的活性炭，搅拌30分钟，过滤脱炭，补加注射用水至接近处方全量。

(2)滤液取样，测定pH值，必要时用pH调节剂调节至规定值，再补加注射用水至处方全量。

(3)药液先用0.45um微孔滤膜过滤，再用0.22um微孔滤膜过滤2次。

(4)以每瓶灌装药液1ml灌装于5ml西林瓶中(在以下各例子中，引用本制备例方法时，如未另外说明，灌装药液量为包含4mg活性化合物的药液体积；在其它例子中如果灌装药液体积明显增加或者明显减小，可以根据经验适当调整西林瓶的体积)，半加胶塞。

(5)按照本文所述冻干曲线A进行冷冻干燥，至水分低于3％；冻干结束后，进行液压加塞；扎铝盖，即得。

在以上制备粉针时，在一系列的配方中添加的枸橼酸钠分别为0mg、1mg、2.5mg、5mg、7.5mg、10mg、15mg、20mg、30mg，得到9批粉针剂样品，分别记为Ex101、Ex102、Ex103、Ex104、Ex105、Ex106、Ex107、Ex108、Ex109。这些批次的粉针剂如本文所述进行45℃下放置4个月的稳定性考察，结果：9批粉针剂的活性成分残余含量(％)均在97.6～99.2％范围内，未见有显著的差别，并且均是令人满意的。9批粉针剂的杂质2增量(％)均在18～32％范围内，未见有显著的差别，并且均是令人满意的。但是，9批粉针剂的杂质3增量(％)呈现明显的差异，Ex101、Ex102、Ex103三者枸橼酸钠用量较少的，杂质3增量(％)均在126～189％范围内，并且枸橼酸钠用量越低该杂质3增量(％)越大；而Ex104～Ex109六个枸橼酸钠用量较高的粉针剂，它们的杂质3增量(％)均在23～41％范围内，未见有显著的差别，并且均是令人满意的。另外，对于每批粉针，取5瓶，每瓶分别添加2ml水，静置，观察完全溶解的时间(在本发明中称为复溶时间)，结果显示，Ex101～Ex106这6个枸橼酸钠用量较低的粉针剂可在11～23秒时间内完全溶解，但是Ex107～Ex109这3个枸橼酸钠用量较高的粉针剂的复溶时间高达82～153秒，并且枸橼酸钠用量越大则溶解时间越长。可见，在氢溴酸高乌甲素粉针剂中添加适当量的枸橼酸钠是有益的，一方面能够使粉针剂在长期贮藏过程中杂质3的增加量控制在有限的范围，并且粉针剂的复溶时间非常短，有利于临床使用。另外，参照上述Ex101～Ex109粉针剂的枸橼酸钠用量设计，但是改用其它有机酸或其盐(即替换为枸橼酸或酒石酸钠)制备得到两个系列各9批的粉针剂，它们同样进行上述高温稳定性试验，结果上述枸橼酸钠赋予粉针剂杂质3增长性质的结果，在这两个系列的粉针剂中均未出现，并且使用枸橼酸所得9批粉针剂的杂质3增量(％)均在133～206％范围内，酒石酸钠所得9批粉针剂的杂质3增量(％)均在119～221％范围内。

制备例2、制备包含氢溴酸高乌甲素的粉针剂

配方：氢溴酸高乌甲素4mg，规定量甘露醇，枸橼酸钠20mg，pH调节剂至pH6.0，注射用水适量，加至1ml。

制备方法：

(1)称取上表处方中的氢溴酸高乌甲素、枸橼酸钠、以及另外规定量的甘露醇(以获得含有不同量甘露醇的粉针剂)，置于不锈钢桶中，加入处方量约80％的注射用水，使各组分溶解，再按溶液体积加入0.1％(w/v)的活性炭，搅拌30分钟，过滤脱炭，补加注射用水至接近处方全量。

(2)滤液取样，测定pH值，必要时用pH调节剂调节至规定值，再补加注射用水至处方全量。

(3)药液先用0.45um微孔滤膜过滤，再用0.22um微孔滤膜过滤2次。

(4)以每瓶灌装药液1ml灌装于5ml西林瓶中(在以下各例子中，引用本制备例方法时，如未另外说明，灌装药液量为包含4mg活性化合物的药液体积；在其它例子中如果灌装药液体积明显增加或者明显减小，可以根据经验适当调整西林瓶的体积)，半加胶塞。

(5)按照本文所述冻干曲线B进行冷冻干燥，至水分低于3％；冻干结束后，进行液压加塞；扎铝盖，即得。

在以上制备粉针时，在一系列的配方中添加的甘露醇分别为0mg、3mg、7mg、10mg、20mg、30mg、50mg、150mg、200mg，得到9批粉针剂样品，分别记为Ex201、Ex202、Ex203、Ex204、Ex205、Ex206、Ex207、Ex208、Ex209。这些批次的粉针剂如本文所述进行45℃下放置4个月的稳定性考察，结果：9批粉针剂的活性成分残余含量(％)均在97.3～99.5％范围内，未见有显著的差别，并且均是令人满意的。9批粉针剂的杂质2增量(％)均在22～36％范围内，未见有显著的差别，并且均是令人满意的。但是，9批粉针剂的杂质3增量(％)呈现明显的差异，Ex201、Ex202、Ex203三者甘露醇用量较少的，杂质3增量(％)均在145～237％范围内，并且甘露醇用量越低该杂质3增量(％)越大；而Ex204～Ex209六个甘露醇用量较高的粉针剂，它们的杂质3增量(％)均在19～44％范围内，未见有显著的差别，并且均是令人满意的。另外，对于每批粉针，取5瓶，每瓶分别添加2ml水，静置，观察完全溶解的时间(在本发明中称为复溶时间)，结果显示，Ex201～Ex206这6个甘露醇用量较低的粉针剂可在9～26秒时间内完全溶解，但是Ex207～Ex209这3个甘露醇用量较高的粉针剂的复溶时间高达135～203秒，并且甘露醇用量越大则溶解时间越长。可见，在氢溴酸高乌甲素粉针剂中添加适当量的甘露醇是有益的，一方面能够使粉针剂在长期贮藏过程中杂质3的增加量控制在有限的范围，并且粉针剂的复溶时间非常短，有利于临床使用。另外，参照上述Ex201～Ex209粉针剂的甘露醇用量设计，但是改用其它糖类(即替换为乳糖或蔗糖)制备得到两个系列各9批的粉针剂，它们同样进行上述高温稳定性试验；结果上述甘露醇赋予粉针剂杂质3增长性质的结果，在这两个系列的粉针剂中均未出现，并且使用乳糖所得9批粉针剂的杂质3增量(％)均在142～197％范围内，蔗糖所得9批粉针剂的杂质3增量(％)均在127～206％范围内。根据以上制备例1和制备例2的结果可见，仅仅在甘露醇和枸橼酸钠二者在特定量情况下组合使用时，才能赋予本发明粉针剂优异的稳定性特别是杂质3方面的优异稳定性。

补充试验1：分别参照以上Ex104、Ex105、Ex106、Ex204、Ex206五个粉针的配方和制法，不同的仅是在制备步骤(2)中将它们的pH值分别调节为5.5，得到五个粉针剂；另外，分别参照以上Ex104、Ex105、Ex106、Ex204、Ex206五个粉针的配方和制法，不同的仅是在制备步骤(2)中将它们的pH值分别调节为6.5，得到五个粉针剂。这10个粉针剂如本文所述进行45℃下放置4个月的稳定性考察，结果：10批粉针剂的活性成分残余含量(％)均在97.5～99.1％范围内，杂质2增量(％)均在17～34％范围内，杂质3增量(％)均在21～37％范围内，未见有显著的差别，并且均是令人满意的。

以上Ex104、Ex105、Ex106、Ex204、Ex205、Ex206六个批次粉针将它们用注射用水溶解以制成含氢溴酸高乌甲素4mg/ml的溶液，结果这些粉针的pH值均在5.83～6.16范围内。以上补充试验1所得5批设定pH值5.5的粉针，将它们用注射用水溶解以制成含氢溴酸高乌甲素4mg/ml的溶液，结果这些粉针的pH值均在5.41～5.66范围内。以上补充试验1所得5批设定pH值6.5的粉针，将它们用注射用水溶解以制成含氢溴酸高乌甲素4mg/ml的溶液，结果这些粉针的pH值均在6.44～6.61范围内。

补充试验2：称取氢溴酸高乌甲素200mg，置于容器中，加入亚硫酸钠20mg，EDTA-2Na0.5mg，甘露醇2g，加水至100ml，搅拌使之溶解，用Na2HPO4和枸橼酸配成的缓冲液调节溶液pH6，过滤、分装；采用0.22um微孔滤膜过滤，滤液按每只2.0ml分装；冷冻干燥：20分钟内将样品冷冻至-30℃以下，保持3小时；升华温度渐渐升至-5℃，保持4小时，二次升华时以每小时5-10℃升温速度升至30℃，保持4小时，真空压塞，扎铝盖包装即可，所得粉针编号可记为#309。将这个#309粉针剂如本文所述进行45℃下放置4个月的稳定性考察，结果：该粉针剂活性成分残余含量97.6％，杂质2增量31％，杂质3增量153％。

制备例3、制备包含氢溴酸高乌甲素的粉针剂

配方：在制备例1之Ex105的基础上，另外添加规定量的乙二胺四乙酸二钠，枸橼酸钠20mg，pH调节剂至pH6.0，注射用水适量，加至1ml。不同批次中乙二胺四乙酸二钠的添加量分别为0mg、0.1mg、0.2mg、0.5mg、1mg、1.5mg，得到6批粉针分别为Ex301、Ex302、Ex303、Ex304、Ex305、Ex306。分别测定这6个粉针剂在初始状态时的酸碱度(用注射用水溶解成含氢溴酸高乌甲素4mg/ml的溶液时的pH值)，结果它们均在pH5.93～6.11范围内。

这6个粉针剂如本文所述进行45℃下放置4个月的稳定性考察。对于每批粉针，分别测定它们在20℃4月处理后的酸碱度(pHa)与45℃4月处理后的酸碱度(pHb)，计算在此情况下的酸碱度变化值(pHb-pHa)，结果显示，Ex301和Ex302二者的酸碱度变化值分别为0.36和0.28(有明显增加的趋势)，而Ex303～Ex306四者的酸碱度变化值均在-0.13～0.11范围内，它们的酸碱度未见有明显变化(表明这些试样具有优异的酸碱度稳定性)。尽管乙二胺四乙酸二钠仅仅是一种常规的络合剂，但它们在维持粉针酸碱度方面却呈现出人意料的有益效果。

安全性试验例：对本发明组合物粉针进行安全性试验考察

本发明所得试样Ex105粉针、Ex305粉针，以及市售粉针(注射用氢溴酸高乌甲素，H20051000，高科华泰产)，照现行的药品注册法规要求(《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则课题》研究组；化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则，药物研究技术指导原则，北京：中国医药科技出版社，2006：124)，进行血管刺激性实验、溶血实验、过敏性实验，结果显示这些试样均符合血管刺激性实验、溶血实验、过敏性实验的规定。显示本发明组合物具有良好的安全性。例如，在刺激性方面，上述三个粉针剂样品注射部位皮肤、静脉均呈现相似的变化，未见充血、水肿、硬结及坏死等异常现象。

长期稳定性试验：

取本发明粉针试样：Ex104、Ex105、Ex106、Ex204、Ex205、Ex206、Ex303、Ex305。使这些样品在20±2℃的室温条件下放置3年，参考上文化学稳定性考察方法，不同的是其中的“常温”结果以0月的结果代替。结果显示，本发明上述粉针试样均具有良好的稳定性，例如残余含量(％)均在96～98％范围内(0月时测定的含量(％)均在标示量的99～101％范围内)，这些粉针剂的酸碱度(用注射用水溶解制成含活性成分约4mg/ml的溶液)，pH均在5.85～6.15范围内，其它指标均是令人满意的。

Claims (10)

1.一种冻干粉针剂，其中包含氢溴酸高乌甲素。

2.根据权利要求1的冻干粉针剂，其中包含氢溴酸高乌甲素、甘露醇、和任选的酸碱调节剂。

3.根据权利要求2的冻干粉针剂，其特征在于：

其中包含的物料以每4重量份的氢溴酸高乌甲素计，甘露醇的量为5-100重量份，例如7.5-50重量份，例如10-30重量份；

所述酸碱调节剂的用量是，使该冻干粉针剂用注射用水溶解成含氢溴酸高乌甲素4mg/ml浓度的溶液时，该溶液的pH值在5.0～7.0范围内的量，例如该溶液的pH值在5.5～6.5范围内的量；

所述的酸碱调节剂选自氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、或其组合；和/或

所述的酸碱调节剂是盐酸溶液或者氢氧化钠溶液，例如1M盐酸溶液或者1M氢氧化钠溶液。

4.根据权利要求1的冻干粉针剂，其特征在于：

其中还包含有机酸或其盐；

其中所述有机酸或其盐选自枸橼酸、枸橼酸的碱金属盐、枸橼酸的碱土金属盐、酒石酸、酒石酸的碱金属盐、酒石酸的碱土金属盐；

所述有机酸或其盐选自枸橼酸、枸橼酸钠、酒石酸、酒石酸钠；

其中包含的物料以每4重量份的氢溴酸高乌甲素计，有机酸或其盐的量为1-20重量份，例如2.5-15重量份，例如5-10重量份；和/或

其中包含氢溴酸高乌甲素40重量份、甘露醇5-100重量份(例如7.5-50重量份，例如10-30重量份)、有机酸或其盐1-20重量份(例如2.5-15重量份，例如5-10重量份)、和任选的酸碱调节剂。

5.根据权利要求1的冻干粉针剂，其特征在于：

其中还包含有效量的乙二胺四乙酸二钠；

其中包含的物料以每4重量份的氢溴酸高乌甲素计，乙二胺四乙酸二钠的量为0.1-2重量份，例如0.2-1.5重量份，例如0.2-1重量份；

其中包含氢溴酸高乌甲素、有机酸或其盐、乙二胺四乙酸二钠、甘露醇、和任选的酸碱调节剂；

其中包含氢溴酸高乌甲素40重量份、甘露醇5-100重量份(例如7.5-50重量份，例如10-30重量份)、有机酸或其盐1-20重量份(例如2.5-15重量份，例如5-10重量份)、乙二胺四乙酸二钠0.1-2重量份(例如0.2-1.5重量份，例如0.2-1重量份)、和任选的酸碱调节剂；

其基本上是按包括如下的步骤制备的：

(a)称取处方量的氢溴酸高乌甲素和甘露醇、任选的有机酸或其盐、和任选的乙二胺四乙酸二钠，加入适量注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭；

(b)补加注射用水至其处方量，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，必要时用酸碱调节剂调节至pH5.0～7.0，优选pH5.5～6.5；

(c)将药液除菌过滤，灌装于西林瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，压塞，即得。

6.根据权利要求5的冻干粉针剂，其中步骤(c)所得经过滤的滤液，其中固形物含量为1～10％(w/v)，优选1～7.5％(w/v)，再更优选1～5％。

7.根据权利要求1的冻干粉针剂，其中还任选地包含其它药学可接受的赋形剂。

8.根据权利要求7的冻干粉针剂，所述赋形剂例如但不限于甘露醇、乳糖、蔗糖、葡萄糖、山梨醇、甘氨酸、右旋糖苷、氯化钠、及其组合。

9.制备权利要求1-8任一项的冻干粉针剂的方法，其基本上包括以下步骤：

(a)称取处方量的氢溴酸高乌甲素、甘露醇、任选的有机酸或其盐和任选的乙二胺四乙酸二钠，加入适量注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭；

(b)补加注射用水至其处方量，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，必要时用酸碱调节剂调节至pH5.0～7.0，优选pH5.5～6.5；

(c)将药液除菌过滤，灌装于西林瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，压塞，即得。

10.根据权利要求9的方法，其特征在于：

其中步骤(c)所得经过滤的滤液，其中固形物含量为1～10％(w/v)，优选1～7.5％(w/v)，再更优选1～5％；

其中步骤(a)所述适量注射用水是注射用水处方量的约70～90％；

其中步骤(a)所述活性炭用量是溶液重量的0.02％～0.5％(w/v)，优选0.05％～0.2％；

其中步骤(b)中所述酸碱调节剂是选自下列的酸碱调节剂的水溶液：氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、或其组合；

其中步骤(d)中除去水份后所得冷冻干燥物料中水份含量低于10％，优选低于8％，优选低于5％，更优选低于3％。