CN104673698A - 降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂，采用红曲菌(Monascus ruber)、纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)、乳酸链球菌(Streptococcus lactis)、嗜酸乳杆菌(Leatobacillus acidophilus)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和双歧乳杆菌(Bacillus bifidum)制备菌种；所述菌种的质量百分比为：红曲菌10～25%，纳豆芽孢杆菌5～20%，乳酸链球菌10～20%，嗜酸乳杆菌10～15%，酿酒酵母5～15%，双歧乳杆菌15～40%。

Description

降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂
技术领域
本发明涉及一种水产养殖用的降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂及其制备方法，属于微生物调节剂在水产养殖业中应用的生物材料技术领域。
背景技术
胆固醇含量与冠状动脉心脏病(coronary heart disease，CHD)有关，它会引起动脉粥样硬化(Atherosclerosis)。临床试验指出，血胆固醇含量每降低1％，冠状动脉心脏病的发生率将会减少2％。美国心脏学会推荐每人每日的胆固醇摄取量应少于300mg，否则就应该多摄取富含ω-3脂肪酸，以减少心脏病的冲击。应市场需求，低胆固醇量食品越来越受到人们的青睐。
很多常见水产品属于高胆固醇食品，例如：100克新鲜白虾中含胆固醇54毫克，但干虾米胆固醇含量就达到434毫克，水发鱿鱼的胆固醇含量达到308毫克；此外，蟹黄胆固醇高达466毫克，蚬高达454毫克；有高血脂问题的人须有所节制。随着生物技术的发展，特别是微生物技术的发展，人们逐渐采用微生物饲料发酵技术来改善饲料中的营养结构、提升动物消化吸收能力。
发明内容
本发明的目的在于提供一种水产养殖用的降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂及其制备方法。本发明充分利用菌种之间的协同作用，起到降低高胆固醇水产动物体内胆固醇的作用。
为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：
降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂，采用红曲菌(Monascus ruber)、纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)、乳酸链球菌(Streptococcus lactis)、嗜酸乳杆菌(Leatobacillusacidophilus)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和双歧乳杆菌(Bacillus bifidum)制备菌种；所述菌种的质量百分比为：红曲菌10～25%，纳豆芽孢杆菌5～20%，乳酸链球菌10～20%，嗜酸乳杆菌10～15%，酿酒酵母5～15%，双歧乳杆菌15～40%。
本发明提供的降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂，优选的，所述菌种的质量百分比为：红曲菌23%，纳豆芽孢杆菌11%，乳酸链球菌15%，嗜酸乳杆菌12%，酿酒酵母7%，双歧乳杆菌32%。
本发明还提供了上述降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂的制备方法，包括以下步骤：
①接种：将所述各菌种接于斜面培养基上；红曲菌培养温度为25～30℃，培养时间为24～36h；纳豆芽孢杆菌培养温度25～30℃，培养时间为24～36h；嗜酸乳杆菌培养温度为30～35℃，培养时间为24～36h；乳酸链球菌培养温度为30～35℃，培养时间为24～36h；酿酒酵母培养温度为32～37℃，培养时间为12～24h；双歧乳杆菌培养温度为25～30℃，培养时间为24～36h；
②菌种培养：将所述菌种分别接种于盛有液体培养基的50mL锥形瓶中，培养基用无菌海水配制，pH为6.0～8.0；锥形瓶放入摇床振荡，温度为28℃，振荡48～72h；采用血球计数板计数，菌液中菌种数量分别达到108个/mL；
③一级发酵：将所述菌种分别接种于盛有液体培养基的1000mL锥形瓶中，培养基用无菌海水配制，pH6.0～8.0，放入摇床振荡，温度为28℃，振荡48～72h；使菌种数量分别达到108个/mL以上，将各菌种按所述菌种的质量百分比混合；
④二级发酵：将混合后的菌液接种于盛有复合菌剂培养基的发酵罐中，复合菌剂培养基pH6.0～8.0，接种量为1～5%，28℃下培养4～7天，使发酵液中菌数达到8～10×108个/mL，即得到所述降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂。
本发明提供的降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂，所述复合菌剂培养基配方为：葡萄糖1～5g/100mL、蜂蜜1～8g/100mL、蔗糖5～10g/100mL、琼脂1～5g/100mL、蛋白胨0.1～0.8g/100mL、KH2PO4 0.2～0.5g/100mL、K2HPO4 0.5～3g/100mL、MgSO4·7H2O0.5～3g/100mL、NaCl0.5～10g/100mL，其余为蒸馏水。
相比于现有技术，本发明提供的降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂在加入到养殖水体后，微生物可促进饲料的分解和被鱼类吸收利用的效率，进一步的，还可以降低高胆固醇水产动物体内胆固醇。同时养殖水体中由鱼类产生的有机污染物通过本发明所述微生物的分解，从而使水质得到净化。
具体实施方式
下面的实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1
降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂，采用25%红曲菌，20%纳豆芽孢杆菌，15%乳酸链球菌，10%嗜酸乳杆菌，15%酿酒酵母，15%双歧乳杆菌，按照以下步骤制备：
①接种：将所述各菌种接于斜面培养基上；红曲菌培养温度为25～30℃，培养时间为36h；纳豆芽孢杆菌培养温度25～30℃，培养时间为36h；嗜酸乳杆菌培养温度为30～35℃，培养时间为36h；乳酸链球菌培养温度为30～35℃，培养时间为36h；酿酒酵母培养温度为32～37℃，培养时间为24h；双歧乳杆菌培养温度为25～30℃，培养时间为36h；
②菌种培养：将所述菌种分别接种于盛有液体培养基的50mL锥形瓶中，培养基用无菌海水配制，pH为6.0～8.0；锥形瓶放入摇床振荡，温度为30℃，振荡48～72h；采用血球计数板计数，菌液中菌种数量分别达到108个/mL；
③一级发酵：将所述菌种分别接种于盛有液体培养基的1000mL锥形瓶中，培养基用无菌海水配制，pH6.0～8.0，放入摇床振荡，温度为30℃，振荡48～72h；使菌种数量分别达到108个/mL以上，将各菌种按所述菌种的质量百分比混合；
④二级发酵：将混合后的菌液接种于盛有复合菌剂培养基的发酵罐中，复合菌剂培养基pH6.0～8.0，接种量为5%，30℃下培养7天，使发酵液中菌数达到10×108个/mL，即得到所述降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂。
本实施例提供的降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂的制备方法，所述复合菌剂培养基配方为：葡萄糖5g/100mL、蜂蜜3g/100mL、蔗糖8g/100mL、琼脂5g/100mL、蛋白胨0.8g/100mL、KH2PO40.4g/100mL、K2HPO41g/100mL、MgSO4·7H2O2.5g/100mL、NaCl5g/100mL，其余为蒸馏水。
实施例2
降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂，采用10%红曲菌，5%纳豆芽孢杆菌，20%乳酸链球菌，15%嗜酸乳杆菌，10%酿酒酵母，40%双歧乳杆菌，按实施例1所述方法制备，即得到所述降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂。
实施例3
降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂，所述菌种的质量百分比为：红曲菌23%，纳豆芽孢杆菌11%，乳酸链球菌15%，嗜酸乳杆菌12%，酿酒酵母7%，双歧乳杆菌32%，按实施例1所述方法制备，即得到所述降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂。
本发明提供的鱼类养殖微生物添加剂的性能实验
试验组添加实施例3微生物添加剂，
对照组空白。
后续饲料添加相同，结果如表1所示。添加本发明实施例1微生物添加剂后相对于对照组鲜虾、鱿鱼、蟹黄的各个数据均有明显降低。
表1
胆固醇含量 鲜虾（mg/dg） 鱿鱼（mg/dg） 蟹黄（mg/dg）
实验组 1.935 141 273
对照组 2.684 232 357

Claims (4)

1.降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂，其特征在于：采用红曲菌(Monascusruber)、纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)、乳酸链球菌(Streptococcus lactis)、嗜酸乳杆菌(Leatobacillus acidophilus)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和双歧乳杆菌(Bacillusbifidum)制备菌种；所述菌种的质量百分比为：红曲菌10～25%，纳豆芽孢杆菌5～20%，乳酸链球菌10～20%，嗜酸乳杆菌10～15%，酿酒酵母5～15%，双歧乳杆菌15～40%。
2.根据权利要求1所述的降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂，其特征在于：所述菌种的质量百分比为：红曲菌23%，纳豆芽孢杆菌11%，乳酸链球菌15%，嗜酸乳杆菌12%，酿酒酵母7%，双歧乳杆菌32%。
3.根据权利要求1所述的降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂的制备方法，其特征在于：
①接种：将所述各菌种接于斜面培养基上；红曲菌培养温度为25～30℃，培养时间为24～36h；纳豆芽孢杆菌培养温度25～30℃，培养时间为24～36h；嗜酸乳杆菌培养温度为30～35℃，培养时间为24～36h；乳酸链球菌培养温度为30～35℃，培养时间为24～36h；酿酒酵母培养温度为32～37℃，培养时间为12～24h；双歧乳杆菌培养温度为25～30℃，培养时间为24～36h；
②菌种培养：将所述菌种分别接种于盛有液体培养基的50mL锥形瓶中，培养基用无菌海水配制，pH为6.0～8.0；锥形瓶放入摇床振荡，温度为28℃，振荡48～72h；采用血球计数板计数，菌液中菌种数量分别达到108个/mL；
③一级发酵：将所述菌种分别接种于盛有液体培养基的1000mL锥形瓶中，培养基用无菌海水配制，pH6.0～8.0，放入摇床振荡，温度为28℃，振荡48～72h；使菌种数量分别达到108个/mL以上，将各菌种按所述菌种的质量百分比混合；
④二级发酵：将混合后的菌液接种于盛有复合菌剂培养基的发酵罐中，复合菌剂培养基pH6.0～8.0，接种量为1～5%，28℃下培养4～7天，使发酵液中菌数达到8～10×108个/mL，即得到所述降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂。
4.根据权利要求3所述的降低水产动物胆固醇含量的复合微生物添加剂的制备方法，其特征在于：所述复合菌剂培养基配方为：葡萄糖1～5g/100mL、蜂蜜1～8g/100mL、蔗糖5～10g/100mL、琼脂1～5g/100mL、蛋白胨0.1～0.8g/100mL、KH2PO4 0.2～0.5g/100mL、K2HPO4 0.5～3g/100mL、MgSO4·7H2O0.5～3g/100mL、NaCl0.5～10g/100mL，其余为蒸馏水。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106235308A (zh) * 2016-07-28 2016-12-21 苏剑锋 一种大蒜酵素及其制备方法
CN106942484A (zh) * 2017-03-10 2017-07-14 苏州顶裕生物科技有限公司 一种猪用微生物饲料添加剂及其制备方法

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