CN104606230B - 脂肪间充质干细胞在降脂方面的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种脂肪间充质干细胞在降脂方面的应用,脂肪间充质干细胞来源于健康成人的脂肪组织,并采用混合胶原酶消化法分离培养取得。脐带间充质干细胞采用脐带组织块爬片法分离获得。通过对UC‑MSCs和AD‑MSCs在db/db小鼠模型治疗中的比较,AD‑MSCs可显著降低小鼠体重和血脂含量,改善脂代谢异常状态,为消除和治疗身体肥胖带来新的应用方向,甚至还可为T2DM或代谢性疾病提供新的解决思路和理论依据。
Description
技术领域
本发明涉及一种生物技术在医疗方面的应用,特别涉及一种利用脂肪间充质干细胞进行降脂的应用,属于生物医疗技术领域。
背景技术
近年来,关于间充质干细胞的研究工作正在世界范围内如火如荼的进行,间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有多向分化潜能,可通过分泌一系列生物活性细胞因子和生长因子调控局部微环境,进而调节机体免疫反应以及促进受损组织修复,对未来人体生命科学的研究和贡献将至关重要。
目前研究证实,MSCs具有显著调节糖代谢的作用。MSCs移植到β-细胞损伤的动物体内后,可修复损伤的胰岛,并分化为有功能的胰岛素分泌细胞(β-细胞),升高血清胰岛素及C肽水平,同时提高外周组织对胰岛素敏感性,从而有效缓解糖尿病动物的高血糖状态;另外,MSCs对高血糖引起的糖尿病足、下肢血管病变等糖尿病并发症均具有较好的改善作用。
随着基因工程的深入,以及近年来人类遇到的关于心血管疾病已成为人类健康头号杀手的问题,对MSCs在降脂方面的研究就成为一个重要的攻关方向。MSCs对脂肪代谢是否有作用目前尚未有报道,研究发现,MSCs来源不同,包括UC-MSCs和AD-MSCs,其表达谱存在较大差异,且在高糖高脂环境下表现出明显不同的特征,对这两种细胞在进入高脂血症患者或动物体内后,对糖、脂代谢调节作用进行验证分析,从而确定出可行的、有效降脂过程,就成为本发明想要解决的问题。
发明内容
鉴于上述现有情况,本发明旨在提供一种利用脂肪间充质干细胞进行降脂方面的应用,以生物技术改善体内血脂含量,降低体重,满足人类健康需要。
本发明是通过以下技术方案来实现的:
一种脂肪间充质干细胞在降脂方面的应用。
所述脂肪间充质干细胞来源于健康成人的脂肪组织,并采用混合胶原酶消化法分离培养取得。
所述降脂包括降低血脂含量、减轻体重和/或改善脂代谢异常。
通过对UC-MSCs和AD-MSCs在db/db小鼠模型治疗中的比较得出:AD-MSCs可显著降低小鼠体重和血脂含量,改善脂代谢异常状态,为消除和治疗身体肥胖带来新的应用方向,甚至还可为T2DM或代谢性疾病提供新的解决思路和理论依据。
附图说明
图1MSCs治疗后db/db小鼠体重变化曲线图;
图2MSCs治疗后db/db小鼠脂肪重量对比直方图;
图3MSCs治疗后db/db小鼠脂肪细胞体积变化对比图;
图4MSCs治疗后db/db小鼠血脂含量对比直方图;
图5MSCs治疗后对db/db小鼠肝脏形态及结构的影响图;
图6MSCs治疗后对db/db小鼠肝功能酶类影响的直方图;
图7MSCs治疗后db/db小鼠血清炎性因子水平的直方图;
图8Westernblot检测db/db小鼠脂肪组织代谢关键酶对比直方图;
图9Westernblot检测db/db小鼠脂肪组织AMPK1信号通路对比直方图;
图10Westernblot检测db/db小鼠肝脏组织代谢关键酶表达图;
图11Westernblot检测db/db小鼠肝脏组织AMPK1信号通路表达图;
图12 q-PCR检测小鼠脂肪S1PR表达直方图;
图13DIO小鼠与正常组小鼠喂养过程的体重对比曲线图;
图14MSCs治疗后各组DIO小鼠体重变化曲线图;
图15MSCs治疗后DIO小鼠脂肪细胞体积变化对比图;
图16MSCs治疗后DIO小鼠肝脏病理变化对比图;
图17MSCs治疗后DIO小鼠血脂变化情况直方图。
具体实施方式
为验证以上分析,本发明采用AD-MSCs及UC-MSCs对leptin受体缺陷的db/db小鼠进行移植治疗,比较两种来源间充质干细胞的治疗效果,并通过小鼠血脂、血清生化指标以及肝脏、脂肪等组织病理变化,对MSCs调节脂代谢及其作用机制进行深入探讨。
下面结合附图1-17对本发明所述脂肪间充质干细胞在降脂方面应用的实验验证过程做进一步的详细描述:
一、实验动物构建
1、Leprdb/db(db/db)小鼠模型构建:
Leprdb/db购自北京大学医学部实验动物科学部,5-6周龄,雄性,共35只。饲养于军事医学科学院实验动物中心IVC屏障系统中,普通饲料喂养,自由饮水,12h/12h黑白交替。每3天称量小鼠体重,每4天检测小鼠随机血糖,待平均体重至30g,随机血糖大于18mmol/L时开始治疗。
2、饮食诱导肥胖(Diet-Induced-Obese,DIO)模型构建:
3-4周龄C57BL/6J雄性小鼠60只,普通饲料适应喂养1周后,按空腹体重随机选择15只小鼠设为正常对照组(Normal),喂饲普通饲料,其余小鼠喂饲高脂饲料(60Kcal%脂肪,7Kcal%蔗糖)。每5天称量一次小鼠体重。喂养4周后,在高脂饲料喂养的小鼠中,选择体重高于对照组平均体重20%的个体,按体重平均分组。
二、间充质干细胞准备
1、人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)的分离培养
采用脐带组织块爬片法分离获得脐带间充质干细胞(Umbilical cord derivedmesenchymal stem cells,UC-MSCs),具体方法如下:
(1)取剖宫产新生儿脐带,先用含有1%双抗和250μg/mL两性霉素的D-Hank’s液浸泡并充分冲洗脐带,用20mL注射器冲洗脐静脉和脐动脉内的残存积血。
(2)用组织剪将脐带组织剪碎成1mm3大小的组织块,再将获得的小块脐带组织用200目滤网滤过,收集200目滤网上的脐带组织块,去掉过小的脐带组织块,获得直径为1-1.5mm多个脐带组织块。
(3)收集组织块,将组织块直接接种在培养瓶中,直接放置于5%CO2、37℃培养箱内,静置1-2小时。
(4)待组织块贴壁比较牢固后,添加含20%牛血清的D-MEM/F12完全培养液,置于5%CO2、37℃培养箱内继续培养,五天后,在培养瓶中脐带组织间充质干细胞增生铺满约80%;以0.25%胰蛋白酶-0.01%EDTA消化,所得细胞为原代细胞。
2、人脂肪间充质干细胞(AD-MSCs)的分离培养
采用混合胶原酶消化法分离培养脂肪间充质干细胞(Adipose derivedmesenchymal stem cells,AD-MSCs),具体方法如下:
(1)将吸脂手术吸取的健康成人脂肪组织,转移至50mL离心管中,加入PBS充分洗涤,1500rpm,离心5分钟,获取上层脂肪组织。
(2)按照1∶1∶1比例将I、II及IV型胶原酶混合,配制为0.2%混合胶原酶,并按脂肪组织∶胶原酶=1∶1的比例将脂肪组织加入混合胶原酶消化液中,置于37℃摇床中消化脂肪组织30分钟。
(3)将消化好的脂肪组织立刻加入10%FBS的α-MEM细胞培养基,1500rpm,离心10分钟,沉降细胞及组织团块。用α-MEM完全培养基重悬细胞,通过100μm孔径的尼龙网去除未消化的组织。
(4)将细胞接种于培养瓶,置于37℃,饱和湿度,5%CO2培养箱中静止培养。2天后,将未贴壁的细胞倒掉,PBS轻轻洗一遍,加入干细胞完全培养基,待细胞克隆长至80%融合时,0.05%胰酶消化传代至新培养瓶中。
3、间充质干细胞(MSCs)流式检测细胞表面抗原
选择P3代UC-MSCs及AD-MSCs,用0.05%胰酶消化,PBS洗两遍后分别用小鼠抗人CD11b-PE、CD45-PE、HLA-DR-PE、CD73-PE、CD90-PE、CD105-PE、CD34-FITC及CD19-FITC抗体标记5×105个MSCs,室温避光放置30min,再用PBS洗两遍后,4%多聚甲醛固定,FACS检测。
鉴定合格的细胞冻存于液氮罐中,用时复苏并传代至P5代,0.05%胰酶消化、离心后用生理盐水重悬,计数,调整细胞浓度为5×106/ml。
三、实验动物分组治疗
1、db/db小鼠分组及治疗
分组前测定小鼠空腹血糖及体重,选择血糖大于10mmol/L且体重大于32g的小鼠,按体重及血糖将小鼠平均分为3组,每组8只,另外选择8只同周龄正常C57BL/6J小鼠作为正常对照:
(1)正常对照组(Normal):同周龄8只正常C57BL/6J小鼠,与Leprdb/db小鼠同期饲养,不做处理。
(2)生理盐水组(Vehicle):8只Leprdb/db小鼠,每周腹腔注射生理盐水200μl,共3次。
(3)脂肪间充质干细胞治疗组(AD-MSC):8只Leprdb/db小鼠,每周腹腔注射脂肪间充质干细胞1.0×106,200μl(生理盐水作为溶剂),共3次。
(4)脐带间充质干细胞治疗组(UC-MSC):8只Leprdb/db小鼠,每周腹腔注射脐带间充质干细胞1.0×106,200μl(生理盐水作为溶剂),共3次。
2、饮食诱导肥胖(DIO)模型分组及治疗:
分组前测定小鼠体重,选择体重大于30g的小鼠,按体重将小鼠平均分为3组,每组8只,另外选择8只同周龄正常饮食的C57BL/6J小鼠作为正常对照:
(1)正常对照组(Normal):8只正常饮食C57BL/6J小鼠,不做处理。
(2)生理盐水组(Vehicle):8只高脂高糖饮食小鼠,每周腹腔注射生理盐水200μl,共3次。
(3)脂肪间充质干细胞治疗组(AD-MSC):8只高脂高糖饮食小鼠,每周腹腔注射脂肪间充质干细胞1.0×106,200μl(生理盐水作为溶剂),共3次治疗。
(4)脐带间充质干细胞治疗组(UC-MSC):8只高脂高糖饮食小鼠,每周腹腔注射脐带间充质干细胞1.0×106,200μl(生理盐水作为溶剂),共3次治疗。
四、动物试验相关指标检测
1、称量体重
UC-MSCs及AD-MSCs治疗小鼠后,每隔1周称量一次小鼠体重,根据小鼠平均体重绘制小鼠体重变化曲线。
2、空腹血糖检测
间充质干细胞治疗小鼠后每隔1周测一次空腹血糖。方法:小鼠禁食10小时后,尾部取血,滴在血糖试纸的反应端,通过血糖测试仪显示出血糖浓度。绘制血糖变化曲线。
3、葡萄糖耐量测定
小鼠禁食10h后,口服葡萄糖2mg/g体重,血糖测试仪测定给予葡萄糖0、30、60、120min时的血糖值,绘制糖耐量曲线。
4、动物血清检测:
4.1血清生化指标检测:
实验结束后,小鼠眼球取血,3000rpm离心10min分离血清,样品送至北京北方生物技术研究所进行甘油三脂(TG)、总胆固醇(CHOL)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及碱性磷酸酶(ALP)生化指标检测。
4.2血清炎性因子检测:
分离小鼠血清,使用Luminex炎性因子检测试剂盒检测小鼠血清中IL-1β、IL-4、IL-6、IL-12(p70)、IL-17、TNF-α及IFN-γ等。
5、动物组织病理检测:
5.1动物组织苏木素-伊红(HE)染色:
小鼠断颈处死后,做腹部正中切口,充分暴露腹部,取出小鼠肝脏、胰腺、脂肪,以10倍体积的10%甲醛固定24小时,送样于北京雪邦生物科技有限公司进行石蜡包埋、苏木素-伊红(HE)染色。
5.2胰腺组织冰冻切片荧光染色
取小鼠胰腺组织,进行冰冻切片,将切片放入染色盒,进行荧光染色:
(1)加入0.5%TritonX-100溶液孵育30min,PBS清洗3次(5min/次):
(2)山羊血清工作液封闭30min,PBS清洗2次;
(3)Glucagon抗体以及Insulin抗体共同孵育4℃过夜,PBS清洗3次;
(4)荧光二抗(FITC标记Goat抗Guinea pig二抗及PE标记Goat抗Rabbit二抗),室温孵育2小时,PBS清洗3次;
(5)接着入DAPI核染料室温孵育10min,PBS清洗,50%甘油PBS封片;
(6)荧光显微镜下观察并采集图像,进行相应图像分析。
6、动物组织Q-PCR及Western Blot检测
取小鼠肝脏、脂肪等组织,在组织匀浆器中进行匀浆,每份组织分为两组,其中一组加入RIPA裂解液后提取肝脏及脂肪组织总蛋白,按照常规方法进行Westernblot分析,抗体为HSL,HSL-P,ACC1,ACC1-P等,选择GAPDH做内参;另一组加入Trizol裂解液后提取RNA,qPCR法分析脂肪组织中1-磷酸鞘氨醇(Sphingosine1-phosphate,S1P)受体1-5,GAPDH做内参;引物序列如下表:
S1P受体家族1-5引物序列
7、数据统计及分析
所得数据均经SPSS(Statistical Package for the Social Science)17.0统计分析软件处理。统计结果以均数±标准差()表示。两组之间的比较采用配对t检验,三组以上的组间比较运用单因素方差分析(one-way ANOVA),p<0.05视为差异具有统计学意义。
五、实验结果
1、MSCs对db/db小鼠脂代谢调节作用
1.1、AD-MSCs移植可减轻db/db小鼠体重
对db/db小鼠进行3次AD-MSCs及UC-MSCs移植,并从第一次治疗开始每周称量一次小鼠体重。结果发现,经AD-MSCs移植治疗组小鼠与生理盐水组相比,体重明显减轻(*P<0.05,**P<0.01),而UC-MSCs治疗组则没有明显降低小鼠体重的作用,见图1。
1.2、AD-MSCs移植可降低db/db小鼠脂肪积累
分离小鼠脂肪并称重,结果发现db/db小鼠脂肪重量明显高于正常C57BL/6J小鼠(Normal组),而AD-MSCs治疗组小鼠脂肪重量显著降低,见图2。
分离小鼠腹部皮下脂肪组织进行石蜡切片、HE染色,结果发现db/db小鼠脂肪细胞过度膨大,单个细胞体积明显大于正常C57BL/6J小鼠(Normal组),且细胞核较不规则;经AD-MSCs治疗后,db/db小鼠脂肪细胞体积显著减小;而与生理盐水组相比,UC-MSCs治疗组则没有明显差异,见图3。
1.3、AD-MSCs具有降低db/db小鼠血脂的作用
通过分析各实验组小鼠血清生化指标发现,db/db小鼠血清中总胆固醇(CHOL)、总甘油三脂(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)等脂类物质水平均明显高于正常对照组(##:P<0.01);而AD-MSCs具有降低小鼠血清中CHOL、TG及LDL-C等脂类物质的作用(*P<0.05,**P<0.01),对于血清中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)则没有显著改变,见图4,与AD-MSCs治疗组相比,UC-MSCs治疗组没有显著降低db/db小鼠血脂的作用。
2、MSCs对db/db小鼠肝损伤的治疗作用
Db/db小鼠腹部解剖可见小鼠腹部有大量脂肪,脏器脂肪病变严重,小鼠肝细胞水样变及肝细胞点状坏死;肝组织病理切片HE染色显示,db/db小鼠肝脏呈现严重的脂肪变性,肝组织为脂肪细胞填充,肝细胞大片坏死,炎性细胞浸润及纤维组织增生;而经MSCs治疗后肝脏脂肪变性明显改善,纤维化程度下降,炎性细胞减少,肝索结构得到恢复,其中AD-MSCs治疗效果更加显著,见图5。而经血清生化检测丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸转氨酶(AST)及碱性磷酸酶(ALP)等肝功能指标发现,MSCs治疗可显著改善db/db小鼠肝功能,并降低小鼠血清中转氨酶水平和碱性磷酸酶水平,见图6。
3、MSCs治疗降低了db/db代谢性炎症
Luminex多因子检测系统检测小鼠血清炎性因子水平,结果发现db/db小鼠血清中IL-1β、IL-4、IL-6、IL-12(p70)、IL-17、TNF-α及IFN-γ等炎性因子水平均高于正常C57BL/6J小鼠(#P<0.05,##P<0.01),而经AD-MSCs及UC-MSCs治疗后,炎性因子水平均下降(*P<0.05,**P<0.01),见图7。
4、Westernblot检测db/db小鼠脂肪、肝脏组织关键酶及代谢通路
使用RIPA蛋白裂解肝脏及脂肪组织并进行Westernblot分析,脂肪组织分析结果如图8所示,与正常小鼠(N1~N3)相比,db/db小鼠未治疗组(V1~V3)脂肪组织中脂肪合成的关键酶--乙酰辅酶A羧化酶(ACC1)表达量差异不大,而其磷酸化水平(酶抑制形式)显著降低;脂肪分解关键酶--激素敏感脂肪酶(HSL)及其磷酸化水平(酶活化形式)则显著下降。与之相比,AD-MSC治疗组小鼠(A1~A3)ACC1水平显著低于未治疗组,而HSL及其磷酸化水平则显著高于未治疗组,UC-MSCs治疗组(U1~U3)与未治疗组相比,ACC1及HSL表达水平及磷酸化水平均差异不明显。
对脂肪组织AMPK1(AMP activated protein kinasel)信号通路进行分析,结果发现,脂肪干细胞治疗后的脂肪组织,AMPK1水平及AMPK1磷酸化水平均明显高于未治疗组及UC-MSCs组,见图9。
对肝脏组织进行Westernblot分析,结果发现,Westernblot未检出肝脏组织中HSL的表达;而db/db小鼠肝脏ACC1表达水平明显高于正常小鼠,MSCs治疗后差异不显著,见图10。
肝脏组织中AMPK1的表达水平,AD-MSCs组高于未治疗组及UC-MSCs组,但差异不显著;而AMPK1的磷酸化水平,3组之间没有显著差异,见图11。
5、q-PCR检测小鼠脂肪S1PR表达
1-磷酸鞘氨醇(S1P)是鞘磷脂代谢重要产物,作为生物活性鞘脂而参与细胞增殖、生存、调控细胞运动、细胞骨架重排等。S1P可与五种G蛋白偶联受体结合,最初被命名为EDG受体,后来被重命名为S1P受体(S1PR1-S1PR5)。qPCR分析脂肪组织中的S1P受体家族成员1-5(S1PR1-5)的表达。结果发现,与生理盐水组及UC-MSCs组相比,AD-MSCs治疗可显著升高脂肪组织中S1PR1-4核酸表达水平,见图12。
6、MSCs对饮食诱导肥胖(DIO)模型脂代谢调控作用
6.1饮食诱导肥胖(DIO)小鼠体重变化
对C57BL/6J小鼠进行高脂饮食诱导45天,结果发现,与正常饮食组小鼠(Normal)相比,高脂饮食可以明显提高小鼠体重,见图13,选择体重大于30g的小鼠进行试验。
6.2AD-MSCs移植能减轻DIO小鼠体重及缩小脂肪细胞体积
对选择的高脂饮食诱导肥胖DIO小鼠进行AD-MSCs及UC-MSCs移植治疗,结果发现,给予生理盐水及UC-MSCs治疗组小鼠体重均继续增长,而给予AD-MSCs治疗后小鼠体重增长缓慢,至治疗三周末,AD-MSCs组小鼠体重与生理盐水组相比有显著差异(*P<0.05),见图14。
分离DIO小鼠腹部皮下脂肪组织进行HE染色,结果发现,DIO小鼠脂肪细胞过度膨大,单个细胞体积明显大于正常C57BL/6J小鼠(Normal组),且细胞周围有较明显的炎性细胞浸润(花冠样结构);经AD-MSCs治疗后,小鼠脂肪细胞体积显著减小,炎症减轻;UC-MSCs治疗则没有明显缩小脂肪细胞的作用,见图15。
6.3MSCs移植可降低DIO小鼠肝脏脂肪病变
将小鼠解剖后发现,DIO小鼠腹部堆积了大量脂肪,肝脏体积增大,边缘变钝,颜色呈黄褐色,可见表面白色斑点;经AD-MSCs治疗的小鼠肝脏呈鲜红色,边缘锐利,表面光滑,接近正常组;UC-MSCs治疗组肝脏颜色及形态介于两者之间,见图16。
6.4AD-MSCs移植可降低DIO小鼠血脂水平
分析各实验组小鼠血清生化指标发现,DIO小鼠血清中总胆固醇(CHOL)、总甘油三脂(TG)等脂类物质水平均明显高于正常对照组,血清游离脂肪酸(NEFA)变化不大;而AD-MSCs治疗后的小鼠血清中CHOL及TG水平显著降低(*P<0.05),UC-MSCs治疗组与未治疗组相比没有显著差异,见图17。
六、结论
1、AD-MSCs移植显著降低了db/db小鼠体重及脂肪重量,减小小鼠脂肪细胞的体积,同时,减轻了小鼠血清中总胆固醇、总甘油三酯及低密度脂蛋白水平。另外,AD-MSCs治疗组小鼠脂肪组织中S1P受体1-4与未治疗组相比显著升高,提示AD-MSCs可能参与鞘磷脂代谢调节,并在饮食诱导肥胖小鼠模型中得到验证。与之相比,UC-MSCs对db/db小鼠脂代谢没有显著的调节能力,通过Westernblot分析发现,AD-MSCs治疗后的小鼠脂肪组织AMPK信号通路中的AMPK1表达水平及其磷酸化水平显著升高,而参与脂肪合成的关键酶ACC1表达水平下降,同时参与脂肪分解的HSL表达及磷酸化水平显著升高。AMPK信号通路是细胞和机体能量代谢的主要调节器,控制产能的分解与合成代谢通路,保证细胞能量的供应。其活性主要受细胞中AMP∶ATP及ADP∶ATP比值的调节,当机体能量缺乏或ATP快速消耗时,可活化AMPK信号通路,表现为AMPK表达水平及磷酸化水平升高。AMPK活化后可使下游底物分子ACC1磷酸化而抑制ACC1活性,或下调ACC1表达水平从而抑制脂肪合成。HSL也是AMPK的重要作用底物,活化的AMPK可促进HSL Ser-565磷酸化从而活化HSL酶活性。HSL是激素敏感性甘油三酯脂肪酶,是脂肪分解的关键酶,可催化甘油三酯分解为甘油和游离脂肪酸。其表达水平及活性受复杂的级联反应机制调节,肾上腺素及胰高血糖素等可使HSL磷酸化从而活化HSL酶活性,而糖皮质激素及甲状腺素等则可使HSL去磷酸化。HSL表达水平及活化状态在肥胖患者脂肪内受到抑制。AD-MSCs来源于脂肪,其对高脂状态具有较好的耐受能力,同时可在高糖高脂状态下上调或下调很多基因的表达,从而对高脂环境进行调节。AD-MSCs的移植可通过活化AMPK等相关信号通路而活化HSL及抑制ACC1活性,从而促进脂肪分解、抑制脂肪合成,降低脂肪储存。
2、MSCs的移植显著减轻了db/db小鼠肝脏严重的脂肪样变,降低了肝纤维化程度并恢复了肝脏的肝索结构,减少了炎性细胞浸润,同时,降低了小鼠血清中转氨酶及碱性磷酸酶水平,改善了小鼠肝脏状态。
3、MSCs移植降低了db/db小鼠血清中炎症因子表达水平,改善了小鼠代谢性炎症状态。
综上所述,与UC-MSCs相比,AD-MSCs在db/db小鼠模型治疗中可显著降低小鼠体重,改善脂代谢异常状态,为治疗肥胖提供了有效途径。
Claims (3)
1.一种脂肪间充质干细胞在制备降脂药物方面的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述脂肪间充质干细胞来源于健康成人的脂肪组织,并采用混合胶原酶消化法分离培养取得。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述降脂包括降低血脂含量、减轻体重和/或改善脂代谢异常。
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Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113730439A (zh) * | 2021-09-09 | 2021-12-03 | 陕西中鸿瑞康健康管理有限公司 | 能降低甘油三酯的干细胞因子冻干粉及其制备方法和应用 |
CN114507638B (zh) * | 2021-12-31 | 2024-01-02 | 浙江大学 | 一种抑制间充质干细胞衰老的优化培养基及其应用 |
CN115109161B (zh) * | 2022-06-28 | 2023-08-11 | 广东赛尔生物科技有限公司 | 含有间充质干细胞的减肥药物组合物 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2008036374A3 (en) * | 2006-09-21 | 2008-10-30 | Medistem Lab Inc | Allogeneic stem cell transplants in non-conditioned recipients |
WO2013085344A1 (ko) * | 2011-12-08 | 2013-06-13 | 아주대학교 산학협력단 | 중간엽줄기세포 렙틴분비능을 이용한 골다공증 예방 또는 치료용 물질 스크리닝 방법 |
CN103619342A (zh) * | 2011-05-19 | 2014-03-05 | 麦瑟布莱斯特公司 | 用于治疗肥胖症和/或代谢综合征的方法 |
CN103930542A (zh) * | 2011-06-29 | 2014-07-16 | 生物修复疗法有限公司 | 棕色脂肪细胞组合物及方法 |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20030170633A1 (en) * | 1998-06-12 | 2003-09-11 | Ronald Vogels | Adenoviral library assay for adipogenesis genes and methods and compositions for screening compounds |
-
2015
- 2015-01-23 CN CN201510033480.6A patent/CN104606230B/zh active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2008036374A3 (en) * | 2006-09-21 | 2008-10-30 | Medistem Lab Inc | Allogeneic stem cell transplants in non-conditioned recipients |
CN103619342A (zh) * | 2011-05-19 | 2014-03-05 | 麦瑟布莱斯特公司 | 用于治疗肥胖症和/或代谢综合征的方法 |
CN103930542A (zh) * | 2011-06-29 | 2014-07-16 | 生物修复疗法有限公司 | 棕色脂肪细胞组合物及方法 |
WO2013085344A1 (ko) * | 2011-12-08 | 2013-06-13 | 아주대학교 산학협력단 | 중간엽줄기세포 렙틴분비능을 이용한 골다공증 예방 또는 치료용 물질 스크리닝 방법 |
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Publication number | Publication date |
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