CN104604849A - 一种免洗手消毒液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种免洗手消毒液及其制备方法，所述免洗手消毒液包括如下比例的组分：三氯羟基二苯醚4.5g/L～5.5g/L、复合醇50％～60％、酸性增效剂15g/L～20g/L、甘油0.95％～1.05％和余量为去离子水，所述复合醇、所述甘油和所述去离子水的比例为体积分数。通过将各组分混合即可制备得到，可在1分钟内杀灭病毒，在30秒内能杀灭肠道致病菌、化脓性球菌、致病性酵母菌和医院感染常见致病菌，对手部皮肤的无刺激性、无毒副作用和无过敏反应，使用方便、适用范围广，是防控各类传染病的重要手段。

Description

一种免洗手消毒液及其制备方法

技术领域

本发明属于抗菌消毒领域，具体涉及一种免洗手消毒液及其制备方法。

背景技术

在过去几十年已发现的人类致病微生物中，病毒一直占有显著地位。在人类传染病中70％以上是由病毒引起的，即病毒性传染病。病毒性传染病的爆发即使是比较轻微的也会给民众带来严重的影响。目前，天花、小儿麻痹等传染病已先后被有效的疫苗所根除；甲乙型肝炎等已得到控制；原定2012年彻底消除麻疹，但是目前麻疹的发病率依然很高；新的更加严重的传染病，如：艾滋病、疯牛病、克雅病、SARS、手足口病(2007年列为法定传染病)、禽流感、甲型H₁N₁流感、H₇N₉流感的暴发流行，其涉及面广、传染性强。因此，病毒性传染病的防控是人类所面临的重大而迫切的问题。

近年来，病毒性传染病的发病率呈升高趋势，其流行的危害性，不仅表现在对人们健康的影响上，更重要的是由于大多数具有感染性的病毒在人群中确切的传播机制还不清楚，且尚未发现治疗病毒性疾病的特效药物，疫苗的研究生产又相对滞后，使设计和制定适合的预防和控制病毒传播的措施还很困难。因此，普遍认为通过消毒切断病毒的传播途径和保护易感人群是防控病毒性传染病的重要手段。

目前，国内外应用于手和皮肤消毒剂都是一些中低效消毒剂，如氯己定、醇类、醚类和季铵盐等，这些消毒剂经复方配合，对GB 27950-2011《手消毒剂通用技术要求》中手和皮肤消毒的代表菌株(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌和自然菌)都有很好的杀灭效果，但对以脊髓灰质炎病毒为代表的病毒的杀灭效果很差。而可用于灭活病毒的含氯消毒剂、过氧化物类消毒剂和醛类消毒剂由于其刺激性或致畸性不能用于手和皮肤消毒。GB 27950-2011《手消毒剂通用技术要求》还规定了手消毒剂的有效成分限量，标准规定禁止使用各种处方药成分如抗生素、抗真菌药物、激素等和卫生行政部门规定的禁用物质。碘伏应用液中有效成分含量≤500mg/L，葡萄糖酸氯己定或醋酸氯己定应用液中有效成分总量≤5000mg/L，三氯羟基二苯醚消毒剂应用液中有效成分总量≤3500mg/L，苯扎溴胺或苯扎氯铵消毒剂应用液中有效成分总量≤2000mg/L。这些手消毒剂一般能达到3分钟内杀灭细菌的效果，但对抗力较强的微生物(如消毒指标病毒——脊髓灰质炎病毒)则较难达到杀灭效果，即使延长作用时间也很难取得效果。因此研究一种能用于杀灭病毒的手消毒剂一直是国内外研究的一个难点。尤其是对于目前的埃博拉疫情的防控，研制出能灭活病毒的用于手部消毒的系列消毒产品，能在1分钟内杀灭脊髓灰质炎病毒，对于控制病毒的传播，防控病毒性传染病，保护易感人群和医务工作人员，有很重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种免洗手消毒液及其制备方法，该免洗手消毒液对手部皮肤无刺激和无毒副作用，并且对病毒和细菌具有灭活作用。

本发明所提供的免洗手消毒液包括如下比例的组分：

本发明所提供的免洗手消毒液优选为包括如下比例的组分：

其中，所述复合醇为乙醇和异丙醇按体积比为(4-9)：1混合所得混合物，所述酸性增效剂为乳酸、磷酸和柠檬酸按质量为1：1：(1-2)混合所得混合物。

上述免洗手消毒液中，所述复合醇中乙醇和异丙醇的体积比具体可为9：1或4：1。

所述酸性增效剂中乳酸、磷酸和柠檬酸体积比具体可为1：1：1或1：1：2。

所述三氯羟基二苯醚的化学名称为2,4,4’-三氯-2’-羟基二苯醚，分子量289.5。

所述甘油的化学名称1,2,3-丙三醇，分子量92.09。

上述免洗手消毒液中，所述复合醇、所述甘油和所述去离子水的比例为体积分数。

本发明所提供的免洗手消毒液的制备方法包括如下步骤：将所述三氯羟基二苯醚、复合醇、酸性增效剂、甘油和去离子水按所述比例搅拌混合均匀后即可制备得到所述免洗手消毒液。

上述制备方法中，具体可采用如下制备方法：按所述比例，将乙醇和异丙醇混合，制成复合醇，然后将三氯羟基二苯醚溶于复合醇中，搅拌均匀溶解后，加入甘油、酸性增效剂并使其溶解混匀，然后缓慢加入去离子水，混匀即可制备得到所述免洗手消毒液。

上述制备方法中，还包括对所述免洗手消毒液进行分装的步骤，具体如下：向已洗净、晾干后的白色避光聚乙烯瓶加入所述免洗手消毒液，按照规格进行分装入盒，并置于阴凉干燥处保存。

本发明所述的抗病毒免洗手消毒液清澈透明，可以在1分钟内杀灭病毒(所述病毒包含有包膜和无包膜病毒，如：指标毒株-脊髓灰质炎病毒)，在30秒内能杀灭肠道致病菌、化脓性球菌、致病性酵母菌和医院感染常见致病菌对手部皮肤的无刺激性、无毒副作用和无过敏反应。本发明作用快速和能持续杀死致病微生物，同时具有稳定、安全和无刺激的优点，使用方便和适用范围广，是防控各类传染病的重要手段，而且制备工艺简单，适合大规模生产。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明的方法进行说明，但本发明并不局限于此，凡在本发明的精神和原则之内所做的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

实施例1、本发明所述的抗病毒免洗手消毒液，有如下比例的组分加工制成：

所述复合醇为乙醇和异丙醇按体积比9:1混合后所得混合物；所述酸性增效剂为乳酸、磷酸和柠檬酸按体积比为1:1:2混合后所得混合物。

按上述比例组分进行制备：先称取三氯羟基二苯醚，溶于复合醇中，搅拌均匀后加入甘油和酸性增效剂，再加去离子水即可配制得到。

实施例2、本发明所述的抗病毒免洗手消毒液，有如下比例的组分加工制成：

所述复合醇为乙醇和异丙醇按体积比4:1混合后所得混合物；所述酸性增效剂为乳酸、磷酸和柠檬酸按体积比为1:1:1混合后所得混合物。

按上述比例组分进行制备：先称取三氯羟基二苯醚，溶于复合醇中，搅拌均匀后加入甘油和酸性增效剂。然后加去离子水即可配制得到。

实施例3、抗病毒免洗手消毒液的评价试验

本发明所述的消毒剂依据《消毒技术规范》(2002年版)进行了理化性能鉴定、微生物杀灭效果试验、现场试验、安全性评价以及同类产品微生物杀灭效果比较。

试验一、以下为本发明实施例1的消毒剂杀灭病毒的试验研究

一、试验材料：

1)实验病毒株及其敏感细胞：以下病毒和细胞均由军事医学科学院消毒检测中心提供：

脊髓灰质炎病毒I型(PV-I)疫苗株和Vero细胞；

流感病毒(H₃N₂)疫苗株和白壳鸡胚；

EV71病毒和Vero细胞；

脊髓灰质炎病毒I型(PV-I)疫苗株：参考文献：彭明军、张天宝、黄晓波、彭长华、郑立国、江永忠；一种复方季铵盐消毒液消毒效果与毒性评价；《公共卫生与预防医学》2005年第06期；

流感病毒(H₃N₂)疫苗株：参考文献：赵斌秀、王妍彦、何维英、高荣梅、李炎、李新武；酸性氧化电位水对三种病毒灭活效果及有机物影响的研究；《中国消毒学杂志》2010年07期；

EV71病毒：参考文献：梁英、怀清杰、张炳丽、梁爽、任莉娜、范荣军、李晓鹏；两种检测方法对EV71病毒监测结果的影响研究；《中国卫生检验杂志》2010年07期。

2)主要试剂和培养基：

中和剂：含3.0g/L卵磷脂和3％(V/V)吐温-80的磷酸盐缓冲液(PBS，0.03mol/L，pH＝7.2)；

稀释液：胰蛋白胨生理盐水溶液(TPS)(含0.1％胰蛋白胨的生理盐水)；

有机干扰物(BSA)：3.0％牛血清白蛋白；

细胞消化液：1:250胰蛋白酶(1.0g胰蛋白酶、25ml体积分数为0.02％的乙二胺四乙酸二钠水溶液和225ml D-Hanks液)；

细胞维持培养基：含10％胎牛血清的DMEM高糖培养基；

白壳鸡胚。

二、试验方法：

试验依据：卫生部《消毒技术规范》2002.11,第2.1.1.10.5条和2.1.1.10.7条。

1)病毒的中和鉴定试验：依据以脊髓灰质炎病毒I型(PV-I)疫苗株、流感病毒(H3N2)和EV71病毒为代表，实施例1中制备的抗病毒免洗手消毒液和中和剂原液使用，作用0.5min进行实验。试验分6组，第1组为抗病毒免洗手消毒剂+病毒悬液，作用一定时间后接种培养；第2组为抗病毒免洗手消毒剂+病毒悬液，作用一定时间后，吸取混合液，加入中和剂中接种培养；第3组、第4组和第5组分别为用中和剂、中和产物和TPS对病毒悬液系列稀释后接种培养。试验结果以第1组和第2组无试验病毒或仅有少量病毒生长，但较第3、4、5组显著少，第3、4、5组病毒生长与原接种量相近，其组间误差不超过15％，第6组无病毒生长，细胞生长正常，试验重复3次，结果一致，为所选中和剂及其浓度适宜。

2)病毒灭活试验：取滴度为10⁸TCID₅₀的脊髓灰质炎病毒I型(PV-I)疫苗株、(流感病毒(H₃N₂)或EV71病毒0.1ml和0.1ml 30g/L小牛血清白蛋白混合，置于20℃恒温控制器上5min，加入0.8ml抗病毒免洗手消毒液混合均匀，分别作用0.5min、1.0min和1.5min后，再分别取出0.1ml加到含有0.9ml中和剂的小试管中，中和作用10min。脊髓灰质炎病毒和EV71病毒灭活试验取中和后样液接种Vero细胞，置于37℃，5％CO₂培养箱培养，观察并记录细胞病变情况，计算半数细胞感染剂量(TCID₅₀)。流感病毒(H₃N₂)灭活试验取中和后样液接种白壳鸡胚，检测血凝滴度的变化。以标准硬水代替消毒剂溶液作为阳性对照组。以本次试验所用的中和剂、稀释液和培养基作为阴性对照组。

三、实验结果：

1)病毒中和剂鉴定试验：

试验采用中和稀释法，试验温度为20℃±1℃。试验重复3次。中和剂成分及浓度为含3g/L卵磷脂和3.0％(V/V)吐温-80的PBS溶液。实验结果表明：所用中和剂可有效中和消毒液的作用，且中和剂和中和产物对脊髓灰质炎病毒(PV-1)、流感病毒(H₃N₂)、EV71病毒、宿主细胞和鸡胚的生长基本无影响(如表1所示)。

表1 中和剂鉴定实验结果

注：抗病毒免洗手消毒液为原液，作用时间0.5min。

2)免洗手消毒液对病毒的灭活效果：

在试验温度为20℃±1℃条件下，抗病毒免洗手消毒液作用1min，对脊髓灰质炎病毒(PV-1)、流感病毒(H₃N₂)和EV71病毒的平均杀灭对数值均>4.00。试验重复3次(如表2所示)。

表2 抗病毒免洗手消毒液对不同病毒的杀灭效果

3)免洗手消毒液与国内外同类消毒剂对脊髓灰质炎病毒杀灭效果的对比研究

在试验温度20℃±1℃条件下，经3次重复实验，本发明所述的抗病毒免洗手消毒液原液作用1.0min，对脊髓灰质炎病毒的平均灭活对数值>4.00；其他同类消毒剂作用1.0min，对脊髓灰质炎病毒的平均灭活对数值全部≤2.00(如表3所示)，其中，本发明所制备的免洗手消毒液，国内1为洗得宝牌免洗手消毒凝胶，购自北京洗得宝消毒制品有限公司，国内2为翰瑜康肤消毒液，购自山东诸城瀚海听瑜商贸有限公司，国外为3M^TM爱护佳^TM免洗外科手消毒液，购自3M中国有限公司。

表3 本发明与同类消毒剂对脊髓灰质炎病毒杀灭效果的对比结果

试验二、本发明实施例2的消毒剂杀灭细菌和真菌的试验研究

一、试验材料：

1)实验菌株：

金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)；

绿脓杆菌(ATCC 15442)；

大肠杆菌(8099)；由军事医学科学院消毒检测中心提供，参考文献：刘秀岩、孙守红、李新武、张流波、袁洽劻；两株大肠杆菌对消毒剂及冷热抗力的试验比较；《中国消毒学杂志》2002年02期；

白色念珠菌(ATCC 10231)。

2)主要试剂和培养基：

磷酸盐缓冲液(PBS，0.03mol/L，pH＝7.2)；

稀释液：胰蛋白胨生理盐水溶液(TPS)；

中和剂溶液：含3.0g/L卵磷脂和3％(V/V)吐温-80的磷酸盐缓冲液(PBS，0.03mol/L，pH＝7.2)；

有机干扰物(BSA)：3.0％牛血清白蛋白；

营养肉汤培养基；

固体营养琼脂培养基。

二、试验方法：

试验依据卫生部《消毒技术规范》2002.11，第2.1.1.5.5条和第2.1.1.7.4条。

1)细菌和真菌的中和鉴定试验：

细菌繁殖体以金黄色葡萄球菌ATCC 6538为代表，实施例2中的抗病毒免洗手消毒液原液用标准硬水8倍稀释，作用0.5min进行实验；

真菌以白色念珠菌ATCC 10231作代表，抗病毒免洗手消毒液和中和剂做4倍稀释，作用0.5min进行实验；

试验分6组，第1组为抗病毒免洗手消毒剂+菌液，作用一定时间后，吸取混合液，加入TPS中；第2组为抗病毒免洗手消毒剂+菌液，作用一定时间后，吸取混合液，加入中和剂中；第3组、第4组和第5组分别为用中和剂、中和产物和TPS对菌液系列稀释。试验结果以第1组无试验菌或仅有少量试验菌菌落生长，第2组较第1组为多但较第3、4、5组为少的试验菌菌落生长，第3、4、5组细菌生长菌落数相近，其组间误差不超过15％，第6组无菌生长，试验重复3次，结果一致，为所选中和剂及其浓度适宜；

2)细菌和真菌杀灭试验：吸取1.0ml含有机干扰物的试验菌悬液于试管内，置于20℃水浴5min后，再加入抗病毒免洗手消毒液4ml于试管内，分别作用0.5，1.0和1.5min后，再分别吸取样液0.5ml加入含4.5ml中和剂溶液的试管中。作用10min后，取样液1.0ml接种于平皿内，作活菌培养计数；以同样条件，吸取0.1ml含有机干扰物的试验菌悬液加入含4.9ml的稀释液的试管内，作用10min。用稀释液做10倍系列稀释，选适宜稀释度悬液接种于平皿内，作活菌培养计数，作为阳性对照组。

三、实验结果：

1)中和剂鉴定试验结果：

(1)细菌中和鉴定试验结果：

试验采用悬液定量法进行试验，金黄色葡萄球菌杀灭试验中和剂鉴定采用中和稀释法，试验温度为20℃±1℃，试验重复3次。

金黄色葡萄球菌中和剂鉴定试验结果表明：1组生长菌落数为0cfu/ml，2组平均为3318cfu/ml。3组、4组和5组菌落平均数分别为11650000cfu/ml，11170000cfu/ml和11650000cfu/ml，三组间误差率为1.86％。表明所用中和剂溶液可中和抗病毒免洗手消毒液，且中和剂溶液和中和产物溶液对金黄色葡萄球菌的生长基本无影响。

白色念珠菌中和剂鉴定试验结果表明：1组生长菌落数为0cfu/ml，2组平均为287cfu/ml。3组、4组和5组菌落平均数分别为2600000cfu/ml，2440000cfu/ml和2653000cfu/ml，三组间误差率为3.25％。表明所用中和剂溶液可中和抗病毒免洗手消毒液，且中和剂溶液和中和产物溶液对白色念珠菌的生长基本无影响。

所用中和剂可有效中和抗病毒免洗手消毒液的作用，且中和剂和中和产物对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的生长基本无影响(如表4所示)。

表4 中和剂鉴定实验结果

(2)消毒试验结果：

在试验温度为20℃±1℃条件下，抗病毒免洗手消毒液作用1min，对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的平均杀灭对数值>5.00；对白色念珠菌的平均杀灭对数值>4.00。试验重复3次(如表5所示)。

表5 消毒液对不同细菌的杀灭效果

注：金黄色葡萄球菌阳性对照平均菌数为22000000cfu/ml；大肠杆菌阳性对照平均菌数为21430000cfu/ml；白色念珠菌阳性对照平均菌数为3830000cfu/ml。

试验三、本发明实施例1的消毒剂对手现场的试验研究：

一、试验方法：

消毒前，受试者双手相互搓擦后，五指并拢，用无菌棉拭子在含10ml稀释液的试管中沾湿，对其左手五指屈指面从指尖到指根往返涂擦2遍，以无菌操作方式将采样端剪入原稀释液试管内，作为阳性对照组。采样后，取抗病毒免洗手消毒液原液适量对手进行消毒处理，消毒作用1.0min后，用无菌棉拭子在含10ml中和剂溶液的试管中沾湿，对其右手用相同方法进行采样，作为消毒组。将对照组与消毒组样液充分敲打以适宜稀释度吸取1.0ml接种平皿，一式两份，各组接种平皿后倾注TSA培养基，冷凝后，连同未接种的试验用培养基平板一起置于37℃培养箱内培养48h，计数存活菌落数，计算杀灭对数值。

二、试验结果：

经30个样本试验证明，消毒液作用1min，对手表面自然菌平均杀灭对数值＞1.00(具体平均杀灭对数值＞2.72)，以>1.00判断为消毒试验合格(如表6所示)。

表6 消毒液对手消毒现场试验结果

注：阴性对照无菌生长。

试验四、本发明实施例1的抗病毒免洗手消毒液安全性评价的试验研究结果：

一、小鼠急性经口毒性试验：本研究所配制的抗病毒免洗手消毒液经口试验LD₅₀值>5000mg/kg(体重)，毒性分级属实际无毒；

二、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验：本研究所配制的抗病毒免洗手消毒液对小鼠骨髓嗜多染红细胞无致微核作用；

三、多次皮肤刺激试验：本研究所配制的抗病毒免洗手消毒液作用于家兔破损皮肤4h，总积分平均值为0，皮肤刺激指数<0.5，刺激强度属无刺激性。

Claims (4)

1.一种免洗手消毒液，包括如下比例的组分：

其中，所述复合醇为乙醇和异丙醇按体积比为(4-9)：1混合所得混合物，所述酸性增效剂为乳酸、磷酸和柠檬酸按体积比为1：1：(1-2)混合所得混合物，所述复合醇、所述甘油和所述去离子水的比例为体积分数。

2.根据权利要求1所述的免洗手消毒液，其特征在于：包括如下比例的组分：

3.权利要求1或2所述的免洗手消毒液的制备方法，包括如下步骤：将所述三氯羟基二苯醚、复合醇、酸性增效剂、甘油和去离子水按权利要求1或2所述比例搅拌混合均匀后，即可制备得到所述免洗手消毒液。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：按权利要求1或2所述比例，将三氯羟基二苯醚溶于所述复合醇中，搅拌均匀后，加入甘油、酸性增效剂和去离子水，即可制备得到所述免洗手消毒液。