CN104585750B - 一种抗四氧化二氮应激的食品及制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种抗四氧化二氮应激的食品及制备方法,涉及抗应激技术领域。本发明以重量比计,称取制得的姜黄素纳米脂质体1.5~3份,制得的金属硫蛋白脂质体2~3.8份,制得的强还原性葡多酚3.2~5.9份,制得的鱼腥草提取物0.1~1.6份均匀混合,得到本产品。本发明减少四氧化二氮吸入导致的肺组织损伤,抗应激效果好。
Description
技术领域
本发明涉及抗应激技术领域,具体涉及一种抗四氧化二氮应激的食品及制备方法。
背景技术
火箭液体推进剂四氧化二氮(N2O4)是目前国内外大型运载火箭及导弹应用的主要液体推进剂之一,在军事和航天领域有广泛的应用。N2O4主要以气态二氧化氮(NO2)形式存在,它是一种氧化剂,属于中等毒性物质,主要通过呼吸道吸入中毒,损伤呼吸道,引起肺水肿和化学性肺炎,还可使血管扩张,血压下降,中枢神经和心肌受损。N2O4通过各种途径进入体内,均可使机体的血红蛋白变成高铁血红蛋白。体内高铁血红蛋白含量达15%以上时,即出现紫绀。
由于N2O4的防治多涉及航天和军事领域的敏感问题,故国外少有文献报道。国内研究大剂量N2O4急性损伤情况下应用亚甲兰、山莨菪碱静脉注射、碳酸氢钠、氨茶碱等雾化吸入,以及糖皮质激素、地塞米松、强的松及抗生素等药物治疗;以及研究经口给予维生素E、维生素C、精氨酸、N-乙酰半胱氨酸、螺旋藻及蛋白质等天然活性成分或食物资源进行防护,但这些研究多集中于单一成分的抗氧化或营养支持,作用效果有限,无法有效解决N2O4将血红蛋白氧化变成高铁血红蛋白,导致血红蛋白输氧能力显著下降,造成的机体组织细胞缺氧等问题,另一方面没有有效清除N2O4导致的化学性炎症问题。
发明内容
针对现有技术中存在的缺陷,本发明的目的在于提供一种抗四氧化二氮应激的食品及制备方法,减少四氧化二氮吸入导致的肺组织损伤,抗应激效果好。
为达到以上目的,本发明采取的技术方案是:一种抗四氧化二氮应激的食品,以重量比计,包括以下组分:
在上述技术方案的基础上,以重量比计,包括以下组分:
在上述技术方案的基础上,以质量百分比计,所述姜黄素纳米脂质体的姜黄素含量为3.5%~4.5%。
在上述技术方案的基础上,所述金属硫蛋白脂质体的粒径为210~280nm,以质量百分比计,金属硫蛋白脂质体的金属硫蛋白含量为2.3%。
在上述技术方案的基础上,以质量百分比计,所述强还原性葡多酚的葡多酚含量为68%。
在上述技术方案的基础上,以质量百分比计,所述鱼腥草提取物的鱼腥草素含量为10.6%。
一种抗四氧化二氮应激的食品的制备方法,包括以下步骤:
按重量比计,取1份姜黄素、16份脂质、4份脱氧胆酸钠和1份吐温-80,均匀混合得到复配溶液;按体积比计,取1份复配溶液与1.5~4份浓度为30%~60%的甘露醇溶液,混合均匀后,加入超声仪内进行乳化,得到乳化溶液;干燥乳化溶液,得到姜黄素纳米脂质体;
按重量比计,取5份磷脂及1胆固醇均匀混合得到脂质;按重量比计,取15份脂质、4份胆酸钠、4份吐温-80及1份金属硫蛋白,充分混合的混合物;将上述混合物滴注到甘露醇溶液中,高速分散均质后,冷冻干燥,制得金属硫蛋白脂质体;
在氮气流保护下将葡萄籽粉碎,迅速加入石油醚脱脂,真空抽干,并加入含水的乙酸乙酯提取、过滤,真空干燥包装,制得强还原性葡多酚;
按重量比称取10份鱼腥草于烧杯中,加入280份浓度为60%的乙醇,置于恒温磁力搅拌器中于60℃下加热提取60min,得提取液;将提取液进行真空过滤后,转入旋转蒸发器内进行真空加热蒸发,得到浓缩液;待浓缩液冷却后,进行二次真空过滤,最后对过滤后的浓缩液进行干燥,得到鱼腥草提取物;
按重量比称取所述制得的姜黄素纳米脂质体1.5~3份,制得的金属硫蛋白脂质体2~3.8份,制得的强还原性葡多酚3.2~5.9份,制得的鱼腥草提取物0.1~1.6份均匀混合,在符合GMP洁净条件下造粒,得到抗四氧化二氮应激的食品。
本发明的有益效果在于:
1、本发明产品以重量比计,包括1.5~3份姜黄素纳米脂质体,2~3.8份金属硫蛋白脂质体,3.2~5.9份强还原性葡多酚,0.1~1.6份鱼腥草提取物,根据氧化应激在肺损伤发病机制中的作用,补充外源性抗氧化剂葡多酚,利用葡多酚的强还原性,与四氧化二氮及其降解产物—氮氧化物结合,降低四氧化二氮的氧化损伤;利用金属硫蛋白的解毒作用,解除四氧化二氮降解产物的毒害;针对四氧化二氮导致的组织炎症,利用姜黄素的抗炎效应,使炎症得到有效消除;结合中医药理研究和临床应用,利用鱼腥草清热解毒、消痈排脓、利尿通淋功效,解除四氧化二氮导致的肺热、血毒。也就是综合利用葡多酚的抗氧化、姜黄素的抗化学炎症、金属硫蛋白的解毒、以及鱼腥草的清热解表作用,达到抗四氧化二氮应激的效果。
2、本发明制备强还原性葡多酚过程中,采用氮气流保护提取与真空干燥结合工艺,有效保证了葡多酚的酚羟基的强还原性,与现有技术制备的普通商品葡多酚相比,能够显著降低四氧化二氮的氧化损伤。
3、本发明产品包括粒径为210~280nm的金属硫蛋白脂质体,能够提高金属硫蛋白的作用效果,与现有技术直接使用金属硫蛋白相比,能够更有效提高染毒小鼠体内过氧化脂质的含量。
4、本发明产品包括粒径为110~160nm的姜黄素纳米脂质体,姜黄素纳米脂质体能够穿透细胞膜,使姜黄素容易进入细胞内部,与现有技术直接使用姜黄素相比,能够有效地提高姜黄素的组织穿透性,提高姜黄素的生物利用度,更显著地提高染毒小鼠肺组织抗氧化酶的含量。
5、本发明产品,属于营养防护治疗,与药物治疗相比较,不仅效果显著,而且更具安全性、持久性、经济性等方面的优势。
具体实施方式
一种抗四氧化二氮应激的食品,其特征在于,以重量比计,包括以下组分:姜黄素纳米脂质体1.5~3份,金属硫蛋白脂质体2~3.8份,强还原性葡多酚3.2~5.9份,鱼腥草提取物0.1~1.6份。
其中,姜黄素具有良好的抗氧化、抗炎作用,但姜黄素水溶性差,吸收性和生物利用度较低。为了提高姜黄素的生物利用度,提高靶向性,本发明将姜黄素制备成姜黄素纳米脂质体。具体制备过程为:按重量比计,取5份卵磷脂与1份植物甾醇,均匀混合得到脂质;按重量比计,取1份姜黄素、16份脂质、4份脱氧胆酸钠和1份吐温-80(聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯),均匀混合得到复配溶液;按体积比计,取1份复配溶液与1.5~4份浓度为30%~60%的甘露醇溶液,混合均匀后,加入超声仪内进行乳化,得到乳化溶液;上述乳化溶液制备成粒径为110~160nm的姜黄素纳米脂质体颗粒,以质量百分比计,姜黄素纳米脂质体颗粒中的姜黄素含量为3.5%~4.5%。
金属硫蛋白(MT)是对多种活性氧和活性氮所致氧化损伤的潜在抗氧化剂。MT中富含半胱氨酸的巯基,清除羟基自由基能力是谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的100倍,为超氧化物歧化酶(SOD)的1000倍。MT的抗氧化作用除表现为能直接清除羟自由基外,还能显著提高SOD、GSH-Px的活性,从而具有解毒功能。金属硫蛋白具有一般蛋白质的共同属性,人体摄入后,部分经过胃肠道酸、酶的变性或降解,导致功效下降。本发明采用滴注法将金属硫蛋白制备成金属硫蛋白脂质体,具体制备过程为:按重量比计,取5份磷脂及1胆固醇均匀混合得到脂质;按重量比计,取15份脂质、4份胆酸钠、4份吐温-80及1份金属硫蛋白,充分混合的混合物;将上述混合物滴注到甘露醇溶液中,高速分散均质后,冷冻干燥,即制得金属硫蛋白脂质体,所述金属硫蛋白脂质体的粒径为210~280nm,以质量百分比计,金属硫蛋白脂质体的金属硫蛋白含量为2.3%。
葡多酚极易被空气中氧气所氧化,而且葡多酚氧化程度越高,其抗氧化效果越差。目前葡多酚的提取纯化等工业化生产过程中,未能很好隔绝氧气,酚羟基容易遭到氧化,得到的葡多酚产品抗氧化效果一般。本发明强还原性葡多酚的制备过程为:在氮气流保护下将葡萄籽粉碎,迅速加入石油醚脱脂,真空抽干,并加入含水的乙酸乙酯(其中,水的质量分数为8%)提取、过滤,真空干燥包装,制得强还原性葡多酚,以质量百分比计,所述强还原性葡多酚的葡多酚的含量为68%。
鱼腥草是常用中草药之一,鱼腥草中的有效成分是癸酰乙醛(鱼腥草素)和甲基正壬酮,中医药理研究和临床应用表明,其生物活性较高,具有清热解毒、消痈排脓、利尿通淋等功效。N2O4主要以气态二氧化氮(NO2)形式损伤呼吸道,引起肺部炎症,从中医辨证角度,鱼腥草的清热润肺作用有利于炎症的消除。本发明鱼腥草提取物的制备方法:称取10g干燥粉碎后的鱼腥草于烧杯中,按固液比1:28加入浓度为60%的乙醇280g,置于恒温磁力搅拌器中于60℃下加热提取60min,得提取液,将提取液进行真空过滤后转入旋转蒸发器内进行真空加热蒸发,得到浓缩液,待浓缩液冷却后,进行二次真空过滤,最后对过滤后的浓缩液进行干燥,得到鱼腥草提取物。以癸酰乙醛亚硫酸氢钠为标准品作对照,分光光度比色法测定,以质量百分比计,所述鱼腥草提取物中鱼腥草素含量10.6%。
一种抗四氧化二氮应激的食品的制备方法,按以下过程实施:按重量比称取所述制得的姜黄素纳米脂质体1.5~3份,制得的金属硫蛋白脂质体2~3.8份,制得的强还原性葡多酚3.2~5.9份,制得的鱼腥草提取物0.1~1.6份均匀混合,在符合GMP洁净条件下造粒,得到抗四氧化二氮应激的食品。
以下结合实施例对本发明作进一步详细说明。
实施例1:
按重量比计,取1.5~2.0份姜黄素纳米脂质体、2.0~2.6份金属硫蛋白脂质体、3.2~4.1份强还原葡多酚和0.1~0.6份鱼腥草提取物均匀混合造粒,得到一种抗四氧化二氮应激的食品。
实施例2:
按重量比计,取1.5~2.0份姜黄素纳米脂质体、2.6~3.2份金属硫蛋白脂质体、4.1~5.0份强还原葡多酚和0.6~1.1份鱼腥草提取物均匀混合造粒,得到一种抗四氧化二氮应激的食品。
实施例3:
按重量比计,取1.5~2.0份姜黄素纳米脂质体、3.2~3.8份金属硫蛋白脂质体、5.0~5.9份强还原葡多酚和1.1~1.6份鱼腥草提取物均匀混合造粒,得到一种抗四氧化二氮应激的食品。
实施例4:
按重量比计,取2.0~2.5份姜黄素纳米脂质体、2.0~2.6份金属硫蛋白脂质体、4.1~5.0份强还原葡多酚和1.1~1.6份鱼腥草提取物均匀混合造粒,得到一种抗四氧化二氮应激的食品。
实施例5:
按重量比计,取2.0~2.5份姜黄素纳米脂质体、2.6~3.2份金属硫蛋白脂质体、5.0~5.9份强还原葡多酚和0.1~0.6份鱼腥草提取物均匀混合造粒,得到一种抗四氧化二氮应激的食品。
实施例6:
按重量比计,取2.5~3.0份姜黄素纳米脂质体、3.2~3.8份金属硫蛋白脂质体、3.2~4.1份强还原葡多酚和0.6~1.1份鱼腥草提取物均匀混合造粒,得到一种抗四氧化二氮应激的食品。
实施例7:
按重量比计,将2.5~3.0份姜黄素纳米脂质体、2.0~2.6份金属硫蛋白脂质体、5.0~5.9份强还原葡多酚和0.6~1.1份鱼腥草提取物均匀混合造粒,得到一种抗四氧化二氮应激的食品。
实施例8:
按重量比计,将2.5~3.0份姜黄素纳米脂质体、2.0~2.6份金属硫蛋白脂质体、5.0~5.9份强还原葡多酚和0.6~1.1份鱼腥草提取物均匀混合造粒,得到一种抗四氧化二氮应激的食品。
实施例9:
按重量比计,将2.5~3.0份姜黄素纳米脂质体、3.2~3.8份金属硫蛋白脂质体、4.1~5.0份强还原葡多酚和0.1~0.6份鱼腥草提取物均匀混合造粒,得到一种抗四氧化二氮应激的食品。
测试项目及结果:
动物品种及来源:ICR的SPF级小鼠,每只小鼠的重量均为18~22g,由北京大学医学部实验动物科学部提供,实验动物使用许可证号:SYXK(京)2006-0025;实验温度22-23℃,湿度60%-70%。
按照采用120升密封静式染毒柜,加入45μL汽化N2O4内饲养的小鼠作为染毒小鼠,将所有染毒小鼠分配为金属硫蛋白测试组、金属硫蛋白脂质体测试组、姜黄素测试组、姜黄素脂质体测试组、商品葡多酚测试组、强还原性葡多酚测试组和添加剂测试组,所有测试组均设置相应的正常组和单纯染毒组。
一、抗应激效果测试
1、测试金属硫蛋白和金属硫蛋白脂质体的抗应激效果
将金属硫蛋白测试组的染毒小鼠分为两组,对两组分别进行7天灌胃干预,分别每次按10mg/kg、30mg/kg金属硫蛋白灌胃;将金属硫蛋白脂质体测试组的染毒小鼠分为两组,对两组分别进行7天灌胃干预,分别每次用含10mg/kg、30mg/kg金属硫蛋白的金属硫蛋白脂质体灌胃。
7天后,取金属硫蛋白测试组、金属硫蛋白脂质体测试组的所有染毒小鼠的肺组织,采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定脂质过氧化产物MDA的水平,其结果如下表所示:
由上述数据可知,金属硫蛋白、金属硫蛋白脂质体均能显著降低染毒小鼠肺组织MDA的含量,较高剂量的金属硫蛋白、金属硫蛋白脂质体效果分别优于低剂量的金属硫蛋白、金属硫蛋白脂质体。金属硫蛋白脂质体升高染毒小鼠肺组织MDA含量方面,效果优于金属硫蛋白。
2、测试姜黄素和姜黄素脂质体的抗应激效果
将姜黄素测试组的染毒小鼠分为两组,对两组分别进行7天灌胃干预,一组每次均灌入浓度为75mg/kg的姜黄素,另一组每次均灌入浓度为150mg/kg的姜黄素。将姜黄素脂质体测试组的染毒小鼠分为两组,对两组染毒小鼠分别进行7天灌胃干预,一组每次均灌入含75mg/kg姜黄素的姜黄素脂质体,另一组每次均灌入含150mg/kg姜黄素的姜黄素脂质体。
7天后,取姜黄素测试组、姜黄素脂质体测试组的所有染毒小鼠的肺组织,制备成匀浆,分别采用黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统显色法,二硫代二硝基苯甲酸法,硫代巴比妥酸(TBA)法测定染毒小鼠肺组织中肺组织SOD、GSH-Px及脂质过氧化产物MDA的含量,其结果如下表所示:
注:(1)*:P<0.05vs正常组;△:P<0.05,△△:P<0.01vs单纯N2O4染毒组。
(2)N2O4损伤导致肺组织中脂质过氧化MDA含量下降。
由上述数据可知,姜黄素、姜黄素脂质体均能降低染毒小鼠肺组织的MDA含量,提高SOD、GSH-Px的含量,高剂量的姜黄素、姜黄素脂质体效果优于对应的低剂量姜黄素、姜黄素脂质体。姜黄素脂质体在降低染毒小鼠肺组织MDA的含量,提高SOD、GSH-Px的含量方面,效果优于姜黄素。
3、测试商品葡多酚和强还原性葡多酚的抗应激效果
将某商品葡多酚测试组的染毒小鼠分为两组,对两组分别进行7天灌胃干预,一组每次均灌入浓度为100mg/kg的商品葡多酚(纯度70%),另一组每次均灌入浓度为200mg/kg的商品葡多酚(纯度70%)。将强还原性葡多酚测试组的染毒小鼠分为两组,对两组染毒小鼠分别进行7天灌胃干预,一组每次均灌入等量强还原性葡多酚(100mg/kg),另一组每次均灌入等量强还原性葡多酚(200mg/kg)。
7天后,取某商品葡多酚测试组、强还原性葡多酚测试组的所有染毒小鼠的眼眶血浆,采上海试剂公司Elisa试剂盒测定染毒小鼠血浆高铁血红蛋白的含量,其结果如下表所示:
*与正常组比较;△与单纯染毒组比较
由上述数据可知,某商品葡多酚、强还原性葡多酚均能降低染毒小鼠高铁血红蛋白的含量。强还原性葡多酚在降低染毒小鼠血浆高铁血红蛋白的含量方面,效果显著优于商品葡多酚。
4、测试本抗应激的食品的抗应激效果
选用实施例1-9制得的产品,依次编号A1-A9,将添加剂测试组的染毒小鼠平均分为9组,对9组染毒小鼠分别进行7天灌胃干预,9组染毒小鼠分别灌入等量的A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、A8、A9。
7天后,取添加剂测试组的所有染毒小鼠,眼眶采血,测定高铁血红蛋白,并取肺组织,制备成匀浆,测定MDA、SOD的含量,,其结果如下表所示:
由上述数据可知,A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、A8、A9均能降低染毒小鼠体内血浆高铁血红蛋白含量,提高染毒小鼠肺组织MDA含量,SOD含量,其中,A5的效果最佳。
二、食品的安全性测试
1、将A5作为标准添加剂,对标准添加剂进行安全毒理测试。
选择10只初重为18.1±0.79g的雌性小鼠、10只初重为18.6±0.51g的雄性小鼠进行2周实验,每周对所有小鼠进行灌胃,每只小鼠的两周累计灌胃量均为10g/kg·BW(现有的人群推荐量为0.073g/Kg·BW)。下表为小鼠急性毒性试验结果:
由上表可以看出,标准添加剂属于实际无毒级药剂。
2、将A5作为标准添加剂,对标准添加剂进行遗传毒性测试。
选择30只雌性小鼠、30只雄性小鼠,按照5只雌性小鼠、5只雄性小鼠的比例将所有小鼠分为6组,向6组小鼠进行标准调节剂灌胃,灌胃量分别为0g/kg·BW、1.25g/kg·BW、2.5g/kg·BW、5.0g/kg·BW、10.0g/kg·BWA5作为标准添加剂、及腹腔注射0.06g/kg·BW的环磷酰胺(作为阳性对照组)。下表为受试物小鼠骨髓嗜多染红细胞数微核实验结果
由上表可以看出:服用不同浓度的标准添加剂的小鼠微核率无显著性差异,所有受试小鼠遗传毒性试验的结果均为阴性,标准添加剂没有导致小鼠微核率发生变化,标准添加剂比较安全。
3、标准添加剂受试物对雄性小鼠精子畸变的影响:
测试灌药量分别为0、2.5g/kg·BW、5.0g/kg·BW、10.0g/kg·BW、以及腹腔注射0.04g/kg·BW的环磷酰胺(作为阳性对照组)条件下,观察5000个精子中的畸形精子数量。结果见下表所示:
小鼠精子畸形试验表明:服用不同浓度的标准添加剂的小鼠精子畸形率无显著性差异,所有受试小鼠的精子畸形试验结果均为阴性,标准添加剂没有导致小鼠精子畸形率发生变化,标准添加剂比较安全。
4、标准添加剂受试物对大鼠体重和食物利用率的影响:
使用剂量为0g/kg·BW、2.22g/kg·BW、4.39g/kg·BW、8.98g/kg·BW的A5分别对大鼠进行喂食30天试验。观察并记录30天内所有大鼠的表现,得到30天内试验过程中大鼠无死亡,毛发正常,无异常行为表现。受试物对大鼠体重的影响见下表:
有上表可以看出:与对应阴性对照组相比,受试组大鼠的体重的P值均>0.05,无显著性差异,表明本发明实施例的标准添加剂比较安全。
受试物对大鼠食物利用率的影响结果见下表:
由上表可以看出:受试组大鼠对大鼠食物利用率的P值均>0.05,无显著性差异,表明本发明实施例的标准添加剂比较安全。
4、标准添加剂受试物对大鼠毒副作用的测试:
受试物对大鼠血常规检查结果的影响见下表:
受试物对大鼠白细胞分类的影响见下表:
由上表可以看出:所有受试组大鼠的血常规检查结果均在正常值范围内,表明本发明实施例的标准添加剂比较安全。
受试物对大鼠血液生化检查的影响见下表:
受试物对大鼠血液生化检查的影响见下表:
由上表可以看出:受试物对大鼠血液生化指标的影响,参见表12、13所示,与对应阴性对照组相比,所有受试组大鼠血清中的ALT(丙氨酸转氨酶)、AST(谷草转氨酶)、BUN(bloodureanitrogen,血尿素氮)、TG(甘油三酯)、CHO(总胆固醇)、CRE(血清肌酐)、GLU(血糖)、ALB(血清白蛋白)、TP(血清总蛋白)测定结果均在正常值范围内,表明本发明实施例的标准添加剂比较安全。
受试物对大鼠脏器重量及系数的影响见下表:
由上表可以看出,受试物各剂量组与阴性对照组比较,脏器重量及系数结果均在正常值范围内。
综上所述,本发明实施例的抗四氧化二氮应激的食品无毒副作用。
本发明不局限于上述实施方式,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也视为本发明的保护范围之内。本说明书中未作详细描述的内容属于本领域专业技术人员公知的现有技术。
Claims (7)
1.一种抗四氧化二氮应激的食品,其特征在于,以重量比计,包括以下组分:
2.如权利要求1所述的抗四氧化二氮应激的食品,其特征在于,以重量比计,包括以下组分:
3.如权利要求1所述的抗四氧化二氮应激的食品,其特征在于:以质量百分比计,所述姜黄素纳米脂质体的姜黄素含量为3.5%~4.5%。
4.如权利要求1所述的抗四氧化二氮应激的食品,其特征在于:所述金属硫蛋白脂质体的粒径为210~280nm,以质量百分比计,金属硫蛋白脂质体的金属硫蛋白含量为2.3%。
5.如权利要求1所述的抗四氧化二氮应激的食品,其特征在于:以质量百分比计,所述强还原性葡多酚的葡多酚含量为68%。
6.如权利要求1所述的抗四氧化二氮应激的食品,其特征在于:以质量百分比计,所述鱼腥草提取物的鱼腥草素含量为10.6%。
7.一种基于权利要求1所述的抗四氧化二氮应激的食品的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
按重量比计,取1份姜黄素、16份脂质、4份脱氧胆酸钠和1份吐温-80,均匀混合得到复配溶液;按体积比计,取1份复配溶液与1.5~4份浓度为30%~60%的甘露醇溶液,混合均匀后,加入超声仪内进行乳化,得到乳化溶液;干燥乳化溶液,得到姜黄素纳米脂质体;
按重量比计,取5份磷脂及1份胆固醇均匀混合得到脂质;按重量比计,取15份脂质、4份胆酸钠、4份吐温-80及1份金属硫蛋白,充分混合的混合物;将上述混合物滴注到甘露醇溶液中,高速分散均质后,冷冻干燥,制得金属硫蛋白脂质体;
在氮气流保护下将葡萄籽粉碎,迅速加入石油醚脱脂,真空抽干,并加入含水的乙酸乙酯提取、过滤,真空干燥包装,制得强还原性葡多酚;
按重量比称取10份鱼腥草于烧杯中,加入280份浓度为60%的乙醇,置于恒温磁力搅拌器中于60℃下加热提取60min,得提取液;将提取液进行真空过滤后,转入旋转蒸发器内进行真空加热蒸发,得到浓缩液;待浓缩液冷却后,进行二次真空过滤,最后对过滤后的浓缩液进行干燥,得到鱼腥草提取物;
按重量比称取所述制得的姜黄素纳米脂质体1.5~3份,制得的金属硫蛋白脂质体2~3.8份,制得的强还原性葡多酚3.2~5.9份,制得的鱼腥草提取物0.1~1.6份均匀混合,在符合GMP洁净条件下造粒,得到抗四氧化二氮应激的食品。
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