CN104523674A - 一种以奥沙利铂为主药成分的注射用组合物 - Google Patents

Abstract

本发明依据奥沙利铂原料药的降解特性，经过研究得到了稳定性大大提高的以奥沙利铂为主药成分的注射用组合物，并给出了制备工艺，将其进一步制备成注射剂。该注射液与已上市奥沙利铂注射液相比，显示出更好的稳定性，具体表现为含量下降较少，DACH和双羟基奥沙利铂以及其他总杂质增长明显少于已上市奥沙利铂注射液。该注射剂制备工艺简单，可采用常规制备方法生产，无需特殊设备，具有容易产业化、生产效率高、稳定性好、质量可控等显著优点。

Description

一种以奥沙利铂为主药成分的注射用组合物

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种以奥沙利铂为主药成分的注射用组合物及其制备方法和用途。

背景技术

结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一。在消化道肿瘤中，结直肠癌的发病率仅次于胃癌和食管癌而位居第三。全球结直肠癌每年新发病例数达94万，每年近50万人死于结直肠癌。结直肠癌死亡率居癌症死因第三位。

结直肠癌在我国也是最常见的恶性肿瘤之一，发病率呈明显上升趋势，从上世纪七十年代的万分之一上升到现在的万分之二至三，目前居恶性肿瘤发病率第四位。

经济发展越快的地区，结直肠癌的发病率越高，已居北京、上海癌症发病的第三位。结直肠癌发病与生活方式的改变及膳食结构不合理密切相关，同时发病年龄多在40岁以上，男性多于女性，近年来也有年轻化的趋势。预计在我国结直肠癌发病率上升的趋势还将进一步发展，目前西方国家的发病率是万分之五至六。

奥沙利铂(Oxaliplatin)，化学名称：顺式-[(1R,2R)-1,2-环己二胺-N,N’][草酸(2-)-O,O’]合铂。本品为白色或类白色结晶性粉末；无臭。本品在N，N’-二甲基甲酰胺中略溶，在水或甲醇中微溶，在氯仿或乙醚中几乎不溶，相对分子质量：397.29，分子式：C₈H₁₄N₂O₄Pt，结构式如下：

奥沙利铂的药理作用主要是使肿瘤细胞内DNA形成链间和链内交联，从而中断DNA合成，最终产生细胞毒和抗肿瘤活性。在临床上被广泛用作多种癌症的治疗，如结肠癌、胃癌、膀胱癌、前列腺癌、卵巢癌等。另外，奥沙利铂还 对黑色素瘤、食管癌、神经胶质瘤、非霍奇金淋巴瘤及肾癌均有效。奥沙利铂在临床上显示了与顺铂不同的抗肿瘤活性，疗效优于顺铂且无交叉耐药，不良反应方面，如消化系统反应、潜在耳毒性、肾毒性与致吐性均低于顺铂。

奥沙利铂由瑞士Debiopharm公司研制，1996年Sanofi Synthelabo公司首先在法国获批上市；2002年美国FDA批准静脉注射用奥沙利铂浓缩液和注射用奥沙利铂冻干粉上市，国产奥沙利铂由南京制药厂研发成功，于2000年获新药证书，并生产上市。

FDA批准的奥沙利铂浓缩液所用辅料仅为注射用水，不添加防腐剂，浓度为5mg/ml，规格为50mg，100mg，500mg。

注射用奥沙利铂冻干粉所用辅料仅为一水乳糖，规格为50mg，100mg，一水乳糖所用量为奥沙利铂用量的9倍。

作为继顺铂、卡铂后的第三代铂类抗肿瘤药物，奥沙利铂不仅不良反应少，而且抗肿瘤活性谱广，对结直肠癌、非小细胞肺癌、胃癌、卵巢癌等多种肿瘤细胞株，尤其是对耐顺铂、卡铂的肿瘤细胞有显著的抑制作用，并且同5-氟尿嘧啶、亚叶酸、吉西他滨、紫杉醇、卡培他滨等都有较好的相加或协同作用，临床上经常联合用药。

奥沙利铂主要通过注射给药，然而奥沙利铂在碱性水环境中稳定性较差，会随时间的推移降解产生不同量的二水合二氨基环己烷铂(DACH)、二水合二氨基环己烷铂二聚物、草酸等杂质。草酸从奥沙利铂分子的裂解为两步平衡过程。在第一步中，草酸根5-元环裂解，形成单齿草酸根中间体，其在第二步中，失去草酸根离子，形成二水合络合物。两步反应的速率均取决于氢氧根离子的浓度，草酸根环的打开比失去草酸根离子快约6倍(E.Jerrelmam等人，J.Pharm.Sci,2002,91(10):2116-2121)。由于这种平衡反应，奥沙利铂水性溶液的优化稳定性移至弱酸区域，即，pH4-6。奥沙利铂在碱性条件下的降解反应式如下：

进一步的降解反应式如下：

除了酸，碱催化外，溶液中存在的金属离子也可引起奥沙利铂的分解。这些金属离子通常并不直接影响活性成分，但它们催化形成游离自由基，该游离自由基随后进攻活性化合物。因此，在水性环境中，铁离子的存在可引起羟基自由基或超氧化物自由基，并随后氧化多种化合物。奥沙利铂的氧化可得到性质完全不同的四价铂络合物(双羟基奥沙利铂)，降低了活性化合物奥沙利铂在组合物中的浓度，其结构如下式所示：

上述奥沙利铂降解途径中的分解产物二水合二氨基环己烷铂(DACH)，草酸，二水合二氨基环己烷铂二聚体以及四价铂络合物，会带来较大毒副作用，严重影响产品质量。

目前，奥沙利铂已作为转移性结直肠癌的一线治疗药物应用于临床。在用作治疗时，奥沙利铂以静脉注射的形式给药。静脉注射是一种不经过人体胃肠道吸收，直接将药物注入人体血液的给药方式，若供注射用的制剂中含有来自原料或生产过程中产生的杂质，这些杂质就会不经过胃肠道屏障而直接进入人体血液循环，而这些杂质，即使是数量极其微小也可能会对人体造成重大的损害。由于化合物在贮存过程中会发生化学变化如氧化，分解等，杂质就会随着药物贮存时间的延长而累积。决定注射用奥沙利铂有效期的主要因素也是贮存过程中杂质总量的增长。

产品的质量标准中，杂质总量是一个重要的指标，因此，在药品质量中对杂质总量有严格的要求，比如2010年版中国药典二部第二增补本中，注射用奥沙利铂的标准规定，草酸含量不得高于0.2％，二水合二氨基环己烷铂(DACH)的含量不得高于0.2％，双羟基奥沙利铂含量不得高于0.1％。其他单个杂质总量不得大于0.2％，其他杂质总含量不得大于0.5％。美国药典和欧洲药典都对奥沙利铂注射制剂中杂质的含量做了限制。

因此，通过筛选合适的赋形剂及用量，从而制备出稳定性较高的奥沙利铂注射制剂成为人们研究的方向。

WO9943355公开了一种添加有效稳定量的缓冲液(草酸及其碱金属盐为缓冲体系)至奥沙利铂的水性溶液中构成的奥沙利铂溶液组合物。由于奥沙利铂的分解释放出草酸，该文献通过在平衡体系中添加缓冲液抑制这种分解现象的发生。但是草酸具有肾毒性，不宜添加在静脉注射制剂中。

WO03047587公开了一种将有效量的乳酸、其盐或乳酸盐缓冲液作为稳定剂添加至奥沙利铂的水性溶液中构成的奥沙利铂溶液组合物。但稳定性测试已经表明该溶液组合物在40℃下储存5周后，会沉淀出少量的黑色颗粒，明显为还原的金属铂。

CN101612146A公开了一种奥沙利铂药物组合物及其制备方法，该组合物包括质量比为1：12-1：20的奥沙利铂和乳糖，通过加入注射用水和pH调节剂，经冷冻干燥等步骤制成冻干粉针剂。该冻干粉针剂虽然克服了以乳糖作为冻干载体的奥沙利铂冻干粉针剂成型性不好的问题，但是制剂的稳定性有待于进一步提高。

发明内容

发明人通过对奥沙利铂原料药及制剂降解的研究，根据勒沙特列原理，通过在奥沙利铂水性制剂中添加氨基酸缓冲对，缓冲对解离出的氢离子，有效阻止了二水合二氨基环己烷铂(DACH)及其二聚体和草酸的生成，同时通过控制制剂所用水中溶解氧的含量的技术手段，阻断金属离子催化奥沙利铂的氧化反应，进一步阻止奥沙利铂原料药的降解。从而得到了一种与现有奥沙利铂注射液(ELOXATIN)相比稳定性更好的以奥沙利铂为主药成分的注射用组合物。并进一步提出了制备方法，将其制备成静脉注射制剂。该方法工艺简单，易于工业 化生产。

该组合物以奥沙利铂为主药成分，包括缓冲剂，注射用水，其特征在于，缓冲剂为酸性氨基酸及相应钠盐组成，并且注射用水中溶解氧含量小于0.1ppm。

本专利中所述酸性氨基酸为天冬氨酸或者谷氨酸中的一种。

所述组合物处方组成如下： 

原辅料	用量
		奥沙利铂	0.5mg/ml-5mg/ml
酸性氨基酸	0-0.05mol/L
		甘露醇	0-50mg/ml
0.1mol/L盐酸或氢氧化钠	适量
		pH值	4.5-5.5
注射用水	定容至全量

通过如下步骤制备成注射液：

a.取注射用水适量，以鼓泡方式通入氮气，使溶解氧含量小于0.1ppm，备用；

b.取奥沙利铂原料药，粉碎，过200目筛，备用；

c.取步骤a所得溶解氧含量小于0.1ppm注射用水适量，加入甘露醇，酸性氨基酸，搅拌，使溶解，以0.1mol/L氢氧化钠调节溶液pH值至4.5-5.5；

d.取步骤c所得溶液，搅拌条件下加入处方量奥沙利铂原料药，使溶解；

e.取步骤d所得含药溶液，测定pH值，以0.1mol/L氢氧化钠调节溶液pH值至4.5-5.5；

f.取步骤e所得含药溶液，添加步骤a所得注射用水至全量；

g.取步骤f所得含药溶液，测定pH值，以0.1mol/L盐酸或氢氧化钠调节溶液pH值至4.5-5.5；

h.取步骤g所得含药溶液，按质量百分比加入0.1％针用活性炭，保温30min，依次以0.45um，0.22um微孔滤膜，过滤，得奥沙利铂含药溶液； 

i.取步骤h所得含药溶液，分装至容积合适的玻璃容器中，封口，为奥沙利铂注射液；

j.取步骤i所得分装好的奥沙利铂注射液，灭菌，条件为121℃，15min；

k.取步骤j所得奥沙利铂注射液，灯检，即得成品。

优选的处方如下：

注射液制备工艺如下：

a.取注射用水适量，以鼓泡方式通入氮气，使溶解氧含量小于0.1ppm，备用；

b.取奥沙利铂原料药,天冬氨酸，谷氨酸，粉碎，过200目筛，备用；

c.取步骤a所得溶解氧含量小于0.1ppm注射用水适量，加入处方量天冬氨酸或者谷氨酸，甘露醇，搅拌，使溶解，以0.1mol/L氢氧化钠调节溶液pH值至4.5-5.5；

d.取步骤c所得溶液，搅拌条件下加入处方量奥沙利铂原料药，使溶解；

e.取步骤d所得含药溶液，测定pH值，以0.1mol/L氢氧化钠调节溶液pH值至4.5-5.5；

f.取步骤e所得含药溶液，添加步骤a所得注射用水至全量；

g.取步骤f所得含药溶液，测定pH值，以0.1mol/L盐酸或氢氧化钠调节溶液pH值至4.5-5.5；

h.取步骤g所得含药溶液，按质量百分比加入0.1％针用活性炭，保温30min，依次以0.45um，0.22um微孔滤膜，过滤，得奥沙利铂含药溶液； 

i.取步骤h所得含药溶液，分装至容积合适的玻璃容器中，封口，为奥沙利铂注射液；

j.取步骤i所得分装好的奥沙利铂注射液，灭菌，条件为121℃，15min；

k.取步骤j所得奥沙利铂注射液，灯检，即得成品。

本发明依据奥沙利铂原料药在碱性条件下降解，并在金属离子催化下，生成游离自由基氧化原料药，形成四价铂络合物的原理。依据勒沙特列原理通过添加酸性氨基酸，从而解离出的氢离子，使原料药降解平衡向左移动。减少了原料药的降解，同时通过降低配置注射液所用注射用水中溶解氧含量的方法，抑制游离自由基的生产，减少了四价铂络合物的生成，通过上述两种方法，大大降低组合物中原料药的降解，提高了组合物的存储稳定性。并给出了制备工艺，将其进一步制备成注射制剂。该注射制剂制备方法简单，可采用常规制备方法生产，无需特殊设备，具有容易产业化、生产效率高、稳定性好、质量可控等显著优点。

上述以奥沙利铂为主药成分的注射用组合物可以用于成人结直肠癌的治疗。

以下结合实施例的具体实施方式再对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的保护范围仅限于以下的实例。在不脱离本发明上述技术思想情况下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的各种替换或变更，均应包括在本发明的范围内。

具体实施方式

实施例1：奥沙利铂大容量注射液。

注射液制备工艺如下：

a.取注射用水适量，以鼓泡方式通入氮气，使溶解氧含量小于0.1ppm，备用；

b.取奥沙利铂原料药,天冬氨酸，谷氨酸，粉碎，过200目筛，备用；

c.取步骤a所得溶解氧含量小于0.1ppm注射用水适量，加入处方量天冬氨酸或者谷氨酸，甘露醇，搅拌，使溶解，以0.1mol/L氢氧化钠调节溶液pH值至4.5-5.5；

d.取步骤c所得溶液，搅拌条件下加入处方量奥沙利铂原料药，使溶解；

e.取步骤d所得含药溶液，测定pH值，以0.1mol/L氢氧化钠调节溶液pH值至4.5-5.5；

f.取步骤e所得含药溶液，添加步骤a所得注射用水至全量；

g.取步骤f所得含药溶液，测定pH值，以0.1mol/L盐酸或氢氧化钠调节溶液pH值至4.5-5.5；

h.取步骤g所得含药溶液，按质量百分比加入0.1％针用活性炭，保温30min，依次以0.45um，0.22um微孔滤膜，过滤，得奥沙利铂含药溶液； 

i.取步骤h所得含药溶液，分装至容积100ml输液瓶中，加塞，轧盖，为奥沙利铂注射液；

j.取步骤i所得分装好的奥沙利铂注射液，灭菌，条件为121℃，15min；

k.取步骤j所得奥沙利铂注射液，灯检，即得成品。

实施例2：奥沙利铂小容量注射液的制备。 

原辅料	处方1	处方2
			奥沙利铂	5mg/ml	5mg/ml
天冬氨酸	0.05mol/L	-
			谷氨酸	-	0.04mol/L
0.1mol/L盐酸或氢氧化钠	适量	适量
			pH值	4.5-5.5	4.5-5.5
注射用水	定容至全量	定容至全量
			总体积	10000ml	10000ml
共制成	1000支	1000支

注射液制备工艺如下：

a.取注射用水适量，以鼓泡方式通入氮气，使溶解氧含量小于0.1ppm，备用；

b.取奥沙利铂原料药,天冬氨酸，谷氨酸，粉碎，过200目筛，备用；

c.取步骤a所得溶解氧含量小于0.1ppm注射用水适量，加入处方量天冬氨酸或者谷氨酸，搅拌，使溶解，以0.1mol/L氢氧化钠调节溶液pH值至4.5-5.5；

d.取步骤c所得溶液，搅拌条件下加入处方量奥沙利铂原料药，使溶解；

e.取步骤d所得含药溶液，测定pH值，以0.1mol/L氢氧化钠调节溶液pH值 至4.5-5.5；

f.取步骤e所得含药溶液，添加步骤a所得注射用水至全量；

g.取步骤f所得含药溶液，测定pH值，以0.1mol/L盐酸或氢氧化钠调节溶液pH值至4.5-5.5；

h.取步骤g所得含药溶液，按质量百分比加入0.1％针用活性炭，保温30min，依次以0.45um，0.22um微孔滤膜，过滤，得奥沙利铂含药溶液； 

i.取步骤h所得含药溶液，分装至容积5ml中硼硅玻璃安瓿中，封口，为奥沙利铂注射液；

j.取步骤i所得分装好的奥沙利铂注射液，灭菌，条件为121℃，15min；

k.取步骤j所得奥沙利铂注射液，灯检，即得成品。

实施例3：样品影响因素试验。

取实施例1四个处方大容量注射液和实施例2两个处方小容量注射液样品适量，分别置高温(40℃)，高温(60℃)，强光(4500Lx±500Lx)，条件下放置10天，于0天，5天，10天检测样品，得检测数据如下：

表1高温(40℃)条件下各样品检测结果

表2高温(60℃)条件下各样品检测结果

表3强光(4500Lx±500Lx)条件下各样品检测结果

由上述数据可见，按本发明实施例1和实施例2所公开处方及工艺制备的奥沙利铂大容量及小容量注射液在高温及强光下稳定。制剂中原料药含量，杂质DACH和双羟基奥沙利铂几乎无变化。可以进行下一步的稳定性考察。

实施例4：实施例1和实施例2样品与市售奥沙利铂大容量注射液长期稳定性比较。

取实施例1和实施例2所制备奥沙利铂大容量及小容量注射液样品(含包材)以及三个规格市售奥沙利铂注射液(含包材)置25℃±2℃，60％±5％RH条件下存储36个月，分别于0月，6月，12月，2年，3年取样测定相关性质，得到相应数据，如下表所示：

表4实施例1和实施例2中各个规格奥沙利铂注射液和市售奥沙利铂注射液3年长期稳定性实验结果

由上表数据可以看出，依本发明所述处方及工艺制备的奥沙利铂注射液和市售奥沙利铂注射液相比，在25℃±2℃，60％±5％RH条件下存储3年，与已上市奥沙利铂注射液相比显示出更好的稳定性，具体表现为含量下降较小，DACH和双羟基奥沙利铂以及其他总杂质增长明显少于已上市奥沙利铂注射液。具有突出的实质性特点和显著进步。

Claims (10)

1.一种以奥沙利铂为主药成分的注射用组合物，以奥沙利铂为主药成分，包括缓冲剂，注射用水，其特征在于，缓冲剂为酸性氨基酸及相应钠盐组成，并且注射用水中溶解氧含量小于0.1ppm。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述酸性氨基酸选自天冬氨酸和谷氨酸中的一种。

3.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物组成如下；

原辅料 用量 奥沙利铂 0.5mg/ml-5mg/ml 酸性氨基酸 0-0.05mol/L 甘露醇 0-50mg/ml 0.1mol/L盐酸或氢氧化钠 适量 pH值 4.5-5.5 注射用水 定容至全量

。

4.如权利要求3所述组合物，其特征在于所述组合物组成如下：

原辅料 用量 奥沙利铂 0.5mg/ml 天冬氨酸 0.05mol/L 甘露醇 50mg/ml 0.1mol/L盐酸或氢氧化钠 适量 pH值 4.5-5.5 注射用水 定容至全量 总体积 100000ml 共制成 1000支

。

5.如权利要求3所述组合物，其特征在于所述组合物组成如下：

原辅料 用量 奥沙利铂 0.5mg/ml 谷氨酸 0.04mol/L 甘露醇 50mg/ml

0.1mol/L盐酸或氢氧化钠 适量 pH值 4.5-5.5 注射用水 定容至全量 总体积 100000ml 共制成 1000支

。

6.如权利要求3所述组合物，其特征在于所述组合物组成如下：

原辅料 用量 奥沙利铂 1mg/ml 天冬氨酸 0.05mol/L 甘露醇 50mg/ml 0.1mol/L盐酸或氢氧化钠 适量 pH值 4.5-5.5 注射用水 定容至全量 总体积 100000ml 共制成 1000支

。

7.如权利要求3所述组合物，其特征在于所述组合物组成如下：

原辅料 用量 奥沙利铂 1mg/ml 谷氨酸 0.04mol/L 甘露醇 50mg/ml 0.1mol/L盐酸或氢氧化钠 适量 pH值 4.5-5.5 注射用水 定容至全量 总体积 100000ml 共制成 1000支

。

8.如权利要求3所述组合物，其特征在于所述组合物组成如下：

原辅料 用量 奥沙利铂 5mg/ml 天冬氨酸 0.05mol/L 0.1mol/L盐酸或氢氧化钠 适量 pH值 4.5-5.5 注射用水 定容至全量 总体积 10000ml 共制成 1000支

。

9.如权利要求3所述组合物，其特征在于所述组合物组成如下：

原辅料 用量 奥沙利铂 5mg/ml 谷氨酸 0.04mol/L 0.1mol/L盐酸或氢氧化钠 适量 pH值 4.5-5.5 注射用水 定容至全量 总体积 10000ml 共制成 1000支

。

10.如权利要求1-9所述组合物，其特征在于该组合物通过如下步骤制备成注射液：

a.取注射用水适量，以鼓泡方式通入氮气，使溶解氧含量小于0.1ppm，备用；

b.取奥沙利铂原料药，粉碎，过200目筛，备用；

c.取步骤a所得溶解氧含量小于0.1ppm注射用水适量，加入甘露醇，酸性氨基酸，搅拌，使溶解，以0.1mol/L氢氧化钠调节溶液pH值至4.5-5.5；

d.取步骤c所得溶液，搅拌条件下加入处方量奥沙利铂原料药，使溶解；

e.取步骤d所得含药溶液，测定pH值，以0.1mol/L氢氧化钠调节溶液pH值至4.5-5.5；

f.取步骤e所得含药溶液，添加步骤a所得注射用水至全量；

g.取步骤f所得含药溶液，测定pH值，以0.1mol/L盐酸或氢氧化钠调节溶液pH值至4.5-5.5；

h.取步骤g所得含药溶液，按质量百分比加入0.1％针用活性炭，保温30min，依次以0.45um，0.22um微孔滤膜，过滤，得奥沙利铂含药溶液；

i.取步骤h所得含药溶液，分装至容积合适的容器中，封口，为奥沙利铂注射液；

j.取步骤i所得分装好的奥沙利铂注射液，灭菌，条件为121℃，15min；

k.取步骤j所得奥沙利铂注射液，灯检，即得成品。