CN104515850A - 快速测试装置及方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种快速测试装置及方法。具体地，本发明提供了一种快速检测装置和方法，所述检测装置还包括：第一容器以及位于所述第一容器内的抗原溶液；任选的第二容器以及位于所述第二容器内的被可检测标记物所标记的标记抗体X'；和一检测件，所述检测件包括一样品接受部和一反应部。本发明所述快速检测方法可将样品直接加到快速检测装置中，省略预先将样品和仅稳定存在于液体环境中的抗原混合步骤，避免了稀释样品中抗体的步骤，从而实现检测的高灵敏度，高特异性，并更加简单便捷，便于用户使用。

Description

快速测试装置及方法
技术领域
本发明属于生物免疫学，具体地涉及一种快速测试装置及方法，用于检测仅稳定存在于缓冲溶液中的抗原的抗体。
背景技术
随着免疫分析日益广泛应用于以临床为主以及非临床领域的诊断产业(diagnostic industry)，免疫分析向两个方向发展：一类为全自动化的免疫分析；另一类为以多孔材料如硝酸纤维膜为载体的快速免疫分析。前者需要价格昂贵的全自动仪器及与仪器严格配套的各种试剂盒，目前只能在医疗检测中心应用，虽也能较快速给出结果，但仍需一定时间，不适合远离医疗及检测中心的地区，更不能用于“患者床旁检验”(real time clinical decision)和普查的需要。在酶免疫分析的基础上，主要以硝酸纤维素膜为载体的快速检测方法迅速和广泛地发展起来。
快速检测应是一种廉价的、可方便使用的、基于膜的检测方法，它能提供分析物存在于液体样品的视觉证明。这种检测可以以独立的试纸条，也可以以装在塑料盒中的形式进行。一般地，进行检测仅需要200μl的液体样品，一般在2-5分钟内完成。在临床检测中，样品可以是尿、血液、血清、唾液或其他体液。在非临床检测中，样品可以是由土壤、灰尘、植物或食物等准备好的小量的溶液，然后类似地直接用膜试纸条进行测试。这种检测不需要任何仪器，能被用于临床、实验室、室外和家庭，并且经常可由无经验的人员进行检测。
这类方法目前在文献及市场上的命名还很不统一。它实际上属于快速斑点免疫结合分析(dot immunobinding assay,DIBA)，该分析始于80年代，主要有以下两种模式：
1、斑点免疫渗滤分析(dot immunofiltrtion assay,DIFA)免疫反应是通过垂直穿透固定有配体的硝酸纤维素膜而进行的(flow through type)。
2、斑点免疫层析分析(dot immunochromatography assay，DICA)分析原理与DIFA相同，只是反应液体的流动不是直向的穿透流动，而是层析作用的侧向流动(lateral flow type)，在1990年开始应用。
上述两种模式中硝酸纤维素膜的种类及形式组成方式的区别在于：
免疫渗滤分析(穿透滤过型)方法中采用的硝酸纤维素膜为圆片膜，孔径0.2-0.4μm，较简单，由载有配体(抗体或抗原)的硝酸纤维素膜片及底层的吸水垫料组成。
免疫层析分析(侧向流动型)中采用的硝酸纤维素膜为窄长型，依灵敏度及流速的要求，可选用孔径不同的合适的膜；自近端至远端(由左至右)包括:(1)样品垫(sample pad)，(2)载有固相标记配体(抗体或抗原)的玻璃纤维素膜条或聚酯膜条(conjugate release membrane)，(3)合适孔径的、喷涂有显示阳性结果的捕获分析物的配体线，和阴性对照组线的硝酸纤维素膜条(nitrocellulosememtrane)，(4)吸水垫(absorbent pad)，这四部分衔接固定在不干扰免疫反应和流速的簿塑料背板上(back sheet)。
上述两种模式中采用的标记物可选自：胶体金属(胶体金，胶体硒)、纳米颗粒(如金属纳米颗粒或碳纳米材料)、分散型染料(disperse dyes)或染料标记的微球(latex particles)等可检测标记物。前述标记物各有优缺点，可根据以下的标准选择，如：灵敏度，所需要的颜色，分析的模式和操作步骤，制备、保证重复性、急定性及规模及的难易程度和重复性，以及标记物所需配体量等。其中酶虽然有高灵敏度，重复性好及标记物易规模化等优点，但它需要洗涤，加底物等步骤，需要反应的时间也长些，对技术也有一些要求，故未能作为快速诊断的主要标记物(1985年最初的免疫渗滤分析是以酶作为标记物)。目前应用最广泛的标记物为胶体金，包括：胶体金免疫渗滤分析(goldimmumofiltraition assay，GIFA)或滴金免疫分析和胶体金免疫层析分析(goldimmunochromatography assay，GICA)。由于GICA更简便快速，已成为目前最主要的快速免疫分析方法之一。
胶体金免疫渗滤分析(GIFA)原理与操作步骤基本与ELISA相同：加样品于固定有配体(抗体或抗原，此处以抗体为例，下同)的硝酸纤维素膜上，通过渗滤在膜中形成抗体-抗原复合物，洗涤渗滤后，再加液体的胶体金标记抗体。当结果为阳性时，在膜上固定有“抗体-抗原-胶体金标记抗体复合物”而呈现红色斑点。
胶体金免疫层析分析CICA原理与GIFA相同，只是操作步骤有所不同，如反应液体流动方向由垂直渗滤改为侧向层析流动：样品加于样品垫(1)上，样品向吸水垫(4)方向流动，途经载有固相胶体金标记抗体膜(2)后，将金标记抗体完全复溶，抗原与金标记抗体形成“金标记抗体-抗原复合物”，继续向前流动至硝酸纤维素膜条(3)上的固定有捕获抗原的抗体线处。当结果为阳性时，金标记抗体-抗原复合物上，就会形成“金标记抗体-抗原-固相抗体”复合物，呈现红色阳性条带；如样品中无抗原，则不被捕获，就不显色，则结果为阴性。多余的游离金标记抗体继续前移至固定有抗金标记体二抗处，被固定呈现红色的对照。
GICA与GIFA不同之处在于后者只是单一的免疫层析条，不需要其它试剂，一步操作。二者与ELISA不同处是反应时间大大缩短，仅需要数分钟就完成了ELISA需数小时才能显示的结果。因为在GIFA和GICA中，高浓度的抗体集中固定在多孔材料(如纤维素)的微孔中，待测抗原在渗滤或层析时，流经微孔与固定的高浓度抗体紧密接触，很快完成免疫结合反应。这就是以膜为基础的胶体金快速免疫结合分析中的免疫浓缩作用(immunoconcentraiton)。
在ELISA中，待测抗原要在液相中经过扩散作用，逐渐与吸附在固相表面的抗体结合。同时，标记抗体也需要同样的扩散结合过程形成抗体-抗原-标记抗体复合物，故需时间较长。
现有的技术中，检测针对抗原的抗体时，某些含有三级或四级结构的抗原在干燥状态下可能不稳定，这些抗原在干燥状态下会显著降低特异性和灵敏度，典型的例子是，抗人乳头瘤病毒(如16，18和58型)的病毒样颗粒(VLP)。
目前检测抗人乳头状瘤病毒抗体时，采用的是位于液体中的病毒表面蛋白(或病毒样颗粒)。该方法中，样品必须加入缓冲液中然后将混合液体加到侧向流动测试装置中。该现有方法的一个缺点是，在将含有样品的混合液加到侧向流动测试装置之前必须先经过一个将样品加入到缓冲液中并混匀的过程，同时仍需满足一定的反应时间。另外，如果样品中只含有少量抗体的话，由于市场上的那些检测方法通常需要先将样品用缓冲液稀释，那么如果检测方法的灵敏度不够的话，就容易造成检测不成功(假阴性)。
公开号为WO2012097788的PCT专利申请公开了一种快速检测和装置，可用于定性和/或定量分析存在于体液中的抗人类乳头状瘤病毒(HPV)抗体。该发明所述快速测试提供了一种混有试剂的体液样品，所述试剂本身含有预定量的生理活性的流体以及预定量的至少一种HPV特异性抗原，随后将混合物进行分析，利用可测量的变化和/或可被用户观察到的变化进行检测。进行快速测试的设备提供了一个容器(2)，用于接受所述试剂(14)，其中从患者采集的体液标本可以被添加到所述容器(2)中并与试剂(14)混合。此外，该设备还提供一分析系统(4)，它利用可测量的变化和/或可以由用户观察到的改变进行分析，所述分析系统被设计成可接受存在容器(2)中预定量的底物。该技术方案中，在将待测样品添加到检测装置之前仍然要预先将样品和液态的抗原溶液混合。因此，一方面增加了预先混合的步骤，另一方面仍在反应时将样品稀释了，这样同样容易造成检测不成功(假阴性)。
因此，本领域中迫切需要开发检测新的快速、高灵敏度的并且尤其适用于抗不稳定抗原的抗体的检测装置和方法。
发明内容
本发明的目的是为了提供一种快速检测装置及检测方法，所述快速检测方法可将样品直接加到检测装置中，省略预先将样品和仅稳定存在于液体环境中的抗原的混合步骤，从而避免了稀释样品中抗体的步骤，进而提高了检测的高灵敏度。
在本发明的第一方面，提供了一种检测装置，所述检测装置包括：
第一容器以及位于所述第一容器内的抗原溶液，所述抗原溶液中的抗原Y可与待测抗体X特异性结合，其中所述的抗原Y是未标记的抗原Y、或带有可检测标记物的标记抗原Y'；
任选的第二容器以及位于所述第二容器内的被可检测标记物所标记的标记抗体X'；和
一检测件，所述检测件包括一样品接受部和一反应部，其中
所述样品接受部用于接受待测样品溶液，并且所述样品接受部载有用于捕获所述待测抗体X的捕获剂；
所述反应部设有控制线区域，所述控制线区域设有用于表示检测完成的控制线；所述反应部还设有用于检测所述待测抗体X的检测线，所述检测线区域载有固相抗体X'，所述固相抗体X'可与所述抗原Y和标记抗体X'反应形成“固相抗体X'-抗原Y-标记抗体X'”三元复合物；或者所述固相抗体X'与所述的标记抗原Y'反应形成“固相抗体X'–标记抗原Y'”二元复合物。
在另一优选例中，所述的捕获剂包括与待测抗体X结合的配体、抗体或其组合。
在另一优选例中，所述的检测件包括检测片、检测条、检测板。
在另一优选例中，所述待测样品溶液可通过侧向流动层析作用或渗滤作用从所述样品接受部流到所述反应部。
在另一优选例中，所述的可检测标记物包括：胶体金属(胶体金，胶体硒)、纳米颗粒(碳颗粒)、荧光分子、生色团、分散型染料(disperse dyes)或染料标记的微球(latex particles)。
在另一优选例中，所述的检测装置为试剂盒形式，所述试剂盒包括所述的检测装置，以及使用说明。
在另一优选例中，所述检测件还包括一结合物释放部，并且在所述结合物释放部载有可释放的结合物，所述结合物包括被可检测标记物所标记的抗体X'和任选的被可检测标记物所标记的质控物(如兔抗羊多克隆抗体)；所述结合物释放部设于所述样品接受部和反应部之间。
在另一优选例中，所述反应部的控制线区域载有质控抗体。
在另一优选例中，所述质控抗体用于结合所释放的质控物，所述的质控抗体包括(但并不限于)：固相羊抗兔多克隆抗体等。
在另一优选例中，所述检测件的结合物释放部还载有被可检测标记物所标记的质控物。所述的质控物包括(但并不限于)：兔抗羊多克隆抗体。
在另一优选例中，当液体(如待测样品溶液)从样品接受部流到结合物释放部时，所述的可释放的结合物被释放，然后再一起流到反应部。
在另一优选例中，所述检测件还包括一抗原溶液接受部，所述抗原溶液接受部设于样品接受部的上游，添加于所述抗原溶液接受部的抗原溶液会流到并流经所述样品接受部；和/或
所述检测件还包括一吸液部，所述吸液部设于所述反应部的下游，促进液体流向反应部。
在另一优选例中，所述样品接受部和所述抗原溶液接受部是一体的，所述样品接受部既接受待测样品，也接受抗原溶液。
在另一优选例中，所述待测抗体X包括针对病原体(如病毒、螺旋体、细菌)的抗体，较佳地所述抗体包括针对HPV的抗体，更佳地包括选自下组的抗体：HPV16抗体、HPV18抗体或HPV58抗体；
所述抗原溶液对应为：包含至少5个，较佳地≥100个HPV16L1衣壳蛋白的病毒样颗粒的缓冲液；和/或包括由至少5个，较佳地≥100个HPV18L1衣壳蛋白的病毒样颗粒的缓冲液，和/或包括由至少5个，较佳地≥100个HPV58L1衣壳蛋白的病毒样颗粒的缓冲液。
在另一优选例中，所述的缓冲液是Tris BSA缓冲液。
在另一优选例中，所述样品接受部的材料包括：玻璃纤维素膜、硝酸纤维素膜或聚酯纤维膜；并且所述样品接受部载有的待测抗体X的捕获剂为与所述样品接受部共价结合的蛋白A、蛋白G或抗待测抗体X的二抗。
在另一优选例中，所述二抗为羊抗人IgG抗体或兔抗人IgG抗体。
在另一优选例中，所述样品接受部还设有共价结合的抗红细胞抗体。
在另一优选例中，所述反应部的材料为硝酸纤维素膜或尼龙膜；和/或
所述反应部设有检测线，所述检测线区域载有的固相抗体X'包括：抗HPV16L1单克隆抗体、抗HPV18L1单克隆抗体、抗HPV58L1单克隆抗体；并且所述标抗体X'分别对应为：胶体金标记的抗HPV16L1单克隆抗体、胶体金标记的抗HPV18L1单克隆抗体、胶体金标记的抗HPV58L1单克隆抗体。较佳地，所述单克隆抗体是源自鼠的抗体或鼠抗体。
在另一优选例中，所述的反应部设于样品接受部下面，而所述待测样品溶液通过渗滤作用从样品接受部流到反应部；并且所述检测装置还包括：
第二容器和位于所述第二容器内的标记抗体X'溶液。
在另一优选例中，所述检测件包括：一样品接受部，一结合物释放部和一反应部，所述结合物释放部设于样品接受部和反应部之间，待测样品溶液可通过侧向流动层析作用从样品接受部流到结合物释放部，然后再流到反应部；
所述结合物释放部上设有标记抗体X'。
在另一优选例中，所述结合物释放部载有的可释放的结合物，包括金标记的抗体X'和质控物(如金标记的兔抗羊多克隆抗体)，并且所述反应部的控制线区域还载有质控抗体(如固相羊抗兔多克隆抗体)；和/或
所述金标记抗体X'溶液中同时包括金标记的质控物(如兔抗羊多克隆抗体)，所述反应部的控制线区域载有质控抗体(如固相羊抗兔多克隆抗体)。
在另一优选例中，所述检测装置还包括一抗原溶液接受部，所述抗原溶液接受部设于样品接受部的上游，抗原溶液可通过例如侧向流动层析作用流到样品接受部。
在另一优选例中，所述抗原溶液接受部的材料包括玻璃纤维素膜。
在本发明的第二方面，提供了一种采用本发明第一方面所述的检测装置，检测待测样品中待测抗体X的方法，该方法包括以下步骤：
(1)将待测样品溶液加至所述样品接受部，并使其流向所述反应部；
(2)将抗原溶液加至样品接受部，并使其流向所述反应部；
(3)将标记抗体X'溶液加至样品接受部，并使其流向所述反应部；
(4)读取所述反应部的反应结果，从而得出待测抗体X的检测结果，其中，
如果所述反应部的控制线区域显现一条线，但检测线区域不显现对应于待测抗体X的检测线，则表示待测样品溶液中存在所述待测抗体X，为阳性；
如果所述反应部的控制线区域显现一条线，并且检测线区域显现对应于待测抗体X的检测线，则表示待测样品溶液中不存在所述待测抗体X，为阴性。
在本发明的第三方面，提供了一种采用本发明第一方面所述的检测装置，检测待测样品中待测抗体X的方法，该方法包括以下步骤：
(1)将待测样品溶液加至所述样品接受部，并使其流向所述反应部；
(2)将抗原溶液加至样品接受部或抗原接受部，并使其流向所述反应部；
(3)读取所述反应部的反应结果，从而得出待测抗体X的检测结果，其中，
如果所述反应部的控制线区域显现一条线，但检测线区域不显现对应于待测抗体X的检测线，则表示待测样品溶液中存在所述待测抗体X，为阳性；
如果所述反应部的控制线区域显现一条线，并且检测线区域显现对应于待测抗体X的检测线，则表示待测样品溶液中不存在所述待测抗体X，为阴性。
在另一优选例中，在步骤(2)中添加抗原溶液后，等待5-30分钟(较佳地8～12分钟、或10-20分钟)后，再读取结果。
在本发明第四方面，提供了一种基于本发明第一方面的优选的适用于检测多种抗体的检测装置，其中，所述的待测抗体X为一种或多种，分别记为Xn，n为正整数；相应地，所述抗原溶液中含有的抗原Y为一种或多种，分别记为Yn，n为正整数；标记抗体X'为一种或多种，分别记为X'n，n为正整数；
并且所述反应部的检测线区域设有对应于各待测抗体X的n条检测线，其中第n条检测线分别对应载有对应于待测抗体Xn的固相抗体X'n，
其中，所述各固相抗体X'n与相应的抗原Yn和标记抗体X'n反应形成“固相抗体X'n-抗原Yn-标记抗体X'n”三元复合物；
“固相抗体X'-抗原Y-标记抗体X'”三元复合物；或者所述固相抗体X'与所述的标记抗原Y'反应形成“固相抗体X'–标记抗原Y'”二元复合物。
在另一优选例中，所述的标记物为胶体金(金标)，并且所述抗原溶液中含有两种或两种以上抗原：抗原Y1，抗原Y2，......，抗原Yn，所述抗原Y溶液中的抗原Y1，抗原Y2，......，抗原Yn可分别与待测抗体X1，X2，......，Xn特异性结合；金标记抗体的种类和抗原Y种类相等，分别对应为金标记抗体X1'，X2'，......，Xn'；所述样品接受部载有可捕获所述待测抗体X1，X2，......，Xn的捕获剂；所述反应部设有的检测线的数目和抗原Y种类相等，并且所述检测线区域分别对应载有固相抗体X1'，X2'，......，Xn'，所述固相抗体X1'，X2'，......，Xn'可对应地与抗原Y1，抗原Y2，......，抗原Yn，金标记抗体X1'，X2'，......，Xn'通过夹心反应形成“固相抗体X'n-抗原Yn-金标记抗体X'n”三元复合物；其中n大于或等于2。
在本发明的第五方面，提供了一种采用本发明第四方面中所述的检测装置，检测待测样品中待测抗体X的方法，该方法包括以下步骤：
(1)将待测样品溶液加至所述样品接受部，并使其流向所述反应部；
(2)将抗原溶液加至样品接受部，并使其流向所述反应部；
(3)按特异性由高至低，依次将标记抗体X1'，X2'，......，Xn'溶液加至样品接受部，并使其流向所述反应部；
(4)读取所述反应部的反应结果，从而得出各待测抗体Xn的检测结果，其中，
如果所述反应部的控制线区域显现一条线，但检测线区域都不显现对应于待测抗体Xn的检测线，则表示待测样品溶液中存在所述待测抗体Xn，为阳性；
如果所述反应部的控制线区域显现一条线，并且检测线区域显现对应于待测抗体Xn的检测线，则表示待测样品溶液中不存在所述待测抗体Xn，为阴性。
在另一优选例中，如果仅控制线区域出现一条线，则为阳性；如果控制线区域和至少一条检测线区域都出现一条线，则为所述至少一条检测线区域对应的待测目标的结果为阴性。
在另一优选例中，检测时间为8-15min。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
图1是实施例1中侧向流动免疫层析装置的俯视图；
图2是实施例1中侧向流动免疫层析装置的内部试剂条的示意图；
图3是实施例1中侧向流动免疫层析装置内部的样品接受部的结合情况以及阴性结果的示意图；
图4是实施例1中侧向流动免疫层析装置内部的反应部的结合情况以及阴性结果的示意图；
图5是实施例2中侧向流动免疫层析装置内部的样品接受部的结合情况以及阳性结果的示意图；
图6是实施例2中侧向流动免疫层析装置内部的反应部的结合情况以及阳性结果的示意图；
图7是实施例3中侧向流动免疫层析装置的俯视图；
图8是实施例3中侧向流动免疫层析装置的内部试剂条的示意图；
图9是实施例3中侧向流动免疫层析装置内部的反应部的结合情况以及阳性结果的示意图；
图10是实施例4中免疫渗滤试验装置的俯视图；
图11是实施例4中免疫渗滤试验装置的样品接受部的示意图；
图12是实施例4中免疫渗滤试验装置的反应部的示意图；
图13是实施例4中免疫渗滤试验装置内结合了特异性组分的反应部试剂条以及阳性结果的示意图；
图14为实施例4中阳性结果的示意图；
图15为实施例5中阴性结果的示意图。
图16显示了实施例1和2中所用的检测件外壳(A)、内部结构(B)、阴性检测结果(C)和阳性检测结果(D)。
具体实施方式
本发明人经过广泛而深入的研究，首次提供了一种快速的、针对抗不稳定抗原的抗体的检测装置和方法。该方法避免了检测时对待测样品的稀释，因而可以更灵敏正确地得出检测结果。在此基础上完成了本发明。
侧流免疫层析的检测件和检测方法
参见图1和图2。本发明提供一种侧向流动免疫层析的检测件，从左至右设有：一样品接受部2，一结合物释放部3，一反应部4，一吸液部5，其中，所述侧向流动免疫层析装置还可包括一抗原接受部1，用以接受抗原溶液，所述抗原接受部设于所述样品接受部的左侧(上游)，并且与所述样品接受部相连，液体可以通过层析作用从抗原接受部流向样品接受部；上述抗原接受部用以接受抗原溶液(优选在干燥状态下不稳定的抗原的溶液)；上述样品接受部用以接受样品；上述结合物释放部上宜载有抗待测抗原的抗体(或通过第二容器内的标记抗体X'提供)和用于质控的质控剂(如兔抗羊多克隆抗体等)；上述反应部设有检测线和/或对照线/控制线。
在优选的技术方案中，本发明还可以包括一背衬，上述抗原接受部、样品接受部、结合物释放部、反应部、吸液部五部分衔接固定在不干扰免疫反应和流速的背衬上。所述背衬的材料是常规的，可包括但不限于塑料。
在优选的技术方案中，本发明还可以包括一外壳，并且所述外壳上设有相应的抗原加样孔，样品加样孔以及观测区，分别对应抗原接受部，样品接受部以及反应部的位置。
在本发明中，所述抗原接受部的材料包括各种常规的、适用于侧流免疫层析或免疫渗滤分析的多孔材料，代表性的例子包括(但并不限于)：玻璃纤维素膜(官能团化或未官能团化)硝酸纤维素膜或聚酯纤维膜。
在本发明中，所述样品接受部的材料包括各种常规的、适用于侧流免疫层析或免疫渗滤分析的多孔材料，代表性的例子包括(但并不限于)：官能团化的玻璃纤维素膜、硝酸纤维素膜或聚酯纤维膜。所述样品接受部设有共价结合的用于捕获待检测抗体X的捕获剂，代表性的捕获剂包括(但并不限于)：蛋白A、蛋白G或抗样品中抗体的二抗。当样品为人血样本时，所述二抗优选为羊抗人IgG抗体或兔抗人IgG抗体。
当样品为全血样本时，所述样品接受部还设有共价结合的抗红细胞抗体。当采用硝酸纤维素膜或聚酯纤维膜时，与所述抗红细胞抗体的结合为不可逆的，例如，羊抗人多克隆抗体和兔抗红细胞抗体。
在本发明中，所述结合物释放部的材料包括各种常规的、适用于侧流免疫层析或免疫渗滤分析的多孔材料，代表性的例子包括但不限于：硝酸纤维素膜或聚酯纤维膜。所述结合物释放部上设有抗上述不稳定抗原表位的抗体。优选地，所述抗体为被可检测标记物所标记标记的抗体，例如胶体金标记的抗体。例如对于HPV16的检测而言，所述结合物释放部上优选地载有胶体金标记的鼠抗HPV16L1单克隆抗体和胶体金标记的兔抗羊多克隆抗体。
在本发明中，所述反应部的材料包括各种常规的、适用于侧流免疫层析或免疫渗滤分析的多孔材料，代表性的例子包括(但并不限于)：硝酸纤维素膜或聚酯纤维膜。所述反应部上设有检测线。优选地，所述反应部上还设有用于表示检测完成的控制线。优选地，所述反应部上还设有阴性对照组线。
上述技术方案中，所述吸液部设于最下游，可吸收液体并保证样品的正常流动。
采用上述技术方案所述侧向流动免疫层析装置检测待测样品的方法包括以下步骤：(1)将样品滴加到样品接受部上，所述样品可以选自但不限于人的全血或血清或血浆；(2)将抗原溶液滴加到抗原接受部上；(3)等待10～15分钟，读取结果，本领域技术人员可以结合实施例理解判断结果的规则。
参见图7和图8。本发明采用的另一技术方案为：所述的抗原接受部和样品接受部是合二为一的。该检测件从左至右设有：一样品接受部2a，一结合物释放部3，一反应部4，一吸液部5，所述样品接受部先接受样品后接受抗原，所述样品接受部的材料是结合有蛋白G的葡聚糖。当所述接受部的材料使用结合有蛋白G的葡聚糖时，由于没有红细胞滞留，结果发现样品中抗体的吸附力大大提高了，因此可得到更高的灵敏度，特别是针对血清或血浆样品。
同样，在优选的技术方案中，还可以包括一背衬，上述接受部，结合物释放部，反应部，吸液部四部分衔接固定在不干扰免疫反应和流速的背衬上。
优选的技术方案中，本发明还可以包括一外壳，并且所述外壳上设有相应的加样孔以及观测区，分别对应接受部以及反应部的位置。
采用上述技术方案所述侧向流动免疫层析装置检测待测样品的方法包括以下步骤：(1)将样品滴加到样品接受部上，所述样品可以选自但不限于人的全血或血清或血浆；(2)将抗原溶液滴加到样品接受部(兼作为抗原接受部)上；(3)等待10～15分钟，读取结果，本领域技术人员可以结合实施例理解判断结果的规则。
免疫渗滤的检测件和检测方法
在本发明中，可采用的另一技术方案为：一种免疫渗滤快速检测件。参见图10和图11，该检测件从上至下设有：一样品接受部(同时具有预过滤的作用)和一反应部；所述反应部包括一硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上设有检测线以及用于表示检测完成的控制线。
所述样品接受部包括一滤纸，所述滤纸包括各种常规的、适用于免疫渗滤分析的多孔材料，代表性的例子包括(但并不限于)材料可选自但不限于：官能团化的玻璃纤维素膜、硝酸纤维素膜或聚酯纤维膜。
所述样品接受部设有共价结合的用于捕获待检测抗体X的捕获剂，代表性的捕获剂包括(但并不限于)：蛋白A、蛋白G或抗样品中抗体的二抗。当样品为人血样本时，所述二抗为优选羊抗人IgG抗体或兔抗人IgG抗体。
当样品为全血样本时，所述样品接受部还设有共价结合的抗红细胞抗体；当采用硝酸纤维素膜或聚酯纤维膜时，与所述抗红细胞抗体的结合为不可逆的，例如，羊抗人多克隆抗体和兔抗红细胞抗体。
上述技术方案中，所述检测线上载有鼠抗HPV16L1单克隆抗体；所述控制线上载有羊抗兔多克隆抗体。
第一容器与抗原溶液
本发明快速检测装置还包括第一容器以及位于所述第一容器内的抗原溶液(第一溶液)。所述抗原溶液中的抗原Y可与待测抗体X特异性结合，其中所述的抗原Y是未标记的抗原Y、或带有可检测标记物的标记抗原Y'。
在本发明中，对于抗原Y没有特别限制，抗原是来源于各种不同病原体(如病毒、螺旋体、细菌)的抗原。然而，本发明特别适用于含有三级或四级结构的抗原并且在干燥状态下稳定性较差的抗原。
相应地，在本发明中，可检测的待测抗体X也没有限制，该抗体X可以是针对各种不同病原体(如病毒、螺旋体、细菌)的抗原，较佳地，所述抗体是针对在干燥状态下不稳定的抗原的抗体，例如针对HPV的抗体，更佳地包括(但并不限于)：HPV16抗体、HPV18抗体或HPV58抗体。
在本发明中，以检测HPV为例(抗原为L1衣壳蛋白或VLP)，所述抗原溶液可包括：包含至少5个，较佳地≥100个HPV16L1衣壳蛋白或由L1衣壳蛋白所构成病毒样颗粒的缓冲液；和/或包括由至少5个，较佳地≥100个HPV18L1衣壳蛋白或由L1衣壳蛋白所构成病毒样颗粒的缓冲液，和/或包括由至少5个，较佳地≥100个HPV58L1衣壳蛋白或由L1衣壳蛋白所构成病毒样颗粒的缓冲液。
在另一优选例中，所述的缓冲液或缓冲体系没有特别限制，只要其有利于抗原的稳定保存。一种代表性的缓冲液是Tris BSA缓冲液。
第二容器与位于第二容器的标记抗体X'
在本发明的另一种方案中，如果结合物释放部未设有可释放的标记抗体X',则在本发明装置中应当包括第二容器与位于第二容器的标记抗体X'。通常，标记抗体X'以溶液形式存在，然而也可以以固态形式存在，并在使用之前添加液体(缓冲液)，从而形成含所述标记抗体X'的溶液(第二溶液)。
相应地，在检测时，可在将待测样品、抗原溶液添加于检测件之前、之后或之间，将含所述标记抗体X'的溶液添加于检测件。优选方式是在添加了待测样品和抗原溶液之后，再添加含所述标记抗体X'的溶液。
在检测件上，添加所述的含所述标记抗体X'的溶液时，可以添加于单独的添加位置(例如，对应于结合物释放部的位置)，或增加于合用的位置，例如抗原溶液接受部或样品接受部。
在本发明中，如果结合物释放部设有可释放的标记抗体X',则在本发明装置中可不包括第二容器与位于第二容器的标记抗体X'。当然，在本发明装置中额外地包括第二容器也是可行的。
标记物和标记抗体
在本发明中，抗体可以用常规方法，用各种不同的可检测标记物进行标记。代表性的标记物包括(但并不限于)：胶体金属(胶体金，胶体硒)、纳米颗粒(如金属纳米颗粒或碳纳米材料)、分散型染料(disperse dyes)或染料标记的微球(latex particles)。
一种特别优选的标记物是胶体金。
本发明的主要优点包括：
(1)本发明所述快速检测方法可将样品直接加到检测装置中，省略预先将样品和仅稳定存在于液体环境中的抗原混合步骤，避免了稀释样品中抗体的步骤，从而实现检测的高灵敏度，高特异性，并更加简单便捷，便于用户使用。
(2)本发明所述检测装置及方法不需要稀释样品，因此处理样品更简便。
(3)本发明所述检测装置及方法可以使用一种抗原溶液进行多种测试，更方便用户使用。
(4)本发明所述检测装置及方法可以富集抗体，因此可以实现高灵敏度的侧向流动免疫快速测试。
(5)本发明所述免疫渗滤快速测试装置及方法可以适用富集样品以及全血分离样品，因此可以实现高灵敏度的检测。
(6)由于本发明可以实现同一样品中不同HPV抗体的富集，因此，可通过依次添加不同金标抗体溶液来实现同时检测不同抗体的多参数检测，并且同时提高检测的特异性和灵敏度；也可以选择性地先使HPV16和HPV58失活，从而实现仅仅富集并检测抗HPV18的抗体，从而实现排除交叉反应所带来的干扰，并通过特异性不高的抗体成功地高灵敏度地实现检测。
具体实施方式
下面结合附图对本发明作详细描述，下表所列为实施例中所有材料的来源，本发明所使用的材料为本领域技术人员公知的商品化的产品：
实施例1
本实施例的快速检测装置包括第一容器以及位于所述第一容器内的抗原溶液，所述抗原溶液是含至少100个HPV16L1衣壳蛋白VLP的Tris BSA缓冲液；和检测件。
检测件如图1-2所示，所述侧向流动免疫层析检测件，从左至右设有：一抗原接受部，一样品接受部，一结合物释放部，一反应部，一吸液部。其中，结合物释放部上载有抗待测抗原的抗体；上述反应部设有检测线和控制线。所述侧向流动免疫层析装置包括一背衬，所述背衬的材料为塑料。
所述检测件还包括一外壳，并且所述外壳上设有相应的抗原加样孔，样品加样孔以及观测区，分别对应抗原接受部，样品接受部以及反应部的位置。
所述抗原接受部的材料为玻璃纤维素膜。
所述样品接受部为载有羊抗人IgG抗体和兔抗红细胞抗体的多孔硝酸纤维素膜条。
所述结合物释放部为载有胶体金标记的鼠抗HPV16L1单克隆抗体和胶体金标记的兔抗羊多克隆抗体的聚酯纤维膜。
所述反应部为硝酸纤维素膜。所述反应部上设有检测线，所述检测线上载有鼠抗HPV16L1单克隆抗体；所述反应部上还设有控制线，所述控制线上载有羊抗兔多克隆抗体。
检测待测样品中是否含有HPV16L1抗体的方法包括以下步骤：
(1)将20μl待测样品滴加到样品接受部上，所述样品可以选自但不限于人的全血或血清或血浆；
(2)将100μl抗原溶液滴加到抗原接受部上；
(3)等待15分钟，读取结果，判断结果的规则为：
阳性结果：如果抗体的效价高于阈值的情况下，HPV16L1VLP抗原与间接固定化的人抗体反应完全(包括那些抗HPV16L1VLP部分)。因此没有HPV16L1VLP可以渗透到结合物释放部。结果是没有检测线将出现。这表明，样品中的抗体效价高于某一定数值(高于阈值)。阈值可根据抗原溶液中的不同的抗原Y含量而变化并可计算出。
阴性结果：如果抗体的效价低于阈值的情况下，HPV16L1VLP抗原与间接固定化的人抗体(被捕获于样品接受部的待测抗体)没有完全反应(在滴度/效价低的情况下)或根本没有反应(在阴性样本的情况下)。因此，未反应的或所有的HPV16L1VLP可以渗透到结合物释放部。结果是一条检测线将出现。在检测线处、由于HPV16L1VLP包括多个相同的抗原表位，故在检测线发生夹心反应，形成“固相抗体X'-抗原Y-标记抗体X'”三元复合物。这表明，样品中的抗体滴度低于某一定数值(低于阈值)。
根据上述技术方案，对一组样品进行测试，得图4。
根据上述判断规则，结合图3和图4可知，所检测的样品的检测结果为阴性。
实施例2：
采用实施例1同样的快速检测装置，用实施例1相同方法，对另一组样品进行测试，得图6，根据上述判断规则，结合图5和图6可知，所检测的样品的检测结果为阳性。
实施例1和2中所用的检测件结构和检测结果如图16所示。
此外，对于已知浓度的抗HPV16抗体样品，用系列稀释法制备一系列标准浓度为5000mIU/ml、1000mIU/ml、500mIU/ml、200mIU/ml、100mIU/ml、50mIU/ml、20mIU/ml和10mIU/ml的样品。
将上述样品用实施例1的检测装置和检测方法进行检测，结果表明，本发明检测装置和方法可以检测低至50mIU/ml的样品，而现有方法(WO2012097788)的检测灵敏度最低为500mIU/ml(见下表)。
表1检测灵敏度比较
样品中抗体浓度 实施例2 现有方法(WO2012097788)
5000mIU/ml 阳性 阳性
1000mIU/ml 阳性 阳性
500mIU/ml 阳性 阳性
200mIU/ml 阳性 阴性
100mIU/ml 阳性 阴性
50mIU/ml 阳性 阴性
20mIU/ml 极弱阳性 阴性
10mIU/m 阴性 阴性
实施例3：
本实施例的快速检测装置包括第一容器以及位于所述第一容器内的抗原溶液，所述抗原溶液是含至少200个HPV16L1衣壳蛋白的VLP的Tris BSA缓冲液；和检测件。
所述检测件如参见图7和图8所示。从左至右设有：一样品接受部，一结合物释放部，一反应部，一吸液部，其中，所述样品接受部先接受样品溶液后接受抗原溶液，所述接受部为共价结合了羊抗人IgG抗体和兔抗红细胞抗体的氨基官能团化的玻璃纤维。和实施例1不同的是该接受部可以接受更多数量的样品且抗原溶液流动的更快。
本实施例中，所述接受部也可以采用结合蛋白G的葡聚糖上被用来吸收更多数量的样品。
所述侧向流动免疫层析件还包括一外壳，并且所述外壳上设有相应的加样孔以及观测区，分别对应接受部以及反应部的位置。
所述检测件的其他结构与实施例1相同。
检测待测样品的方法包括以下步骤：
(1)将50μl样品加到样品接受部上，所述样品可以选自但不限于人的全血或血清或血浆；
(2)然后将100μl抗原溶液加到样品接受部上；
(3)等待10分钟，读取结果，所述判断结果的规则同实施例1。
根据上述技术方案，对一组样品进行测试，得图9。
根据上述判断规则可知，所检测的样品的检测结果为阳性。
实施例4：
本实施例的快速检测装置包括第一容器以及位于所述第一容器内的抗原溶液，所述抗原溶液是含至少100个由HPV16L1衣壳蛋白构成的病毒样颗粒(VLP)的Tris BSA缓冲液；第二容器和位于所述第二容器金标鼠抗HPV16-L1单克隆抗体；和检测件。
所述检测件如图10～12所示。所述免疫渗滤检测件从上至下设有：
一样品接受部；所述样品接受部包括一滤纸，所述滤纸的材料为官能团化的玻璃纤维素膜，滤纸上固定化结合羊抗人IgG抗体以及兔抗红细胞抗体；
一反应部；所述反应部包括一硝酸纤维素膜，所述多孔硝酸纤维素膜上设有检测线，以及用于表示检测完成的控制线；所述检测线上载有鼠抗HPV16L1单克隆抗体；所述控制线上载有羊抗兔多克隆抗体。
采用上述技术方案所述免疫渗滤快速测试装置检测待测样品的方法包括以下步骤：
(1)加100μl样品到预处理滤纸上等待直到所有液体通过滤纸；
(2)然后将100μl抗原溶液加到预处理滤纸上直到所有液体通过滤纸；
(3)加100μl金标鼠抗HPV16-L1单克隆抗体和金标兔抗羊多克隆抗体溶液，等待直到所有液体通过滤纸；去掉滤纸并读取结果：
如果待测样品中抗HPV16L1抗体的浓度在阈值以上，只在质控区域出现一条线(点)，则为阳性；如果没有抗HPV16L1抗体或抗HPV16L1抗体的浓度低于阈值，除了质控线会出现线(点)之外，检测线也将会出现线(点)，则为阴性。
根据上述技术方案，对一组样品进行测试，得图14。
根据上述判断规则，结合图13和14可知，所检测的样品的检测结果为阳性。
本实施例的优点：本装置可以用于检测富集/浓缩后的待测样品中的抗体，以及高加样量的待测样品(甚至是全血样品)，因此能够达到比侧流体系高得多的灵敏度。对于某些少见的HPV感染类型的检测特别有意义。
缺点：需要在样品盒抗原溶液加完后再额外加一步金标溶液。
实施例5：
采用实施例4同样的快速检测装置，用实施例1相同方法，对另一组样品进行测试，得图15。
根据上述判断规则，结合图15可知，所检测的样品的检测结果为阴性。
实施例6：
本实施例的快速检测装置与实施例1基本相似，不同点在于：
包括2个第一容器，在2个第一容器中相应的抗原溶液分别是含至少100个HPV16L1衣壳蛋白的VLP的Tris BSA缓冲液；和含至少100个HPV18L1衣壳蛋白的VLP的Tris BSA缓冲液。
所述测试件如实施例1的测试件，不同的是：在反应部设有两条检测线，即在硝酸纤维素膜载有抗HPV116L1VLP单克隆抗体(T1)作为检测线1，同时载有抗HPV58L1VLP的单克隆/多克隆抗体(T2)作为检测线2。另外，还有一点不同的是：结合物释放部为仅仅载有胶体金标记的兔抗羊多克隆抗体的聚酯纤维膜。
人的全血/血清/血浆中的HPV抗体，常常可以和不同类型的HPV反应，例如HPV16，HPV18，HPV58以及其他类型，例如理论上HPV5。为了实现一次检测可以同时检测出HPV58L1和HPV16L1的抗体的多参数检测，仅有一种高特异性的抗HPV16L1VLP单克隆抗体和一相对低特异性抗HPV58L1VLP单克隆/多克隆抗体且该抗体会与HPV16L1VLP发生交叉反应，在这种情况下，如果简单地进行平行检测HPV16和HPV58抗体的多参数检测，那么由于HPV16V1VLP会同时结合HPV16单克隆抗体和HPV58抗体，然后金标抗体也会同时结合HPV16V1VLP和HPV58V1VLP，因此无法正确检测是否含有HPV58。
针对以上问题，一种可行的解决方案是：采用特异性抗HPV16L1VLP的抗体使HPV16L1VLP失活，然后相对低特异性的抗HPV58L1VLP(单克隆)抗体不能与HPV16L1VLP反应而只能与HPV58L1VLP反应。
以下结合具体实施例介绍上述采用特异性的抗HPV16L1VLP的抗体和低特异性/非特异性抗HPV58L1VLP的(单克隆/多克隆)抗体，来检测抗HPV16L1VLP抗体和抗HPV58L1VLP抗体。
检测方法包括以下步骤：
(1)将人的全血样品加入样品接受部；
(2)再将含有HPV16L1VLP和HPV58L1VLP的混合抗原溶液加到抗原接受部，所有的HPV16L1VLP会被样品接受部上的人抗HPV16抗体捕获到并结合，而所有的HPV58L1VLP将会与检测线2区域的抗HPV58L1VLP的抗体结合；
(3)然后先加入金标抗HPV16L1VLP单克隆抗体溶液到样品接受部，则金标抗HPV16L1VLP单克隆抗与HPV16L1VLP-人抗HPV16抗体结合物反应，使得HPV16L1VLP失活，同时反应部检测线1区域不出现可见的线，表明人抗HPV16抗体的检测呈阳性；再加入金标抗HPV58L1VLP抗体溶液，由于所述金标抗HPV58L1VLP抗体无法与样品接受部的HPV16L1VLP结合(因为金标抗HPV16L1VLP单克隆抗与HPV16L1VLP-人抗HPV16抗体结合物反应，使得HPV16L1VLP失活)，因此所述金标抗HPV58L1VLP抗体移动至反应部的检测线2，并与此处的HPV58L1VLP-抗HPV58L1VLP的抗体结合物发生三明治反应，从而形成一条可见的检测线，表明该样品中的人抗HPV58抗体的检测结果为阴性。
在另一检测中，样品中仅仅含有抗HPV58抗体，那么结果则为：先加入的金标抗HPV16L1VLP抗体溶液移动至反应部的检测线1区域，与此区域的HPV16L1VLP抗原-抗HPV16L1VLP抗体结合物结合，从而使HPV16L1VLP失活，并且检测线1显示为可见的线，表明样品中的人抗HPV16抗体的检测结果为阴性；后加入的金标抗HPV58L1VLP抗体溶液与样品接受部的HPV58L1VLP抗原-抗HPV58L1VLP抗体结合物结合，而反应部检测线2区域不显示可见的检测线。因此，即使在仅仅有特异性抗HPV16抗体和非特异性/低特异性抗HPV58抗体的条件下，仍然可以通过依次加入金标抗HPV16L1VLP抗体和金标HPV58L1VLP抗体来实现特异性的多参数检测，同时检测含有抗HPV16或/和HPV58。
上述检测装置为侧向流动免疫层析装置，本领域技术人员可以据此，在不需要任何创造性劳动的前提下，将该方法应用到免疫渗滤快速测试，即依次加入金标抗HPV16L1VLP抗体和金标HPV58L1VLP抗体。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (15)

1.一种检测装置，其特征在于，所述检测装置包括：
第一容器以及位于所述第一容器内的抗原溶液，所述抗原溶液中的抗原Y可与待测抗体X特异性结合，其中所述的抗原Y是未标记的抗原Y、或带有可检测标记物的标记抗原Y'；
任选的第二容器以及位于所述第二容器内的被可检测标记物所标记的标记抗体X'；和
一检测件，所述检测件包括一样品接受部和一反应部，其中
所述样品接受部用于接受待测样品溶液，并且所述样品接受部载有用于捕获所述待测抗体X的捕获剂；
所述反应部设有控制线区域，所述控制线区域设有用于表示检测完成的控制线；所述反应部还设有用于检测所述待测抗体X的检测线，所述检测线区域载有固相抗体X'，所述固相抗体X'可与所述抗原Y和标记抗体X'反应形成“固相抗体X'-抗原Y-标记抗体X'”三元复合物；或者所述固相抗体X'与所述的标记抗原Y'反应形成“固相抗体X'–标记抗原Y'”二元复合物。
2.根据权利要求1所述检测装置，其特征在于，所述检测件还包括一结合物释放部，并且在所述结合物释放部载有可释放的结合物，所述结合物包括被可检测标记物所标记的抗体X'和任选的被可检测标记物所标记的质控物；所述结合物释放部设于所述样品接受部和反应部之间。
3.根据权利要求1或2所述检测装置，其特征在于，所述检测件还包括一抗原溶液接受部，所述样品接受部和所述抗原溶液接受部是一体的。
4.根据权利要求1所述检测装置，其特征在于，所述检测件还包括一抗原溶液接受部，所述抗原溶液接受部设于样品接受部的上游；和/或
所述检测件还包括一吸液部，所述吸液部设于所述反应部的下游，促进液体流向反应部。
5.根据权利要求1、2或4所述检测装置，其特征在于，所述待测抗体X包括针对病原体(如病毒、螺旋体、细菌)的抗体，较佳地所述抗体包括针对HPV的抗体，更佳地包括选自下组的抗体：HPV16抗体、HPV18抗体或HPV58抗体；
所述抗原溶液对应为：包含至少5个，较佳地≥100个HPV16L1衣壳蛋白的病毒样颗粒的缓冲液；和/或包括由至少5个，较佳地≥100个HPV18L1衣壳蛋白的病毒样颗粒的缓冲液，和/或包括由至少5个，较佳地≥100个HPV58L1衣壳蛋白的病毒样颗粒的缓冲液。
6.根据权利要求1所述检测装置，其特征在于，所述样品接受部的材料包括：玻璃纤维素膜、硝酸纤维素膜或聚酯纤维膜；并且所述样品接受部载有的待测抗体X的捕获剂为与所述样品接受部共价结合的蛋白A、蛋白G或抗待测抗体X的二抗。
7.根据权利要求1所述检测装置，其特征在于，所述样品接受部还设有共价结合的抗红细胞抗体；和/或
所述反应部的控制线区域载有质控抗体。
8.根据权利要求1所述检测装置，其特征在于：所述反应部的材料为硝酸纤维素膜或尼龙膜；和/或
所述反应部设有检测线，所述检测线区域载有的固相抗体X'包括：抗HPV16L1单克隆抗体、抗HPV18L1单克隆抗体、抗HPV58L1单克隆抗体；并且所述标抗体X'分别对应为：胶体金标记的抗HPV16L1单克隆抗体、胶体金标记的抗HPV18L1单克隆抗体、胶体金标记的抗HPV58L1单克隆抗体。
9.根据权利要求1所述检测装置，其特征在于，所述的反应部设于样品接受部下面，而所述待测样品溶液通过渗滤作用从样品接受部流到反应部；并且所述检测装置还包括：
第二容器和位于所述第二容器内的标记抗体X'溶液。
10.根据权利要求1、2或4所述检测装置，其特征在于：所述结合物释放部载有的可释放的结合物包括金标记的抗体X'和金标记的质控物抗体，并且所述反应部的控制线区域还载有质控抗体；和/或
所述金标记抗体X'溶液中同时包括金标记的质控物，所述反应部的控制线区域载有质控抗体。
11.根据权利要求1-10中任一所述检测装置，其特征在于：所述的检测装置为试剂盒形式，其中所述试剂盒包括所述的检测装置以及使用说明。
12.一种采用权利要求1所述的检测装置，检测待测样品中待测抗体X的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将待测样品溶液加至所述样品接受部，并使其流向所述反应部；
(2)将抗原溶液加至样品接受部，并使其流向所述反应部；
(3)将标记抗体X'溶液加至样品接受部，并使其流向所述反应部；
(4)读取所述反应部的反应结果，从而得出待测抗体X的检测结果，其中，
如果所述反应部的控制线区域显现一条线，但检测线区域不显现对应于待测抗体X的检测线，则表示待测样品溶液中存在所述待测抗体X，为阳性；
如果所述反应部的控制线区域显现一条线，并且检测线区域显现对应于待测抗体X的检测线，则表示待测样品溶液中不存在所述待测抗体X，为阴性。
13.一种采用权利要求3所述的检测装置，检测待测样品中待测抗体X的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将待测样品溶液加至所述样品接受部，并使其流向所述反应部；
(2)将抗原溶液加至样品接受部或抗原接受部，并使其流向所述反应部；
(3)读取所述反应部的反应结果，从而得出待测抗体X的检测结果，其中，
如果所述反应部的控制线区域显现一条线，但检测线区域不显现对应于待测抗体X的检测线，则表示待测样品溶液中存在所述待测抗体X，为阳性；
如果所述反应部的控制线区域显现一条线，并且检测线区域显现对应于待测抗体X的检测线，则表示待测样品溶液中不存在所述待测抗体X，为阴性。
14.根据权利要求1所述检测装置，其特征在于，所述的待测抗体X为一种或多种，分别记为Xn，n为正整数；相应地，所述抗原溶液中含有的抗原Y为一种或多种，分别记为Yn，n为正整数；标记抗体X'为一种或多种，分别记为X'n，n为正整数；
并且所述反应部的检测线区域设有对应于各待测抗体X的n条检测线，其中第n条检测线分别对应载有对应于待测抗体Xn的固相抗体X'n，
其中，所述各固相抗体X'n与相应的抗原Yn和标记抗体X'n反应形成“固相抗体X'n-抗原Yn-标记抗体X'n”三元复合物；
“固相抗体X'-抗原Y-标记抗体X'”三元复合物；或者所述固相抗体X'与所述的标记抗原Y'反应形成“固相抗体X'–标记抗原Y'”二元复合物。
较佳地，所述的标记物为胶体金(金标)，并且所述抗原溶液中含有两种或两种以上抗原：抗原Y1，抗原Y2，......，抗原Yn，所述抗原Y溶液中的抗原Y1，抗原Y2，......，抗原Yn可分别与待测抗体X1，X2，......，Xn特异性结合；金标记抗体的种类和抗原Y种类相等，分别对应为金标记抗体X1'，X2'，......，Xn'；所述样品接受部载有可捕获所述待测抗体X1，X2，......，Xn的捕获剂；所述反应部设有的检测线的数目和抗原Y种类相等，并且所述检测线区域分别对应载有固相抗体X1'，X2'，......，Xn'，所述固相抗体X1'，X2'，......，Xn'可对应地与抗原Y1，抗原Y2，......，抗原Yn，金标记抗体X1'，X2'，......，Xn'通过夹心反应形成“固相抗体X'n-抗原Yn-金标记抗体X'n”三元复合物；其中n大于或等于2。
15.一种采用权利要求14所述的检测装置，检测待测样品中待测抗体X的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将待测样品溶液加至所述样品接受部，并使其流向所述反应部；
(2)将抗原溶液加至样品接受部或抗原接受部，并使其流向所述反应部；
(3)按特异性由高至低，依次将标记抗体X1'，X2'，......，Xn'溶液加至样品接受部，并使其流向所述反应部；
(4)读取所述反应部的反应结果，从而得出各待测抗体Xn的检测结果，其中，
如果所述反应部的控制线区域显现一条线，但检测线区域都不显现对应于待测抗体Xn的检测线，则表示待测样品溶液中存在所述待测抗体Xn，为阳性；
如果所述反应部的控制线区域显现一条线，并且检测线区域显现对应于待测抗体Xn的检测线，则表示待测样品溶液中不存在所述待测抗体Xn，为阴性。
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