CN104507539B - 马达加斯加哈伦加那提取物的化妆品用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及化妆品领域,尤其是抗老化产品。本发明更特别地涉及马达加斯加哈伦加那提取物用于促进胶原合成的用途。
Description
技术领域
本发明涉及马达加斯加哈伦加那(Harungana madagascariensis)提取物或包含所述提取物的组合物的化妆品用途,特别是用于延缓或对抗皮肤老化和/或皮肤老化迹象的出现。本发明还涉及此提取物或此组合物用于促进胶原合成的用途,以及用于阻止皮肤蛋白糖化的用途。
背景技术
皮肤是人体的特殊器官。其厚度薄且非常普遍,这是因为其覆盖了人体的整个表面,对于成人,其总表面积约1.6m2。皮肤的功能是在异物的物理渗透方面和在免疫、温度调节和体液流失方面保护深层组织使避免接触外部环境。最后,其持续受到的机械应力意味着其必须比其它任何器官都要具有用很好弹性(flexibility)连接的坚实和连贯的结构。尽管依据解剖部位,其外表存在一些差异,但其总表现出相同的基本形态结构。其包括在其表面的表皮、深层的真皮以及分隔表皮和真皮并连接表皮和真皮的真皮-表皮交界。
真皮的作用是保持皮肤的弹性和强度。其是致密的、纤维性的和弹性的结缔组织,其位于被称为皮下组织的脂肪层上,且在其内充满(bathe)间质细胞、成纤维细胞。后者负责包围其的细胞外基质的组分的合成,其是实际的皮肤支持组织。细胞外基质由胶原束和弹性纤维(弹性蛋白和原纤蛋白)形成的纤维网络构成,位于与皮肤表面平行的波状物(waves)中。
除了其支持表皮的物理作用,真皮还执行了其它的必要功能。其相当的血管化使其能够与表皮进行营养交换。其还允许其富含巨噬细胞类型和树突细胞类型的免疫细胞,这些免疫细胞是在皮肤的免疫防御中的实质上的参与者。此外,其是一种神经支配的组织,其具有负责触感的感觉感受器。最后,其通过合成针对表皮的可溶性细胞因子和生长因子参与愈合现象以及角化细胞增殖和分化的调节。
胶原赋予皮肤张力抗性和抗张强度。弹性蛋白可以使皮肤伸展并在变形后恢复到其位置上。其赋予了皮肤覆盖层弹性。细胞外基质还包含蛋白聚糖和糖胺聚糖,其形成了高度水合的基质,其中包埋有纤维蛋白。最后,结构性糖蛋白通过结合膜整合素提供了基质和细胞之间的交界。
皮肤的细胞外基质是包围皮肤结构并支持表皮的间质材料。在纤维蛋白网络内,胶原是有助于皮肤的机械性质的主要不溶组分。真皮的“胶原纤维”分别由I型胶原和III型胶原组成,围绕着由V型胶原组成的轴。这些胶原属于纤维状胶原组。在成人中,平均来讲,I型胶原比III型胶原丰富6倍。
I型胶原纤维具有巨大的拉伸强度,因此其可被拉伸而不破裂。这些原纤维并排平行排列,被称为胶原纤维。III型胶原由3个α1(Ⅲ)链组成并主要存在于胎儿(fetal)皮肤和可伸展结构中。越接近皮下组织,I型胶原的比例越高。细胞外基质还包含纤维连接蛋白、层粘连蛋白、弹性蛋白和蛋白多糖基质。
尽管其组分具有很好的稳定性,细胞外基质是动态结构,其主要由结缔组织的细胞局部地产生。在这种情况下,成纤维细胞在此组织的维持和再生中发挥了核心作用。其合成和降解胶原和其它细胞外基质的大分子,或组织或定向纤维的能力在皮肤组织稳态是必不可少的。
老化期间,细胞和周围基质之间的某些异常交流可导致过多的细胞外基质的结构的定性和定量修饰。例如,在老化过程中,I型胶原与III型胶原的比率降低。在胶原纤维之间还存在着非酶Maillard糖基化反应导致的化学桥连(bridging)的指数增加。
这种老化胶原的化学桥连导致纤维变得越来越硬,这使得它们更加耐受胶原酶和自由基的攻击。因此,胶原的降解和更新被减缓了。
糖基化取决于循环的葡萄糖分子与游离氨基基团之间相遇的可能性,游离氨基基团存在于多肽链的N-末端或在赖氨酸侧链上。这一反应的生化机理是公知的,并且包括两个阶段:早期阶段(起始),其是还原糖(葡萄糖、果糖)与组成性组织蛋白的末端或侧链胺官能团的反应,从而产生称为“席夫碱”的化合物。这些化合物随后通过阿马多利重排稳定成酮胺。随后是晚期(增殖和终止),其中在氧存在的情况下,酮胺官能团被氧化成脱氧邻酮醛,并与属于其它蛋白(白蛋白、脂蛋白、免疫球蛋白)的其它碱性氨基酸如精氨酸或赖氨酸反应。结果是形成具有戊糖素或呋喃甲酰6.3.呋喃1.4咪唑环型的最终桥连的复合体。
蛋白糖基化反应构成了诱发皮肤老化的主要过程之一。实际上,其导致蛋白之间形成不可逆的交联键,其随年龄累积或在病理条件(糖尿病、氧化应激等)下累积。
因此,桥连的糖基化蛋白失去了其生物学功能;组织变得僵硬和僵化。
发明内容
申请人令人惊奇地证明了,马达加斯加哈伦加那提取物或包括此类提取物的组合物通过促进胶原合成并通过防止皮肤蛋白糖基化来防止皮肤老化。因此,马达加斯加哈伦加那提取物可用作抗皮肤老化的活性剂、促进胶原合成的活性剂和/或抗糖基化剂。
马达加斯加哈伦加那是广泛存在于马达加斯加的金丝桃科家族的一种树。
通常,这种植物用作黄色染料和用于治疗目的,尤其是作为抗菌剂和抗炎剂。
根据本发明的用途优选使用马达加斯加哈伦加那提取物或包含此类提取物的化妆品组合物。
优选地,提取物是马达加斯加哈伦加那叶的提取物。有利的是,此提取物是水性提取物并且优选地,其用甘油进行稳定。优选地,其是根据至少包括以下步骤的方法所得到的水性提取物:
-干燥叶;
-用水提取叶;
-熟化,然后过滤;
-蒸发提取物溶剂;
-调整浓度(添加甘油)。
本发明所使用的马达加斯加哈伦加那提取物是棕红色粘稠液体,具有特殊气味。其具有以下分析特征:
pH(1%水溶液):4-6
20℃时的密度:1.2-1.4
折射率:1.4-1.6
植物/提取物比=10/4。
优选地,根据本发明的化妆品组合物包含按干物质重量计、相对于组合物总重量0.01%至10%的马达加斯加哈伦加那提取物。有利的是,组合物包含按干物质重量计、相对于组合物总重量0.01%至5%的马达加斯加哈伦加那提取物。
根据本发明的组合物还可以包括一种或多种配制剂或在化妆品和皮肤病学组合物中已知的和常规使用的添加剂,例如,举例且非限制性地,添加剂是软化剂、染料、成膜剂、表面活性剂、香料、防腐剂、乳化剂、油、醇、维生素如维生素E、紫外线屏蔽剂等。凭借对化妆品的知识,本领域技术人员知道依据所需的性质将何种配制剂添加到本发明的组合物中以及其用量。
根据本发明的组合物可以是美容和皮肤病学领域的技术人员所知晓的任何形式,除了施用于面部和身体,其没有任何植物制剂(galenical)的限制。有利的是,根据本发明的组合物是凝胶、乳膏、洗剂、油、乳、喷雾等形式。
申请人已证明,本发明所使用的马达加斯加哈伦加那提取物以及包含该提取物的化妆品组合物可以用于促进胶原合成或阻止皮肤蛋白糖基化。
因此,根据本发明的马达加斯加哈伦加那提取物或包含该提取物的化妆品组合物可用于预防、延缓、对抗、治疗或减轻皮肤老化和/或皮肤老化迹象的出现。
表述“皮肤老化迹象”是指:皮肤的皱纹、细纹、松弛,皮肤纤维失去弹性,皮肤枯萎,皮肤变薄以及皮肤无光泽和/或无生气。
凭借其诱导皮肤中胶原合成的作用,根据本发明的一个优选的变型,马达加斯加哈伦加那提取物可用于修复老化的皮肤的表现,尤其是减轻皱纹和细纹或使枯萎或变薄的皮肤重新变得致密。
本发明所使用的马达加斯加哈伦加那提取物和包括该提取物的化妆品组合物也可用于重新致密化(re-densifying)和/或紧致(firming)和/或调理(toning)皮肤。
根据本发明的马达加斯加哈伦加那提取物和包括该提取物的化妆品组合物用于应用到皮肤上;其对面部皮肤或身体皮肤无差异。
当是面部皮肤时,优选地是脸部、颈部、领口部位和/或眼睛周围区域的皮肤。
根据一个具体的变型,根据本发明的马达加斯加哈伦加那提取物和包括该提取物的化妆品组合物应用于身体皮肤,以紧固和/或调理皮肤,例如在瘦身(thinning)的情况下。
下述实施例涉及马达加斯加哈伦加那提取物对I型胶原的合成的效果的评价,对蛋白糖基化的作用,以及作为本发明主题的组合物。
附图说明
实施例涉及如下附图,其中:
-图1表示了对于对照(组A)、对于10-5M视黄醇的阳性对照(组B)、对于各种浓度的马达加斯加哈伦加那提取物:0.001%(组C)、0.005%(组D)和0.01%(组E)(通过荧光光学显微镜观察,放大倍数×200)的I型胶原免疫荧光(TRITC)。
-图2表示了I型胶原的表达,表示为每细胞核的荧光单位。
具体实施方式
I.马达加斯加哈伦加那提取物对I型胶原分泌的活性的评估
A.材料与方法
将成纤维细胞接种到具有玻璃盖玻片的6孔板中,每皿70000个细胞,于最低必需培养基(MEM)中。48小时后,不处理(对照)或用0.001%、0.005%和0.01%的马达加斯加哈伦加那提取物处理(10-5M浓度的视黄醇作为阳性对照)细胞,并在孵育箱中孵育72小时,于37℃,5%CO2下。
然后,将各个细胞层冲洗,并用甲醇固定(-20℃),之后揭示I型胶原。
将细胞与针对目标蛋白的第一抗体孵育,然后与针对第一抗体的第二抗体孵育,其中第二抗体偶合到荧光染料TRITC(衍生自罗丹明的四甲基罗丹明异硫代氰酸)。各个抗体之间的孵育时间是1小时。通过用二脒苯基吲哚(DAPI)标记来揭示细胞核。
将盖玻片置于载玻片上,然后在荧光显微镜(Nikon Eclipse 50i)下观察。拍摄细胞群的数个视野。TRITC荧光图像表明了目的蛋白所在的区域。DAPI荧光图像表明了细胞核,因此提供了每个视野内的细胞数。使用NIS元素图像分析软件(Nikon)分析拍摄图像(如图1所示)。
B.结果
这一研究表明,马达加斯加哈伦加那提取物以剂量依赖的方式通过成纤维细胞显著地促进I型胶原的合成。马达加斯加哈伦加那提取物促进了细胞外基质的主要成分(I型胶原)的合成。因此,这些性质赋予这一提取物抗老化的作用。
II.马达加斯加哈伦加那提取物防止蛋白糖基化反应的评估
选择体外模型用于评估马达加斯加哈伦加那提取物的作用。这基于测量牛白蛋白的游离氨基基团与葡萄糖之间的糖基化反应所形成的衍生物。这些衍生物中的一些(晚期糖基化终末产物)是发荧光的。孵育8天后测量反应。平行测试参考分子,氨基胍。
A.材料与方法
测试系统是在磷酸盐缓冲液(0.2M,pH=7.4)中的包含牛白蛋白(0.5g/ml)和葡萄糖(500mM)的反应混合物。
将产物在无菌管中与测试系统混合;后者用铝箔覆盖(反应必须在黑暗中进行)。对于实验条件而言,当某些试剂或产物不存在时,管的体积必须用Milli Q水补充至QS。
用封口膜封闭管(反应必须在隔离氧的情况下进行)后,将各个反应混合物置于37℃的干燥培养箱中8天。
孵育8天后,各管移除100μl并转移到96孔黑色板中。然后在FLUOstar(BMG)上读取荧光(激发波长为355nm,发射波长为460nm)。
B.结果
结果示于下表中;其以任意荧光单位表达。从“产物+牛白蛋白+葡萄糖”数据中减去“产物+牛白蛋白”样品的荧光(=干扰)。
此表代表了糖基化交联键的形成,表达为任意的荧光单位(T.S=测试系统,包含牛白蛋白(0.5g/ml)和葡萄糖(500mM)的反应混合物,在磷酸盐缓冲液(0.2M,pH=7.4)中)。
将牛白蛋白与过量葡萄糖孵育8天后,观察到糖基化交联键的形成。利用牛白蛋白-葡萄糖加合物的荧光特性进行评估。
存在于测试系统中的马达加斯加哈伦加那提取物以非不显著的方式阻止了牛白蛋白和葡萄糖之间的交联键合。
III.制剂实施例
百分比是按相对于组合物总重量计的重量百分比。
洁面凝胶
%
水辉石......................................................1.50
乙二醇......................................................2.00
黄原胶......................................................0.25
月桂醇醚硫酸钠..............................................3.00
硬脂&椰油酰基谷氨酸钠.......................................7.00
牛油树脂....................................................0.50
椰油酰两性乙酸钠............................................10.00
乙二醇二硬脂酸酯............................................4.00
LANETTE SX..................................................9.00
马达加斯加哈伦加那..........................................0.50
防腐剂......................................................Q.S.
EDTA二钠....................................................0.10
香料........................................................Q.S.
软化水......................................................Q.S.100
爽肤水
%
黄原胶......................................................0.15
卡波姆......................................................0.15
生物糖胶-1..................................................10.00
芦芭胶......................................................10.00
马达加斯加哈伦加那..........................................1.00
PEG-40氢化蓖麻油............................................0.40
防腐剂......................................................Q.S.
香料........................................................Q.S.
软化水......................................................Q.S.100
抗老化晚霜
%
鲸蜡硬脂醇&鲸蜡硬脂基葡糖苷.................................4.50
甘油硬脂酸&PEG-100硬脂酸酯..................................2.00
硬脂醇聚醚-21...............................................0.50
氢化可可-甘油酯.............................................2.00
辛酸/癸酸甘油三酯...........................................8.00
牛油树脂....................................................2.00
二甲聚硅氧烷................................................0.50
卡波姆......................................................0.30
乙二醇......................................................5.00
赛比克305...................................................0.30
马达加斯加哈伦加那..........................................3.00
氢氧化钠....................................................0.08
防腐剂......................................................Q.S.
香料........................................................Q.S.
软化水......................................................Q.S.100
抗老化精华液
%
COVACRYL MV 60..............................................0.70
FUCOGEL.....................................................8.00
马达加斯加哈伦加那..........................................5.00
乙二醇......................................................10.00
防腐剂......................................................Q.S.
香料........................................................Q.S.
软化水......................................................Q.S.100
Claims (8)
1.一种包含马达加斯加哈伦加那提取物的化妆品组合物在制备用于促进胶原合成和/或防止皮肤蛋白糖基化的试剂中的用途。
2.如权利要求1所述的用途,其中马达加斯加哈伦加那提取物是叶的提取物。
3.如权利要求1所述的用途,其中马达加斯加哈伦加那提取物是水性提取物。
4.如权利要求3所述的用途,其中马达加斯加哈伦加那提取物用甘油进行稳定。
5.如权利要求1所述的用途,其特征在于所述提取物配制于化妆品组合物中,其包含按干物质重量计、相对于组合物总重量0.01%至10%的所述提取物。
6.如权利要求5所述的用途,其特征在于所述提取物配制于化妆品组合物中,其包含按干物质重量计、相对于组合物总重量0.01%至5%的所述提取物。
7.如权利要求5所述的用途,其中所述化妆品组合物还包含一种或多种配制剂或添加剂。
8.如权利要求7所述的用途,其中所述配制剂或添加剂选自软化剂、染料、成膜剂、表面活性剂、香料、防腐剂、乳化剂、油、醇、紫外线屏蔽剂和维生素。
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