CN104498370A - 一种基于香菇母种的培养基的制作方法 - Google Patents

一种基于香菇母种的培养基的制作方法 Download PDF

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    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
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Abstract

本发明公开了一种基于香菇母种的培养基的制作方法，其特征在于，包括如下步骤：S01：将马铃薯去皮洗净，切成片状放入铝锅中，加入清水煮沸，文火维持30-35分钟，过滤取汁；S02：将琼脂放入水中浸泡后加入马铃薯汁液中，继续加热至全部融化，在加热过程中，使用玻璃棒搅拌；S03：加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B1，并使用热水补足溶液到设定的容积；S04：测定并调节pH值，使得pH值的范围为5.5-6；S05：将配制好的培养基分装入试管中，分装完毕后塞上棉塞；S06：把试管放入高压灭菌锅内进行灭菌；S07：降温后，将培养基摆成斜面，继续冷却凝固后，即制得斜面培养基。工艺简单实用，效果很好，可用于保藏菌种。

Description

一种基于香菇母种的培养基的制作方法
技术领域
本发明涉及一种基于香菇母种的培养基的制作方法。
背景技术
母种系指由孢子、子实体组织、菇木或基质菌丝分离纯化，并在试管培养基上繁殖的菌丝体。用于培育母种的培养基称为母种培养基。一般常用的母种培养基的配方有：PDA培养基、PDY培养基、木屑培养基、麦粒培养基等，其中应用最广的是PDA培养基。
大多数的香菇母种的PDA培养基适合培育母种用，但不能保藏菌种。
发明内容
针对上述问题，本发明提供一种基于香菇母种的培养基的制作方法，工艺简单，可用于保藏菌种。
为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明通过以下技术方案实现：
一种基于香菇母种的培养基的制作方法，其特征在于，包括如下步骤：
S01：将马铃薯去皮洗净，切成片状放入铝锅中，加入清水煮沸，文火维持30-35分钟，过滤取汁；
S02：将琼脂放入水中浸泡后加入马铃薯汁液中，继续加热至全部融化，在加热过程中，使用玻璃棒搅拌；
S03：加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B1，并使用热水补足溶液到设定的容积；
S04：测定并调节pH值，使得pH值的范围为5.5-6；
S05：将配制好的培养基分装入试管中，分装完毕后塞上棉塞；
S06：把试管放入高压灭菌锅内进行灭菌；
S07：降温后，将培养基摆成斜面，继续冷却凝固后，即制得斜面培养基。
本发明的有益效果是：工艺简单实用，效果很好，可用于保藏菌种。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对本发明技术方案作进一步的详细描述，以使本领域的技术人员可以更好的理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。
一种基于香菇母种的培养基的制作方法，包括如下步骤：
S01：将马铃薯去皮洗净，切成片状放入铝锅中，加入清水煮沸，文火维持30-35分钟，过滤取汁；
S02：将琼脂放入水中浸泡后加入马铃薯汁液中，继续加热至全部融化，在加热过程中，使用玻璃棒搅拌，防止沉锅底烧焦或溢出；
S03：加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B1，并使用热水补足溶液到设定的容积。一般而言，假设设定的容积是1000毫升，那么各组分的重量如下：
马铃薯的重量约是200g，葡萄糖的重量约是20g，琼脂的重量约是18-20g，葡萄糖的重量约是20g，磷酸二氢钾的重量约是2g，硫酸镁的重量约是0.5g，维生素B1的重量约是10毫克。
S04：测定并调节pH值，使得pH值的范围为5.5-6，比如，可以使用5%盐酸或5%氢氧化钠溶液调节pH值。
S05：将配制好的培养基分装入试管中，分装完毕后塞上棉塞；
分装试管时，要尽量避免培养基粘附管口、瓶口，如果不慎培养基粘着管、瓶口或管壁，一定要用纱布擦净，以免培养基粘住棉塞而影响接种，或增加杂菌污染机率。试管装量根据需要而定，若制斜面培养基，装量一般为试管高度的1/5～1/4。
塞入试管的棉塞要紧贴管壁，不能留有缝隙。过紧妨碍空气流通，也不便操作；过松则达不到过滤杂菌目的，且棉塞易掉入试管或脱离试管口。松紧度以提起棉塞后试管跟着被提起而不脱落，拔出棉塞可听到轻微的声音为适宜。标准棉塞应是塞头略大，不易变形，入管部分占棉塞总长2/3，露在管外部1/3（不少于l厘米）。近年来，有条件的地方开始使用透气性硅胶塞塞试管口，简单实用，效果很好。
S06：把试管放入高压灭菌锅内进行灭菌，一般是在0.15-0.16兆帕压力下灭菌20-30分钟。
S07：降温后（降温至60-65℃时，以防冷凝水积聚过多），将培养基摆成斜面，继续冷却凝固后，即制得斜面培养基。需要注意，将试管倾斜时，保证斜面长度不超过试管总长度的1/2。
在步骤S06中，可以使用两种方案进行灭菌：
第一种，将试管盖上油纸或牛皮纸并使用绳扎好，竖直放入高压灭菌锅内进行灭菌。
第二种，使用绳子将试管扎成若干捆，棉塞部分用牛皮纸包扎好，竖直放入高压灭菌锅内进行灭菌。
上述香菇母种的培养基的制作方法工艺简单实用，效果很好，可用于保藏菌种。
以上仅为本发明的优选实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或者等效流程变换，或者直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。

Claims (6)

1.一种基于香菇母种的培养基的制作方法，其特征在于，包括如下步骤：
S01：将马铃薯去皮洗净，切成片状放入铝锅中，加入清水煮沸，文火维持30-35分钟，过滤取汁；
S02：将琼脂放入水中浸泡后加入马铃薯汁液中，继续加热至全部融化，在加热过程中，使用玻璃棒搅拌；
S03：加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B1，并使用热水补足溶液到设定的容积；
S04：测定并调节pH值，使得pH值的范围为5.5-6；
S05：将配制好的培养基分装入试管中，分装完毕后塞上棉塞；
S06：把试管放入高压灭菌锅内进行灭菌；
S07：降温后，将培养基摆成斜面，继续冷却凝固后，即制得斜面培养基。
2.根据权利要求1所述的一种基于香菇母种的培养基的制作方法，其特征在于，在步骤S04中，使用5%盐酸或5%氢氧化钠溶液调节pH值。
3.根据权利要求1所述的一种基于香菇母种的培养基的制作方法，其特征在于，在步骤S06中，将试管盖上油纸或牛皮纸并使用绳扎好，竖直放入高压灭菌锅内进行灭菌。
4.根据权利要求1所述的一种基于香菇母种的培养基的制作方法，其特征在于，在步骤S06中，使用绳子将试管扎成若干捆，棉塞部分用牛皮纸包扎好，竖直放入高压灭菌锅内进行灭菌。
5.根据权利要求3或4所述的一种基于香菇母种的培养基的制作方法，其特征在于，在0.15-0.16兆帕压力下灭菌20-30分钟。
6.根据权利要求5所述的一种基于香菇母种的培养基的制作方法，其特征在于，步骤S07中，当培养基降温至60-65℃时，再将培养基摆成斜面。
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