CN104434934A - 包含双膦酸盐和维生素d3的复方制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种包含双膦酸盐和维生素D3的复方制剂及其制备工艺。所述复方制剂包含占复方制剂总重量的20%～30%的双膦酸盐和占复方制剂总重量的0.02%～0.10%的维生素D3，所述复方制剂还包含水溶性环糊精，其中维生素D3与水溶性环糊精的重量比为1:100～1:300，优选1:220～1:300，更优选1:220～1:250。

Description

包含双膦酸盐和维生素D3的复方制剂及其制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种包含双膦酸盐和维生素D3的复方制剂，更具体而言涉及一种包含阿仑膦酸钠和维生素D3的复方片剂及其制备方法。

背景技术

双膦酸盐是人工合成的一类焦膦酸盐类似物，由2个碳膦键(P-C-P)取代焦膦酸盐的氧膦键(P-O-P)，并对碳原子的侧链进行化学修饰而成。该类化合物是潜在骨吸收抑制剂，可降低破骨细胞的活性，并增加其细胞凋亡。临床研究证实，双膦酸盐类化合物在治疗骨质疏松症、增加骨质量和减少骨折方面均有显著疗效。迄今，双膦酸盐类药物已开发出十几种产品，按其分子结构可分为三代，其中第二代是在侧链中引入氢基，又称为氨基双膦酸盐，如阿仑膦酸钠(alendronate)、帕米膦酸钠(pamidronate)，伊班膦酸钠(ibandronate)及奥帕膦酸钠(olpadronate)¹⁾。

阿仑膦酸钠是一种含氮双膦酸盐，口服5或10mg/d可使有或无骨质疏松症的绝经后妇女、男性骨质疏松患者或者有或无因使用糖皮质激素的骨质疏松男女的骨密度(BMD)持续增加。对于绝经后骨质疏松妇女，口服阿仑膦酸钠10mg/d在持续增加BMD方面优于鼻降钙素，至少与合用雌激素和雷洛昔芬同样有效²)。阿仑膦酸钠可用于治疗男性骨质疏松，一项研究对24例男性随机给予阿仑膦酸钠10mg/d或安慰剂，另一项是对34例男性随机给予10mg/d阿仑膦酸钠或α-骨化醇1mg/d，24个月后两项研究中阿仑膦酸钠组BMD均显著增加，腰椎增加7%～10%，股骨颈增加2.5%～5.2%³)。

另一项研究评估了阿仑膦酸钠对多发性全身骨折危险及发生率的影响。对年龄在55～81岁至少有一次脊椎骨折(n=2027)或没有脊椎骨折但满足WHO骨质疏松股骨颈BMDT≤2.5(n=1631)的受试者均给予钙1000mg/d或500mg钙及250U胆骨化醇，然后随机给予安慰剂或阿仑膦酸钠(5mg/d共2a，然后10mg/d)，平均随访4.3a。结果安慰剂组1818例中有86例发生多发性全身骨折，1841例接受阿仑膦酸钠者中有51例。阿仑膦酸钠组多发性全身骨折危险下降42%(RR=0.58，95%CI=0.41)，脊椎骨折率下降84%(相对危险=0.16，95%CI=0.05)⁴⁾。

维生素D为脂溶性维生素，是固醇类衍生物。现已知的维生素D有多种，比较重要的是维生素D2和D3。

人们发现维生素D本身并没有生理功能，只有转变为它的活性形式才能成为有生理活性的有效物质。维生素D的活性形式有：25-羟维生素D3、1,25-二羟维生素D3、24,25-二羟维生素D3等，其中以1,25-二羟维生素D3为主要形式。膳食中的维生素D3在胆汁的作用下，在小肠乳化被吸收入血。从膳食和皮肤两条途径获得的维生素D3与血浆α-球蛋白结合被转运至肝脏后，首先在肝细胞内质网和线粒体中，经25-羟化酶作用，变成25-羟维生素D3，然后再在肾脏中混合功能氧化酶-1a羟化酶作用，变成1,25-二羟维生素D3，其活性比25-羟维生素D3高500～1000倍⁵)。然后在DBP转运蛋白的载运下，经血液到达小肠、骨等靶器官中与靶器官的核受体(VDRn)或膜受体(VDRm)结合，发挥相应的生物学效应。

维生素D的主要作用是调节钙、磷代谢，促进肠内钙磷吸收和骨质钙化，维持血钙和血磷的平衡。具有活性的维生素D作用于小肠黏膜细胞的细胞核，促进运钙蛋白的生物合成。运钙蛋白和钙结合成可溶性复合物，从而加速了钙的吸收。维生素D促进磷的吸收，可能是通过促进钙的吸收间接产生作用的。因此，活性维生素D对钙、磷代谢的总效果为升高血钙和血磷，使血浆钙和血浆膦的水平达到饱和程度。有利于钙和磷以骨盐的形式沉积在骨组织上促进骨组织钙化⁶)。

双膦酸盐药物具有早期抑制骨冲吸收的作用，在服用双膦酸盐药物几天到几周后，会使血中钙的浓度降低，导致低血钙症。这种低血钙症在维生素D缺乏的患者身上表现尤为明显。治疗过程中新骨形成所需的钙需从食物或钙剂补充，而维生素D及其活性类似物可以促进肠道内钙的吸收，并提高血钙浓度，恰能对抗双膦酸盐的这种副作用。对于骨质疏松的患者，在服用双膦酸盐的同时补充适量的维生素D和钙质是很有必要的。但双膦酸盐易与钙离子和其他二价阳离子络合而影响其吸收，导致生物利用度的降低，因而双膦酸盐与钙剂不宜同时服用。将双膦酸盐与维生素D或其活性类似物制成复方制剂，可以缓解服用阿仑膦酸钠产生的副作用，还能促进钙的吸收，最大程度的防治骨质疏松症状，并能方便患者服用，毒副作用小。目前已存在不少针对双膦酸盐与维生素D3的复方制剂的研究。

然而，维生素D3是脂溶性维生素，易溶于乙醇，难溶于水，制成口服固体制剂后溶出往往偏低，且维生素D3为高活性物质，含维生素D3的口服制剂规格很小，上市制剂的最低规格仅为2.5μg，制剂中维生素D3的含量均匀度难以保证。维生素D3对光、氧气、高温和高湿均不稳定，在潮湿空气中几天就氧化失活，因此制备合格的含维生素D3口服制剂，具有相当大的挑战性。

为提高维生素D3在制剂中的稳定性，CN1993134公开了一种阿仑膦酸钠维生素D3片的处方，其中维生素D3被包裹在蔗糖、淀粉、明胶和中链甘油三酯为基质的微粒中，形成微囊，维生素D3含量的稳定性因此有很大提高。但是中链甘油三酯可与维生素D3发生酯基转移反应，降解生成维生素D3酯，是非活性成分，需要严格控制其生成量，微囊化维生素D3为外表光滑的微球，与其它原辅料粉末形态不同，不易混匀，维生素D3均匀度不好控制。CN101534834公开了一种包含维生素D3和环糊精的固体分散体制备工艺，维生素D3和2-羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)溶于乙醇/水溶液中，喷雾干燥得到固体分散体，喷雾干燥机入口温度为50℃，固体分散体在50℃继续干燥2小时。此干燥工艺的缺点是，HP-β-CD溶液的粘度比较大，喷雾干燥过程中喷嘴容易堵塞，而且物料会粘附到设备内壁上，分散体去除溶剂需要较高的干燥温度和较长的时间，不利于维生素D3的稳定，生产上也不易实现，此外，固体分散体量少，而其他原辅料量多，在将固体分散体与其他原辅料混合时，不容易混匀。CN101254196公开了一种含双膦酸化合物和维生素D3包合物的复合制剂制备方法，在溶液中制备维生素D3的HP-β-CD包合物，通过冷冻干燥去除溶剂，此工艺的缺点是，HP-β-CD与水或乙醇的亲和力较大，冷冻干燥的生产周期较长(通常大于10小时)，冻干样品容易吸潮，对后续制剂过程环境湿度有较高要求，工艺比较复杂，不利于产业化。

因而需要一种既能提高维生素D3的稳定性、溶出度和含量均匀度、又操作简单的制备包含双膦酸盐和维生素D3的复方制剂的方法。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种包含双膦酸盐和维生素D3的复方制剂。

本发明所述的复方制剂以双膦酸盐和维生素D3作为活性成分，其中双磷酸盐占复方制剂总重量的20%～30%，维生素D3占复方制剂总重量的0.02%～0.10%。本发明所述的复方制剂还包括水溶性环糊精，其中维生素D3与水溶性环糊精的重量比为1:100～1:300，优选为1:220～1:300，更优选1:220～250。在本发明的复方制剂的制备过程中，无需将维生素D3与水溶性环糊精制成固体分散体或包合物，而是将维生素D3与水溶性环糊精制成粘合剂溶剂，然后直接将粘合剂溶液与双膦酸盐混合进行湿法制粒。

本文所述水溶性环糊精选自2-羟丙基-β-环糊精、羟乙基-β-环糊精、磺丁基醚-β-环糊精、羧甲基-β-环糊精、甲基-β-环糊精、葡萄糖基-β-环糊精和麦芽糖基-β-环糊精中的一种或多种，优选2-羟丙基-β-环糊精。水溶性环糊精在复方制剂中既是粘合剂，同时又作为助溶剂和稳定剂，增加维生素D3的溶解度，进而提高维生素D3制剂的溶出度。

维生素D3与水溶性环糊精的比例很重要，当处方中维生素D3与水溶性环糊精的重量比为1:100～1:300，优选为1:220～1:300，更优选1:220～1:250时，制得的复方制剂中维生素D3具有良好的稳定性、溶出度和含量均匀度。当处方中水溶性环糊精的量太多，粘合剂的粘度增大，制粒过程中，粘合剂损失过多；当处方中水溶性环糊精的量太少时，对维生素D3的保护作用减弱，导致维生素D3的稳定性下降。

水溶性环糊精占总复方制剂重量的0.5%～15%、优选5%～10%。如果水溶性环糊精用量太少，对维生素D3的稳定作用不够，且对维生素D3的溶出增溶效果不明显，水溶性环糊精用量太大，粘度增加，湿法制粒时粘合剂损失过多。

本发明所述双膦酸盐包括但不限于：阿仑膦酸盐、依替膦酸盐、氯磷酸盐、帕米磷酸盐、替鲁磷酸盐、利塞膦酸盐、英卡膦酸盐和唑来膦酸盐以及它们药学上可接受的盐或水合物；优选为阿仑膦酸盐或其药学上可接受的盐或水合物；更优选为阿仑膦酸钠。

本发明所述的复方制剂还可以包括一种或多种药学上可接受的辅料，所述辅料包括填充剂、崩解剂、抗氧化剂、润滑剂、助流剂、润湿剂、载体、粘合剂、稀释剂、压制助剂、缓冲剂、悬浮剂、乳化剂、表面活性剂和着色剂等。

填充剂包括但不限于以下组中的至少一种成分：乳糖、预胶化淀粉、微晶纤维素等。

崩解剂包括但不限于以下组中的至少一种成分：羧甲基淀粉钠、羟丙基纤维素、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素纳、交联羧甲基淀粉钠等。崩解剂的加入方式可选自内加、外加、内外加三种方式中的任一种方式。

抗氧化剂的典型实例是丁基羟基甲苯(BHT)。

润滑剂包括但不限于以下组中的至少一种成分：硬脂酸镁、硬脂酸钠、苯甲酸钠、油酸钠、乙酸钠和氯化钠。

助流剂的代表性实例包括胶态二氧化硅和滑石粉。

润湿剂为不同浓度的乙醇溶液。

载体或赋形剂可包括但不限于以下组中的至少一种成分：甘露醇、羟丙基纤维素、右旋糖、乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、甲基纤维素、磷酸钙、硅酸钙、硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙、明胶、滑石粉、山梨醇和交联羧甲基纤维素钠。

本发明所述的复方制剂可以是固体口服制剂，包括但不限于片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂和其他常用固体口服制剂。

在一个特别优选的实施方案中，所述复方制剂为复方片剂，双膦酸盐为阿仑膦酸钠，水溶性环糊精为HP-β-CD，其中维生素D3与HP-β-CD的重量比为1:250。

在一个更特别优选的实施方案中，本发明所述的复方制剂是一种片剂，其包括维生素D3、阿仑膦酸钠、丁基羟基甲苯(BHT)、HP-β-CD、乳糖Flowlac100、微晶纤维素102、交联羧甲基纤维素钠、BHT、胶态二氧化硅、硬脂酸镁，其中维生素D3与HP-β-CD的重量比为1:250。

本发明的另一个目的是提供一种制备包含双膦酸盐和维生素D3的复方制剂的方法。

本发明所述的制备方法包括以下步骤：

(1)将维生素D3溶解在含水溶性环糊精的乙醇溶液中，得到粘合剂溶液，其中维生素D3与水溶性环糊精的重量比为1:100～1:300，优选1:220～1:300，更优选1:220～1:250；

(2)将双膦酸盐与粘合剂溶液混合进行湿法制粒，得到湿颗粒；

(3)将湿颗粒进行后处理，得到本发明的复方制剂。

水溶性环糊精常用于制备难溶性药物的包合物，水溶性环糊精的浓度越高，粘性越大，而粘度一般是制剂工艺过程中需要克服的缺点，但在本发明中，粘度不再是缺点，利用水溶性环糊精的粘性进行湿法制粒，将维生素D3均匀的粘附在其他原辅料粉末的表面，提高了维生素D3的分散程度，而且维生素D3分子周围是亲水性的水溶性环糊精，更有利于维生素D3的溶出，因此，维生素D3的均匀度和溶出均有很大程度的改善。

在步骤(1)中，乙醇溶液的浓度应大于70%，原因是湿法制粒所需粘合剂溶液的量是有限的，而活性成分在乙醇中易溶而在水中难溶，为使药物在有限的润湿剂中溶解，润湿剂乙醇的浓度应大于70%。

在步骤(3)中，在制备复方片剂、颗粒剂、胶囊剂等制剂的情况中，后处理包括干燥步骤，即将湿颗粒干燥。通常是在40～50℃的温度下、优选在40℃下进行干燥，干燥时间为1～1.5小时。在这样的温度下进行干燥，更有利于维生素D3的稳定。湿颗粒干燥后，经压片制得片剂。而湿颗粒干燥后直接灌装，可得到颗粒剂，装胶囊即得胶囊剂。

而在制备复方丸剂的情况中，后处理包括湿颗粒制丸，干燥整理得干丸干丸抛光后还可进行包衣。

此外，复方制剂中的乙醇残留量应不超过0.5%，过多会影响产品稳定性，也可能给病人带来副作用等不良反应。采用传统制粒工艺制得的维生素D3的HP-β-CD固体分散体于40℃干燥1小时，乙醇约为4-5%，而采用本发明的制备方法，无需制备维生素D3的HP-β-CD固体分散体，仅通过将维生素D3溶于水溶性环糊精的乙醇溶液，湿法制粒，就能达到增加维生素D3稳定性，同时促进维生素D3溶出的目的。在本发明的湿法制粒过程中，粘合剂溶液均匀分散到其它原辅料表面，水溶性环糊精的粘度被分散，因此溶剂更容易干燥除去，湿颗粒40℃干燥1小时，乙醇含量低于0.17%。

本发明所述的制备方法的一个具体实施方案如下所示：

将维生素D3溶解在HP-β-CD的乙醇溶液中制成粘合剂溶剂，其中维生素D3与HP-β-CD的重量比为1:100～1:300；将该粘合剂溶液与双膦酸盐混合进行湿法制粒；对湿颗粒进行适宜的后处理制成固体复方制剂。

在制备复方片剂的一个优选的实施方案中，制备方法包括将维生素D3与抗氧化剂等适宜的药学上可接受的辅料溶解在HP-β-CD的70%以上的乙醇溶液中作为粘合剂溶剂，其中维生素D3与HP-β-CD的重量比为1:200～1:250；将该粘合剂溶液与双膦酸盐和填充剂、崩解剂等适宜的药学上可接受的辅料混合进行湿法制粒；将得到的湿物料在40℃～50℃下干燥1-1.5小时；将干燥后的物料与抗氧化剂、助流剂等适宜的药学上可接受的辅料混合；最后加入适合的润滑剂总混，压片。

在一个特别更优选的实施方案中，制备包含阿仑膦酸钠和维生素D3的复方片剂的方法包括：将维生素D3和辅料丁基羟基甲苯(BHT)溶解在HP-β-CD的95%溶液中作为粘合剂溶液，其中D3与HP-β-CD的重量比为1:250；将该粘合剂溶液与阿仑磷酸钠、乳糖、微晶纤维素、交联甲基纤维素钠一起进行湿法制粒，物料在40℃左右干燥1-1.5小时，将干燥后的物料与BHT、胶态二氧化硅混合，然后加入硬脂酸镁进行总混，压片。

本发明的又一个目的是提供包含双膦酸盐和维生素D3的复方制剂在制备用于治疗骨质疏松症或者用于预防和治疗因骨质疏松而引起的骨折的药物中的应用。

有益效果：

1、本发明所述的制备方法，无需将维生素D3和水溶性环糊精制备成固体分散剂或固体包合物，简化了工艺步骤，工艺简单，用最常规的设备即可实现产业化。

2、采用本工艺生产，维生素D3溶于水溶性环糊精的乙醇溶液中，湿法制粒，干燥时间小于2小时，所得产品没有维生素D3酯生成，维生素D3含量稳定，溶出和均匀度均良好。

3、当复方制剂中维生素D3与水溶性环糊精的重量比为1:100～1:300，优选1:220～1:300，更优选1:220～1:250时，制得的口服制剂中维生素D3具有良好的稳定性、溶出度和含量均匀度。

4、维生素D3为难溶性药物，将其溶解在水溶性环糊精的乙醇溶液中，湿法制粒，维生素D3均匀分散到其它原辅料粉末表面，维生素D3分子周围是亲水性的水溶性环糊精，维生素D3的溶出有效改善。

5、在湿法制粒过程中，粘合剂溶液均匀分散到其它原辅料表面，水溶性环糊精的粘度被分散，因此溶剂更容易干燥除去。湿颗粒40℃干燥1小时，乙醇含量低于0.17%。

附图说明

图1示出根据本发明实施例1制备得到的复方制剂(即韩美制剂)与参比制剂的溶出曲线的比较。

图2示出根据本发明实施例2制备得到的复方制剂(即韩美制剂)与参比制剂的溶出曲线的比较。

具体实施方式

下列实施例仅用于例证本发明的某些方面和实施方案的目的，并不以任何方式限制本发明的范围。

实施例1：

1.处方

制备本发明所述的复方制剂的详细处方如表1所述。

表1

2.制备方法

将主成份阿仑膦酸钠和辅料BHT分别粉碎过80目筛，备用。按照表1中的处方量称取BHT与维生素D3、2-羟丙基-β-环糊精溶解于1800g95%乙醇中制成粘合剂溶液，剩余乙醇备用。将过筛后的主成份阿仑膦酸钠、乳糖Flowlac100、微晶纤维素101、交联羧甲基纤维素钠放入湿法制粒机(GHL250哈尔滨纳诺医药化工设备有限公司)，然后再将粘合剂溶液倒入湿法制粒机中，用剩余乙醇清洗容器内残留的粘合剂溶液，倒入湿法制粒机内进行湿法制粒，搅拌速度：100rpm，切碎速度：高速，制粒时间：2分钟，软材过26目筛制粒。制得的湿颗粒在40℃下干燥1小时。胶态二氧化硅和100g干燥后的颗粒混合，过26目筛。然后将胶态二氧化硅混合物、20g BHT、与剩余的干燥后的颗粒混合30分钟，添加硬脂酸镁总混5分钟。采用GZPK3045型高速压片机(上海天祥健台制药有限公司)在压力为4.5KN、转速为15rpm的条件下压片。

3.溶出曲线比较

(1)试验样品

韩美制剂：根据实施例1所述处方和制备方法制备得到的复方片剂，规格为70mg/2800IU。

参比制剂：阿仑膦酸钠维D3片剂，规格：70mg/2800IU，批号R1345，杭州默沙东制药有限公司进口分装。该参比制剂是用巴斯夫公司生产的维生素D3干粉(微囊结构)与其他物料混合后压片制成的，其中不包含2-羟丙基-β-环糊精。

(2)溶出度试验方法

根据FDA官方网站推荐的阿仑膦酸钠维D3片溶出度检查方法(见下面表2)设定溶出条件。

表2

溶出条件：

溶出介质：称取十二烷基磺酸钠(SDS)3g，加水溶解并稀释至1000ml,摇匀，即得。

介质体积：500ml

装置：桨法(中国药典2010年版二部附录ⅩC第二法)

转速：75转

介质温度：37℃

取样时间：45min

(3)溶出度测定条件

色谱柱：Platinum EPSC18，150×4.6mm，3μm

流动相：乙腈-水(93:7)

检测器：UV265nm

流速：1.5ml/min

进样量：100μl

(4)溶出度结果

韩美制剂与参比制剂的溶出度结果见表3，溶出曲线见图1。

表3

结果表明在本发明实施例1的复方制剂中维生素D3的溶出度相对于参比制剂具有很大程度的改善。

4.维生素D3的含量均匀度

随机抽取15片药品，测定维生素D3的含量。

维生素D3含量测定条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.025％磷酸溶液为流动相A，乙腈-流动相A(99:1)为流动相B，按如下表4所示的梯度时间表进行梯度洗脱；流速为1.2ml/min；柱温为25℃；进样温度为5℃±3℃；检测波长为265nm。

表4：

时间(分钟)	流动相A%	流动相B%
			0	51.5	48.5
16	13	87
			39	10	90
43	0	100
			57	0	100
57.1	51.5	48.5
			65	51.5	48.5

测得的维生素D3的含量结果见表5。

表5

结果表明在根据本发明实施例1的复方制剂中维生素D3的含量符合要求。相比传统工艺制粒，本方法的复方制剂更稳定，而且可用最常规的湿法制粒方法制备，明显提高生产效率。

实施例2：

1.处方

制备本发明所述的复方制剂的详细处方如表6所述。

表6

2.制备方法

将主成份阿仑膦酸钠和辅料BHT分别粉碎过80目筛。按照表6中的处方量称取BHT与维生素D3、2-羟丙基-β-环糊精溶解于2000g95%乙醇中制成粘合剂溶液，剩余乙醇备用。将过筛后的主成份阿仑膦酸钠、乳糖Flowlac100、微晶纤维素101、交联羧甲基纤维素钠按照处方量放入湿法制粒机(GHL250哈尔滨纳诺医药化工设备有限公司)，然后再将粘合剂溶液倒入湿法制粒机中，用剩余乙醇清洗容器内残留的粘合剂溶液，倒入湿法制粒机内进行湿法制粒，搅拌速度：100rpm，切碎速度：高速，制粒时间：2分钟，软材过26目筛制粒。制得的湿颗粒在40℃下干燥1小时。将胶态二氧化硅和100g干燥后的颗粒混合，过26目筛。然后将胶态二氧化硅混合物、30g BHT与剩余的干燥后的颗粒混合30分钟，添加硬脂酸镁总混5分钟。采用GZPK3045型高速压片机(上海天祥健台制药有限公司)，在压力为4.5KN、转速为15rpm的条件下压片。

3.溶出曲线比较

(1)试验样品

韩美制剂：根据实施例2所述处方和制备方法制备得到的复方片剂，规格70mg/5600IU。

参比制剂：阿仑膦酸钠维D3片剂，规格：70mg/5600IU，批号S3572，杭州默沙东制药有限公司。

(2)溶出度试验方法

溶出条件：

溶出介质：称取十二烷基磺酸钠(SDS)3g，加水溶解并稀释至1000ml,摇匀，即得。

介质体积：500ml

装置：桨法(中国药典2010年版二部附录ⅩC第二法)

转速：75转

介质温度：37℃

取样时间：45min

(3)溶出度测定条件

色谱柱：Platinum EPSC18，150×4.6mm，3μm

流动相：乙腈-水(93:7)

检测器：UV265nm

流速：1.5ml/min

进样量：100μl

(4)溶出度结果

实施例2的韩美制剂与参比制剂的溶出度结果见表7，溶出曲线见图2。

表7

时间(min)	0	5	10	15	20	30	45
								参比制剂	0	56.85	82.10	87.79	86.80	88.35	88.06
韩美制剂	0	76.35	88.39	89.83	90.86	92.07	93.30

结果表明在根据本发明实施例2的复方制剂中维生素D3的溶出度相对于参比制剂具有很大程度的改善。

4.影响因素试验

方法：将根据实施例2制得的韩美制剂分别在40℃、60℃、高湿(RH75%，RH92.5%)、强光条件下保存10天，与参比制剂在60℃条件下保存10天，对比维生素D3含量。维生素D3含量的测定条件同实施例1。结果见表8。

表8

结果表明根据本发明实施例2的复方制剂在上述条件下非常稳定，各项指标均符合药品标准。其在高温(60℃)条件下比参比制剂稳定性更好。可以看出本发明的工艺及处方优化效果显著。

实施例3：

为了确定最优的辅料比例，本申请发明人试验了具有不同比例的环糊精的复方制剂中维生素D3的含量变化。不改变实施例2的处方中的其他条件，用不同剂量的2-羟丙基-β-环糊精压片，测试复方制剂在60℃下10天后的维生素D3含量。维生素D3含量的测定条件同实施例1。结果见表9。

表9

从表9的结果中可以看出2-羟丙基-β-环糊精与维生素D3在220～300:1的条件下，药品的稳定性最佳。

实施例4：

按实施例1和实施例2的处方放大生产，对制得的样品进行加速试验(40±2℃，75±5%RH)，分别在1、2、3个月检测阿仑膦酸钠和维生素D3的含量、溶出和有关物质含量。

维生素D3的含量、溶出的检测条件和方法分别如实施例1和2所述。

有关物质含量检测方法如下所述：

维生素D3供试品溶液的制备：将根据实施例1和2的处方放大生产制得的样品随机取出15片，置50ml量瓶中，加稀释剂(甲醇：水(95:5))适量，振荡至少10分钟至所有片剂全部崩解，再超声并时时振摇至少30分钟，直到碎块分散，继续振荡3小时，用甲醇：水(95:5)稀释至刻度，摇匀，取适量离心，取上清液作为供试品溶液。

检测方法：取维生素D3供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，用甲醇：水(95：5)稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；精密量取对照溶液1ml，置10ml量瓶中，用甲醇：水(95:5)稀释至刻度，摇匀，作为灵敏度测试溶液；取灵敏度测试溶液100μl，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰能准确积分，再精密量取供试品溶液和对照溶液各100μl，分别注入液相色谱仪(Agilent1260，安捷伦科技有限公司)，色谱条件与含量测定条件相同，供试品溶液的色谱图中如显杂质峰，扣除溶剂和赋形剂的色谱峰，按照加校正因子的自身对照法计算各杂质的含量，含反式维生素D3不得超过0.6%，相对保留时间为0.78处的杂质不得超过0.5%，相对保留时间为0.96处的杂质不得超过0.5%，相对保留时间为1.09处的杂质不得超过0.5%，C8-维生素D3酯不得超过1.2%，C10-维生素D3酯不得超过0.7%，任何其他单个未知杂质不得超过0.2%，酯类杂质总量不得过超1.9%，其他杂质总量(除了酯类杂质以外所有单个杂质的总和)不得超过1.9%。(峰面积低于灵敏度测试溶液主峰面积的未知杂质色谱峰不计入其他杂质总量)。

结果分别见表10和表11。结果表明稳定性试验进行3月，按照实施例1和实施例2的处方制备的复方制剂中两种主成分的含量、有关物质及溶出均符合质量规定。

参考文献

1)于新蕊，周丽颖.双膦酸盐类药物治疗骨相关疾病.世界最新医学信息文摘.2004.10，3(5)：1288.

2)Sundqvist G,Figdor D,Person S,et al.Microbiologic analysis of teeth withfailed endodonfic treatment and the outcome of conservative re-treatment.OralSurg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod.1998,85(1):86

3)Behnen MJ,West LA,Liewehr FR,et al.Antimicrobial activity of severalcalcium hydroxide preparations in root canal dentin.J Endod,2001,27(12):765

4)Siqueira JF,Lopes HP,Uzeda MD.Recontamination of coronally unsealedroot canals medicated with camphorated paramonochlorophonel or calciumhydroxide pastes after saliva challenge.J Endod,1998,24:11～14

5)雄礼鹏.维生素D及其代谢物研究进展.国外医学、临床生物化学与检验学分册，1991，12(4)：163

6)杨春华.维生素D简介.中国实用医药,2009,4(3)

Claims (10)

1.一种复方制剂，其特征在于：所述复方制剂包含占复方制剂总重量的20%～30%的双膦酸盐和占复方制剂总重量的0.02%～0.10%的维生素D3，所述复方制剂还包含水溶性环糊精，其中维生素D3与水溶性环糊精的重量比为1:100～1:300，优选1:220～1:300，更优选1:220～1:250。

2.根据权利要求1所述的复方制剂，其特征在于：水溶性环糊精占复方制剂总重量的0.5%～15%，优选5%～10%。

3.根据权利要求1或2所述的复方制剂，其特征在于：水溶性环糊精选自2-羟丙基-β-环糊精、羟乙基-β-环糊精、磺丁基醚-β-环糊精、羧甲基-β-环糊精、甲基-β-环糊精、葡萄糖基-β-环糊精和麦芽糖基-β-环糊精中的一种或多种，优选2-羟丙基-β-环糊精。

4.根据权利要求1或2所述的复方制剂，其特征在于：所述双膦酸盐选自以下组中的一种或多种：阿仑膦酸盐、依替膦酸盐、氯磷酸盐、帕米磷酸盐、替鲁磷酸盐、利塞膦酸盐、英卡膦酸盐和唑来膦酸盐以及它们药学上可接受的盐或水合物。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的复方制剂，其特征在于，所述复方制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂或丸剂。

6.根据权利要求1所述的复方制剂，其特征在于：所述复方制剂为片剂，所述双磷酸盐为阿仑磷酸钠，所述水溶性环糊精为2-羟丙基-β-环糊精，并且其中维生素D3与2-羟丙基-β-环糊精的重量比为1:250。

7.如权利要求1-6所述的复方制剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)将维生素D3溶解在含水溶性环糊精的乙醇溶液中得到粘合剂溶剂；

(2)将粘合剂溶液与双膦酸盐混合进行湿法制粒，得到湿颗粒；

(3)对湿颗粒进行后处理，制成本发明的复方制剂。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：所述后处理包括干燥步骤；优选地，干燥在40～50℃的温度下进行，干燥时间为1～1.5小时。

9.根据权利要求7所述的制备方法，所述乙醇溶液的浓度大于70%。

10.如权利要求1-6中任一项权利要求所述的复方制剂在制备治疗骨质疏松症或者预防或治疗由骨质疏松症引起的骨折的药物中的应用。