CN104434785A - 一种西红花酸盐注射剂及其制备工艺 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种西红花酸盐及其注射剂型，水溶性较好，药物直接进入血液，起效迅速、稳定可靠；将西红花酸盐、氯化钠，溶于注射用水中，制成西红花酸盐注射剂，该注射剂能提高西红花酸的生物利用度，迅速发挥治疗作用且质量稳定。

Description

一种西红花酸盐注射剂及其制备工艺

技术领域

本发明涉及西红花酸盐注射液，属于医药制剂领域。

背景技术

心脑血管疾病具高死亡率、高复发率、高致残率等特点。随着我国逐渐步入老龄化社会，心脑血管疾病对我国人民的影响也越来越大，严重威胁着患者的生命，如果得不到及时有效的治疗，很容易引起死亡。现在心脑血管疾病治疗主要以化学合成药物及生物制品为主，其对肝脏损伤较大，且治疗效果不够理想。

西红花酸(Crocetin)可改善血浆中的氧扩散及消耗，用于治疗高血压、冠心病、高血脂等，还具有显著的利胆和降胆固醇作用，其作用机理是与西红花酸增加机体脂肪代谢能力有关，主要作用包括调血脂作用、抑制血小板聚集和血栓形成、改变血液流变学、降低血液粘滞度、增加血氧饱和度和抗心肌缺血等作用，为抗心脑血管疾病新药的研制提供新思路。但西红花酸的化学结构为长链多不饱和共轭烯酸结构，结构式如下：

导致水溶性差，在体内的吸收和生物利用度较小，在胃中及肠道中几乎不被吸收，影响了其药效作用的发挥，因此通过一定的化学技术手段，将西红花酸溶解于一定浓度液体试剂中，配制成注射液可发挥其良好的降脂疗效，并进一步应用于治疗心脑血管疾病，将具有很好社会和经济价值。

西红花酸在藏红花中的含量约1％左右，由于藏红花的生长条件苛刻，产量极低，所以价格极其昂贵，而在中药栀子中，也含有一定量的西红花酸，但含量不高，制约了其应用，但栀子中西红花苷含量丰富，天然提取的栀子西红花苷并采用半合成方法得到西红花酸，其收率较高，纯度较好，副作用小，更适宜临床应用。基于国内外对栀子西红花酸报道较少，而对西红花酸盐的研究几乎处于空白阶段，为此本发明提供一种生物利用度高、安全可靠、起效迅速的抗心脑血管疾病新药。

发明内容

本发明目的在于提供一种西红花酸盐注射液及其制备工艺，该注射剂具有生物利用度高、使用方便和安全可靠等优点，适用于临床治疗；制备工艺简便、经济、适宜工业化生产，社会经济效益高，解决西红花酸在水中溶解度较低的问题。

本发明的实施步骤：

（1）栀子果实进行粉碎、超声提取1h，提取溶媒为6-8倍量的75%的乙醇，过滤，重复操作，合并滤液，减压浓缩；

（2）浓缩液加入适量的一定浓度的乙醇，低温放置，滤过，滤液浓缩后重复上述操作，滤过取沉淀，用适量水溶解，注入串联大孔树脂柱中，用不同浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，减压干燥，得栀子提取物；

（3）采用硅胶层析法，以一定比例乙酸乙酯：甲醇：水溶液为流动相进行洗脱，收集洗脱液并浓缩干燥，得到西红花苷；

（4）西红花苷溶于KOH水溶液中，进行控温，至反应停止后自然冷却，滴加盐酸，调节pH，抽滤并水洗，干燥得到粗品西红花酸；产品用95%乙醇溶解除杂，控温，回流冷却、抽滤、重结晶，得精制西红花酸晶体，将所得西红花酸晶体溶于一定量氨水溶液中，一定温度下回流搅拌、浓缩、抽滤，得到西红花酸盐制品。

（5）上述西红花酸盐精制品为主成分，加入氯化钠，用注射用水充分溶解、滤过，灌封于10ml安瓿瓶中，流通蒸汽灭菌45min，得到注射剂成品。

所述西红花酸盐注射液的制备工艺，其特征在于：

步骤（1）减压浓缩至相对密度1.15-1.20；

步骤（2）减压浓缩至相对密度1.15-1.20，冷藏温度为-8--2℃，串联大孔树脂柱为D101与AB-8型串联，洗脱条件为15%乙醇洗至近无色，用85%乙醇洗脱，收集洗脱液；

步骤（3）洗脱剂乙酸乙酯：甲醇：水溶液=41-3：25：32-34；

步骤（4）氢氧化钾的浓度为10%-15%，反应的温度控制在90-100℃，盐酸浓度为20-30%，调节PH=2-3，95%乙醇除杂的温度控制在50-60℃；

    本发明西红花酸盐注射液为水针剂，活性成分为西红花酸盐。

    本发明的有益效果在于增加药物的水溶性，提高其生物利用度，同时药物直接进入血液，起效迅速、作用稳定可靠、无刺激性，适用于不能自主吞咽的患者。

附图说明

图1为所制备栀子提取物全波段扫描色谱图。

图2为所制备栀子提取物高效液相色谱图。

图3为所制备西红花苷高效液相色谱图。

图4为所制备西红花酸粗品的高效液相色谱图。

分析图1全波段扫描图可见，根据栀子提取物在190~500nm波长下的吸光度，结合相关文献可知，在波长238nm、440nm波长下提取物中成分的吸光度值较大，分别为栀子苷和西红花苷类物质，因此以440nm作为西红花苷的检测波长。

分析图2栀子提取物色谱图可见，在波长440nm下检测西红花苷类物质，峰1为西红花苷-Ⅰ，峰 2为西红花苷-Ⅱ，峰3为西红花酸，西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ与邻峰具有良好的分离度，且吸光度值较大，440nm可作为西红花苷类物质的检测波长。

分析图3制备西红花苷色谱图可见，与图2相比，经过纯化后的西红花苷类物质纯度明显提高。

分析图4制备西红花酸粗品色谱图可见，西红花酸经酸碱反应后，得到的西红花酸粗品纯度较高。

具体实施方式

结合实施例对本发明进一步描述：

实施例1：

本实施例采用栀子果实100g粉碎，以800g的75%乙醇为溶媒超声提取1h，过滤，滤渣加入600g的75%乙醇为溶媒超声提取1h，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.15，浓缩液中加入400g的80%乙醇冷藏10h，滤去沉淀物，上清液减压浓缩至相对密度为1.15，加入800g的80%乙醇冷藏10h，沉淀物用水溶解，注入D101与AB-8型串联大孔树脂柱中，用15%乙醇洗至近无色，用85%乙醇洗脱，收集洗脱液，减压干燥，得栀子提取物，备用。

将栀子提取物溶于水后50℃烘干并研磨成粉，得到精制栀子提取物，溶于95%乙醇中，与硅胶、乙酸乙酯进行拌样，挥干乙醇，备用；以乙酸乙酯：甲醇：水溶液=41:25:34作为硅胶层析法洗脱流动相，将栀子提取物加入层析柱中，进行洗脱除杂，并且收集洗脱溶液，浓缩，干燥并研磨成粉，得到西红花苷。

取适量西红花苷溶于10%KOH水溶液中，控制温度为90℃，搅拌回流反应，反应停止后产物自然冷却，滴加20%的盐酸，调节pH=2，抽滤，用水洗涤滤饼，干燥得到粗品西红花酸；产品用95%乙醇溶解除杂，控制温度50℃，回流30min，冷却，抽滤，重结晶，得精制西红花酸晶体，HPLC检测含量为99.2%；将所得西红花酸晶体溶于氨水溶液中，50℃回流搅拌，浓缩，抽滤，得到西红花酸盐制品，HPLC检测含量为99%以上。

上述西红花酸盐精制品为主成分，加入氯化钠，用注射用水充分溶解、滤过，灌封于10ml安瓿瓶中，流通蒸汽灭菌45min，即得注射剂成品。

实施例2：

本实施例采用栀子果实100g粉碎，以800g的75%乙醇为溶媒超声提取1h，过滤，滤渣加入600g的75%乙醇为溶媒超声提取1h，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.20，浓缩液中加入400g的80%乙醇冷藏10h，滤去沉淀物，上清液减压浓缩至相对密度为1.20，加入800g的80%乙醇冷藏10h，沉淀物用水溶解，注入D101与AB-8型串联大孔树脂柱中，用15%乙醇洗至近无色，用85%乙醇洗脱，收集洗脱液，减压干燥，得栀子提取物，备用。

将栀子提取物溶于水后50℃烘干并研磨成粉，得到精制栀子提取物，溶于95%乙醇中，与硅胶、乙酸乙酯进行拌样，挥干乙醇，备用；以乙酸乙酯：甲醇：水溶液=43:25:32作为硅胶层析法洗脱流动相，将栀子提取物加入层析柱中，进行洗脱除杂，并且收集洗脱溶液，浓缩，干燥并研磨成粉，得到西红花苷。

取适量西红花苷溶于15%KOH水溶液中，控制温度为100℃，搅拌回流反应，反应停止后产物自然冷却，滴加30%的盐酸，调节pH=2，抽滤，用水洗涤滤饼，干燥得到粗品西红花酸；产品用95%乙醇溶解除杂，控制温度60℃，回流30min，冷却，抽滤，重结晶，得精制西红花酸晶体，HPLC检测含量为99.1%；将所得西红花酸晶体溶于氨水溶液中，60℃回流搅拌，浓缩，抽滤，得到西红花酸盐制品，HPLC检测含量为99%以上。

上述西红花酸盐精制品为主成分，加入氯化钠，用注射用水充分溶解、滤过，灌封于10ml安瓿瓶中，流通蒸汽灭菌45min，即得注射剂成品。

实施例3：

     采用高糖高脂饮食饲养SD大鼠，造成高脂血症模型，观察本发明所得产物西红花酸盐对大鼠血脂的影响。

西红花酸盐对大鼠血脂含量的影响（,n=8）

注：与正常对照组比较，^1）P<0.01；与模型组比较，^2）P<0.05，,^3）P<0.01。

Claims (3)

1.一种西红花酸盐的注射剂，其特征在于包含西红花酸盐、等渗调节剂氯化钠和注射用水，西红花酸盐具有如下所示结构式：

      

。

2. 一种西红花酸盐注射剂的制备工艺如下：

（1）将栀子果实进行粉碎、称重，超声提取1h，提取溶媒为6-8倍量60%-80%的乙醇，过滤，重复操作，合并滤液，减压浓缩；

（2）浓缩液加入4-8倍量的80%的乙醇，低温放置10h，滤过，滤液浓缩后重复上述操作，滤过取沉淀，用水溶解，注入串联大孔树脂柱中，用不同浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，减压干燥，得栀子提取物；

（3）采用硅胶层析法，以一定比例乙酸乙酯：甲醇：水溶液为流动相进行洗脱，收集洗脱液并浓缩干燥，得到西红花苷；

（4）西红花苷溶于KOH水溶液中，进行控温，至反应停止后自然冷却，滴加盐酸，调节pH，抽滤并水洗，干燥得到粗品西红花酸；产品用95%乙醇溶解除杂，控温，回流冷却、抽滤、重结晶，得精制西红花酸晶体，将所得西红花酸晶体溶于一定量氨水溶液中，一定温度下回流搅拌、浓缩、抽滤，得到西红花酸盐制品；

（5）上述西红花酸盐精制品为主成分，加入氯化钠，用注射用水充分溶解、滤过，灌封于10ml安瓿瓶中，流通蒸汽灭菌45min，得到注射剂成品。

3.根据权利要求2所述西红花酸盐注射液的制备工艺，其特征在于：

步骤（1）减压浓缩至相对密度1.15-1.20；

步骤（2）减压浓缩至相对密度1.15-1.20，冷藏温度为-8--2℃，串联大孔树脂柱为D101与AB-8型串联，洗脱条件为15%乙醇洗至近无色，用85%乙醇洗脱，收集洗脱液；

步骤（3）洗脱剂乙酸乙酯：甲醇：水溶液=41-43：25：32-34；

步骤（4）氢氧化钾的浓度为10%-15%，反应的温度控制在90-100℃，盐酸浓度为20-30%，调节PH=2-3，95%乙醇除杂的温度控制在50-60℃；

步骤（5）氯化钠为等渗调节剂。