CN104430331B - 愈创木酚在防治番茄黄化曲叶病中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了愈创木酚在番茄黄化曲叶病毒病的应用，愈创木酚药液的施药浓度为50~500μg/mL，在愈创木酚药液中加入乳化剂作为表面活性剂。本发明将愈创木酚用于番茄黄化曲叶病毒病的防治，愈创木酚对番茄黄化曲叶病毒病的防治效果可达到50%，配合使用防治传毒介体烟粉虱的化学农药，从而达到病虫兼治的效果。通过实验证明，针对番茄黄化曲叶病毒病，可以使用愈创木酚进行有效预防和治疗。
Description
技术领域
本发明属于农药技术领域，涉及愈创木酚的新用途，具体涉及愈创木酚在防治番茄黄化曲叶病中的应用。
背景技术
番茄黄化曲叶病毒病(TYLCV)，或“番茄黄化卷叶病毒”，是一种植物单链DNA病毒，该病在番茄花期、结果期、采收期各阶段均可发生。番茄植株感染病毒后，初期主要表现生长迟缓或停滞，生长点黄化，节间变短，植株明显矮化，叶片变小变厚，叶质脆硬，叶片有褶皱、向上卷曲，叶片边缘至叶脉区域黄化，以植株上部叶片症状典型，下部老叶症状不明显；后期表现坐果少，果实变小，膨大速度慢，成熟期的果实不能正常转色。番茄植株感染病毒后，尤其是在开花前感染病毒，果实产量和商品价值均大幅度下降。严重时造成的损失可达100%，是严重危害番茄生产的病害之一。
番茄黄化曲叶病毒病扩展迅速、危害严重，目前主要采取预防为主的措施，如选用抗病品种、定植无毒种苗、防治传毒介体昆虫等措施。对于茄黄化卷叶病毒的化学治疗，大多是针对传毒介体烟粉虱，如在定植前3～5d使用吡蚜酮等药剂喷雾，避免带虫幼苗移入田间；或者在定植后从烟粉虱零星发生开始，交替使用25%阿克泰水分散粒剂2000～3000倍液、25%扑虱灵可湿性粉剂1000～1500倍液、1.8%阿维菌素1500倍液等药剂喷雾防治。目前，在生产上，主要釆用抗病毒剂盐酸吗啉呱、硫酸铜、丁香酚等防治番茄黄化曲叶病毒病，其中，20%的丁香酚水乳剂可以使番茄花叶病毒粒子断裂、抑制病毒外壳蛋白体外聚合，促进叶绿素合成，提高植物的诱导抗病性。
愈创木酚（guaiacol），结构式如下：
学名邻甲氧基苯酚，又称甲基儿茶酚、邻羟基茴香醚，是一种白色或微黄色结晶或无色至淡黄色透明油状液体，有特殊芳香气味，自然界中存在于愈创木树脂、松油和硬木干馏油中，是一种重要的精细化工中间体，广泛应用于医药、香料及染料的合成。
其中，愈创木酚在医药上的用途主要为愈创木酚甘油醚的良好化痰作用，愈创木酚甘油醚的结构式如下：
愈创木酚甘油醚口服后可刺激胃黏膜，反射性引起支气管分泌增加，使痰液稀释，用于慢性支气管炎的多痰咳嗽、肺脓肿、支气管扩张和继发性哮喘，其与镇咳平喘药合用，用于黏液不易咳出的情况。
目前，在公开文献中，未检索到愈创木酚在番茄黄化卷叶病毒病应用方面的相应资料。
发明内容
本发明的目的是提供愈创木酚的新用途，即提供愈创木酚在防治番茄黄化曲叶病中的应用。
本发明所采用的技术方案如下：
愈创木酚在防治番茄黄化曲叶病中的应用。
愈创木酚作为抗番茄黄化曲叶病毒时，其施药浓度为50~500μg/mL，施药浓度进一步优选为200~400μg/mL。
在上述技术方案的基础上，为提高愈创木酚的溶解度、提高抗病毒效果，可在愈创木酚药液中加入乳化剂作为表面活性剂。
上述愈创木酚药液在配制时，先取40%的愈创木酚，用乙醇溶解为5000～20000μg/mL的母液，再加入乳化剂表面活性剂水溶液稀释为50～400μg/mL。
本发明在施药时，取50~500μg/mL的愈创木酚药液对番茄育苗茎叶进行喷雾施药，喷药量为200～1000L/hm2，喷雾压力为0.3～0.8kPa，施药次数为1～3次。
愈创木酚药液作用机理：
（1）抑制RNA反转录酶RTASE的活性，阻止病毒粒子合成；
（2）阻止病毒粒子在细胞上的吸附，减少病毒浸染几率；
(3)增强植物体内的抗氧化能力，减少病毒浸染对植物的伤害；
(4)提高植物的抗病能力。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明将愈创木酚用于番茄黄化曲叶病毒病的防治，愈创木酚对番茄黄化曲叶病毒病的防治效果可达到50%，配合使用防治传毒介体烟粉虱的化学农药，从而达到病虫兼治的效果。通过实验证明，针对番茄黄化曲叶病毒病，可以使用愈创木酚进行有效预防和治疗。
具体实施方式
为说明本发明愈创木酚在防治番茄黄化曲叶病中的应用情况，验证愈创木酚对番茄黄化曲叶病毒的防治效果，分别取四个不同浓度的愈创木酚药液作为实施例1、2、3和4，并以20%丁香酚（eugnol）水乳剂作为对比例，在室内测定愈创木酚药液和20%丁香酚水乳剂对番茄黄化曲叶病毒的防治效果，具体如下：
1、药剂
实验药剂：40%愈创木酚原液，由安徽扬子化工有限公司提供；
对照药剂:20%丁香酚（eugnol）水乳剂，江苏省农科院食品质量安全研究所提供。
2、供试靶标
2.1试验对象：
番茄黄化曲叶病毒病（Tobaccoyellowleafcurlvirus（TYLCV））。
2.2供试毒源：
番茄黄化曲叶病毒病（TYLCV）承江苏省农科院植保所病毒研究室提供。TYLCV亲缘性克隆在牛肉蛋白胨培养液中繁殖至OD值0.6时用于注射接种。
2.3提供植物：
番茄种子（品种：粉红D，杂交种、江苏省农科院育成）在清水中浸渍24h，置于垫有滤培养皿中，在28℃催芽至露白；采用育苗基质填满20孔育苗盘（孔径8cm），露白的种子播于育苗孔中，每孔播种2粒种子；保持基质湿润。番茄出苗后2叶期，每孔留1株苗。番茄苗4张叶片时作为供试植物。番茄苗的培育均在自然环境下进行。
3、试验处理方法
3.1药液的配制
取40%愈创木酚母液用乙醇溶解成10000μg/mL的母液，也可以用其他浓度的愈创木酚母液用甲醇等其他溶剂溶解成10000μg/mL的母液；并在药液母液中加入乳化剂作表面活性剂；
20%丁香酚水乳剂直接用清水稀释成20000μg/mL的母液。
浓度的设定：用乳化剂的水溶液稀释供试药剂的母液；愈创木酚母液和丁香酚按等比稀释后最终药液浓度为400、200、100、50μg/mL的药液；每个浓度设4次重复，每重复喷雾8株番茄苗。
3.2试验方法
参照《农药室内生测试验准则杀菌剂第4部分：防治小麦白粉病试验盆栽法》进行，采用茎叶喷雾法测定药剂对番茄黄化曲叶病毒病的防治效果。
3.2.1药剂喷雾方法
番茄育苗盘置于PWT-510型喷雾塔内，由低到高喷雾不同浓度的愈创木酚和丁香酚药液（精确喷雾面积为0.2m2，喷药液10mL，喷药量为500L/hm2，喷雾压力为0.5kPa）。喷药后的番茄苗移至25℃、相对温度为70%的光照温室中。
3.2.2接种方法
TYLCV-大肠杆菌培养液用1.0mL注射器在番茄苗第2叶至第3叶之间的茎上进行注射接种，注射针尖刺到表皮和皮部之间，每株注射0.1mL。
3.2.3调查方法
接种后30d，按照Lapidot和Friedmann(Ann.appl.Biol.2002.140:109-127)的方法调查各处理番茄黄化曲叶病毒病严重度：
0级：无明显症状，植株生长与未接种植株表现一致；
1级：顶部叶片的小叶边缘有轻微的黄化现象；
2级：顶部叶片边缘有明显黄化现象和轻微的扭曲现象；
3级：多数叶片黄化，叶片扭曲，植株生长量变小，但能继续生长；
4级：植株严重萎缩、黄化扭曲，生长停滞。
4、数据统计与分析
4.1计算方法
病情指数=（Σ（各级病株数×相对级数值）/（调查总株数×最高病级值））×100
防治效果（%）=（（对照病情指数-处理病情指数）/对照病情指数）×100
根据各药剂浓度对数值及对应的防效几率值回归分析，求毒力回归方程和计算EC50。所有计算均用DPS数据处理软件进行。
5、试验结果
5.1防治效果
采用茎叶喷雾测定愈创木酚、丁香酚对番茄黄化曲叶病毒病的预防效果，各药剂不同浓度对番茄黄化曲叶病毒病的防治效果见表1。
表1：愈创木酚和丁香酚对番茄黄化曲叶病毒病的防治效果（茎叶喷雾法）
从表1试验结果可知，愈创木酚对番茄黄化曲叶病毒病的防治效果高于丁香酚，特别是实施例1（愈创木酚药液浓度为400μg/mL）的防治效果可达到50%以上。
5.2有效中浓度(EC50)
用机率值法计算各药剂对番茄黄化曲叶病毒病的毒力回归方程和有效中浓度(EC50)。
愈创木酚对番茄黄化叶病毒病的毒力回归式：
Y=3.5599+0.6364x（r=0.98865）
EC50=183.1408μg/mL（95%置信限：63.4432~1023.2152μg/mL）
丁香酚对番茄黄化曲叶病毒病的毒力回归式：
Y=3.3913+0.6148x(r=0.96691)
EC50=413.8931μg/mL（95%置信限：71.5430~1862.2926μg/mL）
愈创木酚对番茄黄化曲叶病毒病的EC50值为183.1408μg/mL，丁香酚的EC50值为413.8931μg/mL，结果表明愈创木酚的活性是丁香酚的2.26倍。
Claims (6)
1.愈创木酚在防治番茄黄化曲叶病中的应用。
2.如权利要求1所述的愈创木酚在防治番茄黄化曲叶病中的应用，其特征在于：所述愈创木酚药液的施药浓度为50~500μg/mL。
3.如权利要求1所述的愈创木酚在防治番茄黄化曲叶病中的应用，其特征在于：所述愈创木酚药液的施药浓度为200~400μg/mL。
4.如权利要求1所述的愈创木酚在防治番茄黄化曲叶病中的应用，其特征在于：在所述愈创木酚药液中加入乳化剂作为表面活性剂。
5.如权利要求1所述的愈创木酚在防治番茄黄化曲叶病中的应用，其特征在于：所述愈创木酚药液在配制时，先将愈创木酚用乙醇溶解为5000～20000μg/mL的母液，再加入乳化剂水溶液稀释为50~500μg/mL。
6.如权利要求1所述的愈创木酚在防治番茄黄化曲叶病中的应用，其特征在于，施药时，取50~500μg/mL的愈创木酚药液对番茄育苗茎叶进行喷雾施药，喷药量为200～1000L/hm2，喷雾压力为0.3～0.8kPa，施药次数为1～3次。
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