CN104521958A - 愈创木酚在烟草花叶病毒的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了愈创木酚在烟草花叶病毒的应用，愈创木酚药液的施药浓度为50~500μg/mL，在愈创木酚药液中加入乳化剂作为表面活性剂。本发明将愈创木酚用于烟草花叶病毒的防治，愈创木酚对烟草花叶病毒的防治效果可达到67%，通过实验证明，针对烟草花叶病毒，可以使用愈创木酚进行有效预防和治疗，具有广阔的应用前景，会为烟草花叶病毒病的防治作出重要贡献。

Description

愈创木酚在烟草花叶病毒的应用
技术领域
本发明属于农药技术领域，涉及愈创木酚的新用途，具体涉及愈创木酚在烟草花叶病毒的应用。
背景技术
烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus；TMV），又译为烟草花叶病毒，是一种RNA病毒，专门感染植物，尤其是烟草及其他茄科植物，能使这些受感染的叶片看来斑驳污损，因此得名（mosaic为马赛克，也就是拼贴之意）。19世纪末期人们已知有某种威胁烟草作物生存的疾病，但直到1930年才确知此病毒的存在。是烟草花叶病等的病原体，属于Tobamovirus群。烟草花叶病和番茄花叶病早为一般所了解。叶上出现花叶症状，生长陷于不良状态，叶常呈畸形。
烟草花叶病毒病俗称聋烟、疯烟、青花、油头。烟草植株染病后，幼嫩叶片侧脉及支脉组织呈半透明状，即明脉。叶脉两侧叶肉组织渐呈淡绿色。病毒在叶片组织内大量增殖，使部分叶肉细胞增大或增多，出现叶片薄厚不匀，颜色黄绿相间，呈花叶状。后花叶斑驳程度加大，并现大面积深褐色坏死斑，中下部老叶尤甚，发病重的叶片皱缩、畸形、扭曲。早期发病的植株节间缩短，严重矮化，生长缓慢，不能正常开花结实。并易脱落。能发育的荫果小而皱缩，种子量少且小，多不能发芽。目前主要使用丁香酚均匀喷雾防烟草花叶病毒，其中，20%的丁香酚水乳剂对防治烟草花叶病毒效果良好。
愈创木酚（guaiacol），结构式如下：                                               
学名邻甲氧基苯酚，又称甲基儿茶酚、邻羟基茴香醚，是一种白色或微黄色结晶或无色至淡黄色透明油状液体，有特殊芳香气味，自然界中存在于愈创木树脂、松油和硬木干馏油中，是一种重要的精细化工中间体，广泛应用于医药、香料及染料的合成。
其中，愈创木酚在医药上的用途主要为愈创木酚甘油醚的良好化痰作用，愈创木酚甘油醚的结构式如下：
愈创木酚甘油醚口服后可刺激胃黏膜，反射性引起支气管分泌增加，使痰液稀释，用于慢性支气管炎的多痰咳嗽、肺脓肿、支气管扩张和继发性哮喘，其与镇咳平喘药合用，用于黏液不易咳出的情况。
目前，在公开文献中，未检索到愈创木酚在烟草花叶病毒防治应用方面的相应资料。
发明内容
本发明的目的是提供愈创木酚的新用途，即提供愈创木酚在烟草花叶病毒防治方面的应用。
本发明所采用的技术方案如下：
愈创木酚在烟草花叶病毒的应用。
愈创木酚作为防治烟草花叶病毒时，其施药浓度为50~500μg/mL，施药浓度进一步优选为200~400μg/mL。
在上述技术方案的基础上，为提高愈创木酚的溶解度、提高抗病毒效果，可在愈创木酚药液中加入乳化剂作为表面活性剂。
上述愈创木酚药液在配制时，先取40%的愈创木酚，用乙醇溶解为5000～20000μg/mL的母液，再加入乳化剂水溶液作为表面活性剂稀释为50～400μg/mL。
本发明在施药时，取50~500μg/mL的愈创木酚药液对水稻育苗秧苗进行喷雾施药，喷药量为200～1000L/h m2，喷雾压力为0.3～0.8kPa，施药次数为1～3次。
愈创木酚药液作用机理：
（1）抑制RNA反转录酶RTASE的活性，阻止病毒粒子合成；
（2）阻止病毒粒子在细胞上的吸附，减少病毒浸染几率；      
(3)增强植物体内的抗氧化能力，减少病毒浸染对植物的伤害；           
 (4)提高植物的抗病能力。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明将愈创木酚用于烟草花叶病毒的防治，愈创木酚对烟草花叶病毒的防治效果可达到67%。通过实验证明，针对烟草花叶病毒，可以使用愈创木酚进行有效预防和治疗。
具体实施方式
为说明本发明愈创木酚在烟草花叶病毒的应用情况，验证愈创木酚对烟草花叶病毒的防治效果，分别取四个不同浓度的愈创木酚药液作为实施例1、2、 3和4，并以20%丁香酚（eugnol）水乳剂作为对比例，在室内测定愈创木酚药液和20%丁香酚水乳剂对烟草花叶病毒的防治效果，具体如下：
1、药剂
实验药剂：40%愈创木酚原液，由安徽扬子化工有限公司提供；
对照药剂20%丁香酚（eugnol）水乳剂，江苏省农科院食品质量安全研究所提供。
2、供试靶标
2.1试验对象：
烟草花叶病毒病（Tobacco mosaic virus；（TMV））。
2.2供试毒源：
烟草花叶病毒（TMV）承江苏省农科院植保所病毒研究室提供的纯毒源。
2.2供试植物：
烟草种子（品种：NC89，承江苏省农科院植保的提供）播种于育苗基质填满的60孔育苗盘（孔径3cm），每孔播种2粒种子；烟草苗2叶期移栽幼苗至9cm盆钵中，每盆1株，盆中装满基质。烟草苗5叶期用于试验。烟草苗的培育均在自然环境下进行。
3、试验处理方法
3.1药液的配制
取40%愈创木酚母液用乙醇溶解成10000μg/mL的母液，也可以用其他浓度的愈创木酚母液用甲醇等其他溶剂溶解成10000μg/mL的母液；并在药液母液中加入乳化剂作表面活性剂；
20%丁香酚水乳剂直接用清水稀释成20000μg/mL的母液，并在药液母液中加入乳化剂作表面活性剂。
浓度的设定：用乳化剂的水溶液稀释供试药剂的母液；愈创木酚母液和丁香酚按等比稀释后最终药液浓度为400、200、100、50μg/mL的药液；每个浓度设4次重复，每重复喷雾8株烟草苗。
3.2试验方法
参照《农药室内生测试验准则 杀菌剂 第4部分：防治小麦白粉病试验 盆栽法》进行，采用茎叶喷雾法测定药剂对烟草花叶病毒病的防治效果。
3.2.1药剂喷雾方法
烟草幼苗置于PWT-510型喷雾塔内，由低到高喷雾不同浓度的愈创木酚和丁香酚药液（精确喷雾面积为0.2m2，喷药液10mL，喷药量为500L/h m2，喷雾压力为0.5kPa）。喷药后的烟草苗移至25℃、相对湿度为70%的光照温室中。
3.2.2接种方法
从接种TMV发病的植株上（品种：NC89）剪取新鲜叶片5g，研磨出汁液，加入蒸馏水，用纱布过滤出汁液；喷药后24h的烟草，先将装在用纱布封口的广口瓶中的石英砂倾撤在烟叶正面，再用棉球蘸取上述病毒汁液摩擦接种在烟叶正面，全叶接种，接种后用水冲洗。每重复处理8株，每株接种2片叶；重复4次。
3.2.3调查方法
    接种后30d，按照中华人民共和国烟草行业标准（YC/T39-1996）的方法调查各处理烟草花叶病毒病严重度，并计算病情指数：
0级：全株无病；
1级：心叶脉明或轻微花叶，病株无明显矮化；
2级：三分之一叶片花叶但不变形，或病株矮化为正常株高的四分之三以上；
3级：三分之一至三分之二叶片花叶，或变形或主侧脉坏死，或植株矮化为正常的二分之一至四分之三；
  4级：全株叶片花叶，严重变形或坏死，病株矮化为正常株高的二分之一以上。
4、数据统计与分析
4.1计算方法
病情指数=（Σ（各级病株数×相对级数值）/（调查总株数×最高病级值））×100
防治效果（%）=（（对照病情指数-处理病情指数）/对照病情指数）×100
根据各药剂浓度对数值及对应的防效几率值回归分析，求毒力回归方程和计算EC50。所有计算均用DPS数据处理软件进行。
5、试验结果
5.1防治效果
采用茎叶喷雾测定愈创木酚、丁香酚对烟草花叶病毒病的预防效果，各药剂不同浓度对烟草花叶病毒病的防治效果见表1。
表1：愈创木酚和丁香酚对烟草花叶病毒病的防治效果（茎叶喷雾法）
从表1试验结果可知，愈创木酚对烟草花叶病毒病的防治效果高于丁香酚，特别是实施例1（愈创木酚药液浓度为400μg/mL）的防治效果可达到67%。
5.2有效中浓度(EC50)
用机率值法计算各药剂对烟草花叶病毒病的毒力回归方程和有效中浓度(EC50)。
愈创木酚对烟草花叶病毒病的毒力回归式：
Y=2.56585+1.17180x   （r=0.9812）
EC50=119.4752μg/mL（95%置信限：37.6650~976.3999μg/mL）
丁香酚对烟草花叶病毒病的毒力回归式：
Y=2.67425+0.98436x    (r=0.9897)
EC50=230.5169μg/mL（95%置信限：86.6997~1015.8332μg/mL）
试验结果表明愈创木酚对烟草花叶病毒病防治效果优于丁香酚。愈创木酚对烟草花叶病毒病的EC50值为119.4752μg/mL，丁香酚的EC50值为230.5169μg/mL，结果表明愈创木酚的活性是丁香酚的1.92倍。

Claims (6)

1.愈创木酚在烟草花叶病毒的应用。
2.如权利要求1所述的愈创木酚在烟草花叶病毒的应用，其特征在于：所述愈创木酚药液的施药浓度为50~500μg/mL。
3.如权利要求1所述的愈创木酚在烟草花叶病毒的应用，其特征在于：所述愈创木酚药液的施药浓度为200~400μg/mL。
4.如权利要求1所述的愈创木酚在烟草花叶病毒的应用，其特征在于：在所述愈创木酚药液中加入乳化剂作为表面活性剂。
5.如权利要求1所述的愈创木酚在烟草花叶病毒的应用，其特征在于：所述愈创木酚药液在配制时，先将愈创木酚用乙醇溶解为5000～20000μg/mL的母液，再加入乳化剂水溶液稀释为50~500μg/mL。
6.如权利要求1所述的愈创木酚在烟草花叶病毒的应用，其特征在于，施药时，取50~500μg/mL的愈创木酚药液对烟草育苗进行喷雾施药，喷药量为200～1000L/h m2，喷雾压力为0.3～0.8kPa，施药次数为1～3次。
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