CN104406960A - 生鲜乳中硫氰酸根快速检测定量试剂盒及应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种生鲜乳中硫氰酸根快速检测定量试剂盒，可用于检测生鲜乳中硫氰酸根的含量。所述试剂盒由刻度吸管、带盖比色管、蛋白沉淀剂、显色剂、硫氰酸根对照品、样品比色板组成。本快速检测定量试剂盒通过添加三氯乙酸振摇，沉淀生鲜乳中的蛋白质，静止后上清液中的硫氰酸根与三价铁显色剂能够形成带色硫氰酸铁的原理，配置不同标准浓度的硫氰酸根溶液与三氯化铁反应，根据显示出的不同色度来制成标准比色板，将待测样品显示的颜色与标准比色板比较，来确定液态乳中硫氰酸根的含量，对达到所需浓度的样品在进行实验室上机操作，该方法检出限为0.01％。

Description

生鲜乳中硫氰酸根快速检测定量试剂盒及应用

技术领域

本发明涉及一种生鲜乳中硫氰酸根的快速检测并能定量的试剂盒及应用。

背景技术

硫氰酸根在体内释放的氰根离子可使组织不能利用氧而产生中毒，并可妨碍机体对碘的吸收而引起甲状腺疾病。在奶牛的养殖环节中，饲料、水质对生鲜乳中硫氰酸根离子的含量均有影响。在生鲜乳中掺入硫氰酸根达到15mg/kg时有明显有效的抑菌、保鲜、延长产品保质期的作用，但也存在不法奶户将硫氰酸根掺入生鲜乳中改变生鲜乳保存质量的问题。卫生部发布的《食品中可能违法添加的非使用物质和易滥用的食品添加剂名单(第一批)》中明确规定乳及乳制品中硫氰酸根属于违法添加物质。我国还没有规定硫氰酸根检测标准，实际检测中生鲜乳中硫氰酸根的检验方法较多，一般有分光光度法、气相法、荧光动力学法等。在检测环节中因存在国家对生鲜乳中硫氰酸根的含量没有标准要求，所选择的检测方法均为参考方法，各方法线性关系处理时的浓度下限不同。而各种检测方法在检测环节中，所有样品均需在实验室上机操作，生鲜乳的前处理复杂，上机操作时间周期长，耗材昂贵，而且上述各种检测方法对外界环境要求均较高，需在实验室专业人员操作。在室外环境中，缺乏专业的检测方法和手段对生鲜乳收购站和奶车进行现场检测。

现有的一些可以进行现场检测的试剂盒，多以定性为主，只能对生鲜乳中是否含有硫氰酸根进行定性筛选，并根据其提供的检测限对硫氰酸根的浓度进行直观的鉴别。目前需要一种快速检测的试剂盒，可以和多种检测方法配合使用，依据检测方法的定量限，对检测样品进行筛选，达到检测方法定量限的样品进行实验室上机操作，使整个检测过程简便高效快捷。

发明内容

为了解决硫氰酸根的现场含量测定问题，本发明提供了一种简单准确的适用于现场快速检测生鲜乳中硫氰酸根的试剂盒及应用。该试剂盒可以依据检测所指定的方法对现场生鲜乳样品进行含量判定，使低于指定检测方法定量限的样品被快速判定，节省实验室检测的资源。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

一种生鲜乳中硫氰酸根快速检测定量试剂盒，由刻度吸管、带盖比色管、蛋白沉淀剂、显色剂、硫氰酸根对照品、样品比色板组成，其中：样品比色板为白色底板4排小孔，每排6个，蛋白沉淀剂为15～20mg/ml三氯乙酸水溶液，显色剂为1～2mg/ml氯化铁盐酸溶液，硫氰酸根对照品1.6732g。

上述生鲜乳中硫氰酸根快速检测定量试剂盒，可用于检测生鲜乳中硫氰酸根的含量，具体检测方法如下：

1)以试剂盒中自带硫氰酸钾对照品于1000ml容量瓶中蒸馏水定容，再根据参考生鲜乳检测方法的线性范围制备硫氰酸根标准浓度梯度溶液(标准浓度梯度为五个)，取六个带盖比色管，每个带盖比色管中加空白生鲜乳2ml，第一管加空白蒸馏水2ml，后五管加硫氰酸根指定标准的浓度梯度溶液各2ml，六管样品置于样品比色板第一排，作为标准比色管。

2)制备生鲜乳样品，各检测样品取2ml置于带盖比色管中，置于样品比色板后三排，作为待测样品比色管。

3)在标准比色管与待测样品比色管中各滴加2ml蛋白沉淀剂，振摇3～5分钟，静止3～5分钟，在比色管上部轻轻加入2滴显色剂。

4)第一排得到颜色从浅到深的标准对比图；

5)将后排的比色管中显色剂与样品接触面的颜色程度与标准对比图比较，确定硫氰酸根含量。

6)对达到指定方法浓度要求的样品，进行实验室上机检测。

本快速检测定量试剂盒通过添加三氯乙酸振摇，沉淀生鲜乳中的蛋白质，静止后上清液中的硫氰酸根与三价铁显色剂能够形成带色硫氰酸铁的原理，配置不同标准浓度的硫氰酸根溶液与三氯化铁反应，根据显示出的不同色度来制成标准比色板，将待测样品显示的颜色与标准比色板比较，来确定液态乳中硫氰酸根的含量，对达到所需浓度的样品在进行实验室上机操作。

本发明具有如下优点：

1、大批量检测生鲜乳时，使用本试剂盒配合检测依据的指定方法，可以在现场将低于指定方法定量限的样品筛选出来。从而使后期上机操作的样品数量减少，提高了检测效率并且节省了检测资源。

2、本试剂盒操作简单，原理明了，经过简单培训均可掌握。生鲜乳奶站工作人员或生鲜乳收购人员均可在奶站或者户外进行操作，在第一时间对生鲜乳质量进行判定。

3、本试剂盒可以根据检测人员在实验室上机检验的方法与要求，灵活配置定量阳性样品，在现场进行检测筛选，将达到检测限的样品再进入实验室进行上机检测，该方法检出限为0.01％。

4、应用此试剂盒，可以大大提高生鲜乳中硫氰酸根的现场检测效率。

附图说明

图1为样品比色板；

图2为2ml塑料刻度吸管；

图3为带盖玻璃比色管；

图4为50ml避光玻璃瓶；

图5为铝箔密封小包；

图中：1-配置硫氰酸根梯度浓度的位置孔，2-放置各样品的位置孔，3-刻度吸管，每刻度线为1ml，4-圆柱形透明玻璃管，刻度线为2ml，4ml(分别指示生鲜乳刻度与蛋白沉淀剂添加刻度)，5-玻璃管磨口塞，6-避光玻璃瓶，7-瓶塞，8-铝箔密封小包。

具体实施方式

下面结合附图对本发明的技术方案作进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本发明技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的保护范围中。

具体实施方式一：如图1-5所示，本实施方式提供的生鲜乳中硫氰酸根快速检测定量试剂盒，由2个刻度吸管、带盖比色管(24个)、蛋白沉淀剂(15～20mg/ml三氯乙酸水溶液)、显色剂(1～2mg/ml氯化铁盐酸溶液)、硫氰酸根对照品(1.6732g)、样品比色板组成，其中：样品比色板为白色底板4排小孔，每排6个，蛋白沉淀剂与显色剂装于避光具塞玻璃瓶中，硫氰酸钾对照品装于燥避光的铝箔密封小包中。

上述试剂盒可用于检测生鲜乳中硫氰酸根的含量，具体检测方法按照如下步骤进行：

1)制备硫氰酸根标准浓度梯度溶液，以试剂盒中自带硫氰酸钾对照品小包，于1000ml容量瓶中蒸馏水定容，再根据参考生鲜乳检测方法的线性范围制备适当的浓度梯度。取六个带盖比色管，每个带盖比色管中加空白生鲜乳2ml，第一管加空白蒸馏水2ml，后五管加硫氰酸根指定标准的浓度梯度溶液各2ml，六管样品置于比色板第一排。

2)制备生鲜乳样品，各检测样品取2ml置于比色管中，置于比色板后三排。

3)在标准比色管与待测样品比色管中各滴加2ml蛋白沉淀剂，振摇5分钟，静止5分钟分钟，在比色管上部轻轻加入2滴显色剂。

4)第一排得到颜色从浅到深的标准对比图；

5)将后排的比色管中显色剂与样品接触面的颜色程度与标准对比图比较，确定硫氰酸根含量。

6)对达到指定方法浓度要求的样品，进行实验室上机检测。

具体实施方式二：根据卫生部指定方法：卫生部食品整治办[2009]29号指定牛奶中硫氰酸根的检测方法，具体步骤如下：

1)制备硫氰酸根标准浓度梯度溶液，以试剂盒中自带硫氰酸钾对照品小包，于1000ml容量瓶中蒸馏水定容，即得1000ppm硫氰根标准储备液。取硫氰酸标准储备溶液1mL，置于100mL容量瓶中，加水至刻度。此溶液含硫氰酸10mg/L。移取0.1、0.2、0.5、1.0、2.0mL硫氰酸标准中间液，用水定容于10mL容量瓶中，浓度分别为0.1、0.2、0.5、1.0、2.0mg/L的标准浓度梯度溶液。取六个带盖比色管，每个带盖比色管中加空白生鲜乳2ml，第一管加空白蒸馏水2ml，后五管加硫氰酸根指定标准的浓度梯度溶液各2ml，六管样品置于比色板第一排。

2)制备生鲜乳样品，取18批次检测样品各2ml置于比色管中，置于比色板后三排。

3)在标准比色管与待测样品比色管中各滴加2ml蛋白沉淀剂，振摇5分钟，静止5分钟分钟，在比色管上部轻轻加入2滴显色剂。

4)第一排得到颜色从浅到深的标准对比图。

5)将后排的比色管中显色剂与样品接触面的颜色程度与标准对比图比较，确定硫氰酸根含量。14批次样品低于标准对比图中第三孔的颜色，表明14批次样品中硫氰酸根含量低于卫生部指定方法中线性下限0.2mg/L的要求，无数据意义可以作为未检出。

6)2批次样品对应标准对比图中第三孔的颜色，2批次样品对应标准对比图中第四孔的颜色，表明该4批样品含量高于卫生部指定方法中线性下限0.2mg/L的要求，有数据意义，按卫生部指定方法进行实验室上机检测。结果见表1。

7)对低于标准对比图中第三孔颜色的14批样品也按卫生部指定方法进行实验室上机检测，结果见表1。综合表1数据，本试剂盒检验数据与卫生部指定方法作出的数据一致，表明试剂盒可行。

表1试剂盒与卫生部指定方法18批生鲜乳中硫氰酸根含量检测数据

Claims (9)

1.一种生鲜乳中硫氰酸根快速检测定量试剂盒，其特征在于所述试剂盒由刻度吸管、带盖比色管、蛋白沉淀剂、显色剂、硫氰酸根对照品、样品比色板组成。

2.根据权利要求1所述的生鲜乳中硫氰酸根快速检测定量试剂盒，其特征在于所述样品比色板为白色底板4排小孔，每排6个。

3.根据权利要求1所述的生鲜乳中硫氰酸根快速检测定量试剂盒，其特征在于所述蛋白沉淀剂为15～20mg/ml三氯乙酸水溶液。

4.根据权利要求1所述的生鲜乳中硫氰酸根快速检测定量试剂盒，其特征在于所述显色剂为1～2mg/ml三氯化铁盐酸溶液。

5.根据权利要求1所述的生鲜乳中硫氰酸根快速检测定量试剂盒，其特征在于所述硫氰酸根对照品1.6732g。

6.根据权利要求1所述的生鲜乳中硫氰酸根快速检测定量试剂盒，其特征在于所述刻度吸管为2个。

7.根据权利要求1所述的生鲜乳中硫氰酸根快速检测定量试剂盒，其特征在于所述带盖比色管为24个。

8.权利要求1-7任一权利要求所述的生鲜乳中硫氰酸根快速检测定量试剂盒的应用，其特征在于所述试剂盒可用于检测生鲜乳中硫氰酸根的含量。

9.根据权利要求6所述的生鲜乳中硫氰酸根快速检测定量试剂盒的应用，其特征在于所述具体检测方法如下：

1)以试剂盒中自带硫氰酸钾对照品于1000ml容量瓶中蒸馏水定容，根据参考生鲜乳检测方法的线性范围制备五个硫氰酸根标准浓度梯度溶液，取六个带盖比色管，每个带盖比色管中加空白生鲜乳2ml，第一管加空白蒸馏水2ml，后五管加硫氰酸根指定标准的浓度梯度溶液各2ml，六管样品置于样品比色板第一排，作为标准比色管；

2)制备生鲜乳样品，各检测样品取2ml置于带盖比色管中，置于样品比色板后三排，作为待测样品比色管；

3)在标准比色管与待测样品比色管中各滴加2ml蛋白沉淀剂，振摇3～5分钟，静止3～5分钟，在比色管上部轻轻加入2滴显色剂；

4)第一排得到颜色从浅到深的标准对比图；

5)将后排的比色管中显色剂与样品接触面的颜色程度与标准对比图比较，确定硫氰酸根含量；

6)对达到指定方法浓度要求的样品，进行实验室上机检测。