CN104397320A - 一种黑木耳胶原蛋白的提取方法 - Google Patents

Abstract

一种黑木耳胶原蛋白的提取方法，主要步骤为： 步骤1.黑木耳的预处理；步骤2.确定黑木耳胶原蛋白提取的酶制剂；步骤3.黑木耳胶原蛋白的提取；步骤4.黑木耳胶原蛋白的精制。本发明的 一种黑木耳胶原蛋白的提取方法，采用酶法提取，酶法提取反应条件温和，蛋白质多肤链可水解为短肤链，提高了蛋白质的溶解性，同时其反应的液固比小，提高了提取液中的固形物含量，降低了用于除去提取液水分的能量消耗，为工业生产创造了有利条件。

Description

一种黑木耳胶原蛋白的提取方法

技术领域

本发明涉及一种提取技术方法，特别是一种黑木耳胶原蛋白的提取方法。

背景技术

黑木耳属于真菌门担子菌纲木耳目，是人们所喜爱的食品，其质地细嫩、清脆爽滑，子实体除含有丰富的蛋白质、维生素、钙、磷、铜等物质外，还含有大量的具有生物活性的多糖，是一种重要的药食兼用真菌。

黑木耳不仅具有很高的营养价值，它还有很高的药用价值。医学研究证明：黑木耳具有益气强身、滋肾养胃、活血等功能，它能抗血凝、抗血栓、降血脂，降低血黏度，软化血管，使血液流动顺畅，减少心血管病发生，是一种药用价值极高的食用菌。

我国是食用菌生产、出口和消费的大国，黑木耳产量占世界第一位。黑木耳蛋白质含量高，脂肪与热量低，开发黑木耳蛋白质新资源，对提高我国人民营养状况有积极作用。黑木耳胶原蛋白作为一种新蛋白食品，对于拓宽蛋白食品的新来源，充分利用我国现有资源，改善我国人民的膳食结构，具有非常重要的意义。

目前提取黑木耳胶原蛋白的方法有热水法、碱法、酶法等，热水法提取黑木耳蛋白质，比较传统的水提法得率有所提高，但由于温度过高，会造成蛋白质的不可逆变性；碱法提取技禾属于化学提取方法，对黑木耳蛋白质的化学特性及其功能特性造成了一定影响，并且具有一定的污染。

发明内容

本发明的目的是提供一种黑木耳胶原蛋白的提取方法。

本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种黑木耳胶原蛋白的提取方法，其提取方法的主要步骤为：

步骤1.黑木耳的预处理：

将黑木耳清洗、除杂后，40℃低温烘干，然后粉碎成1.0mm-1.3mm粉末，在25个大气压、50℃的条件下进行CO ₂ 超临界萃取2.5h，脱脂后，干燥备用；

步骤2.确定黑木耳胶原蛋白提取的酶制剂：

选用碱性蛋白酶进行黑木耳胶原蛋白的提取；

步骤3.黑木耳胶原蛋白的提取：

称取2份黑木耳粉末，采用碱性蛋白酶，在提取温度55℃、pH值8.5的条件下提取时间2-4h，料液比为1:50-1:70，酶用量为3%-5%，酶解，反应结束后离心，取上清液；

步骤4.黑木耳胶原蛋白的精制：

将盛有黑木耳蛋白质溶液的烧杯置于装有冰水的大烧杯内,并置于磁力搅拌器上搅拌；边搅拌，边缓慢加入硫酸馁至饱和，时间为5-10分钟内；继续搅拌10-30分钟；10000转离心10分钟或3000转离心30分钟；弃去上清液，将沉淀悬浮于1-2倍沉淀物体积的缓冲液中，通过离心除去残留的不溶性物质；透析、超滤除去硫酸钱；使用5mol/L的NaCI溶液盐析，使蛋白质溶液最终浓度至0.9mol/L，24h后离心4500转离心25min，沉淀用0.5mol/L乙酸溶解，重复盐析和溶解操作1次，然后移入透析袋，蒸馏水透析3d，接下来冷冻干燥2d，得到精制黑木耳胶原蛋白冻干样。

本发明的有益效果：本发明的一种黑木耳胶原蛋白的提取方法，采用酶法提取，酶法提取反应条件温和,蛋白质多肤链可水解为短肤链,提高了蛋白质的溶解性,同时其反应的液固比小,提高了提取液中的固形物含量,降低了用于除去提取液水分的能量消耗,为工业生产创造了有利条件。

具体实施方式

实施例1

1.黑木耳的预处理：

将黑木耳清洗、除杂后，40℃低温烘干，然后粉碎成1.0mm-1.3mm，在25个大气压、50℃、2.5h进行CO ₂ 超临界萃取脱脂后，干燥备用。

2.确定黑木耳胶原蛋白提取的酶制剂

通过胃蛋白酶、碱性蛋白酶、纤维素酶的实验数据比较分析，发现碱性蛋白酶提取效果优于纤维素酶，纤维素酶优于胃蛋白酶，确定选用碱性蛋白酶进行黑木耳胶原蛋白的提取。

3.黑木耳胶原蛋白的提取：

称取2g黑木耳粉末，采用碱性蛋白酶，在提取温度55℃、pH值8.5下提取时间2-4h，同时料液比为1:50-1:70，酶用量为3%-5%，酶解，反应结束后离心，取上清液。

4.黑木耳胶原蛋白的精制：

将盛有黑木耳蛋白质溶液的烧杯放在另一装有冰水的大烧杯内,并置于磁力搅拌器上搅拌；边搅拌，边徐徐加入硫酸馁至饱和，该步骤应在5-10分钟内完成；继续搅拌10-30分钟；10000转离心10分钟或3000转离心30分钟；弃去上清液，将沉淀悬浮于1-2倍沉淀物体积的缓冲液中，残留的不溶性物质可能是变性蛋白，通过离心除去；硫酸钱能够通过透析，超滤除去，或者使用5mol/L的NaCI溶液盐析，使蛋白质溶液最终浓度至0.9mol/L，24h后离心4500转离心25min，沉淀用0.5mol/L乙酸溶解，重复盐析和溶解操作1次，然后移入透析袋，蒸馏水透析3d，接下来冷冻干燥2d，得到精制黑木耳胶原蛋白冻干样。

实施例2

本实施例为实施例1的优选方案，

1.黑木耳的预处理，同实施例1。

2.确定黑木耳胶原蛋白提取的酶制剂，同实施例1。

3.黑木耳胶原蛋白的提取：

称取2g黑木耳粉末，采用碱性蛋白酶，在提取温度55℃、pH值8.5下提取时间3h，同时料液比为1:70，酶用量为3%酶解，反应结束后离心，取上清液。

4.黑木耳胶原蛋白的精制，同实施例1。

以上所述为本发明的较佳实施例，对本发明而言仅仅是说明性的，而非限制性的。本专业技术人员凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围内。

Claims (1)

1.一种黑木耳胶原蛋白的提取方法，其特征在于：其提取方法的主要步骤为：

步骤1.黑木耳的预处理：

将黑木耳清洗、除杂后，40℃低温烘干，然后粉碎成1.0mm-1.3mm粉末，在25个大气压、50℃的条件下进行CO₂超临界萃取2.5h，脱脂后，干燥备用；

步骤2.确定黑木耳胶原蛋白提取的酶制剂：

选用碱性蛋白酶进行黑木耳胶原蛋白的提取；

步骤3.黑木耳胶原蛋白的提取：

称取2份黑木耳粉末，采用碱性蛋白酶，在提取温度55℃、pH值8.5的条件下提取时间2-4h，料液比为1:50-1:70，酶用量为3%-5%，酶解，反应结束后离心，取上清液；

步骤4.黑木耳胶原蛋白的精制：

将盛有黑木耳蛋白质溶液的烧杯置于装有冰水的大烧杯内,并置于磁力搅拌器上搅拌；边搅拌，边缓慢加入硫酸馁至饱和，时间为5-10分钟内；继续搅拌10-30分钟；10000转离心10分钟或3000转离心30分钟；弃去上清液，将沉淀悬浮于1-2倍沉淀物体积的缓冲液中，通过离心除去残留的不溶性物质；透析、超滤除去硫酸钱；使用5mol/L的NaCI溶液盐析，使蛋白质溶液最终浓度至0.9mol/L，24h后离心4500转离心25min，沉淀用0.5mol/L乙酸溶解，重复盐析和溶解操作1次，然后移入透析袋，蒸馏水透析3d，接下来冷冻干燥2d，得到精制黑木耳胶原蛋白冻干样。