CN104394715B - 包含水溶性活性成分的纳米凝胶 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及纳米凝胶组合物，其包含至少一种水溶性活性成分、一种或更多种植物蛋白质和一种或更多种大豆可溶性多糖。这些组合物可被用于丰富和/或强化食品、饮料、动物饲料和/或化妆品，并能使活性成分稳定。本发明还涉及制备这种纳米凝胶组合物的方法。本发明还涉及通过将所述组合物与饮料成分混合来生产饮料的方法。本发明还涉及通过这种方法可获得的饮料。

Description

包含水溶性活性成分的纳米凝胶
本发明涉及纳米凝胶组合物，其包含至少一种水溶性活性成分、一种或更多种植物蛋白质和一种或更多种大豆可溶性多糖。这些组合物可被用于丰富和/或强化食品、饮料、动物饲料和/或化妆品，并能使活性成分稳定。本发明还涉及制备这种纳米凝胶组合物的方法。本发明还涉及通过将所述组合物与饮料成分混合来生产饮料的方法。本发明还涉及通过这种方法可获得的饮料。
含有水溶性活性成分(例如叶酸)的用来丰富或强化食品、饮料、动物饲料或化妆品的组合物在本领域是已知的(S.M.Lopera等(2009)，Vitae16，p55-65)。由于藻酸盐珠易于在实验室规模制备，因此它们已被用于叶酸的微胶囊化，它是温和的水凝胶工艺且用于食品配方相对安全(K.Kasipathy，2008，Delivery and controlled release ofbioactives in foods and nutraceuticals，第13章，331-341页)。然而，藻酸盐微胶囊的多孔性导致叶酸的渗漏且当被暴露至光和饮料典型的酸性条件(pH为3-5)时叶酸的稳定性减弱。的确，叶酸被暴露至紫外辐射时的不稳定性(C9-N10键断裂)众所周知。此外，叶酸在pH 2-4范围内的酸性饮料pH范围内溶解性不好。
因此，仍然存在对这样的组合物的需求，其包含水溶性活性成分、用于丰富和/或强化食品、饮料、动物饲料或化妆品且未显示出上述问题。
因此，本发明的一个目标是提供具有上述期望特性的水溶性活性成分的组合物，所述期望特性例如活性成分在酸性pH(3-5)下的极佳稳定性、活性成分被暴露至光时的极佳稳定性(光稳定性)和被用于饮料时的极佳透光性。改进水溶性活性成分的组合物的制备方法也是本发明的一个目标。
该目标已被这样的纳米凝胶组合物解决，所述纳米凝胶组合物包含：
a)基于组合物干重的0.1-5重量-％的至少一种水溶性活性成分，所述活性成分选自抗坏血酸、生物素、叶酸、尼克酸、硫胺素和维生素B6；
b)基于组合物干重的9-40重量-％的一种或更多种植物蛋白质，所述植物蛋白质选自适用于食品应用的蛋白质的组；和
c)基于组合物干重的50-90重量-％的一种或更多种大豆可溶性多糖；
其中基于组合物干物质的蛋白质与多糖的重量比被选择为1∶b，前提是b被包含在1到6之间。
本发明中的术语“纳米凝胶”指的是由交联的亲水性异质聚合物网络(水凝胶)构成的纳米颗粒。
适用于根据本发明的组合物的水溶性活性成分是pKa在4-6之间的水溶性活性成分，其优先选自抗坏血酸(维生素C，pKa 4.17)；生物素(维生素B8，pKa 5.33)；叶酸(维生素B9，pKa 4.7)；尼克酸(烟酸或维生素B3，pKa 4.9)；硫胺素(维生素B 1，pKa 4.8)；维生素B6，pKa 5.33；以及它们的混合物。对于本发明所有实施方式的最优选水溶性活性成分是叶酸。
根据本发明，优选的植物蛋白质源自大豆、羽扇豆(例如L.albus、L.angustifolius或其变体)、豌豆和/或马铃薯。可从植物的任何部分包括果实(像例如黄豆)、种子(包括制备的或加工的种子)等或者从全粉(whole flour)或脱脂产物例如碎片(shred)、薄片(flakes)等中分离蛋白质。
对于本发明的组合物，特别优选的是大豆蛋白质和豌豆蛋白质，甚至更优选的大豆蛋白质是“酸溶性大豆蛋白质”(蛋白质含量大于或等于60重量-％的Soyasour 4000K)。最优选的是蛋白质含量大于或等于80重量-％、水分小于或等于7.5重量-％、脂肪小于或等于1.5重量-％且pH为3.6-6.4的Soyasour 4000K。它可来源于吉林Fuji蛋白质有限公司。优选的豌豆蛋白质来源是来自Cosucra SA(Warcoing，比利时)。
本文中使用的术语“大豆可溶性多糖”指的是多糖含量大于或等于60重量-％的大豆可溶性多糖。最优选的大豆可溶性多糖是多糖含量大于或等于70重量-％、蛋白质含量小于或等于10重量-％、脂肪含量小于或等于1重量-％、水分含量小于或等于8重量-％、灰分小于或等于8重量-％且pH在3-6之间的大豆可溶性多糖。它可源自Fuji有限公司。
对于根据本发明的组合物，优选选择基于组合物干物质的蛋白质与多糖的重量比为1∶b，前提是b被包含在1到5之间，特别优选的b被包含在2到4之间，甚至更优选地b是3。
在本发明的一个特别优选的实施方式中，通过动态光散射测量的纳米凝胶的平均粒径在120-250nm之间。
本发明还涉及上述稳定的纳米凝胶组合物的制造方法，其包括以下步骤(可使用本文指定的量的成分实施所述方法)：
I)在7.4左右的pH下将一种或更多种大豆可溶性多糖的溶液、至少一种选自抗坏血酸、生物素、叶酸、尼克酸、硫胺素和维生素B6的水溶性活性成分的溶液和植物蛋白质的溶液在水中混合，其中大豆蛋白质的浓度为1g/l-10g/l，蛋白质与多糖的重量比为1∶1-1∶6，水溶性活性成分的浓度为0.02g/l-0.2g/l；
II)任选地，搅拌步骤I)的混合物1分钟至8小时；
III)将来自步骤I)或步骤II)的混合物的pH调节至4左右的pH，在2-3小时后重复所述pH调节；
IV)用本领域技术人员已知的常规均质化方法使步骤III)的混合物均质化，随后在90℃下加热1小时；
V)在70℃-95℃之间的温度下加热纳米凝胶至少45分钟；
VI)任选地，干燥步骤V)得到的纳米凝胶。
根据本发明，优选蛋白质是如上所述的植物蛋白质。
在一个优选的实施方式中，植物蛋白质的浓度为4g/l-6g/l。蛋白质与多糖的重量比优选地是1∶2-1∶4，甚至更优选地是1∶3。水溶性活性成分的浓度优选地在0.01g/l-0.15g/l之间，优选的水溶性活性成分是叶酸。
可以使用任何允许用于食品的酸进行步骤III)中重复的调节pH至4左右的pH，优选地使用盐酸。
可以使用本领域技术人员已知的任何均质化方法进行步骤IV)中的均质化，像超声破碎法或高压均质法。
超声破碎法在液体中产生交替的低压波和高压波，从而导致小真空泡的形成和剧烈破裂。这种现象被称为空穴作用，它产生高速的冲击液体射流和强烈的流体力学剪切力，连同压缩、加速、降压和撞击，导致颗粒瓦解和分散遍及产物以及反应物的混合。(Encyclopedia of emulsion technology，1983，第1卷，P.Walstra，57页，P.Becher编，ISBN：0-8247-1876-3)
在高压均质法的情况下，混合物通过均质阀的间隙，这创造了高湍流和高剪切的条件，连同压缩、加速、降压和撞击，导致颗粒瓦解并分散遍及产物。颗粒的尺寸取决于方法中使用的操作压力和所选的间隙类型。(Food and Bio Process Engineering，DairyTechnology，2002，H.G.Kessler，Ed A.Kessler，ISBN 3-9802378-5-0)
实施本发明的最优选的均质化是根据(Donsi等J.Agric.Food Chem.，2010，58：10653-10660)的高压均质法，这是考虑到这种技术生产纳米乳剂的效率和高通量。更优选地，在500-700bar下进行这种方法至少1分钟，甚至更优选地，在600bar下进行至少2分钟。
步骤V)的纳米凝胶可被原样使用或者被干燥用于之后使用。可以使用本领域技术人员已知的任何常规干燥方法执行干燥步骤，优选的是喷雾干燥法和/或粉末捕获法，其中喷洒的悬液滴被吸附剂(例如淀粉或硅酸钙或硅酸或碳酸钙或它们的混合物)床捕获并随后干燥。
本发明还涉及通过上述方法可获得的纳米凝胶，优选地，其中植物蛋白质是大豆蛋白质或豌豆蛋白质，以及水溶性活性成分是叶酸。
本发明还涉及上述纳米凝胶用于丰富和/或强化食物、饮料、动物饲料和/或化妆品，优选地用于丰富和/或强化饮料，甚至更优选地用于丰富和/或强化酸性饮料(pH为3-5)的用途。
本发明的另一些方面是含有上述组合物的食物、饮料、动物饲料、化妆品。
本发明的产品形式能够被用作添加成分的饮料可以是碳酸饮料，例如风味塞尔查(seltzer)水、软饮料或矿物饮料，以及非碳酸饮料，例如风味水、果汁、水果宾治(fruitpunches)和这些饮料的浓缩形式。它们可基于天然水果或蔬菜汁或人工香料。被包括在内的还有酒精饮料和速溶饮料粉。此外，含糖饮料和具有人工甜味剂的无热量瘦身饮料也被包括在内。
此外，获自天然原料或合成的乳制品在本发明的产品形式能够被用作营养成分的食品产品的范围内。这种产品的典型实例是乳饮料、冰激凌、乳酪、酸乳等。乳替代产品(例如豆浆饮品和豆腐产品)也被包含在此应用范围内。
被包括在内的还有其中含有本发明的产品形式作为添加成分的甜食，例如糖食产品、糖果、口香糖、甜点(例如冰激凌、果冻、布丁、速溶布丁粉等)。
被包括在内的还有其中含有本发明的产品形式作为着色剂或营养成分的谷类食品、零食、饼干、意大利面、汤和酱、蛋黄酱、沙拉调味品等。此外，用于乳制品和谷类食品的水果制品也被包括在内。
通过本发明的组合物被加入到食品产品中的一种或更多种水溶性活性成分(优选的是叶酸)的终浓度可优选地为基于食品组合物总重量的0.1-50ppm，特别地为1-30ppm，更优选地为3-20ppm(例如约6ppm)并且取决于待被强化的特定食品产品和预期的强化水平。
优选地，通过向食品产品中加入本发明组合物形式的水溶性活性成分获得本发明的食品组合物。对于食品产品的强化，可按照应用水分散固体产品形式的本身已知的方法使用本发明的组合物。
一般而言，根据特定应用，所述组合物可以以含水原液(stock solution)、干燥粉末混合物或者与其它合适食品成分的预混合物的形式被加入。根据最终应用的制剂，可以例如使用干粉混合机、低剪切混合机、高压均质机或高剪切混合机完成混合。很显然，这种技术是本领域技术人员能力范围内的。
本发明还涉及制造饮料的方法，其包括下述步骤：使根据本发明的组合物均质化，然后将基于水溶性活性成分含量的1-50ppm、优选地为5ppm的乳剂与另外的常用饮料成分混合。
此外，本发明涉及通过上述饮料制造方法可获得的饮料。优选地，饮料的pH在2-8之间，更优选地，饮料的pH在3-5.5之间
附图简述
图1展示了超滤之后，单独蛋白质(Assp)、单独多糖(SSP)和蛋白质/多糖复合纳米凝胶(Nps)溶液的紫外光谱。
图2展示了在pH为7.4时，从叶酸/蛋白质/多糖纳米凝胶、叶酸/多糖纳米凝胶和叶酸/蛋白质纳米凝胶中释放的叶酸的紫外光谱。通过超滤分离释放的叶酸。在pH为7.4时直接制备的叶酸溶液被用作对照。
通过下述实施例进一步阐释本发明，但本发明不限于此。
实施例
实施例1：在pH为7.4时，叶酸与大豆蛋白质、大豆多糖或大豆蛋白质/大豆多糖复合纳米凝胶的相互作用
大豆蛋白质来自吉林Fuji蛋白质有限公司(Soyasour 4000K，酸溶性大豆蛋白质；ASSP)，其中蛋白质含量为88％(干基)。它的等电点在pH4.7左右。具有70-80重量-％多糖的大豆可溶性多糖(SSP)来自Fuji有限公司。
考虑到叶酸的溶解度，调查pH为7.4时的相互作用。首先，将单独的蛋白质溶液、单独的多糖溶液和蛋白质/多糖复合纳米凝胶溶液调节至pH为7.4。然后，加入溶解在pH为7.4的10mM磷酸缓冲液中的叶酸，在室温下过夜搅拌孵育混合物。混合物中的蛋白质终浓度为4mg/ml，多糖浓度为12mg/ml。利用高流量超滤膜(截止分子量：3kDa，MicroconYM-3，Millipore)分离混合物中的游离叶酸，然后在超滤液中收集。使单独的叶酸溶液也通过超滤膜，超滤液中97％的叶酸(表1)证实了叶酸的回收。使单独的蛋白质、单独的多糖和蛋白质/多糖复合纳米凝胶溶液也通过超滤膜，它们的超滤液的紫外光谱(图1)显示了在紫外区域的吸光度，指示超滤液中的小肽。通过从超滤液的280nm吸光度中减去图1中所示的280nm吸光度来计算超滤液中的FA浓度。表1显示：在pH为7.4时，约10％的FA与蛋白质或纳米凝胶结合；几乎没有叶酸与多糖结合。
表1.在pH为7.4时，不同混合物中的游离叶酸(FA)的浓度。通过超滤分离混合物中的游离叶酸。
实施例2：在pH为4时，叶酸与大豆蛋白质、大豆多糖或大豆蛋白质/大豆多糖复合纳米凝胶的相互作用
纳米凝胶在pH为4时相对疏水，其由芘荧光表征，叶酸在pH为4时也是疏水化合物。因此，纳米凝胶可通过疏水相互作用与叶酸结合。考虑到pH依赖性溶解度，以下述3种不同方法将叶酸加入到重量比1∶3的纳米凝胶溶液：
(1)将重量比1∶3的纳米凝胶溶液调节至pH为7.4，然后加入固体叶酸以使叶酸的终浓度达到1mM，蛋白质浓度达到4mg/ml，多糖浓度达到12mg/ml。过夜搅拌以溶解叶酸后，将混合物的pH改变至4.0。
(2)将叶酸溶解在pH为7.4的10mM磷酸缓冲液中。将叶酸溶液逐滴加入至pH为4.0的纳米凝胶溶液中以使叶酸的浓度达到0.25mM、0.5mM或1mM，随后过夜搅拌。混合物的pH为约4.0。
(3)将叶酸溶解在pH为7.4的10mM磷酸缓冲液中。调节纳米凝胶溶液至pH为7.4。将叶酸溶液与纳米凝胶溶液混合以使叶酸浓度达到0.1mM、0.5mM或1mM，过夜搅拌后，调节混合物的pH至4.0。
在pH为4.0时，短时间储存之后，所有上述混合物均出现叶酸的黄色沉淀。对于叶酸与单独的蛋白质和单独的多糖的混合物，也观察到了相同的黄色沉淀。对于单独的蛋白质，上清液显示出黄色，但其它为无色。这些结果表明：在pH为4.0时，蛋白质能结合/稳定部分叶酸，纳米凝胶和大豆多糖几乎不结合/稳定叶酸。
实施例3：制备叶酸/大豆蛋白质/大豆多糖纳米凝胶
由于在pH为4时，大豆蛋白质能够结合部分叶酸，但纳米凝胶不能，因此通过以下所述制备叶酸/蛋白质/多糖纳米凝胶：在pH为7.4时，将叶酸与蛋白质和多糖混合，随后调节pH、高压均质化并加热。制备的细节如下：将7.88g浓度为50mg/ml的大豆多糖溶液加入到5ml水中，随后边搅拌边加入pH为7.4的6.25ml 1mM叶酸溶液和6.25ml浓度为20mg/ml的大豆蛋白质溶液。混合物中的蛋白质终浓度为5mg/ml，多糖浓度为15mg/ml，叶酸浓度为0.25mM，体积为25ml。将混合物的pH调节至4.0，搅拌3小时后，再次将pH调节至4.0。通过在600bar下高压均质化2分钟使混合物均质化，然后在90℃下加热1小时以获得包封有叶酸的大豆蛋白质/大豆多糖纳米凝胶。还利用这种方法使用单独的蛋白质和单独的多糖来制备叶酸/蛋白质纳米凝胶和叶酸/多糖纳米凝胶。
将由此得到的叶酸/蛋白质/多糖纳米凝胶溶液、叶酸/蛋白质纳米凝胶溶液和叶酸/多糖纳米凝胶溶液的pH改变至7.4以从纳米凝胶中释放叶酸，通过超滤分离释放出的叶酸。按照如上所述测量超滤液中的叶酸浓度，在pH为7.4时直接制备的0.25mM叶酸和0.5mM叶酸溶液被作对照。图2中的结果显示：混合、调节pH、均质化和热处理后，叶酸光谱未发生改变。含蛋白质或纳米凝胶的混合物的强度降低，这与叶酸在pH为7.4时进行结合的结果一致(表1)，即约10％叶酸与蛋白质和纳米凝胶结合。
实施例4：叶酸/大豆蛋白质/大豆多糖纳米凝胶的稳定性
实施动态光散射(DLS)以测量pH为4.0的叶酸/蛋白质/多糖纳米凝胶的尺寸。表2中的数据显示：叶酸浓度为0.25mM和0.5mM的纳米凝胶与不含叶酸的纳米凝胶的尺寸相似。储存1个月之后，纳米凝胶的尺寸未发生变化。
表2.叶酸(FA)浓度为0.25mM和0.5mM的FA/蛋白质/多糖纳米凝胶的DLS结果。蛋白质/多糖纳米凝胶被用作对照。
实施例5：保护叶酸/大豆蛋白质/大豆多糖纳米凝胶中的叶酸免受紫外降解
如上所述，叶酸对紫外辐射敏感。由于分子内的荧光猝灭，叶酸具有极低的荧光量子产率，约为0.005。叶酸分子中的C9-N10键断裂后形成的蝶呤在445nm左右具有增强的荧光峰。6-甲酰蝶呤(FPT)的荧光量子产率接近0.1，蝶呤-6-羧酸(PCA)的荧光量子产率约为0.2。445nm区域内的荧光随着作为C9-N10键断裂的结果的FPT的形成以及随后FPT被光诱导转换为PCA而增强[M.K.Off等，Journal of Photochemistry and Photobiology B：Biology 80(2005)47-55]。
本研究调查了叶酸的紫外降解。将pH为4的含0.25mM叶酸或0.5mM叶酸的叶酸/蛋白质/多糖纳米凝胶溶液置于距离紫外辐射计(500w，峰λ＝365nm)30cm的7ml玻璃瓶中持续1小时。叶酸浓度为0.25mM或0.5mM的溶解在pH为7.4的10mM磷酸缓冲液中的单独的叶酸也被调查。pH为7.4的5mg/ml蛋白质与0.25mM叶酸的混合物，以及pH为7.4的15mg/ml多糖与0.25mM叶酸的混合物也被调查。紫外辐射后，调节叶酸/蛋白质/多糖纳米凝胶溶液至pH为7.4以释放叶酸。通过超滤分离释放至溶液中的叶酸并按照如下所述进行分析。将0.25mM叶酸和0.5mM叶酸分别稀释10倍和20倍之后，测量在348nm被激发的超滤液的450nm荧光强度。用于调查叶酸降解的所有样品都不含丝毫叠氮酸钠。
表3显示了紫外辐射前后的叶酸荧光强度比。对于单独的叶酸溶液，当叶酸的浓度为0.25mM和0.5mM时，紫外辐射后在450nm的荧光强度分别增加89倍和85倍。荧光强度在紫外辐射后平均87倍的增加表明玻璃瓶内叶酸的降解。叶酸浓度从0.25mM增加到0.5mM并未显著影响降解。虽然在pH为7.4时，单独的蛋白质只能结合约10％的叶酸，单独的多糖不能与叶酸结合(表1)，但表3中的结果显示：单独的蛋白质和单独的多糖能够极大地降低叶酸的降解。在pH为7.4时，与单独的叶酸相比，多糖和蛋白质存在时叶酸的降解分别降至30％和22％。在pH为4.0时，叶酸/蛋白质/多糖纳米凝胶能有效保护叶酸免受降解；在相同的紫外辐射后，仅12％的装载叶酸被降解。我们还调查了储存1个月后的叶酸/蛋白质/多糖纳米凝胶；与新鲜配制的叶酸/蛋白质/多糖纳米凝胶相比，叶酸被释放和分离后的叶酸荧光强度未发生变化。用紫外光辐射从叶酸/蛋白质/多糖纳米凝胶中释放和分离的叶酸。在相同的辐射后，叶酸荧光的改变与在pH为7.4时直接配制的叶酸溶液相同。这种结果进一步证明：在pH为4.0时，叶酸/蛋白质/多糖纳米凝胶能有效保护叶酸免受紫外降解。
表3.紫外辐射后，不同样品中的叶酸(FA)的降解程度。通过测量紫外辐射之前和之后的叶酸荧光发射光谱的450nm强度获得降解程度。叶酸在pH为7.4时被释放并通过超滤分离。荧光激发波长为348nm。
1)紫外辐射后的叶酸荧光强度与紫外辐射前强度的比率
实施例6：制备叶酸/豌豆蛋白质/大豆多糖纳米凝胶并保护叶酸免受紫外降解
将豌豆蛋白质溶解在水中并将pH调节至3.25。过夜平衡后，在5000rpm下离心溶液30分钟以除去未溶解的蛋白质。上清液中含有15mg/ml豌豆蛋白质。如下所述制备叶酸/豌豆蛋白质/大豆多糖纳米凝胶：在pH为7.4时，搅拌混合大豆多糖溶液和叶酸溶液与豌豆蛋白质溶液。混合物中的豌豆蛋白质的终浓度为5mg/ml，多糖的终浓度为15mg/ml，叶酸的终浓度为0.25mM，体积为25ml。将混合物的pH调节至4.0，搅拌3小时后，再次将pH调节至4.0。通过在600bar下高压均质化2分钟使混合物均质化，然后在90℃下加热1小时以获得包封有叶酸的豌豆蛋白质/大豆多糖纳米凝胶。由此得到的纳米凝胶的尺寸为203nm，PDI为0.23(表5)。
对叶酸的紫外降解进行调查。与单独的叶酸相比，豌豆蛋白质存在时叶酸的降解降至19％(表4)。在pH为4.0时，叶酸/豌豆蛋白质/多糖纳米凝胶能有效保护叶酸免受降解；在相同的紫外辐射后，仅13％的装载叶酸被降解。
表4.紫外辐射后，不同样品中的叶酸(FA)的降解程度。通过测量紫外辐射之前和之后的叶酸荧光发射光谱的450nm强度获得降解程度。叶酸在pH为7.4时被释放并通过超滤分离。荧光激发波长为348nm。
1)紫外辐射后的叶酸荧光强度与紫外辐射前的强度的比率。
实施例7：pH为3.0、3.5和4.0的叶酸/豌豆蛋白质/大豆多糖纳米凝胶溶液和叶酸/大豆蛋白质/大豆多糖纳米凝胶溶液的稳定性，以及冻干后的纳米凝胶的再分散能力
将在pH为4.0时制备的叶酸/豌豆蛋白质/大豆多糖纳米凝胶溶液和叶酸/大豆蛋白质/大豆多糖纳米凝胶溶液的pH分别改变至3.5和3.0以调查稳定性。表5中的数据显示：在pH为3和3.5的介质中储存1周后，纳米凝胶的尺寸未发生变化，这表明纳米凝胶在饮料pH条件下稳定。此外，冻干纳米凝胶，然后再分散至水中。再分散后，纳米凝胶的尺寸未显著变化，这表明纳米凝胶能够以干燥粉末的形式被储存和使用。
表5.pH为3.0、3.5和4.0的介质中、以及冻干后再分散至pH为4.0的介质中的叶酸/豌豆蛋白质/大豆多糖纳米凝胶和叶酸/大豆蛋白质/大豆多糖纳米凝胶的DLS结果。叶酸浓度为0.25mM。

Claims (10)

1.含有选自抗坏血酸、生物素、叶酸、尼克酸、硫胺素和维生素B6的至少一种水溶性活性成分的稳定纳米凝胶的制造方法，其包括下述步骤：
I)在7.4左右的pH下将一种或更多种大豆可溶性多糖的溶液与选自抗坏血酸、生物素、叶酸、尼克酸、硫胺素和维生素B6的至少一种水溶性活性成分的溶液和植物蛋白质的溶液在水中混合，其中植物蛋白质的浓度为1g/l-10g/l，蛋白质与多糖的重量比为1:1-1:6，水溶性活性成分的浓度为0.001g/l-0.2g/l；
II)任选地，搅拌步骤I)的混合物1分钟至8小时；
III)将来自步骤I)或步骤II)的混合物的pH调节至4左右的pH，在2-3小时后重复所述pH调节；
IV)用本领域技术人员已知的常规均质化方法使步骤III)的混合物均质化，随后在90℃下加热1小时；
V)在70℃-95℃之间的温度下加热纳米凝胶至少45分钟；
VI)任选地，干燥步骤V)得到的纳米凝胶。
2.根据权利要求1的稳定纳米凝胶的制造方法，其中所述植物蛋白质的浓度为4g/l-6g/l。
3.根据权利要求1的稳定纳米凝胶的制造方法，其中所述蛋白质与多糖的重量比为1:2-1:4。
4.根据权利要求1的稳定纳米凝胶的制造方法，其中所述活性成分的浓度为0.01g/l-0.15g/l。
5.通过权利要求1-4中任一项所述的方法能够获得的纳米凝胶。
6.根据权利要求5的纳米凝胶，其中所述植物蛋白质是大豆蛋白质或豌豆蛋白质，以及所述活性成分是叶酸。
7.根据权利要求5-6中任一项所述的纳米凝胶组合物用于丰富和/或强化食品、饮料、动物饲料、化妆品组合物的用途。
8.饮料的制造方法，其包括以下步骤：将根据权利要求5-6中任一项所述的纳米凝胶组合物与其它饮料常用成分混合。
9.通过根据权利要求8所述的方法能够获得的饮料。
10.根据权利要求9所述的饮料，其中所述饮料的pH在3到5.5之间。
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