CN104380098B - 用于选择性检测生物学相关酸的方法 - Google Patents

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Abstract

本文提供用于进行离子迁移谱测定的方法和系统。根据申请人的传授内容的各个方面，所述方法和系统可使可能难以使用常规MS技术分离的生物学相关酸分离。在各个方面中，根据申请人的传授内容的方法和系统可使得差分迁移谱仪能够通过使用CO2作为漂移气体与丙酮组合解析生物学相关酸。

Description

用于选择性检测生物学相关酸的方法
相关申请案
本申请案主张2012年5月18日申请的美国临时申请案第61/649,063号的优先权，所述临时申请案以全文引用的方式并入本文中。
技术领域
本发明大体上涉及质谱，且更确切地说涉及使用离子迁移谱分离酸的方法和设备。
背景技术
虽然质谱(MS)可用于定量样品中特定分析物的量，但MS技术有时不足以辨别两个离子种类。举例来说，甲基丙二酸(MMA)，即一种二羧酸，具有化学式C4H6O4且为钴胺素缺乏(即维生素B12缺乏)的临床标志。虽然使用气相色谱-质谱(GC-MS)定量患者血液中的MMA的临床分析可为灵敏的，但其常常由于受丁二酸(SA)内源性含量干扰而缺乏特异性，丁二酸也是一种具有化学式C4H6O4的二羧酸。此外，如下所示，SA展现与MMA相同的大片段和小片段MRM跃迁且还常常以比MMA高得多的含量存在于生物样品中，使得其干扰MMA的检测/辩别：
已尝试额外样品制备方法，例如在LC分离、固相萃取或湍流色谱之前衍生化，来改进MMA与更丰富的SA的分离。然而，这些技术需要耗时和/或复杂的样品制备，可能增加成本和/或降低生产量，使得MMA的临床诊断定量不准确、不实用或无效益。
由于上文指出的MS关于各种分析物的不足，所以有时在替代方案中依赖于例如离子迁移谱(IMS)的技术或其与MS的组合以获得改进的敏感性和选择性。鉴于MS基于质荷比分析离子，IMS实际上基于离子在沿着漂移管轴长所施加的恒定静电场中漂移穿过气体(通常在大气压)下所需的时间差异来分离离子。在IMS中，离子具有单一方向(轴向)运动且根据其在这些低电场条件(E<1000V/cm)下穿过气体的迁移率加以分离。离子穿过飞行管的漂移时间和因此迁移率为离子的尺寸和形状以及其与背景气体的相互作用的特征。
差分迁移谱，也被称为高场不对称波形离子迁移谱(FAIMS)或场离子谱(FIS)，是IMS的变化形式。在DMS中，RF电压常常称为分离电压(SV)，以垂直于漂移气流的方向施加在漂移管两端。给定种类的离子由于在高场和低场部分期间的迁移率差异而倾向于在RF波形的每一循环期间径向迁移远离输送室的轴一个特征量。施加到漂移管的DC电势统称为补偿电压(CV或CoV)，提供SV的对重平衡静电力。CV可经调谐以便优先防止所关注的离子种类漂移。根据施加情况，CV可设定成固定值以仅使具有特定差分迁移率的离子种类通过，而其余种类的离子朝着电极漂移且被中和。或者，如果在样品持续引入DMS中时相对于固定SV扫描CV，那么可在DMS传送具有不同差分迁移率的离子时产生迁移谱。
在IMS和DMS中，漂移气体的分子在样品离子流动穿过漂移管时与样品离子相互作用。理想的是，漂移气体经选择以与各种干扰分析物相互作用以便进一步区分所述分析物的迁移率。另外，可添加到漂移气体的改质剂在SV的高场和低场部分期间与离子群集到不同程度，从而使这些离子的差分迁移率偏移。然而，DMS条件对于特定种类的作用常常不可预测，而辩别重叠检测峰始终不易于实现。实际上，个别种类的DMS检测峰常常相对于质谱仪的那些峰非常宽，使得重叠常常干扰种类识别。举例来说，先前基于迁移率分离MMA和SA的尝试尚未成功。
因此，仍对改进的种类辩别增强的生物学相关酸的检测存在需要。同样，仍对在减少样品制备的同时改进的来自样品的MMA的定量存在需要。
发明内容
已出乎意料地发现，在差分迁移谱仪中使用CO2作为漂移气体可有利地允许解析对应于同量异位羧酸(包括例如MMA和SA的二羧酸)的离子信号。离子信号的解析可转而允许在含有此类酸的样品中精确定量此类酸。在许多实施例中，样品中存在的同量异位二羧酸的此类定量可根据本文中的传授内容来实现，而不需对样品进行耗时的制备步骤，例如衍生化。在一些情况下，CO2与例如丙酮的改质剂的组合作为漂移气体(例如在气体体积小于约10％、约1％到约10％丙酮的浓度范围中，约1.5％丙酮)出乎意料地且有利地进一步促进对应于同量异位羧酸的离子信号的解析。
根据一个方面，申请人的传授内容的某些实施例涉及用于进行离子迁移谱测定的方法。根据所述方法，含有或疑似含有所关注的酸性分析物的样品可传送到差分迁移谱仪中。可使用包含CO2和丙酮的漂移气体将样品输送穿过差分迁移谱仪，以实现所关注的酸性分析物的离子与样品中存在的干扰酸性分析物的离子分离。
根据另一方面，申请人的传授内容的某些实施例涉及用于进行离子迁移谱测定的方法。根据所述方法，含有或疑似含有所关注的酸性分析物的样品可经电离以生成多种分析物离子。可使用包含CO2的漂移气体将多种分析物离子输送穿过离子迁移谱仪，以实现所关注的酸性分析物的离子与所述电离样品中存在的干扰酸性分析物的离子分离。
在一些方面中，漂移气体可具有大于约80％、大于约90％、大于约95％或大于98.5％的CO2浓度。在一些方面中，漂移气体可基本上由CO2组成。在各个方面中，漂移气体可基本上由CO2和丙酮组成。
在各个方面中，所关注的酸性分析物和干扰酸性分析物的离子可为同量异位的。在一些方面中，所关注的分析物和干扰分析物具有羧酸官能团。在一些方面中，所关注的酸性分析物和干扰酸性分析物可包含羧酸。举例来说，羧酸可包含亮氨酸和异亮氨酸。在一些方面中，所关注的酸性分析物可为MMA且干扰酸性分析物可为SA。
在根据本发明传授内容的各种实施例的一些方面中，所述方法可包括向漂移气体供应改质剂。改质剂可为极性化合物。举例来说，改质剂可包含丙酮。
在各个方面中，所述方法可另外包括制备用于电离的样品。举例来说，样品可通过流动注射分析(FIA)直接引入或干燥于固体支撑物上以便直接引入样品，例如(但不限于)AP-MALDI、DESI、DART和LDTD。在一些方面中，样品制备不包括所关注的酸性分析物的衍生化。举例来说，样品制备包含液相色谱。
在各个方面中，离子迁移谱仪可包含差分迁移谱仪、FAIMS装置，和/或可耦接到LC-MS/MS。
根据另一方面，申请人的传授内容的某些实施例涉及用于进行离子迁移谱测定的方法。根据所述方法，样品可经电离以生成多种分析物离子，所述样品含有或疑似含有所关注的酸性分析物。可使用包含CO2的漂移气体将多种分析物离子输送穿过离子迁移谱仪，以将所述所关注的酸性分析物的离子与所述电离样品中存在的干扰酸性分析物的离子的峰解析。
根据另一方面，申请人的传授内容的某些实施例涉及用于进行离子迁移谱测定的方法。根据所述方法，可电离含有MMA和SA的样品。包含CO2的漂移气体可用丙酮改质。可使用所述经改质漂移气体将电离样品输送穿过离子迁移谱仪，以实现MMA与SA的分离，可定量MMA与SA中的至少一者。
申请人的传授内容的这些和其它特征阐述于本文中。
附图说明
所属领域的技术人员将理解以下描述的图式仅出于说明的目的。所述图式并不打算以任何方式限制申请人的传授内容的范畴。
图1以示意图形式图解说明根据申请人的传授内容的各种实施例的一个方面的包括气帘气体供应器和气帘气体的改质剂供应器的示范性差分迁移谱仪/质谱仪系统。
图2以示意图形式图解说明根据申请人的传授内容的各种实施例的一个方面的包括气帘气体供应器和气帘气体的改质剂供应器的示范性差分迁移谱仪系统。
图3是在不同气帘气体中甲基丙二酸的补偿电压制图(在两种情况下均未使用改质剂，N2节流气体设定成10psi N2)。其描绘了根据申请人的传授内容的各种实施例的多个方面，比较通过使用纯N2和纯CO2作为气帘气体的差分迁移谱仪传送的MMA离子与随后检测到的MMA离子的数据。(注释1:气泡尺寸反映所观测到的离子强度(基于所记录的绝对强度)。观测结果:在N2下，除了在高分离电压下显著的强度损失，甲基丙二酸表现像b型离子，然而，在CO2作为气帘气体的情况下，离子强度随着分离电压增加而增加)
图4是在不同气帘气体中甲基丙二酸的补偿电压制图(在两种情况下异丙醇均作为改质剂(1.5％)，N2节流气体设定成10psi N2)。其描绘了根据申请人的传授内容的各种实施例的多个方面，比较通过使用纯N2和纯CO2作为气帘气体并且IPA作为改质剂的差分迁移谱仪传送的MMA离子与随后检测到的MMA离子的数据。(注释1:气泡尺寸反映所观测到的离子强度(基于所记录的绝对强度)。观测结果:在N2+异丙醇下，甲基丙二酸行为变成a型离子，但在高分离电压下的强度损失仍显著。然而，在CO2作为气帘气体的情况下，离子强度随着分离电压增加而增加)
图5是在不同气帘气体中甲基丙二酸的补偿电压制图(在两种情况下丙醇均作为改质剂(1.5％)，N2节流气体设定成10psi N2)。其描绘了根据申请人的传授内容的各种实施例的多个方面，比较通过使用纯N2和纯CO2作为气帘气体并且丙酮作为改质剂的差分迁移谱仪传送的MMA离子与随后检测到的MMA离子的数据。(注释1:气泡尺寸反映所观测到的离子强度(基于所记录的绝对强度)。观测结果:在N2+丙酮下，甲基丙二酸行为变成a型离子，但在高分离电压下的强度损失仍显著。然而，在CO2作为气帘气体的情况下，离子强度随着分离电压增加而增加)
图6是在CO2作为气帘气体的情况下丁二酸和甲基丙二酸的补偿电压制图(在两种情况下丙醇均作为改质剂(1.5％)，N2节流气体设定成10psi N2)。其描绘了根据申请人的传授内容的各种实施例的多个方面，在纯CO2作为气帘气体并且丙酮作为改质剂的情况下，比较通过差分迁移谱仪传送以及随后检测MMA离子和SA离子的数据。(注释1:气泡尺寸反映所观测到的离子强度(基于所记录的绝对强度)。观测结果:在3600分离电压下在2种物质之间获得基线(10％谷)分离)
图7描绘了根据申请人的传授内容的各种实施例的多个方面，在纯CO2作为气帘气体且丙酮作为改质剂的情况下，含有MMA和/或SA的样品的差分迁移谱仪的迁移谱。
具体实施方式
应了解，为了清楚起见，以下讨论将阐明申请人的传授内容的实施例的各个方面，同时每当省略某些具体细节是适宜或恰当的时便省略某些具体细节。举例来说，在替代性实施例中，相似或类似特征的讨论可以略微简化。众所周知的想法或概念为简洁起见也可以不进行任何详细论述。技术人员应认识到，申请人的传授内容的一些实施例可能不需要每次实施中的某些具体描述的细节，所述细节仅在本文中阐述以提供实施例的彻底理解。类似地，将显而易知可以根据公共常识，在不脱离本发明的范畴的情况下，易于对所述实施例进行更改或改变。实施例的以下详细描述不应被视为以任何方式限制申请人的传授内容的范畴。
本文提供用于进行离子迁移谱测定的方法和系统。根据申请人的传授内容的各个方面，所述方法和系统可使例如可能难以使用常规MS技术分离的生物学相关酸分离。在各个方面中，根据申请人的传授内容的方法和系统可使得差分迁移谱仪能够解析样品的生物学相关酸，例如同量异位二羧酸、亮氨酸和异亮氨酸、以及MMA和SA，全部借助于非限制性实例来说。
现在参照图1，示意性图解说明根据申请人的传授内容的各个方面的示范性差分迁移谱仪/质谱仪系统100。如图1所示，差分迁移谱仪/质谱仪系统100一般包含与质谱仪的第一真空透镜元件150(下文一般特指质谱仪150)流体连通的差分迁移谱仪110。如所属领域的技术人员将了解，差分迁移谱仪/质谱仪系统100仅表示根据本文所述的系统、装置和方法的各个方面所用的一个可能配置。迁移谱仪110可具有各种配置，但一般被配置成基于穿过固定或可变电场的迁移率来拆分离子。举例来说，迁移谱仪可尤其为离子迁移谱仪、差分迁移谱仪或具有各种几何结构的FAIMS装置，例如平行板、弯曲电极或圆柱形FAIMS装置。
在图1所描绘的示范性实施例中，差分迁移谱仪110包含一对由电绝缘体114围绕的相对电极板112，电绝缘体114支撑电极板112并且使其与其它导电元件绝缘。电极板112围绕从差分迁移谱仪110的入口118漂移到差分迁移谱仪110的出口120的漂移气体116。差分迁移谱仪110的出口120释放漂移气体116到含有质谱仪150的真空室152的入口154中。
差分迁移谱仪110可包含在由气帘板或边界构件132界定并且供应有来自气帘气体供应器134的气帘气体的气帘室130内。具体来说，来自气帘气体供应器134的气帘气体可在通过流量控制器和阀确定的流动速率下流动穿过气帘气体导管136。气帘气体供应器134可向气帘气室提供任何纯或混合的组合气帘气体。借助于非限制性实例来说，气帘气体可为空气、O2、He、N2、CO2或其任何组合。在一些方面中，气帘气体可具有至少约80％CO2、至少约90％CO2、至少约95％CO2、至少约98.5％CO2或实质上100％CO2的浓度。气帘室130中气帘气体的压力可维持在大气压(即760托)下或接近大气压(即760托)。
系统100还可包括用于向气帘气体供应改质剂的改质剂供应器138。如上文所指出，改质剂可添加到气帘气体以在SV的高场和低场部分期间有差异地与离子群集。如所属领域的技术人员将了解，改质剂供应器可为固体、液体或气体的储槽，气帘气体穿过所述改质剂供应器传递到气帘室130。举例来说，气帘气体可鼓泡穿过液体改质剂供应器。或者，改质剂液体或气体可例如通过LC泵、注射泵或将改质剂以已知速率分配到气帘气体中的其它分配装置而计量进入气帘气体。举例来说，改质剂可使用泵引入以便得到改质剂在气帘气体中约1.5％的最终浓度。改质剂供应器134可提供任何改质剂，借助于非限制性实例来说，包括丙酮、水、甲醇、异丙醇、二氯甲烷、二溴甲烷或其任何组合。
任选地，气帘气体导管136和/或气帘室130可包括加热器，用于加热气帘气体和改质剂的混合物以进一步控制气帘气体中改质剂的比例。
离子102可由离子源(未示出)提供且经由气帘室入口发射进入气帘室130。如所属领域的技术人员将了解，离子源可实际上为所属领域中已知的任何离子源，尤其包括例如连续离子源、脉冲离子源、大气压化学电离(APCI)源、电喷雾电离(ESI)源、电感耦合等离子体(ICP)离子源、基质辅助激光解吸/电离(MALDI)离子源、辉光放电离子源、电子碰撞离子源、化学电离源或光致电离离子源。气帘室130中气帘气体的压力(例如，约760托)可提供出自气帘气室入口144的气帘气体流出物142以及进入差分迁移谱仪110的气帘气体流入物137，流入物144变为携载离子102穿过差分迁移谱仪110且进入包含在真空室152内的质谱仪150的漂移气体116，所述真空室152可维持在比气帘室130低得多的压力下。举例来说，真空室152可通过真空泵156维持在2.3托的压力下。由于在气帘室130内的气帘气体可包括改质剂，所以漂移气体116还可包含改质剂。在一个示范性实施例，气帘气体/漂移气体可为经丙酮改质的纯CO2。
如所属领域的技术人员将了解，质谱仪150可另外包括在真空室152下游的质量分析仪元件150a。离子可输送穿过真空室152且可输送穿过含有一或多个额外差动泵吸真空阶段的一或多个质量分析仪元件150a。举例来说，在一个实施例中，三重四极杆质谱仪可包含三个差动泵吸真空阶段，包括维持在大致2.3托压力下的第一阶段、维持在大致6毫托压力下的第二阶段和维持在大致10-5托压力下的第三阶段。第三真空阶段可含有检测器以及之间有碰撞池的两个四极杆质量分析仪。对所属领域的技术人员将显而易知的是，系统中可存在许多其它离子光学元件。还可使用其它类型的质量分析仪，例如单级四极杆、离子阱(3D或2D)、混合分析仪(四极杆-飞行时间、四极杆-线性离子阱、四极杆-轨道阱)、轨道阱或飞行时间。
在操作中，含有或疑似含有所关注的酸性分析物的样品(例如，血液、血清、尿液、唾液等)可根据所属领域中已知的各种方法来制备以便引入差分迁移谱仪110中。离子102可邻近气帘室130的入口产生且接着输送穿过差分迁移谱仪110，以实现所关注的酸性分析物与干扰物质的离子的分离。根据各个方面，差分迁移谱仪110可在固定SV和CV扫描下操作以使得各种离子连续通过。或者，所施加的CV可基于例如基于在所施加条件下的已知迁移率的查找表进行选择以使所关注的酸性离子优先通过。由差分迁移谱仪传送的离子可接着被发送到下游质量分析仪元件150、150a以进一步分析或检测。
如所属领域的技术人员将了解，差分迁移谱仪110可用于根据申请人的传授内容而修改的各种已知系统中。举例来说，现在参照图2，以示意图形式图解说明根据本发明的第二实施例的一个方面的差分迁移谱仪系统200。为了清楚起见，与图1的系统100的元件类似的图2的系统200的元件使用与图1加上100来相同的参考数字标识。为简洁起见，对于图2，不重复图1的描述。
如所示，图2的差分迁移谱仪系统200类似图1的差分迁移谱仪/质谱仪系统100的一部分，但不具有图1的下游质谱仪150、150a和真空室元件152。相反地，差分迁移谱仪210可安装在任何数目的不同质谱仪元件上游，或可简单地安装在减压区上游以有效抽吸离子202和漂移气体216穿过差分迁移谱仪210。或者，安置在差分迁移谱仪210的出口处的检测器250(例如，法拉弟杯(Faraday cup)或其它离子电流测量装置)可有效检测由差分迁移谱仪210传送的离子。
差分迁移谱仪210包含在气帘室230内。气帘室230可以类似于上文结合图1所述的方式供应有通过改质剂供应器238改质的来自气帘气体供应器234的气帘气体。
实例
申请人的传授内容可参考以下实例和图3到图7中呈现的数据而得到甚至更充分地理解，其证明根据本文传授内容的各个方面使用差分迁移谱测定分离样品中存在的各种生物学酸。从本说明书和本文所公开的本发明传授内容的实践来考虑，申请人的传授内容的其它实施例对所属领域的技术人员来说将为显而易见的。打算将这些实例仅仅视为示范性的。
如上文所指出，MMA和SA为例如血液的生物样品中所存在的同量异位二羧酸。虽然MMA为维生素B12缺乏的已知标志，但由于SA干扰质谱技术常常难以在不存在临床诊断分析中一般避免的昂贵和/或耗时的样品制备的情况下具体定量MMA。现在参照图3到图7，数据描绘了使用DMS分离MMA与SA的结果。虽然数据描绘了如参考图2中所描绘的系统所讨论的在没有下游操控的情况下由差分迁移谱仪传送的MMA和SA离子的强度，但所属领域的技术人员将理解，离子迁移谱仪可替代地位于质谱仪前端以便能够进一步分析所传送的离子。
现在具体参照图3，此绘图描绘了在使用在3.3L/min的气体流量下操作的作为气帘气体的纯N2和纯CO2以及在0.3L/min(10psi)下操作的N2节流气体(DMR)以增加在差分迁移池中的停留时间的情况下，由在分别由x轴和y轴指示的各种CV和SV下操作的差分迁移谱仪传送的MMA离子的强度(每个气泡的尺寸反映了所检测到的离子的绝对强度)。未使用改质剂。差分迁移谱仪为经改质以经由校准的流量控制器提供CO2气体手动控制的SelexIONTM。使用由AB Sciex销售的系统检测离子。
如图3所示，在纯N2作为气帘气体的情况下，MMA离子表现为b型离子，如随着场强度增加其迁移率初始增加(即CV幅度增加)且接着其迁移率随后降低(即上“尾”)所指示。此外，MMA离子展现在高SV下显著的强度损失，如气泡的尺寸减小所指示。然而，在纯CO2作为气帘气体的情况下，MMA离子展现在高SV下增加的迁移率和增加的强度。
现在参照图4，此绘图描绘了除向气帘气体添加异丙醇(IPA，1.5％)作为改质剂之外，在与图3类似的条件下操作的差分迁移谱仪的出口处记录的MMA离子的强度。如图4所示，在纯N2+IPA作为气帘气体和改质剂的情况下，MMA离子表现为a型离子，如其迁移率随着场强度增加而增加所指示。尽管如此，MMA离子仍展现在高SV下显著的强度损失。然而，在纯CO2+IPA作为气帘气体和改质剂的情况下，MMA离子展现在高SV下增加的迁移率和增加的强度。
现在参照图5，此绘图描绘了除向气帘气体添加丙酮(1.5％)代替IPA之外，在与图4类似的条件下操作的差分迁移谱仪出口处记录的MMA离子的强度。如图5所示，在纯N2+丙酮作为气帘气体和改质剂的情况下，MMA离子继续表现为a型离子，如其迁移率随着场强度增加而增加所指示。然而，与在IPA作为改质剂的情况下MMA离子所示出的那些相比，MMA离子展现在高SV下甚至更显著的强度损失。在纯CO2+丙酮作为气帘气体和改质剂的情况下，MMA离子展现在高SV下增加的迁移率和增加的强度。
现在参照图6，此绘图描绘了在与图5类似的条件下操作的差分迁移谱仪出口处记录的MMA和SA离子的强度。也就是说，在纯CO2作为气帘气体和丙酮(1.5％)作为改质剂的情况下，在差分质谱仪出口端检测到MMA和SA离子中的每一个。如图6所示，MMA离子和SA离子都表现为a型离子，如其迁移率随着场强度增加而增加所指示。然而，在大于约2500V的给定SV下，每一种物质的CV可被区分开。举例来说，图6表明在3600V的SV下，在MMA(-31.3V)与SA(-28.5V)之间所测量的CV存在约10％分离。
如图7中进一步详细所示，在CO2作为气帘气体以3L/min的速率流动穿过DMS而丙酮(1.5％)作为改质剂的情况下操作的DMS可足以从单个样品分离MMA和SA。首先具体参照图7a，此绘图描绘了在3600V的固定SV下随着CV扫描，在仅外加MMA(约250pg/μL)的空白(水:甲醇(50:50(v:v))和0.1％甲酸)中检测到的由DMS传送的离子的计数。在迁移谱中在CV＝-31.0V下出现单峰。
现在参照图7b，此绘图描绘了在3600V的固定SV下随着CV扫描，在仅外加SA(约250pg/μL)的空白(水:甲醇(50:50(v:v))和0.1％甲酸)中检测到的由DMS传送的离子的计数。在迁移谱中在CV＝-28.5V下出现单峰。
现在参照图7c，此绘图描绘了在3600V的固定SV下随着CV扫描，在外加MMA:SA(1:1)(各自约250pg/μL)的空白(水:甲醇(50:50(v:v))和0.1％甲酸)中检测到的由DMS传送的离子的计数。在迁移谱中在在-31.3V和-28.5V的CV下出现两个明显的峰，在-31.3V的CV下的峰实质上对应于如图7a所示在仅含有MMA的样品中检测到的峰，在-28.5V的CV下的峰实质上对应于如图7b所示在仅含有SA的样品中检测到的峰。用于MMA和SA传送的CV值的差异足以准许选择性监测/定量MMA而为来自SA的干扰。
出人意料的是，这些数据表明CO2作为漂移气体与丙酮作为改质剂的组合提高DMS关于二羧酸的分离能力。因此，可根据本文传授内容，在样品制备最少的情况下充分拆分单个样品中存在的酸以允许其具体定量。
本文所用的部分标题仅用于组织目的且不欲视为限制。虽然结合各种实施例来描述申请人的传授内容，但并不打算将申请人的传授内容限制为这类实施例。与其相反，如所属领域的技术人员将了解的，申请人的传授内容涵盖各种替代方案、修改和等效物。

Claims (16)

1.一种用于进行离子迁移谱测定的方法，其包含：
a.电离样品以生成多种分析物离子，所述样品含有或疑似含有所关注的酸性分析物；以及
b.使用包含具有至少80％浓度的CO2的漂移气体和液体改质剂将所述多种分析物离子输送穿过离子迁移谱仪以引起离子与所述液体改质剂在应用的分离电压的高场和低场部分期间群集到不同程度，以实现所述所关注的酸性分析物的离子与所述电离样品中存在的干扰酸性分析物的离子的分离，所述离子迁移谱仪包含差分迁移谱仪或FAIMS。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述漂移气体具有至少98.5％的CO2浓度。
3.根据权利要求1所述的方法，其中所述漂移气体由CO2组成。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述所关注的酸性分析物包含甲基丙二酸MMA。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述干扰酸性分析物包含丁二酸SA。
6.根据权利要求1所述的方法，其中所述所关注的酸性分析物与所述干扰酸性分析物的离子为同量异位的。
7.根据权利要求1所述的方法，其中所述所关注的分析物和所述干扰分析物具有羧酸官能团。
8.根据权利要求1所述的方法，其中所述改质剂包含极性化合物。
9.根据权利要求8所述的方法，其中所述改质剂包含丙酮。
10.根据权利要求1所述的方法，其进一步包含制备用于电离的样品。
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述样品制备包含将所述样品干燥于固体支撑物上以便经由AP-MALDI、DESI、DART和LDTD中的任一者直接引入样品。
12.根据权利要求1所述的方法，其中所述离子迁移谱仪耦合到LC-MS/MS。
13.根据权利要求1所述的方法，其中所述离子迁移谱仪耦合到LC-MS。
14.根据权利要求1所述的方法，其中步骤b包含将所述所关注的酸性分析物的离子与所述电离样品中存在的干扰酸性分析物的离子的峰解析。
15.一种质谱测定的方法，其包含：
a.电离含有MMA和SA的样品；
b.提供包含具有至少80％浓度的CO2的漂移气体；
c.用液体丙酮改质所述漂移气体以形成经改质漂移气体；
d.使用所述经改质漂移气体将所述电离样品输送穿过离子迁移谱仪以引起离子与所述液体丙酮在应用的分离电压的高场和低场部分期间群集到不同程度，以实现MMA与SA的分离，所述离子迁移谱仪包含差分迁移谱仪或FAIMS；以及
e.定量MMA和SA中的至少一者。
16.一种用于进行离子迁移谱测定的方法，其包含：
a.将含有或疑似含有所关注的酸性分析物的样品引入到差分迁移谱仪中；以及
b.使用包含具有至少80％浓度的CO2和液体丙酮的漂移气体将所述样品输送穿过所述差分迁移谱仪以引起离子与所述液体丙酮在应用的分离电压的高场和低场部分期间群集到不同程度，以实现所述所关注的酸性分析物的离子与所述样品中存在的干扰酸性分析物的离子的分离。
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