CN104370931B - 黄酮类化合物及其制备方法和应用 - Google Patents
黄酮类化合物及其制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种如式(I)所示结构的黄酮类新化合物及其制备方法和在美白和/或抗炎中的应用，所述黄酮类新化合物能够显著抑制酪氨酸酶活性和由LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的一氧化氮代谢作用，因此，本发明所述黄酮类新化合物有望用于制备具有美白和抗炎功效的药物，为研究和开发具有美白和抗炎作用的药品、保健品、日化用品等提供了新思路。
Description
技术领域
本发明涉及一种药用植物中的新化合物，具体涉及一种从荔枝草中分离得到的黄酮类新化合物及其衍生物，并涉及该黄酮类新化合物及其衍生物的制备方法及在美白和/或抗炎中的应用。
技术背景
荔枝草为唇形科鼠尾草属植物荔枝草(Salvia plebeian R.Br.)的全草，又称过冬青、天名精、凤眼草、蛤蟆草、雪见草、青蛙草、皱皮草等，广泛分布于我国华东、中南、西南地区，主产于江苏、浙江、安徽等省。
荔枝草味苦、辛，性凉，具有清热解毒、凉血散瘀、利水消肿等功效，用于治疗急性扁桃体炎、慢性气管炎、肾炎水肿、痔疮肿痛等。荔枝草中的主要化学成分包括黄酮类、萜类、倍半萜类、皂苷类、不饱和甾醇类及挥发油等。其中，现有技术通常是采用柱色谱法对黄酮类化合物进行分离，截止目前已经从荔枝草中分离得到的黄酮类化合物有泽兰黄酮、高车前素、高车前苷等，其中泽兰黄酮、高车前素、高车前苷这几种黄酮类化合物对CCl4和D-GlaN诱发大鼠肝细胞毒性均具有保护作用(1mg/kg，p＜0.001)，高车前素和高车前苷还可明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖、血清总胆固醇和甘油三酯的含量，且能显著改善游离脂肪酸所致内皮细胞—氧化氮生成减少，从而改善游离脂肪酸所致的胰岛素抵抗，对血管内皮细胞起到保护作用。
由此可见，从荔枝草中的分离得到的多种黄酮类化合物通常显示出良好的药学活性，但是现有技术从荔枝草中分离得到的黄酮类化合物的种类十分有限。在这种背景下，如何对荔枝草中所含的黄酮类化合物进行分离提纯以期获得更多的生物活性物质，是本领域技术人员尚未解决的一个难题。
发明内容
本发明解决的技术问题是现有技术从荔枝草中分离得到的黄酮类化合物的种类较少，进而提供一种从荔枝草中分离得到的黄酮类新化合物及其衍生物，本发明的另一目的是提供所述黄酮类新化合物及其衍生物的制备方法及其在美白和/或抗炎中的应用。
本发明实现上述目的的技术方案为：
一种黄酮类新化合物，结构如式(I)所示：
其中，R1、R2和R3独立地选自氢或甲基。
所述的黄酮类新化合物具有式(Ia)所示结构：
一种所述黄酮类新化合物的制备方法，包括如下步骤：
(1)将荔枝草粉碎，加入50～100v％乙醇，浸泡后收集渗漉液，将所述渗漉液浓缩得到荔枝草提取物；
(2)对所述荔枝草提取物进行硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯进行洗脱， 收集乙酸乙酯洗脱液，浓缩得第一浸膏；
(3)对所述第一浸膏进行硅胶柱层析分离，使用二氯甲烷与甲醇的混合溶剂进行洗脱，所述二氯甲烷与甲醇的体积比为10:1～20:1，浓缩洗脱液得第二浸膏；
(4)对所述第二浸膏进行MCI柱层析分离，使用甲醇与水的混合溶剂进行洗脱，所述甲醇与水的体积比为13:7～3:1，浓缩洗脱液得粗品；
(5)将所述粗品进行凝胶柱层析分离，即得到所述式(Ia)所示结构的黄酮类新化合物。
步骤(1)中，所述50～100v％乙醇与所述荔枝草的质量比为5:1～30:1。
步骤(1)中，所述浸泡的时间为5～30天。
步骤(1)中，所述荔枝草为荔枝草的全草、荔枝草的地上部分、荔枝草的地下部分中的任意一种。
步骤(2)中，所述硅胶柱层析分离是采用质量比为1:1～1:3的硅胶和硅藻土对所述荔枝草提取物进行拌样。
步骤(2)中，所述乙酸乙酯的体积与步骤(2)中所述硅胶柱的柱体积之比为3:1～10:1。
步骤(2)中对所述荔枝草提取物进行硅胶柱层析分离时，在用乙酸乙酯进行洗脱前，先使用石油醚对硅胶柱进行淋洗。
步骤(3)中对所述第一浸膏进行硅胶柱层析分离时，在使用二氯甲烷与甲醇的混合溶剂进行洗脱前，先使用二氯甲烷对硅胶柱进行淋洗。
步骤(3)中所述二氯甲烷与甲醇的混合溶剂的体积与步骤(3)中所述硅胶柱的柱体积之比为3:1～10:1。
步骤(4)中对所述第二浸膏进行MCI柱层析分离时，在进行洗脱前先依次使用甲醇与水的体积比为1:4～3:7、2:3～1:1、11:9～3:2的甲醇与水的混合 溶剂进行淋洗。
步骤(4)中用于进行洗脱的所述甲醇与水的混合溶剂的体积与所述MCI柱的柱体积之比为3:1～10:1。
步骤(5)中，所述凝胶柱层析的固定相为Sephadex LH-20凝胶，流动相为甲醇。
所述黄酮类新化合物在美白和/或抗炎中的应用。
所述黄酮类新化合物在制备日化用品和/或抗炎药物中的应用。
所述黄酮类新化合物的衍生物，具有式(I)所示的母核结构。
所述黄酮类新化合物的衍生物在美白和/或抗炎中的应用。
所述黄酮类新化合物的衍生物在制备日化用品和/或抗炎药物中的应用。
本发明所述黄酮类新化合物的制备方法，根据物质的分子量和极性的差异，依次在步骤(2)～(4)中进行两次硅胶柱层析分离和MCI柱层析分离，得到粗品，并在步骤(5)中对所述粗品进行凝胶柱层析分离，最终得到分子量为434的黄酮类新化合物。
本发明上述技术方案具有以下有益效果：
本发明提供了一种未见报道的如式(I)所示结构的黄酮类新化合物，通过美白及抗炎活性测试试验，证明了所述黄酮类新化合物具有优良的美白和抗炎作用，由此可见，本发明所述黄酮类新化合物具有结构新颖、作用独特的优点，既可用作美白和抗炎活性分子，也可作为先导化合物，为开发具有美白和抗炎功效的日化用品提供了新思路。
附图说明
图1为本发明黄酮类新化合物Ia的HMBC图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明提供的黄酮类新化合物及其衍生物进行详细说明。其中1重量份为1kg，1体积份为1mL。
实施例1
本实施例所述黄酮类新化合物Ia的制备方法，包括如下步骤：
(1)称取荔枝草全草10重量份，粉碎后加入95v％乙醇的水溶液50重量份，搅匀，浸泡30天，收集渗漉液，真空浓缩得到荔枝草提取物；
(2)用质量比为1:1的硅胶和硅藻土对所述荔枝草提取物进行拌样，并上样至硅胶柱，依次使用3倍柱体积的石油醚和3倍柱体积的乙酸乙酯作为洗脱剂进行洗脱，收集乙酸乙酯洗脱液，浓缩得第一浸膏0.21重量份；
(3)对所述第一浸膏进行硅胶柱层析分离，依次用二氯甲烷10倍柱体积、体积比为10:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂10倍柱体积、以及体积比为5:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂作为洗脱剂进行梯度洗脱，并收集二氯甲烷与甲醇的体积比为10:1的洗脱液，浓缩得第二浸膏0.07重量份；
(4)对所述第二浸膏进行MCI柱层析分离，依次采用体积比为3:7的甲醇与水的混合溶剂10倍柱体积、体积比为1:1的甲醇与水的混合溶剂10倍柱体积、体积比为3:2的甲醇与水的混合溶剂10倍柱体积、体积比为7:3的甲醇与水的混合溶剂10倍柱体积、以及体积比为4:1的甲醇与水的混合溶剂10倍柱体积作为洗脱剂进行梯度洗脱，并收集甲醇与水的体积比为7:3的洗脱液，减压浓缩得粗品；
(5)以Sephadex LH-20凝胶为固定相、甲醇为流动相，对所述粗品进行凝胶柱层析分离，合并相同组分，即得到1.5×10-5重量份的黄酮类新化合物Ia。
所述黄酮类新化合物Ia为橘黄色无定型粉末，2wt％AlCl3-C2H5OH溶液显色时呈阳性反应，在254nm紫外下有暗斑。同时，利用1H-NMR谱、 13C-NMR谱、HMBC谱及高分辨质谱对黄酮类新化合物Ia进行结构鉴定，得出所述黄酮类新化合物Ia的分子式为C24H18O8，其带有原子编号的结构式 为：
其中，HR-ESI-MS(m/z)：457.0918[M+Na]+(计算值457.0899)；1H-NMR和13C-NMR数据及其归属见表1。
表1黄酮类新化合物Ia的1H-NMR和13C-NMR数据及其归属(DMSO-d6)
所述黄酮类新化合物Ia的结构推导的具体过程如下：根据1H-NMR和 13C-NMR数据可知，所述黄酮类新化合物Ia是一个以高车前素为母核的分子，其与高车前素的不同之处在于：黄酮类新化合物Ia是用δC105.7的碳原子，即C12a取代高车前素中H-8质子；同时，在1H-NMR谱中还存在有两个苯环氢信号δH6.59(1H,s,H-8)和6.93(1H,s,H-11)、两个苯环上的羟基信号δH9.28(1H,s,9-OH)和8.88(1H,s,10-OH)、一个四重质子峰δH4.47(1H,q,J＝6.7Hz,H-12)和一个甲基二重峰1.41(3H,d,J＝6.7Hz,H-13)；相应地，在13C-NMR(DMSO-d6,100Hz)谱中还存在有三个含氧碳信号δC142.1、δC142.7、δC145.1,三个无氧碳信号δC103.6、δC114.5、δC115.2，一个叔碳信号δC26.9和一个甲氧基信号δC25.9，上述1H-NMR和13C-NMR数据提示黄酮类新化合物Ia是一个在高车前素结构基础上还具有一个2,4,5-三羟基苯环和一个CH-CH3基团的分子。
再结合所述黄酮类新化合物Ia的HMBC谱图(如图1所示)，δH1.41(3H,H-13)分别与δC26.9(C-12)、δC115.2(C-11a)和δC105.7(C-12a)远程相关，这提示上述CH-CH3基团分别与上述苯环上的C-11a和高车前素黄酮母核上的C-12a相连。经过上述推导得到的分子结构符合HR-ESI-MS给出的分子量。
经检索可知，所述黄酮类新化合物Ia迄今未见报道，故命名为Plebein。
实施例2
本实施例所述黄酮类新化合物Ia的制备方法，包括如下步骤：
(1)称取荔枝草全草10重量份，粉碎后加入50v％乙醇水溶液300重量份，搅匀，浸泡17.5天，收集渗漉液，真空浓缩得到荔枝草提取物；
(2)用质量比为3:1的硅胶和硅藻土对所述荔枝草提取物进行拌样，并上样至硅胶柱，依次使用10倍柱体积的石油醚和10倍柱体积的乙酸乙酯作为洗脱剂进行洗脱，收集乙酸乙酯洗脱液，浓缩得第一浸膏0.26重量份；
(3)对所述第一浸膏进行硅胶柱层析分离，依次用二氯甲烷3倍柱体积、体积比为20:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂3倍柱体积、以及体积比为5:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂作为洗脱剂进行梯度洗脱，并收集二氯甲烷与甲醇的体积比为20:1的洗脱液，浓缩得第二浸膏0.09重量份；
(4)对所述第二浸膏进行MCI柱层析分离，依次采用体积比为3:7的甲醇与水的混合溶剂3倍柱体积、体积比为1:1的甲醇与水的混合溶剂3倍柱体积、体积比为3:2的甲醇与水的混合溶剂3倍柱体积、体积比为13:7的甲醇与水的混合溶剂3倍柱体积、以及体积比为4:1的甲醇与水的混合溶剂3倍柱体积作为洗脱剂进行梯度洗脱，并收集甲醇与水的体积比为13:7的洗脱液，减压浓缩得粗品；
(5)以Sephadex LH-20凝胶为固定相、甲醇为流动相，对所述粗品进行凝胶柱层析分离，合并相同组分，即得到1.8×10-5重量份的黄酮类新化合物Ia。
实施例3
本实施例所述黄酮类新化合物Ia的制备方法，包括如下步骤：
(1)称取荔枝草全草10重量份，粉碎后加入无水乙醇200重量份，搅匀，浸泡18天，收集渗漉液，真空浓缩得到荔枝草提取物；
(2)用质量比为1:1的硅胶和硅藻土对所述荔枝草提取物进行拌样，并上样至硅胶柱，依次使用10倍柱体积的石油醚和7倍柱体积的乙酸乙酯作为洗脱剂进行洗脱，收集乙酸乙酯洗脱液，浓缩得第一浸膏0.25重量份；
(3)对所述第一浸膏进行硅胶柱层析分离，依次用二氯甲烷3倍柱体积、体积比为15:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂6倍柱体积、以及体积比为5:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂作为洗脱剂进行梯度洗脱，并收集二氯甲烷与甲醇的体积比为15:1的洗脱液，浓缩得第二浸膏0.10重量份；
(4)对所述第二浸膏进行MCI柱层析分离，依次采用体积比为1:4的甲醇与水的混合溶剂3倍柱体积、体积比为2:3的甲醇与水的混合溶剂3倍柱体积、体积比为11:9的甲醇与水的混合溶剂3倍柱体积、体积比为3:1的甲醇与水的混合溶剂3倍柱体积、以及体积比为4:1的甲醇与水的混合溶剂3倍柱体积作为洗脱剂进行梯度洗脱，并收集甲醇与水的体积比为3:1的洗脱液，减压浓缩得粗品；
(5)以Sephadex LH-20凝胶为固定相、甲醇为流动相，对所述粗品进行凝胶柱层析分离，合并相同组分，即得到1.7×10-5重量份的黄酮类新化合物Ia。
实施例4
本实施例所述黄酮类新化合物Ia的制备方法，包括如下步骤：
(1)称取荔枝草全草10重量份，粉碎后加入75v％乙醇水溶液175重量份，搅匀，浸泡5天，收集渗漉液，真空浓缩得到荔枝草提取物；
(2)用质量比为2:1的硅胶和硅藻土对所述荔枝草提取物进行拌样，并上样至硅胶柱，用6.5倍柱体积的乙酸乙酯作为洗脱剂进行洗脱，收集乙酸乙酯洗脱液，浓缩得第一浸膏0.20重量份；
(3)对所述第一浸膏进行硅胶柱层析分离，用体积比为15:1的二氯甲 烷与甲醇的混合溶剂6.5倍柱体积进行洗脱，收集并浓缩洗脱液，得第二浸膏0.06重量份；
(4)对所述第二浸膏进行MCI柱层析分离，采用体积比为3:1的甲醇与水的混合溶剂6.5倍柱体积作为洗脱剂进行洗脱，收集并浓缩洗脱液得粗品；
(5)以Sephadex LH-20凝胶为固定相、甲醇为流动相，对所述粗品进行凝胶柱层析分离，合并相同组分，即得到1.1×10-5重量份的黄酮类新化合物Ia。
实施例5
本实施例所述黄酮类新化合物Ib，其结构如式(Ib)所示：
本实施例所述黄酮类新化合物Ib的制备方法为：
向5×10-4重量份的化合物Ia中加入6N盐酸/四氢呋喃溶液5体积份，室温下搅拌反应1小时，浓缩即得到所述黄酮类新化合物Ib。
实施例6
本实施例所述黄酮类新化合物的衍生物IIb，其结构如式(IIb)所示：
本实施例所述黄酮类新化合物的衍生物IIb的制备方法为：
将3×10-4重量份的化合物Ib溶解在5体积份的无水甲醇中，加入2N氢氧化钠/水溶液5体积份，室温下搅拌反应2小时，浓缩，残渣经重结晶得到所述黄酮类新化合物的衍生物IIb。
实施例7
本实施例所述黄酮类新化合物Ic，其结构如式(Ic)所示：
本实施例所述黄酮类新化合物Ic的制备方法为：
以化合物Ia为原料，在酸催化下，与原甲酸三乙酯反应得到中间体Ic-3，中间体Ic-3在弱碱性条件下与等当量的甲基化试剂反应，得到化合物Ic-4，然后在酸催化下化合物Ic-4发生水解反应，脱去保护基即得到化合物Ic；其中，所述酸选自无机酸或有机酸，如对甲苯磺酸、甲磺酸、醋酸、盐酸、硫酸或磷酸；所述碱选自碳酸钾、碳酸钠、三乙胺、吡啶、N,N-二甲基-4-胺基吡啶或二异丙基乙胺；所述甲基化试剂选自碘甲烷或硫酸二甲酯。
实施例8
本实施例所述黄酮类新化合物Id，其结构如式(Id)所示：
本实施例所述黄酮类新化合物Id的制备方法为：
以化合物Ia为原料，在酸催化下，与原甲酸三乙酯反应得到中间体Ic-3，中间体Ic-3在碱性条件下与2当量甲基化试剂反应，得到化合物Id-2；然后在酸催化下化合物Id-2发生水解反应，脱去保护基即得到化合物Id；其中，所述酸选自无机酸或有机酸，如对甲苯磺酸、甲磺酸、醋酸、盐酸、硫酸或磷酸；所述碱选自碳酸钾、碳酸钠、三乙胺、吡啶、N,N-二甲基-4-胺基吡啶、 二异丙基乙胺、氢化钠、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钾、二异丙基氨基锂或正丁基锂；所述甲基化试剂选自碘甲烷或硫酸二甲酯。
实验例
为了清楚地说明本发明所述黄酮类新化合物具有良好的美白和抗炎活性，本发明还设置了如下实验例。
实验例1：本发明所述黄酮类新化合物的美白活性研究
1.1溶液配制
样品溶液：将本发明所述黄酮类新化合物Ia用0.1％DMSO的PBS溶解，并配制成摩尔浓度为100μmol/L的样品溶液。
阳性药物溶液：精密称取维生素C用PBS溶解，并配制成摩尔浓度为100μmol/L的阳性药物溶液。
L-DOPA溶液：精密称取4.930mg的左旋多巴(L-dopa)，用0.01mol/LPBS(pH6.8)溶解，并定容至10mL，避光，超声溶解，配制成摩尔浓度为 2.5mmol/L的L-DOPA溶液。L-dopa溶液易氧化，应现用现配。
酪氨酸酶溶液：将25KU的酪氨酸酶粉末用0.01mol/L PB(pH6.8)溶解，定容至250mL，配制成浓度为100U/mL的酪氨酸酶溶液。将配制好的酪氨酸酶溶液分装至离心管中，密封后置于-20℃冰箱保存；冻存的酪氨酸酶溶液，置于37℃水浴锅中，快速晃动使离心管中的溶液迅速融化，每次融化的酪氨酸酶溶液须在4h内用完。
1.2活性测试
将20μL样品溶液或阳性药物溶液加入到96孔细胞培养板中，再依次加入L-DOPA溶液65μL和酪氨酸酶溶液15μL，充分混匀，于37℃孵育20min，而后再冰浴10min，立即置于酶标仪中测定490nm处的吸光度。
1.3实验结果
根据490nm处的吸光度计算本发明所述黄酮类新化合物Ia对酪氨酸酶的抑制率(％)，并将酪氨酸酶活性抑制率达到50％时化合物的浓度作为IC50值，结果如表2所示。所述酪氨酸酶的抑制率按以下公式计算：
抑制率I(％)＝(1-(B1-B2)/(A1-A2))×100％
其中，A1：标准反应管所测的吸光度；
A2：标准阴性对照所测的吸光度；
B1：样品、酪氨酸酶、L-DOPA及PBS的混合液所测的吸光度；
B2：样品、L-DOPA及PBS的混合液所测的吸光度。
表2本发明所述黄酮类新化合物对酪氨酸酶的抑制作用
由表2可以看出，本发明所述黄酮类新化合物对酪氨酸酶具有显著的抑 制作用，优于阳性药物维生素C，可作为潜在的酪氨酸酶抑制剂和美白活性剂用于防治皮肤色斑、雀斑、老年斑等皮肤色素沉着。
实验例2：本发明所述黄酮类新化合物的抗炎活性研究
2.1细胞分组
取对数生长期的小鼠巨噬细胞RAW264.7，进行常规消化培养，调整为每毫升含有1×105个巨噬细胞的单细胞悬液，将细胞接种于96孔培养板中，每孔90μL；
随机分成4组，分别为对照组(0.1％DMSO的PBS)、模型组(用100ng/mL的LPS刺激细胞)、阳性药物组(摩尔浓度为50μM的地塞米松的PBS溶液，其中含有0.1％DMSO)及化合物Ia组(摩尔浓度为50μM的本发明所述黄酮类新化合物Ia的PBS溶液，其中含有0.1％DMSO)，每组设3个复孔。
2.2细胞给药
对照组和模型组均不给药；阳性药物组的每孔分别加入10μL地塞米松溶液和5μL的LPS；化合物Ia组的每孔分别加入10μL黄酮类新化合物Ia溶液和5μL的LPS。
2.3活性测试
将上述培养板置于37℃的CO2孵箱中培养24小时，吸取该培养板中的培养液90μL，加入等体积的Griess试剂，室温反应10min，用酶标仪读取540nm处的吸光度。
所述Griess试剂由Griess试剂I和Griess试剂II等体积混合而成，4℃放置，并于12小时内使用；其中Griess试剂I为0.1％的盐酸萘乙二胺水溶液，Griess试剂II为含有1％对氨基苯磺酰胺和5％磷酸的水溶液。
2.4实验结果
根据540nm处的吸光度计算本发明所述黄酮类新化合物Ia对LPS诱导 的小鼠巨噬细胞RAW264.7的一氧化氮代谢抑制率(％)，并将LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的一氧化氮代谢抑制率达到50％时化合物的浓度作为IC50值，结果如表3所示。所述LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的一氧化氮代谢抑制率按以下公式计算：
抑制率％＝(模型组吸光度值-化合物Ia组吸光度值)/(模型组吸光度值-对照组吸光度值)×100％
表3本发明所述黄酮类新化合物对LPS诱导RAW264.7的NO代谢抑制作用
由表3可知，本发明所述黄酮类新化合物对LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的一氧化氮代谢具有显著的抑制作用，优于阳性药物地塞米松，可作为潜在的抗炎剂用于制备防治炎症相关疾病的药物。
综上所述，本发明所述黄酮类新化合物能够显著抑制酪氨酸酶活性和由LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的一氧化氮代谢作用，因此，本发明所述黄酮类新化合物有望用于制备具有美白和抗炎功效的药物，为研究和开发具有美白和抗炎作用的药品、保健品、日化用品等提供了新思路。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (17)
1.一种黄酮类化合物，其特征在于，结构如式(I)所示：
其中，R1、R2和R3独立地选自氢或甲基。
2.根据权利要求1所述的黄酮类化合物，其特征在于，具有式(Ia)所示结构：
3.一种权利要求2所述黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将荔枝草粉碎，加入50～100v％乙醇，浸泡后收集渗漉液，将所述渗漉液浓缩得到荔枝草提取物；
(2)对所述荔枝草提取物进行硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯进行洗脱，收集乙酸乙酯洗脱液，浓缩得第一浸膏；
(3)对所述第一浸膏进行硅胶柱层析分离，使用二氯甲烷与甲醇的混合溶剂进行洗脱，所述二氯甲烷与甲醇的体积比为10:1～20:1，浓缩洗脱液得第二浸膏；
(4)对所述第二浸膏进行MCI柱层析分离，使用甲醇与水的混合溶剂进行洗脱，所述甲醇与水的体积比为13:7～3:1，浓缩洗脱液得粗品；
(5)将所述粗品进行凝胶柱层析分离，即得到所述式(Ia)所示结构的黄酮类化合物。
4.根据权利要求3所述的黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述50～100v％乙醇与所述荔枝草的质量比为5:1～30:1。
5.根据权利要求4所述的黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述浸泡的时间为5～30天。
6.根据权利要求4所述的黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述荔枝草为荔枝草的全草、荔枝草的地上部分、荔枝草的地下部分中的任意一种。
7.根据权利要求3-6任一所述的黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述硅胶柱层析分离是采用质量比为1:1～1:3的硅胶和硅藻土对所述荔枝草提取物进行拌样。
8.根据权利要求7所述的黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述乙酸乙酯的体积与步骤(2)中所述硅胶柱的柱体积之比为3:1～10:1。
9.根据权利要求8所述的黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中对所述荔枝草提取物进行硅胶柱层析分离时，在用乙酸乙酯进行洗脱前，先使用石油醚对硅胶柱进行淋洗。
10.根据权利要求3、4、5、6、8或9所述的黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，步骤(3)中对所述第一浸膏进行硅胶柱层析分离时，在使用二氯甲烷与甲醇的混合溶剂进行洗脱前，先使用二氯甲烷对硅胶柱进行淋洗。
11.根据权利要求10所述的黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述二氯甲烷与甲醇的混合溶剂的体积与步骤(3)中所述硅胶柱的柱体积之比为3:1～10:1。
12.根据权利要求3、4、5、6、8、9或11所述的黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，步骤(4)中对所述第二浸膏进行MCI柱层析分离时，在进行洗脱前先依次使用甲醇与水的体积比为1:4～3:7、2:3～1:1、11:9～3:2的甲醇与水的混合溶剂进行淋洗。
13.根据权利要求12所述的黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，步骤(4)中用于进行洗脱的所述甲醇与水的混合溶剂的体积与所述MCI柱的柱体积之比为3:1～10:1。
14.根据权利要求3、4、5、6、8、9、11或13所述的黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，所述凝胶柱层析的固定相为SephadexLH-20凝胶，流动相为甲醇。
15.权利要求1或2中所述的黄酮类化合物在制备美白和/或抗炎产品中的应用。
16.权利要求1或2中所述黄酮类化合物的衍生物，其特征在于，具有如下结构：
17.权利要求16所述的黄酮类化合物的衍生物在制备美白和/或抗炎产品中的应用。
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