CN104365581B - 一种新型标本保存液 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及生物解剖学领域，尤其涉及一种新型标本保存液。本发明保存液的组分包含山梨酸钾、纳米银、乙醇、丙三醇、柠檬酸，所述的保存液由山梨酸钾1‑5 g，纳米银0.1‑1 g，乙醇100‑300 ml，丙三醇1‑20 ml，柠檬酸10‑20g，调节pH保持5‑6，加水定容至1000 ml组成。该新型标本保存液能有效地保持标本的原有色泽，各组织肌肉、韧带的柔软，维持良好的韧性和弹性。在保存缸的液面和壁上均未发现霉点，由于保存液下降而裸露的组织仍保持一定的湿度，未发现霉变腐化现象；该保存液透明，无刺激性气味，杀菌防霉性能优异；不含有毒有害物质，是一种绿色环保的液体，有利于大规模的应用。
Description
技术领域
本发明涉及生物解剖学领域，尤其涉及一种新型标本保存液。
背景技术
人体解剖学是一门直观性很强的形态科学，其实验教学活动与尸体标本密不可分。解剖学课程，教师主要用标本示教讲解，学生通过观看标本学习，所使用的人体标本为游离的散装标本，主要是用10%福尔马林溶液保存。由于福尔马林沸点低，故在室温时极易挥发，随着温度的上升挥发速度加快，散发出强烈的刺激性气味，严重污染实验室环境，使得学生抗拒对标本的接触，影响实验教学工作的开展。另一方面，福尔马林对人体的健康存在极大的危害，若人体皮肤直接接触福尔马林时，可能会引发过敏反应、皮炎或是湿疹，尤其工作上需长期接触福尔马林的人，经常会有此类现象出现；而且福尔马林挥发性很强，对眼睛有强刺激性，严重的甚至会出现失明现象。所以，配制出一种无刺激性气味，对人体无危害的人体标本保存液，是解剖学领域中一个重要的课题。
为了解决上述存在的问题，各种人体标本保存液应运而生，中国专利CN1047061C公开了一种尸体标本防腐保存液，该保存液组分是由苯甲酸盐、乙醇、硝酸钾和丙三醇配制而成，虽然该保存液具有防腐性能可靠，使用安全无毒，无不良刺激性气味的优点，但是，该保存液对人体标本的组织没有固定作用，容易造成组织形状变形，没有起到保存标本原形的目的，不利于解剖学实验教学的开展。
解剖学杂志发表了一篇食品防腐防霉剂作尸体标本保存液的应用（解剖学杂志，2008年第31卷第6期），该论文的尸体保存液是将山梨酸钾、壳聚糖、Na2EDTA、乙醇和甘油按一定的比例进行复配，制成浓度较高的原液，pH5-7，使用时按照1:5加水增量搅匀使用。该保存液具有保持人体标本原有色泽，肌肉、韧带有趋向柔软，不发生霉点的优点，但是，Na2EDTA在偏酸性的条件下易溶于水，不溶于乙醇，所以，Na2EDTA与乙醇和甘油按比例复配容易造成Na2EDTA的晶体析出，降低该保存的防腐杀菌作用，从而降低了人体标本的保存作用。
发明内容
针对现有标本保存液，尤其是针对人体标本保存液存在的保存效果不理想，标本组织不固定的缺陷。本发明的目的在于提供一种新型标本保存液以解决上述的缺陷。
本发明的新型标本保存液的组分包含山梨酸钾、纳米银、乙醇、丙三醇、柠檬酸，所述的保存液组分的含量是山梨酸钾1-5 g，纳米银0.1-1 g，乙醇100-300 ml，丙三醇1-20ml，柠檬酸10-20 g，调节保存液pH为5-6，加水定容至1000 ml。保存液的组分含量优选为山梨酸钾1-3 g，纳米银0.3-0.7 g，乙醇150-250 ml，丙三醇5-15 ml，柠檬酸15-20 g，调节保存液pH为5-6，加水定容至1000 ml。该新型标本保存液对生物标本具有很好的保存效果，尤其是对人体标本的保存效果最好。
山梨酸钾是无色鳞片状结晶性粉末，无臭无味，易溶于水、乙醇。山梨酸钾具有高效的防腐性和抑菌作用，而且热稳定性较好，分解温度高达270℃，毒性低的优点，是国际粮农组织和世界卫生组织向各国重点推荐的低毒、高效保鲜防腐剂；它对酶菌、酵母菌、好氧性微生物有明显抑制作用，抑菌最适pH值在5.0～6.0，其抑菌效果比苯甲酸高5～10倍，毒性仅为苯甲酸的五分之一；且对食品风味无不良影响，广泛应用于肉、鱼、蛋、禽类制品、葡萄酒、果酒、乳制品等的防腐保鲜。对人体标本的保存起到防腐，杀菌，保持原始生物标本组织的色泽和湿润度，防止霉变的作用。
纳米银（nano-silver，NS）是将粒径加工到纳米级的金属银单质。其粒径一般为2~15 nm，是近年来被广泛研究和应用的新型、广谱、安全、抗菌活性强的纳米无机抗菌材料，因理化性质独特和比表面积极大，其抗菌效果是其他抗菌剂无法比拟的。目前NS作为新型的抗菌剂在医疗、建材等领域已得到较为广泛的应用。纳米银表面与蛋白质分子通过氮原子紧密结合，能够对人体标本组织蛋白质进行适度的交联，进而起到固定的作用，保持人体标本的原始形态和原始组织的柔软度和韧性。
柠檬酸是无毒无味的有机酸，具有很强的杀菌和抗氧化作用，能有效杀灭血液透析机管路中污染的细菌芽孢，对生物标本的保存具有高效的抑菌和保持生物标本原色泽的作用，利于对生物标本保存液的制备。
乙醇具有较强的脱水作用，能脱除细胞表面部的水分，使蛋白分子结构松解，并使蛋白质变性凝固而起防腐作用。
丙三醇是无色无臭的液体，能与水和乙醇任意混合，其所形成的溶液较稳定，因此是价值很高的溶媒和保存液成分；丙三醇的吸湿性高，起到防干燥的作用，使人体组织柔软而透明，在复合防腐保存液中，丙三醇是一种良好的选择。利用丙三醇的防腐性、吸湿性和对某些无机盐类药物的特殊溶解力的优点，配置成的保存液稳定，人体标本不易干燥，组织柔软，更重要的是丙三醇能吸附与其混合的药物如乙醇，滞留在标本内部和表面使防腐剂不易挥发和散失，增强防腐效果，提高防腐能力和杀菌能力。
与现有技术相比，本发明的优点在于：
1）本发明的新型标本保存液是无色透明的液体，无刺激性气味，杀菌防霉性能优异，利于解剖学实验课程的授课；
2）本发明的新型标本保存液能有效地保持原生物标本的组织形态和色泽，无挥发性物质，效果持久，可有效地降低成本；
3）本发明的新型标本保存液不含有毒有害物质，绿色环保，减轻环境的负担。
具体实施方式
下面采用具体实施例进一步说明本发明的内容。
以下内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。
实施例1、本发明的新型标本保存液：
将1g山梨酸钾，1g纳米银、10g柠檬酸、100ml乙醇，20ml丙三醇混合，调节保存液pH值保持为5-6，加水定容1000ml，即得新型标本保存液。
实施例2、本发明的新型标本保存液：
将3g山梨酸钾，0.3g纳米银、15g柠檬酸、200ml乙醇，15ml丙三醇混合，调节保存液pH值保持为5-6，加水定容1000ml，即得新型标本保存液。
实施例3、本发明的新型标本保存液：
将5g山梨酸钾，0.1g纳米银、20g柠檬酸、300ml乙醇，20ml丙三醇混合，调节保存液pH值保持为5-6，加水定容1000ml，即得新型标本保存液。
实验例一、本发明的新型标本保存液的杀菌实验：
将金葡萄球菌（ATCC 25923）、大肠杆菌（ATCC 25923）、铜绿假单胞菌（ATCC27853）、和白色念球菌（ATCC 64550）24h斜面培养物接种于生理盐水中，校正浓度至0.5 麦氏比法浓度。实验在20℃的水浴中进行，取4支无菌试管，分别加入0.5ml菌液，标志为对照组，实施例1组，实施例2组，实施例3组，同时，向对照组无菌试管加入1.5ml无菌水，实施例1组无菌试管加入1.5ml实施例1制得的保存液，实施例2组无菌试管加入1.5ml实施例2制得的保存液，实施例3组无菌试管加入1.5ml实施例3制得的保存液，混匀。待作用至预定时间后，分别取10ul菌药混合液加入平板上，划平板，做好标志，然后在37度温箱孵育24～48h，观察1h后菌落情况。
表1 本发明实施例1-3新型标本保存液对四种细菌的抑制效果：
| 菌种 | 对照组 | 实施例1组 | 实施例2组 | 实施例3组 |
| 金葡萄球菌 | + | － | － | － |
| 大肠杆菌 | + | － | － | － |
| 铜绿假单胞菌 | + | － | － | － |
| 白色念球菌 | + | － | － | － |
阳性：+ 阴性：－
由上述表1的实验数据可以得出，本发明制得新型标本保存液对常见的细菌具有很强的抑制作用，在1h后使用实施例1-3制得的新型标本保存液，没有菌种出现，说明本发明的新型标本保存液抑制细菌的作用明显，而且没有刺激性的气味，无毒害，利于该新型标本保存液大规模的应用。
实验例二、本发明的新型标本保存液的人体标本保存实验：
将本发明实施例1-3制备的保存液和10%福尔马林保存液分别置入肱二头肌、脾脏、肾脏、结肠、脑标本保存一年时间后，分别从肉眼和嗅觉感观上对发明实施例1-3制备的新型标本保存液、10%福尔马林保存液和无菌的标本色泽、组织柔韧度、保存缸壁上的霉点情况、裸露出保存液的组织的湿度情况、气味和保存液液面下降情况，结果如下：
表2 本发明实施例1-3制得的新型标本保存液和10%福尔马林保存液的标本保存效果结果：
由表2的数据可得出，使用本发明的实施例1-3制得的新型标本保存液的标本保持了原有色泽，各组织的肌肉、韧带柔软，韧性和弹性较好，在保存缸的液面和壁上均未发现霉点，由于保存液下降造成的部分裸露的组织仍保持一定的湿度，也未发现霉变腐化现象，而使用10%福尔马林的保存液的标本，色泽趋向深褐色，且弹性和韧性均有一定的下降，硬化明显，液面下降明显，在保存缸的液面和壁上有明显霉点，裸露的组织出现霉变现象，所以，本发明制备的新型标本保存液对标本保存性好，无刺激性气味，利于解剖学标本的展示，利于解剖学实验课的开展。
Claims (3)
1.一种新型标本保存液，其特征在于，所述的保存液由
山梨酸钾1-5 g，
纳米银0.1-1 g，
乙醇100-300 ml，
丙三醇1-20 ml，
柠檬酸 10-20 g，
加水定容至1000 ml组成。
2.如权利要求1所述的新型标本保存液，其特征在于，所述的保存液由
山梨酸钾1-3 g，
纳米银0.3-0.7 g，
乙醇150-250 ml，
丙三醇5-15 ml，
柠檬酸 15-20 g，
加水定容至1000 ml组成。
3.如权利要求1或2所述的新型标本保存液，其特征在于，所述的新型保存液的pH 值保持在5-6。
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