CN104350064A - 修饰的吻素肽和其用途 - Google Patents

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Abstract

本申请提供5至7个天然或非天然氨基酸的合成修饰肽以及包括它们的药物组合物，其用于治疗表现与感觉门控功能损伤相关的行为异常的疾病或紊乱、抑郁症或认知缺损，特别是精神分裂症和阿尔茨海默病。

Description

修饰的吻素肽和其用途
技术领域
本发明涉及合成肽和其药物学可接受盐和包括它们的药物组合物；和其用于治疗表现行为异常的疾病或紊乱例如阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease)，或特别地与感觉门控功能(sensory gating function)损伤相关的疾病或紊乱例如精神分裂症(schizophrenia)；和/或用于治疗抑郁症(depression)；和/或用于改善认知功能的用途。
背景技术
精神分裂症是影响大约1％人口的严重精神障碍(mental disorder)。精神分裂症的病因是复杂的并且涉及遗传和环境因素。精神分裂症经常根据积极、消极和认知症状来描述。积极症状例如妄想和幻觉，大多数人通常不会经历。消极症状是正常情绪反应或思维过程的缺陷，和认知症状是认知功能障碍。消极和认知症状与积极症状相比对药物的反应欠佳，并且与积极症状相比对生活质量、功能残疾(functional disability)和其他人的负担更加不利。
抗精神病药物仍然是护理包括精神分裂症和双相躁狂(bipolar mania)的精神紊乱的现行标准。第一代抗精神病药物(典型的)例如氟哌啶醇(haloperidol)抑制了多巴胺D2受体并且在治疗精神分裂症的积极症状中有效性一般，但可能会导致锥体束外的运动障碍。第二代(非典型的)抗精神病药物抑制D2受体以及其它受体(尤其5-羟色胺2A(5-HT2A)受体)。已经证明非典型的抗精神病药物导致运动障碍的可能性较小，但与体重增加、催乳激素和葡萄糖的升高以及镇静相关。近期数据表明靶向代谢型谷氨酸受体(mGluRs)的药剂可以代表具有前景的新型抗精神病药物，并且这样的药剂现在正在由几家公司开发。然而，由US国立卫生研究院赞助的已知为CATIE的大型试验发现74％的病人由于耐受性差或功效不彻底在治疗的18个月内停止使用，表明需要新疗法。
Kiss1基因的产物吻素(Kisspeptin)(旧称转移抑素(Metastins))结合至已知为GPR54的G蛋白偶联受体。Kiss1原本鉴定为人转移抑制基因(humanmetastasis suppressor gene)。吻素-GPR54信号转导级联几年前被认为在性激素调节方面具有基础作用，并且被认为是青春期的看门人。此外，近期研究表明在心血管系统、血管形成和在能量平衡方面吻素起到额外的生理功能。在海马(hippocampus)中，吻素提高齿状回(dentate gyrus)的颗粒细胞的兴奋性和生长因子脑源性神经营养因子的分泌(BDNF，Arai和Orwig，2008)。BDNF在神经系统的发育并在例如记忆、学习和药物成瘾的脑可塑性相关过程中具有重要作用。各种研究已经显示在BDNF与病况例如抑郁症、精神分裂症、强迫性精神失调(obsessive-compulsive disorder)、阿尔茨海默病、亨廷顿舞蹈症(Huntington’s chorea)、雷特综合征(Rett syndrome)和痴呆(dementia)以及神经性厌食和神经性贪食之间的可能关系。
相同申请人的WO 2010/137022公开青春期期间(8周)在首次接受试验的小鼠(mice)的海马中，Kiss1的mRNA表达升高。此外，与下丘脑中的表达不同，海马中Kiss1表达的调控是免疫依赖的。因此，在这些小鼠中求出免疫缺陷的存在(SCID小鼠)、青春期时海马中吻素的异常表达以及信息处理受损之间的函数关系(通过前脉冲抑制(PPI)测量)(Cardon等，2010)。PPI是其中低强度前脉冲刺激减弱对随后的惊吓诱发的噪音的反应的现象。PPI中的偏差通常与精神分裂症的病理生理学相关(Braff和Geyer，1990)，但是异常PPI也在其它心理障碍中被发现(Castellanos等，1996；Ornitz等，1992；Perry等，2007；Swerdlow等，1993；Swerdlow等，1995)。
WO 2010/137022也公开了将吻素来源的肽Kp-10(YNWNSFGLRF-NH2)施用至PPI响应受损的SCID小鼠，并且施用至几个精神分裂症小鼠模型，改善了PPI响应水平。另外公开了通过悬尾试验(tail suspension test)表明Kp-10具有潜在的抗抑郁活性，并且在几个小鼠模型中Kp-10改善在水迷宫(watermaze)中的空间学习和记忆，这表明其有助于多方面的认知功能例如学习和记忆等。
发明内容
根据本发明，合成新型修饰的Kp-10来源的肽并且发现其改善在首次接受试验的小鼠中和在精神分裂症和阿尔茨海默病小鼠模型中的PPI响应。
本发明因此提供一种合成肽，环状或线性肽，合成肽选自：
(i)环状或线性肽，其序列为：
R1-Xaa1-Gly-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-NHR2(SEQ ID NOs：2和1)
其中：
Xaa1选自Phe、Ile、Leu、Val、Nle和它们的类似物；
Xaa2选自Leu、Ile、Val、Nle、Phe和它们的类似物；
Xaa3选自Arg的类似物、Arg、Lys、高Arg(homo-Arg)、高Lys和Orn；
Xaa4选自Trp和其类似物；
Xaa5选自Tyr、His、邻甲基-Tyr和2-羟基-3-甲基-Phe；
R1选自对氨基苯丙氨酸(Pap)、NH2C6H4(CH2)1-3CO、Fmoc-Pap、FMS-Pap和C5-C20酰基-Pap，其中所述C5-C20酰基来源于连接至Pap的α-氨基的饱和或不饱和的C5-C20脂肪酸；和
R2是H或(CH2)0-4CH3，和
(ii)线性肽，其序列为：
R1-Xaa1-Gly-Xaa2-Xaa3-Xaa4-NHR2(SEQ ID NO：3)
其中：
Xaa1至Xaa4如以上定义；
R1是9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)或2-硫代-Fmoc(FMS)；和
R2如以上定义。
本发明进一步提供环状合成肽，其具有下述序列：
(SEQ ID NO：6)。
本发明进一步提供线性合成肽，其具有下述序列：
Fmoc-Phe-Gly-Leu-Arg-Trp-NH2(SEQ ID NO：8)。
本发明还提供药物组合物，其包括本发明的合成肽或其药物学可接受盐，和药物学可接受载体。
还提供本发明的合成肽用于治疗表现与感觉门控功能损伤相关的行为异常的疾病或紊乱。所述疾病或紊乱可以是精神分裂症。
另外提供本发明的合成肽用于治疗抑郁症或治疗认知缺损(cognitiveimpairment)。
还提供本发明的合成肽用于治疗阿尔茨海默病(AD)。
本发明还提供了一种治疗表现与感觉门控功能损伤相关的行为异常的疾病或紊乱、抑郁症或认知缺损的方法，其包括向有需要的病人施用有效量的本发明的肽或其药物学可接受盐。
附图说明
图1A-1E示出合成肽对前脉冲抑制(PPI)的作用。将雄性C57Bl/6J首次接受试验的小鼠用合成肽(浅色柱)或用1％的PBS中的DMSO(对照，黑色柱)注射；前脉冲强度是69、73、78或81分贝(dB)。(A)15μg的环状肽2(SEQ ID NO：10)，n＝12，对照n＝8，重复测量ANOVA，F(自由度)(1,18)＝4.2，P＝0.06。(B)8.3μg的环状肽5(SEQ ID NO:12)，n＝8，对照n＝6；重复测量ANOVA，F(1,12)＝0.1，P＝0.7。(C)8.75μg的环状肽6(SEQ ID NO：6)，n＝8，比较n＝10；重复测量ANOVA，F(1,19)＝4.7，P＝0.047，*表示P<0.05，费舍尔LSD事后比较(Fisher LSD post hoc)分析。(D)15.3μg的肽7(SEQ ID NO：13)，n＝12，对照n＝9，重复测量ANOVA，F(1,18)＝1.15，P＝0.3。(E)8.75μg的肽8(SEQID NO：8)，n＝17，对照n＝16，重复测量ANOVA，F(1,31)＝5.3，P＝0.028，*表示P<0.05，费舍尔LSD事后比较分析)。
图2示出在用MK-801处理的小鼠中Kp-10(SEQ ID NO：14)和修饰的Kp-10来源的肽6和8对PPI的作用。将C57BL/6J小鼠用在DMSO中溶解并且PBS中稀释至最终浓度为0.2％(w/v)的DMSO的肽注射，将MK-801在15分钟后注射，并且15分钟后在69、73、78和81分贝下进行PPI的测量。将小鼠用下述处理(对于各强度从左至右)：0.2％的PBS中的DMSO(对照，黑色柱，n＝25)、仅MK-801(0.1mg/kg，白色柱，n＝12)、MK-801和Kp-10(13μg/小鼠，浅灰色柱，n＝28)、MK-801和肽6(SEQ ID NO：6，8.75μg/小鼠，中等灰色柱，n＝16)、或MK-801和肽8(SEQ ID NO：8,8.75μg/小鼠，暗灰色柱，n＝14)；重复测量ANOVA，F(4,90)＝8.6，P<0.0001；*表示P<0.05，与对照比较的费舍尔LSD事后比较分析；#表示P<0.05，与MK-801比较的费舍尔LSD事后比较分析。
图3示出与氯氮平(Clozapine)比较的肽6(SEQ ID NO：6)的抗抑郁作用。将小鼠用下述处理(从左至右)：0.003N的HCl和0.2％的DMSO(对照，黑色柱，n＝8)、肽6(8.75μg，浅灰色柱，n＝7)、或氯氮平(0.3mg/kg，暗灰色柱，n＝6)，并且进行悬尾试验。肽6增加直至发生首次静止(首次静止，ANOVA，F(2,18)＝10.8，P＝0.0008)的延迟时间并且降低静止的总持续时间(总静止，ANOVA，F(2,18)＝3.95，P＝0.039)。*表示P<0.05，与对照比较的费舍尔LSD事后比较分析；#表示P<0.05，与氯氮平处理比较的费舍尔LSD事后比较分析。
图4示出肽6处理的治疗作用和没有副作用。(A)肽6以剂量依赖方式减少悬尾试验中的总静止时间。从左至右：对照(0.2％的DMSO)，0.0029、0.029、0.29、2.9mg/kg的肽6(分别地n＝12/10/9/9/9，单因素ANOVA，F(4,44)＝11.3，P<0.0001)。(B)在用MK-801和利培酮(Risperidone)、奥氮平(Olanzapine)或肽6处理的小鼠中的PPI。从左至右：对照(0.003N的HCl和0.2％的DMSO，白色柱)，只用MK-801处理(浅灰色柱)和用MK-801和利培酮的组合处理(0.1mg/kg的MK-801+Ris，中等灰色柱)，奥氮平(0.375mg/kg的MK-801+Ola，暗灰色柱)或肽6(0.29mg/kg的MK-801+Pep6，黑色柱)(分别地n＝11/10/10/12/15，重复测量ANOVA，F(4,53)＝2.7，P＝0.03)。(C)在69、73、78和81分贝下肽6的重复注射对PPI的作用。将小鼠用0.29mg/kg的肽6在三天中每天一次腹膜内注射，并且在第三次注射后30分钟时在规定的强度下测量PPI。白色柱：对照(0.2％的DMSO)，黑色柱：肽6(n＝18/16。重复测量ANOVA，F(1,32)＝4.4，P＝0.04)。*P<0.05，费舍尔LSD事后比较分析。(D)用氟哌啶醇、奥氮平和肽6处理对强直性昏厥(catalepsy)的持续时间的作用。从左至右：对照(0.003N的HCl和0.2％的DMSO，白色柱)，用氟哌啶醇(HAL-1mg/kg，浅灰色柱)，用奥氮平(OLA0.375mg/kg和OLA1.125mg/kg，暗灰色柱)和用肽6(Pep60.29mg/kg和Pep62.9mg/kg，黑色柱)的处理，(分别地n＝7/6/7/7/7/6，*-单因素ANOVA，F(5,34)＝6.2，P＝0.0003)。(E)氟哌啶醇、奥氮平和肽6对镇静的作用。从左至右：对照(0.003N的HCl和0.2％的DMSO)，和用氟哌啶醇(HAL-1mg/kg)、奥氮平(OLA 0.375mg/kg，OLA 1.125mg/kg)和肽6(Pep60.29mg/kg，Pep62.9mg/kg)处理。(分别地n＝8/7/8/7/8/7，单因素ANOVA，F(5,39)＝4.3，P<0.0001)。(F)氟哌啶醇、奥氮平和肽6对旷场(open field)中自发性活动的作用。距离–在该场地内移动的以米计的总距离。从左至右：对照(0.003N的HCl和0.2％的DMSO，白色柱)，氟哌啶醇(HAL-1mg/kg，浅灰色柱)，奥氮平(OLA 0.375mg/kg，OLA 1.125mg/kg，暗灰色柱)和肽6(Pep60.29mg/kg和Pep62.9mg/kg，黑色柱)。(分别地n＝6/6/7/7/6/7，单因素ANOVA，F(5,32)＝17.8，P<0.0001)。(G)氟哌啶醇、奥氮平和肽6对随各小鼠从转棒(rotrod)落下需要的以秒计的时间测量的强迫性活动的作用。从左至右：对照(0.003N的HCl和0.2％的DMSO，白色柱)、氟哌啶醇(HAL-1mg/kg，灰色柱)、奥氮平(OLA 0.375mg/kg，OLA 1.125mg/kg，浅灰色柱)和肽6(Pep60.29mg/kg和Pep62.9mg/kg，黑色柱)。(分别地n＝7/6/7/7/7/6，单因素ANOVA，F(5,34)＝6.3，P＝0.0003)。*表示P<0.05，与对照比较的费舍尔LSD事后比较分析；#表示P<0.05，与MK-801比较的费舍尔LSD事后比较分析。
图5.口腔施用的肽6降低悬尾试验中的总静止。将在具有1％的DMSO的100μl的水中的2.9mg/kg的肽6通过口腔喂食(oral gavage)施用至首次接受试验的野生型小鼠，并且30分钟后通过悬尾试验(TST)来测试该小鼠。黑色柱：对照；白色柱：肽6(对于对照和试验，n＝10/12；*表示通过t检验的P<0.02)。
图6.肽6对在摩里斯(Morris)水迷宫中的阿尔茨海默病小鼠模型5XFAD的小鼠的表现的作用。Y轴是使小鼠在各天的实验中达到平台的以秒计的时间。各天中的数据是该天中全部试验的平均值(分别地n＝8/8，重复测量ANOVA，F(1,13)＝4.6，P<0.05)。黑方块–对照(0.1％的DMSO)，灰三角形–用肽6处理的小鼠。获得和反转阶段(Acquisition and Reversal phase)在实验部分描述。各点的柱表示标准误差。
具体实施方式
本发明涉及作为修饰的吻素肽Kp-10衍生物的合成线性和环状肽，和其药物学可接受盐。
为了开发具有潜在改善的药学性能的吻素类似物，发明人设计并且制备了Kp-10(转移抑素氨基酸45–54)的几种衍生物和Kp-5(转移抑素氨基酸50–54)的几种衍生物，以下详细描述。Kp-5序列(吻素羧基端的最后5个氨基酸)形成与GPR54的结合序列，而吻素的氨基端对于受体结合不需要，但可能对于稳定化和保护蛋白质水解消化是需要的。
在特定的实施方案中，本发明的合成肽为由序列R1-Xaa1-Gly-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-NHR2表示的酰胺化线性肽。Xaa1和Xaa2是选自苯丙氨酸(Phe)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、缬氨酸(Val)、正亮氨酸(norleucine,Nle)和它们的类似物的疏水性氨基酸；Xaa3是选自精氨酸(Arg)的类似物、Arg、赖氨酸(Lys)、高精氨酸(高Arg)、高赖氨酸(高Lys)和鸟氨酸(Orn)的碱性氨基酸；Xaa4是选自色氨酸(Trp)和其类似物的芳香族氨基酸；Xaa5是选自酪氨酸(Tyr)、组氨酸(His)、邻甲基酪氨酸和2-羟基-3-甲基-苯丙氨酸的芳香族氨基酸；R1选自对氨基苯丙氨酸(Pap)、式NH2C6H4(CH2)1-3CO的Pap类似物和通过其α-氨基附加至选自Fmoc、FMS和C5-C20酰基的基团的Pap，其中所述C5-C20酰基来源于饱和或不饱和的C5-C20脂肪酸；并且R2是氢原子或具有1至5个碳原子的烷基(SEQ ID NO：1)。
在特定的实施方案中，SEQ ID NO：1的线性肽通过在Pap或Pap类似物和酪氨酸或组氨酸残基之间形成的偶氮键而环化从而获得相应的环状肽(SEQ ID NO：2)。通常，所述环化方法涉及：通过使用在酸性介质中的初步偶氮化步骤，随后在温和碱性介质中的分子内偶氮环化，形成将Pap残基的侧链连接至存在于线性前体的酪氨酸或组氨酸残基的侧链的偶氮键。
在特定的实施方案中，本发明的合成肽酰胺化为由序列R1-Xaa1-Gly-Xaa2-Xaa3-Xaa4-NHR2表示的线性肽。Xaa1和Xaa2是选自苯丙氨酸(Phe)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、缬氨酸(Val)、正亮氨酸(Nle)和它们的类似物的疏水性氨基酸；Xaa3是选自精氨酸(Arg)的类似物、Arg、赖氨酸(Lys)、高精氨酸(高Arg)、高赖氨酸(高Lys)和鸟氨酸(Orn)的碱性氨基酸；Xaa4是选自色氨酸(Trp)和其类似物的芳香族氨基酸；R1是9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)或2-硫代-Fmoc(FMS)；并且R2是氢原子或具有1至5个碳的烷基(SEQ ID NO：3)。
根据特定的实施方案，合成肽为由序列R1-Xaa1-Gly-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-NHR2表示的酰胺化的线性肽，该肽是环状的，其中R1是Pap，Xaa1是Phe，Xaa2是Leu，Xaa3是Arg，Xaa4是Trp，Xaa5是Tyr或His，并且R2是H或具有1至5个碳的烷基(SEQ ID NO：4)。
在特定的实施方案中，本发明的合成肽为由序列R1-Xaa1-Gly-Xaa2-Xaa3-Xaa4-NHR2表示的酰胺化的线性肽，其中R1是Fmoc或FMS，Xaa1是Phe，Xaa2是Leu，Xaa3是Arg，Xaa4是Trp，并且R2是H或具有1至5个碳的烷基(SEQID NO：5)。
根据特定的实施方案，本发明的合成肽是序列的环状肽(肽6，SEQ ID NO：6)。
根据特定的实施方案，本发明的合成肽是序列Fmoc-Phe-Gly-Leu-Arg-Trp-NH2的线性肽(肽8，SEQ ID NO：8)。
在特定的实施方案中，C5-C20酰基来源的饱和脂肪酸可以是辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、软脂酸、硬脂酸和二十烷酸；并且不饱和脂肪酸可以是油酸、反油酸、亚油酸、花生四烯酸和二十碳五烯酸。
根据特定的实施方案，Arg的类似物选自L-2-氨基-3-胍基丙酸和N-ω,ω-二甲基-L-精氨酸；Trp的类似物选自β-(3-苯并噻吩基)-L-Ala、6-甲基色氨酸、5-甲氧基色氨酸、5-羟基色氨酸、5-氟色氨酸、7-氮杂色氨酸、5-溴色氨酸和5-甲基色氨酸；Phe的类似物选自2-氟苯丙氨酸、4-氟苯丙氨酸、4-溴苯丙氨酸、2-氯苯丙氨酸、L-高苯丙氨酸、4-硝基苯丙氨酸和α-甲基苯丙氨酸；并且Leu或Val的类似物选自叔丁基L-丙氨酸、L-环己基甘氨酸和L-环戊基甘氨酸。
为了合成本发明的线性肽，可以使用本领域已知的任何方法，例如F-moc固相肽合成技术。
本发明的合成肽可以是它们的游离形式或其盐或化学衍生物形式例如酯。如此处使用的，术语“盐”同时是指肽分子的羧基盐和氨基的酸加成盐。羧基盐可以通过本领域已知的手段形成，并且包括具有无机盐的盐例如钠、钙、铵、铁或锌盐等；和与有机碱的盐，所述有机碱例如用例如胺类(如三羟乙基胺、精氨酸或赖氨酸)、哌啶和普鲁卡因等形成的那些。酸加成盐包括例如与无机酸例如举例盐酸或硫酸的盐；和与有机酸例如举例乙酸或草酸的盐。酯可以通过将用于肽化学的适当的醇类与天冬氨酸或谷氨基酸残基的末端羧基或游离非末端羧基反应而形成。
如此处使用的，短语“药物学可接受的”是指无毒性的、惰性的和/或与人类或其它哺乳类动物生理相容的组成。
根据本发明，除了SEQ ID NO：6和8的肽6和8以外，分别制备几种修饰的Kp-10来源的肽。额外的肽具有如下所述的序列，并且未发现其在用于评价首次接受试验的小鼠早期信息处理的模型(paradigm)中具有显著的作用，并因此只用于比较应用：
·肽2，SEQ ID NO：10
·肽5，SEQ ID NO：12
·Fmoc-Tyr-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-Gly-Leu-Arg-Phe-NH2，肽7，SEQ ID NO：13
感觉门控是大脑调节其对刺激的反应的大型的自动化过程。例如当出现一个刺激时，则存在有反应；然而，当第一刺激接着是稍后的第二刺激时，对第二刺激的反应是迟钝的。这是防止过度刺激的适应机制，其帮助大脑集中于在大量的其它干扰项中的刺激，并且有助于通过消除背景将注意力有选择地分配至重大事件的能力。个体的门控过程的具体特征被认为是可塑的，并且由遗传和发育过程，但也由环境变化、CNS的神经化学和激素状态控制。已显示感觉门控受到包括精神分裂症和阿尔茨海默病的多种紊乱干扰。
前脉冲抑制(PPI)(低强度的前脉冲刺激减弱了对随后的惊吓诱发刺激的反应的现象)用作感觉门控功能的量度(Swerdlow和Geyer，1998)。
根据本发明，已发现将用诱导模仿精神分裂症的效果的精神病症状的MK-801处理的小鼠用本发明的肽6(SEQ ID NO：6)或肽8(SEQ ID NO：8)，或用预先已经发现其改善精神分裂症小鼠模型中的PPI的Kp-10(SEQ IDNO：14)注射，与只用MK-801处理的动物相比明显地改善了PPI。另外，用肽6的处理将PPI恢复至正常水平，具有比Kp-10或肽8更大的效果(图2)。
根据本发明，此外已发现在MK-801精神分裂症小鼠模型中肽6对PPI的作用比已知的抗精神病药物-利培酮和奥氮平更大(图4B)。此外，肽6不具有例如氟哌啶醇和奥氮平等抗精神病药物的典型的副作用(图4D-4G)。
本发明因此提供如以上定义的本发明的合成肽或其药物学可接受盐，来用作药剂。
本发明进一步提供包含如以上定义的本发明的肽或其药物学可接受盐以及药物学可接受载体的药物组合物。
PPI的不足不是单一形式的精神病理所特有的。除了精神分裂症以外，PPI的损伤(impairment)已经报道于几种疾病中，例如孤独症(autisticdisorder)、亨廷顿舞蹈症、强迫性精神失调、注意力不集中的过度反应症(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)、图雷特综合征(Tourette’ssyndrome)和阿尔茨海默病的某些病例(Castellanos等，1996；Ornitz等，1992；Perry等，2007；Swerdlow等，1993；Swerdlow等，1995；Ueki等，2006)。因此，PPI经常用作模型来用于评价早期信息处理的调整并且广泛的用于研究动物中抗精神病药物的作用。
因此，根据特定的实施方案，本发明的合成肽对于治疗表现与感觉门控功能损伤相关的行为异常的疾病或紊乱是有用的。根据特定的实施方案，此类疾病是精神分裂症、孤独症、亨廷顿舞蹈症、强迫性精神失调、注意力不集中的过度反应症(ADHD)或图雷特综合征。根据特定的实施方案，该疾病是精神分裂症。在特定的实施方案中，合成肽具有SEQ ID NO：6所示的序列。在特定的实施方案中，合成肽具有SEQ ID NO：8所示的序列。
此处使用短语“表现与感觉门控功能损伤相关的行为异常的疾病或紊乱”指已发现与上述受损的感觉门控例如举例受损的PPI的任何相关的任何疾病或紊乱。
根据本发明，已进一步发肽6改善在阿尔茨海默病的小鼠模型中的摩里斯水迷宫中的空间学习和记忆(图6)。
根据特定的实施方案，本发明的合成肽可用于治疗阿尔茨海默病。根据特定的实施方案，该合成肽是肽6。
根据本发明，已进一步示出在首次接受试验的动物中的悬尾试验中肽6具有抗抑郁作用(图3和4A)，并且该作用与已知的抗精神病药物氯氮平相比更高。此外已经发现肽6具有增加首次接受试验的动物中的PPI的作用(图1C和4C)。
因此，根据特定的实施方案，本发明的合成肽可以用于治疗抑郁症和/或认知缺损。根据特定的实施方案，该合成肽是肽6。
抑郁症以及认知缺损在精神分裂症和阿尔茨海默病的已知症状之中。
因此，根据特定的实施方案，本发明的合成肽可以用于治疗与精神分裂症或阿尔茨海默病相关的抑郁症和/或认知缺损。
在特定的实施方案中，本发明的合成肽可以用于治疗与除了精神分裂症或阿尔茨海默病以外的疾病相关的抑郁症和/或认知缺损。
在特定的实施方案中，该肽是具有SEQ ID NO：6所示序列的肽6。
根据特定的实施方案，本发明的药物组合物可以包含单一的本发明的合成肽或多于一种的本发明的合成肽。
本发明的药物组合物可以通过传统技术制备，例如，如在Remington中：The Science and Practice of Pharmacy，第19版，1995所述。该组合物可以是固体、半固体或液体形式，或可以设计其来减缓肽的释放。根据特定的实施方案，本发明的组合物可以进一步与赋形剂例如稳定剂、芳香剂、防腐剂、粘结剂、抗氧化剂等混合。
如此处使用的，“药物学可接受载体”是用于将瞬时化合物递送至病人的药物可接受的溶剂、悬浮剂或媒介物。该载体可以是液体或固体并且根据考虑的计划给药方式来选择。脂质体也可以是药物载体。
本发明进一步提供治疗表现与感觉门控功能损伤相关的行为异常的疾病或紊乱、抑郁症或认知缺损的方法，其包括向有需要的病人施用有效量的本发明的合成肽或其药物学可接受盐。
根据特定的实施方案，该疾病是精神分裂症。根据特定的实施方案，该疾病是阿尔茨海默病。根据特定的实施方案，该合成肽是肽6。
如此处使用的，短语“有效量”或“治疗有效量”是指当以本发明的方式使用时足以获得与合理的好处/风险比相应的期望的治疗反应而没有过度不利的副作用(例如毒性、刺激性或过敏反应)的组分的量。
如此处使用的，术语“治疗”包括减轻、缓解、减弱和/或甚至消除与所述疾病或紊乱相关的症状。在精神分裂症的情况下，本发明关注的是使用本发明的合成肽的治疗将减轻/缓解与疾病相关的精神病和/或抑郁症的症状，和/或将改善精神分裂症病人受损的认知功能。
根据特定的实施方案，精神分裂症的治疗包括本发明的肽或其药物学可接受盐单独或以与一种以上的适用于精神分裂症的治疗的药物例如氯氮平、氨磺必利、奥氮平、利培酮、喹硫平(quetiapine)、齐拉西酮(ziprasidone)、阿立哌唑(aripiprazole)或帕潘立酮(paliperidone)的组合施用。
根据特定的实施方案，阿尔茨海默病的治疗包括本发明的肽或其药物学可接受盐单独或以与一种以上的适用于阿尔茨海默病的治疗的药物例如乙酰胆碱酯酶抑制剂(例如，他克林(tacrine)、卡巴拉汀(rivastigmine)、加兰他敏(galantamine)和多奈哌齐(donepezil))或NMDA受体拮抗剂例如美金刚(memantine)，或例如氯丙嗪、氟哌啶醇、奋乃静(Perphenazine)、氟非那嗪(Fluphenazine)等第一代抗精神病药物组合施用。
任何适当的组合物和施用途径涵盖于本发明，其包括口腔(例如，片剂、胶囊剂和微囊剂等的形式)、肠胃外(例如，皮下注射、肌肉注射、关节腔内注射或静脉注射的形式)、吸入、鼻内(喷雾剂的形式)、鞘内(intrathecal)、腹膜内、真皮内、经皮或适用于将肽施用至人类的其它已知的施用途径。
根据特定的实施方案，本发明的肽通过口服来施用。
要施用的肽的剂量将通过有资质的医师来确定并且将依赖于使用的药剂、疾病的严重程度、病人的年龄和体重，并且对口腔应用可以在0.1-100mg，优选1.0-50mg，更优选1.0-20mg变化；对于肠胃外应用可以在0.01-30mg，优选1.0-30mg，更优选1.0-20mg变化；或对于静脉内(IV)应用可以在0.01–10mg，优选0.05-5mg，更优选0.05-0.2mg变化。
现在将通过以下非限制性实施例来说明本发明。
实施例
材料和方法
除非另有说明，将肽6(cKp-7，Pap-Phe-Gly-Leu-Arg-Trp-Tyr-NH2，Pap＝对氨基苯丙氨酸；Pap和Tyr以内部偶氮桥连接，从而获得环状肽(GL Biochem(Shanghai)Ltd.))溶解在DMSO中，并且以PBS稀释至最终浓度为0.1％的DMSO，并且将100μl在行为分析前30分钟以规定的剂量腹膜内注射。
将利培酮(Sigma，Israel)溶解在0.06N的HCL中，并且在PPI分析前30分钟以最终浓度为0.003N的HCL、0.1％DMSO的0.1mg/kg的剂量腹膜内施用。
将奥氮平(Sigma，Israel)溶解在0.06N的HCL中，并且在行为分析前30分钟以最终浓度为0.003N的HCL、0.1％DMSO的0.375或1.125mg/kg的剂量腹膜内施用。
将氟哌啶醇(Sigma，Israel)溶解在0.06N的HCL中，并且在行为分析前30分钟以最终浓度为0.003N的HCL、0.1％DMSO下的1mg/kg的剂量腹膜内给药。
动物。同系交配的12-16周大的C57Bl/6小鼠由Weizmann科学研究所的动物繁殖中心提供。因为发情周期影响PPI，除非另有说明，否则雄性小鼠用于全部实验。全部动物根据Weizmann研究所动物饲养和使用委员会制定的规定来处理并且保持在无菌环境中。
Kp-10肽。将吻素-10(Kp-10，人转移抑素氨基酸45-54，YNWNSFGLRF-NH2(SEQ ID NO：14)，Weizmann Peptide Facility或Sigma-Aldrich，Israel)在PPI分析前30分钟以13μg/小鼠的溶解在PBS的剂量腹膜内注射。将MK-801(Sigma)在0.1mg/kg下使用并且在PPI分析前15分钟施用。
声音惊吓反应(Acoustic startle response)(前脉冲抑制，PPI)测试。如Cardon等(2010)中所述，声音惊吓反应试验在从Med Associates,Inc.(MedAssociates，St.Albans，VT，USA)购得的惊吓室内进行。在适应环境期间，提供65分贝(dB)的背景噪音5分钟，并且持续贯穿于试验阶段。声音惊吓反应试验的全部阶段由惊吓试验(单一脉冲，40毫秒(ms)，120-dB)、前脉冲试验(前脉冲20-ms，69、73、78或81dB随后[100-ms延迟]脉冲)和无刺激试验组成。全部阶段以伪随机顺序提供。试验之间的平均时间是15秒(范围是12–30秒)。由对首次单一脉冲试验的反应来计算惊吓反应。
前脉冲抑制(PPI)的计算。PPI计算为：％PPI＝100-{[(对前脉冲+脉冲的惊吓反应)/(对单一脉冲的惊吓反应)]×100}。降低的PPI表明精神分裂症相关的行为。在惊吓反应和单一前脉冲试验中没有观察到Kp-10处理的和PBS处理的小鼠之间的差别，其中所述反应与脉冲试验相比是可忽略的。
悬尾试验。悬尾装置通过由架子支撑的水平金属柱制成。将各个小鼠使用胶布从其尾巴悬吊，单独地悬吊各个小鼠。在6分钟的观察期中测量静止时间，计算首次静止和总静止的延迟时间。
旷场试验。旷场装置由具有在底板上漆出16个正方形(10×10cm)(外部12个且内部4个)的白色树脂玻璃箱(40×40×30cm)组成。将各个小鼠置于装置的中央从而开始15分钟的试验阶段。监测进入内部正方形的次数、在内部正方形中的耗时(min)和在场地内移动的总距离(cm)。
摇臂水迷宫(RAWM)。如Alamed等(2006)所述，将小鼠在水池中在6摇臂水迷宫范例中试验两天。简略地，小鼠在各天的开始接受本发明的肽的注射。第一天，进行15次试验，在试验1、3、5、7、9和11中，平台是可见的，并且在全部其它试验中，平台是隐藏的。第二天，进行12次试验，全部都具有隐藏的平台。记录在1分钟的时长中到达平台需要的时间和错误的次数(不正确的臂的入口)。
摩里斯水迷宫(MWM)试验。获得阶段：将小鼠连续6天每天进行3-4次试验。在各次试验中，要求它们发现位于直径1.4m的水池中的水面以下1.5cm的隐藏的平台。在测试室内，只有水下平台的位置的末端视觉空间线索是可见的。记录逃离的延迟时间，即，小鼠发现平台并且爬上其需要的时间，直到60s。使各个小鼠停留在平台上20s并且然后从迷宫移出至其居住笼。如果小鼠不在60s内发现平台，则将其手动地置于平台上并且20s后使其返回至其居住笼。试验之间的间隔是600s。第六天，将各个小鼠通过探针试验来测试：将平台从水池除去并且追踪在水池中各个小鼠的位置60秒。对于反转阶段，将小鼠连续2天每天进行四次试验，并且平台在不同的位置。数据使用EthoVision自动化追踪系统(Noldus)来记录。
强直性昏厥和镇静作用。强直性昏厥是静止的状态，并且借助棒试验测量。将动物的前爪置于棒(直径0.75cm且地面上方5cm)上，并且测量直至小鼠将前爪从棒上移下的延迟时间。
镇静作用通过观察小鼠和记下它们如下的镇静状态的得分来评价：0，自发运动；1，轻微间歇性自发运动；2，剧烈间歇性自发运动；3，没有自发运动；4，失去听反射；5，失去睑闭反射；6，失去对尾部夹痛的反应。
强迫性活动(旋转杆(Rotarod))使用旋转杆装置来分析(Jones和Roberts7650，Ugo Basile，Italy)。将动物置于加速杆，并且记录各个小鼠从杆上落下需要的时间。三次试验中，将动物从杆上落下花费最长的时间记录并且用于分析。
实施例1：修饰的Kp-10来源的肽的合成
将线性肽8(SEQ ID NO：8)和作为具有相同序列的环状肽6(SEQ ID NO：6)的前体的线性肽4(SEQ ID NO：7)遵循Fmoc-strategy制造商推荐的商用实验方案(protocol)使用高级化学APEX 396多肽合成仪(Louisville,KY)通过固相法来合成。在组装完成肽链之后，将肽4在室温下去保护并且用三氟乙酸(TFA)、茴香硫醚三乙基硅烷(thioanisol triethylsilane)和水(85:5:5:5v/v)的混合物从高分子支承体(Rink amide)裂解3小时。在完整地脱离N-末端Fmoc保护的同时，肽8从高分子载体分开。在用叔丁基醚沉淀之后，将粗肽通过HPLC精制(至>95％)。
使肽4环化从而在Pap和Tyr残基之间形成内部偶氮键,随后在0℃酸性pH～1下与等摩尔量的亚硝酸(HNO2)反应，并且通过调节pH至8在高稀释度(1mg/2ml)下环化，因此获得肽6。该环化几乎是定量的。通过HPLC的最终纯化(>95％)导致如由质谱分析法和氨基酸分析法显示的期望的环状产物。环化过程根据Fridkin等(2006)和Fridkin等(2011)。
具有分别与环状肽2和5相同的序列的线性肽1和3(分别地SEQ ID NO：9和11)通过如上所述的固相法合成，并且在乙酸铵的溶液pH7中用亚铁氰化钾滴定，从而形成相应的胱氨酸(S-S)环状肽2和5(分别地SEQ ID NO：10和12)。
肽7(SEQ ID NO：13)如以上肽8所述合成。
实施例2：修饰的Kp-10来源的肽改善首次接受试验的小鼠中的PPI
为了测定Kp-10衍生物对行为的作用，我们研究了各个肽2、5、6、7和8对PPI的作用。
为了试验肽2(SEQ ID NO：10)，将肽溶解至DMSO中，然后以PBS稀释至最后浓度为1％(w/v)的DMSO。将雄性C57Bl/6J首次接受试验的小鼠用15μg的肽或用在PBS中的1％DMSO(对照)腹膜内注射。前脉冲强度分析在69、73、78或81分贝下30分钟后进行。如从图1A可见，相对于对照，肽2轻度改善了％PPI，然而，作用不显著(重复测量ANOVA，F(自由度)(1,18)＝4.2，P＝0.06)。
为了试验肽5(SEQ ID NO：12)，将小鼠用在PBS中的1％DMSO中的8.3μg的肽5或在PBS中的1％DMSO(对照)相似地注射。前脉冲强度分析在69、73、78或81分贝下30分钟后进行。如从图1B可见，相对于对照，肽5轻度改善了在73、78和81分贝下的％PPI，然而，作用不显著(重复测量ANOVA，F(1,12)＝0.1，P＝0.7)。
为了试验肽6(SEQ ID NO：6)，将小鼠用在PBS中的1％DMSO中的8.75μg的肽6或用在PBS中的1％DMSO(对照)注射。前脉冲强度分析在69、73、78或81分贝下30分钟后进行。如从图1C可见，相对于对照，肽6高度提高了在全部强度下的％PPI，并且该作用在78分贝下是显著的(重复测量ANOVA，F(1,19)＝4.7，P＝0.047*P<0.05，费舍尔LSD事后比较分析)。
为了试验肽7(SEQ ID NO：13)，将小鼠用在PBS中的1％的DMSO中的15.3μg的肽7或用在PBS中的1％DMSO(对照)注射。前脉冲强度分析在69、73、78或81分贝下30分钟后进行。如从图1D可见，对于对照，肽7相轻度改善了在73、78和81分贝下的％PPI，然而，作用不显著(重复测量ANOVA，F(1,18)＝1.15，P＝0.3)。
为了试验肽8(SEQ ID NO：8)，将小鼠用在PBS中的1％DMSO中的8.75μg的肽8或用在PBS中的1％DMSO(对照)。前脉冲强度分析在69、73、78或81分贝下30分钟后进行。如从图1E可见，相对于对照，肽8强烈地提高了在全部强度下的％PPI并且该作用在73分贝下是显著的(重复测量ANOVA，F(1,31)＝5.3，P＝0.028*P<0.05，费舍尔LSD事后比较分析)。
总之，如从图1A-1E可见，虽然相对于未处理的动物，用肽2、5和7处理没有显著地改善PPI的反应，但是施用肽6和8导致全部强度下％PPI明显的增加。
实施例3：修饰的Kp-10来源的肽保护精神分裂症的动物模型免受PPI紊乱
为了测定最大强度地影响首次接受试验的小鼠中的PPI的肽(肽6和8)是否可以消除在药物引起的精神分裂症的动物模型中的精神病性症状，我们分析了它们对MK-801模型中的PPI的作用。MK-801(N-甲基-D-天冬氨酸盐(NMDA)受体通道的拮抗剂)充当拟精神病药剂(psychomimetic agent)，来引起模拟与精神分裂症相关的认知缺损和行为异常的精神病症状。
由MK-801诱导的神经递质失衡导致了PPI功能紊乱，这是具有精神分裂症的病人的特征之一。在图2中所述的实验中，将C57BL/6J小鼠用Kp-10(13μg/小鼠，浅灰色柱)或用溶解在DMSO中然后以PBS稀释至最终浓度为0.2％(w/v)的DMSO的肽6(8.75μg/小鼠，中等灰色柱)或8(8.75μg/小鼠，暗灰色柱)注射；对照组接受在PBS中0.2％的DMSO(黑色柱)。在15分钟后，注射MK-801(0.1mg/kg)；15分钟之后，进行PPI的测量。如期望的，在用MK-801注射的小鼠(白色柱)中，相对于PBS注射的对照，PPI反应降低。相对于MK-801处理的动物，三种处理全部(Kp-10、肽6和肽8)明显地改善了PPI(图2，重复测量ANOVA，F(4,90)＝8.6，P>0.0001；#表示P<0.05，相对于MK-801的费舍尔LSD事后比较分析)。然而，只有肽6将PPI恢复至正常水平(图2中的*表示P<0.05，相对于对照的费舍尔LSD事后比较分析，在没有MK-801对照和使用肽6的处理之间没有发现在全部前脉冲强度下的明显差别)；在MK-801施用后Kp-10和肽8改善了PPI，但不消除其影响，并且在这些组中的PPI保持与对照组明显的不同。因此，与肽8或Kp-10相比，肽6在消除MK-801对PPI的作用上更有效。
实施例4：修饰的Kp-10来源的肽的抗抑郁作用
精神分裂症病人遭受除了精神病症状以外的认知和消极症状(例如，抑郁症)。显示Kp-10提高了在海马脑片(hippocampal slices)的BDNF mRNA水平(Arai等，2009)，并且在WO 2010/137022中进一步显示，通过作为已建立的用于筛选小鼠的抗抑郁样活性的方法的悬尾试验，其具有抗抑郁作用(Steru等，1985；Cryan等，2005)。
通过如下的悬尾试验来测试本发明肽6的抗抑郁作用：将首次接受试验的小鼠用本发明的肽6(将溶解在DMSO中然后以PBS稀释至最终浓度为0.2％的DMSO(w/v)的8.75μg的肽、HCL添加至最终浓度为0.003N)或用氯氮平(0.3mg/kg，溶解在0.3N的HCL并且以PBS稀释至最终浓度为0.003N的HCL，DMSO添加至最终浓度为0.2％的DMSO(w/v))处理并且进行悬尾试验，在悬尾试验中将小鼠从水平杆上由尾部悬吊并且记录动物的运动。如从图3可见，与对照(黑色柱)和氯氮平(暗灰色柱)相比，使用肽6的处理(浅灰色柱)明显地增加了直至首次静止发生的延迟时间(ANOVA，F(2,18)＝10.8，P＝0.0008)，并且与对照和氯氮平处理相比明显地降低了静止的总持续时间(ANOVA，F(2,18)＝3.95，P＝0.039)。这些结果表明本发明的肽6可用作抗抑郁药并且表明其具有与抗精神病药物氯氮平相比较高的抗抑郁活性。
实施例5：肽6的疗效和缺乏副作用
为了测定肽6的剂量效应，我们以增加的剂量注射其并且分析其对悬尾试验的效果。在0.029、0.29和2.9mg/kg下，肽6以剂量依赖方式降低总静止时间(图4A)。该结果示出肽6具有宽的治疗范围。0.29mg/kg的剂量相当于使用Kp-10的剂量，该Kp-10的剂量降低悬尾试验中的总静止(WO 2010/137022的图10C)。
我们进一步分析了肽6与普通抗精神病药物利培酮和奥氮平相比对减少由MK-801诱导的PPI的作用。这两种药物都导致镇静作用，并且因为PPI不能在镇静的小鼠中正确地测量，我们首先评估可以注射至小鼠而不导致镇静作用的药物最高剂量：选择的剂量对于利培酮是0.1mg/kg并且对于奥氮平是0.375mg/kg(数据未示出)。如从图4B可见，全部药物提高了在MK-801处理的小鼠中的PPI，但只有肽6(黑色柱)完全克服了MK-801的作用并且将PPI水平恢复至对照水平(白色柱)。PPI％的ANOVA表明该处理的显著的主作用，但不是前脉冲强度的显著的主作用。单一强度的单因素ANOVA分析表明了在69、73和81dB的前脉冲强度下的处理之间的统计上明显的差别。
肽6的重复注射的作用通过在三天中每天一次注射0.29mg/kg的肽6并且在第三次注射后30分钟测量PPI来试验。如从图4C可见，肽6的重复注射增加全部强度下的PPI，该作用在69和73分贝的PPI下是明显的。
为了评价肽6的潜在副作用，我们分析了与抗精神病药氟哌啶醇(1mg/kg)和奥氮平(0.375和1.125mg/kg)相比，肽6对强直性昏厥、镇静作用的作用，和对自发的(旷场)和强迫性的(旋转杆)活性的作用。
氟哌啶醇(浅灰色柱，HAL)和奥氮平(暗灰色柱，在0.375和1.125mg/kg下的OLA)即使在低水平的奥氮平下都具有强直性昏厥作用，另一方面，肽6(黑色柱，在0.29和2.9mg/kg下的Pep6)在各试验剂量下不具有强直性昏厥作用(图4D)。
接下来，我们分析了氟哌啶醇、奥氮平和肽6的镇静作用。镇静作用通过观察动物使用镇静得分来评价。氟哌啶醇具有低的镇静作用，奥氮平在1.125mg/kg的剂量下具有镇静作用，肽6在两种试验剂量下不具有镇静作用(图4E)。
对于自发和强迫性活动，氟哌啶醇(HAL，1mg/kg，浅灰色柱)和奥氮平(OLA的0.375和OLA的1.125mg/kg，暗灰色柱)降低在旷场(自发)和在旋转杆(强迫性)两者中的小鼠活动，而肽6(在0.29和2.9mg/kg下的Pep6，黑色柱)不影响在各试验剂量下的各试验中的活动水平(图4F，G)。这些结果示出与其它抗精神病药物相比，肽6不具有运动的副作用。
实施例6：口腔施用肽6减少悬尾试验中的总静止。将2.9mg/kg的肽6溶解在DMSO中，然后以水稀释至1％DMSO的最终浓度。将100μl通过口腔喂食法施用至首次接受试验的野生型小鼠，并且在30分钟后将该小鼠通过悬尾试验(TST)来测试。对照小鼠接受具有1％的DMSO的100μl的水。如从图5可见，相对于对照，肽6明显地降低了总静止。
实施例7：肽6的血浆稳定性。将1μM的肽6溶解在人血浆中，并且在0、0.5、1、1.5、2小时温育后通过HPLC来分析肽浓度。试验通过Cerep,Inc(Redmond，WA，U.S.A)来进行。如表1中所示，肽6高度稳定，其具有>120分钟的计算半衰期。相对于Kp-10(在60分钟后在可检测水平以下)，肽6展示出增加的稳定性，其在60分钟后具有94％的残留在人类血浆中的原始材料(chan等，2011，Kisspeptin resets the hypothalamic GnRH clock in men，J Clin.Endocrinol.Metab，96(6)：E908-15)。
表1：肽6的血浆稳定性
温育时间(分钟) 残留化合物的平均值％
0 100.0
30 118.9
60 93.7
90 97.2
120 71.8
实施例8：肽6对在阿尔茨海默病小鼠模型5XFAD转基因小鼠中的空间学习和记忆的作用。5XFAD小鼠过度表达[APP K670N/M671L(Swedish)+I716V(Florida)+V717I(London)和PS1M146L+L286V]。5XFAD小鼠的产生已在先描述(Oakley等，2006，J Neurosci，26(40)：10129-40，2006)。
肽6对空间学习和记忆的作用通过摩里斯水迷宫行为试验来测试。小鼠连续6天每天进行三至四次试验。在各个试验中，要求小鼠发现在1.1-m直径的水池中位于水面以下1.5cm的隐藏的平台。
在测试室中，只有水下平台的位置的末端视觉空间线索是可见的。记录逃离延迟时间，即，小鼠发现平台并且爬上其需要的时间，直到60秒。使各个小鼠停留在平台上20秒然后从迷宫移出。如果小鼠没有在60秒内发现平台，将其手动地置于平台上20秒。试验之间的间隔是10分钟。在探针试验阶段中，将平台从水池中移出并且跟踪各个小鼠的位置60秒。数据使用EthoVision自动追踪系统(Noldus)来记录。
对于反转阶段，小鼠连续2天每天进行四次试验，在该阶段中，平台在不同的位置。将小鼠或者不处理(对照)，或在测试前30分钟通过腹膜内注射用8.75g/小鼠的肽6处理。如从图6可见，在第5和6天的获得阶段和第1和2天的反转阶段中，用肽6处理的小鼠(灰色三角形)与未处理的小鼠(黑色正方形)相比花费较少的时间发现平台。
全部以上结果证明肽6是潜在的候选药物，与Kp-10相比其具有较高的效率和增加的稳定性、宽的治疗窗(therapeutic window)和高耐受性。
参考文献
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Claims (15)

1.一种合成肽，和其药物学可接受盐，所述合成肽选自：
(i)环状或线性肽，其序列为：
R1-Xaa1-Gly-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-NHR2(SEQ ID NOs：2和1)
其中：
Xaa1选自Phe、Ile、Leu、Val、Nle和它们的类似物；
Xaa2选自Leu、Ile、Val、Nle、Phe和它们的类似物；
Xaa3选自Arg的类似物、Arg、Lys、高Arg、高Lys和Orn；
Xaa4选自Trp和其类似物；
Xaa5选自Tyr、His、邻甲基-Tyr和2-羟基-3-甲基-Phe；
R1选自对氨基苯丙氨酸(Pap)、NH2C6H4(CH2)1-3CO、Fmoc-Pap、FMS-Pap和C5-C20酰基-Pap，其中所述C5-C20酰基来源于连接至Pap的α-氨基的饱和或不饱和的C5-C20脂肪酸；和
R2是H或(CH2)0-4CH3，和
(ii)线性肽，其序列为：
R1-Xaa1-Gly-Xaa2-Xaa3-Xaa4-NHR2(SEQ ID NO:3)
其中：
Xaa1至Xaa4如以上定义；
R1是9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)或2-硫代-Fmoc(FMS)；和
R2如以上定义。
2.根据权利要求1所述的合成肽，其中
所述Arg的类似物选自L-2-氨基-3-胍基丙酸和N-ω,ω-二甲基-L-精氨酸；
所述Trp的类似物选自β-(3-苯并噻吩基)-L-Ala、6-甲基Trp、5-甲氧基-Trp、5-羟基-Trp、5-氟代-Trp、7-氮杂色氨酸、5-溴色氨酸和5-甲基色氨酸；
所述Phe的类似物选自2-氟苯丙氨酸、4-氟苯丙氨酸、4-溴苯丙氨酸、2-氯苯丙氨酸、L-高苯丙氨酸、4-硝基苯丙氨酸和α-甲基苯丙氨酸；和
所述Leu或Val的类似物选自叔丁基-L-丙氨酸、L-环己基甘氨酸和L-环戊基甘氨酸。
3.根据权利要求1所述的合成肽，和其药物学可接受盐，所述合成肽选自：
(i)环状肽，其序列为：
其中：
Xaa1选自Tyr和His；和
R2是H或(CH2)0-4CH3，和
(ii)线性肽，其序列为：
R1-Phe-Gly-Leu-Arg-Trp-NHR2(SEQ ID NO：5)
其中：
R1是Fmoc或FMS；和
R2如以上定义。
4.根据权利要求3所述的合成肽，其为环状并且具有下述序列：
5.根据权利要求3所述的合成肽，其为线性并且具有下述序列：
Fmoc-Phe-Gly-Leu-Arg-Trp-NH2(SEQ ID NO:8)。
6.根据权利要求1-5任一项所述的合成肽，其用于治疗表现与感觉门控功能损伤相关的行为异常的疾病或紊乱。
7.根据权利要求6所述的合成肽，其中所述疾病或紊乱选自精神分裂症、孤独症、亨廷顿舞蹈症、强迫性精神失调、注意力不集中的过度反应症(ADHD)和图雷特综合征。
8.根据权利要求7所述的合成肽，其中所述疾病或紊乱是精神分裂症。
9.根据权利要求1-5任一项所述的合成肽，其用于治疗阿尔茨海默病(AD)。
10.根据权利要求1-5任一项所述的合成肽，其用于治疗抑郁症或治疗认知缺损。
11.根据权利要求10所述的合成肽，其中所述抑郁症和/或所述认知缺损与精神分裂症或与阿尔茨海默病相关。
12.根据权利要求8-11任一项所述的合成肽，其中所述肽具有SEQ ID NO:6所示的序列。
13.一种药物组合物，其包括权利要求1-5任一项所述的合成肽或其药物学可接受盐，和药物学可接受载体。
14.根据权利要求13所述的药物组合物，其配制为口腔施用。
15.一种用于治疗表现与感觉门控功能损伤相关的行为异常的疾病或紊乱、抑郁症或认知缺损的方法，其包括向有需要的病人施用有效量的根据权利要求1-5任一项所述的肽或其药物学可接受盐。
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