CN104263837A - 基于三重信标修饰的金纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应检测水溶液中Hg2+和/或Ag+的方法 - Google Patents

基于三重信标修饰的金纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应检测水溶液中Hg2+和/或Ag+的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104263837A
CN104263837A CN201410535765.5A CN201410535765A CN104263837A CN 104263837 A CN104263837 A CN 104263837A CN 201410535765 A CN201410535765 A CN 201410535765A CN 104263837 A CN104263837 A CN 104263837A
Authority
CN
China
Prior art keywords
aunp
solution
final concentration
dna
dna1
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201410535765.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104263837B (zh
Inventor
匡华
李斯
胥传来
徐丽广
马伟
刘丽强
宋珊珊
吴晓玲
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jiangnan University
Original Assignee
Jiangnan University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangnan University filed Critical Jiangnan University
Priority to CN201410535765.5A priority Critical patent/CN104263837B/zh
Publication of CN104263837A publication Critical patent/CN104263837A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104263837B publication Critical patent/CN104263837B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)

Abstract

基于三重信标修饰的金纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应检测水溶液中Hg2+和/或Ag+的方法，属于重金属离子的检测技术领域。本发明包括通过制备BPS包裹的金纳米粒子、设计核酸探针、信标分子的修饰和重金属离子Hg2+和/或Ag+的检测等步骤。本发明提供了一种基于三重信标修饰的金纳米粒子三聚体的拉曼信号来检测水溶液中二价汞离子和/或银离子的方法，并且可以做到同时检测这两种离子，此种方法工作量少，节约成本，灵敏度高，方便快捷。

Description

基于三重信标修饰的金纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应检测水溶液中Hg2+和/或Ag+的方法
技术领域
本发明涉及基于三重信标修饰的金纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应来同时检测水溶液中二价汞离子和/或银离子的方法，属于重金属离子的检测技术领域。
背景技术
二价汞离子和银离子是两种主要的有毒重金属离子，对环境有着严重的影响并且对人类的健康有着严重的危害。汞离子可以通过食物链富集并且不能通过代谢系统排出，可以引起心脏，肝，大脑，和其他器官的永久性损伤。并且，银离子对水生生物也有很大的毒性。对于汞离子和银离子的检测已经做出了很大的努力。传统的检测方法例如冷冻蒸发原子吸收光谱，色谱，和电感耦合等离子质谱光谱已经被广泛的应用。然而，这些方法费时费力并且成本高。由于汞离子和银离子可以特异性的结合胸腺嘧啶和腺嘌呤碱基形成很强很稳定的T-Hg2+-T 和 C-Ag+-C，近些年大量的基于DNA的汞离子和银离子检测方法被大量的发明。尽管这些传感方法有很高的灵敏度和特异性，但是大部分都是单重检测。然而汞离子和银离子在环境中经常同时存在，发明一种同时检测这两种离子的检测方法是很有必要的。由于简单的样品前处理方法和超高的灵敏度，表面增强拉曼光谱已经作为一种分析技术被广泛的应用于化学和生物传感。相比于广泛应用的荧光分析方法，在非特定的激光激发后，表面增强拉曼散射可以提供特殊分子的指纹图谱并且金属粒子周围的拉曼信标可以保持光稳定性。这些优点使表面增强拉曼散射成为荧光的一个很好的替代者，尤其在多重检测中。本发明建立了一种新的基于金纳米粒子组装后的表面增强拉曼散射光谱的生物传感器，是一种快速、灵敏、特异性的汞离子和银离子的多重检测法。
发明内容
本发明的目的是提供一种基于三重信标修饰的金纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应来同时检测水溶液中二价汞离子和/或银离子的方法。
本发明的技术方案，基于三重信标修饰的金纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应来同时检测水溶液中二价汞离子和/或银离子的方法，具体步骤为：
（一）检测方法的建立
（1）二水合双（对-磺酰苯基）苯基膦化二钾盐（BPS）包裹的20nm金纳米粒子的制备：取150mL锥形瓶和配套的转子，用新鲜配制的王水浸泡24h并用超纯水冲洗三次，烘干备用；取97.5mL的超纯水放入洗涤洁净的锥形瓶中，在瓶口盖上保鲜膜防止外界灰尘进入；然后将装好超纯水的瓶子放在可加热的磁力搅拌仪上，将温度调至450℃，调转速800 r/min，边加热边搅拌；2 min后加入2.5mL 4g/L的氯金酸溶液，继续加热至沸腾；迅速加入1.8mL 10mg/mL的柠檬酸三钠，观察溶液颜色变化，待溶液变为酒红色后将温度调至250℃继续煮沸20min；将加热完毕的溶液降至室温后浓缩十倍用超纯水重悬，加入二水合双（对-磺酰苯基）苯基膦化二钾盐溶液至终浓度为10mg/mL，振荡过夜，8000r/min离心10 min，用0.5×TBE重悬，放置在4℃备用，BPS包裹后的Au纳米粒子记为AuNP；
（2）检测用的核酸探针的设计与合成：
巯基修饰的单链核酸探针：
DNA 1：5’-SH-TCAGACGTTT TTT-3’，
DNA 2：5’-SH-TCAGGATCCC CCC-3’，
DNA 3：5’-SH-TCAGAGCTTG CGTCATGAGA CGCTCCCCCC ATC -3’，
未做任何修饰的单链核酸探针：
DNA 4：5’-GTAGCGAGAT GACGCAAGCT-3’，
DNA 5：5’-AGCGTGAGGC TACTTTTTTC GT-3’，
首先制备金纳米粒子和核酸的偶联物：把AuNP分别和DNA1，DNA2，DNA3按摩尔终浓度为1︰1的比例混合在一起，反应1h后加入NaCl溶液至终浓度为50mM，混合均匀反应过夜；形成AuNP-DNA1，AuNP-DNA2，AuNP-DNA3；接下来DNA4与DNA5和 AuNP-DNA3按摩尔终浓度为2︰2︰1的比例混合，加入NaCl至终浓度为50mM，放置在95℃水浴锅中5 min，然后37℃放置8h，离心除去未杂交的DNA，即得到连有金纳米粒子的“Y”形DNA骨架AuNP-DNAY；
（3）信标分子的修饰：分别把AuNP-DNA1，AuNP-DNA2，AuNP-DNAY分别与终浓度为5μM的ATP，MATT，NTP信标混合，室温反应8h；然后将修饰了ATP的AuNP-DNA1和/或修饰了MATT的AuNP-DNA2与修饰了NTP的AuNP-DNAY按体积1︰1︰1或1︰1的比例混合，即制备得到检测用的拉曼探针溶液；
（二）重金属离子Hg2+和/或Ag+的检测
（4）Ag+ 的检测：25nM信标分子修饰过的AuNP-DNAY和AuNP-DNA2按体积1︰1混合，缓冲体系为0.5×TBE，终浓度为50mM的NaNO3 溶液；含不同浓度的Ag+水溶液（0-0.5ng/mL）加入到上述检测体系中，并在室温下反应1h，使Ag+诱导的DNA杂交反应进行完全，然后测定样品体系的拉曼信号；
（5）Hg2+的检测：检测方法和步骤（4）类似，只是将AuNP-DNA2换成AuNP-DNA1，Ag+ 溶液换成Hg2+溶液，即经过信标分子修饰的25nM的AuNP-DNAY和AuNP-DNA1按体积1︰1混合，缓冲体系为0.5×TBE，终浓度为50mM的NaNO3 溶液；含0-0.5ng/mL不同浓度的Hg2+水溶液加入到上述检测体系中，并在室温下反应1h，使Hg2+诱导的DNA杂交反应进行完全，然后测定样品体系的拉曼信号；
（6）Ag+ 和Hg2+同时检测：检测方法和步骤（4）类似，只是检测体系多添加AuNP-DNA1，并将Ag+溶液换成Ag+和Hg2+的混合溶液，即经过信标分子修饰的25nM的AuNP-DNAY与AuNP-DNA1和AuNP-DNA2按体积1︰1︰1混合，缓冲体系为0.5×TBE，终浓度为50mM的NaNO3 溶液；含0-0.5ng/mL不同浓度的Ag+和0-0.5ng/mL Hg2+水溶液加入到上述检测体系中，并在室温下反应1h，使Ag+和Hg2+诱导的DNA杂交反应进行完全，然后测定样品体系的拉曼信号。
Ag+ 和Hg2+的计算定量方法如表1所示。
表1
I1080：1080cm-1处的拉曼强度；
I1345：1345cm-1处的拉曼强度；
I1621：1621cm-1处的拉曼强度。
本发明的有益效果：本发明提供了一种基于三重信标修饰的金纳米粒子三聚体的拉曼信号来检测水溶液中二价汞离子和/或银离子的方法，并且可以做到同时检测这两种离子，此种方法工作量少，节约成本，灵敏度高，方便快捷。
附图说明
图1 银离子和汞离子同时存在时，形成的金纳米粒子三聚体的透射电镜照片。
图2银离子和汞离子同时且等量存在时三种信标对应的表面增强拉曼光谱图。
图3 4-氨基苯硫酚在1080cm-1处的标准曲线。
图4 4-硝基苯硫酚在1345cm-1处的标准曲线。
图5 4-甲氧基苄硫醇在1621cm-1处的标准曲线。
具体实施方式
实施例1 Hg2+ 的检测
（1）20nm金纳米粒子的制备
取一个150mL锥形瓶和配套的转子用新配制的王水浸泡24h，然后用超纯水冲洗干净，烘干备用。在洗干净的锥形瓶中加入97.5mL的超纯水，放在磁力加热搅拌器上边加热边搅拌，加热温度调至450℃，加热过程中加入2.5mL 4g/L的氯金酸溶液，待溶液沸腾后加入1.8mL 10mg/mL的柠檬酸三钠溶液，观察溶液颜色变化。待溶液变为酒红色后调至250℃继续加热20min；将加热完毕的溶液降至室温后浓缩十倍用超纯水重悬，加入二水合双（对-磺酰苯基）苯基膦化二钾盐溶液至终浓度为10mg/mL，振荡过夜，8000 r/min离心10min，用0.5×TBE重悬，放置在4℃备用，记为AuNP；
（2）检测用的核酸探针的设计与合成
其中DNA1、DNA3的5’端修饰巯基，目的是能与金纳米粒子偶联。DNA4，DNA5与Au-DNA3杂交形成“Y”字DNA骨架，在汞离子存在的情况下能与对应的Au-DNA1进行组装。所有核酸探针均由上海生工生物工程有限公司合成，其具体序列如下：
DNA 1：5’-SH-TCAGACGTTT TTT-3’，
DNA 3：5’-SH-TCAGAGCTTG CGTCATGAGA CGCTCCCCCC ATC-3’，
未做任何修饰的单链核酸探针：
DNA4：5’-GTAGCGAGAT GACGCAAGCT-3’，
DNA5：5’-AGCGTGAGGC TACTTTTTTC GT-3’；
（3）制备金纳米粒子与核酸的拉曼探针
首先是制备金纳米粒子与核酸的耦联物：将100μL AuNP分别和DNA1，DNA3按摩尔终浓度为1︰1的比例混合均匀，放置1h后，加入1μL 5M的氯化钠溶液至终浓度为50mM反应12h。反应结束后8000 r/min离心10 min去除上清，用0.5×TBE洗涤重悬2次，最终仍重悬在100μL 0.5×TBE缓冲液中，即可得到AuNP-DNA1、AuNP-DNA3。
然后将DNA4，DNA5，AuNP-DNA3按摩尔终浓度为2︰2︰1的比例混和，再加入氯化钠溶液至终浓度为50mM，放置在95℃水浴锅中水浴5min，关闭水浴锅将样品放置在水浴锅上方用水蒸气加热至自然冷却。然后继续反应8h，离心去除多余的未杂交的核酸，然后用0.5×TBE重悬，即得到AuNP-DNA Y拉曼检测探针。
信标分子的修饰：分别把AuNP-DNA1，AuNP-DNAY分别与终浓度为5μM的ATP，NTP信标混合，室温反应8h；然后将修饰了ATP的AuNP-DNA1与修饰了NTP的AuNP-DNAY按体积1︰1的比例混合，即为制备得到检测用的拉曼探针溶液；
（4）Hg2+ 的检测
在得到的AuNP-DNA Y拉曼检测探针溶液中加入终浓度为50mM的硝酸钠溶液，同时加入拉曼信标分子修饰过后的等体积的AuNP-DNA1溶液，混合均匀。
含有不同浓度（0-0.5 ng/mL）汞离子的水溶液加入到上述检测体系中，并在25℃下维持1h，使汞离子诱导的金纳米粒子组装完全进行。然后测量整个体系的拉曼光谱。
实施例2  Ag+ 的检测
（1）20nm金纳米粒子的制备：方法如实施例1所述。
（2）检测用的核酸探针的设计与合成：其中DNA2、DNA3的5’端修饰巯基，目的是能与金纳米粒子偶联。DNA4，DNA5与AuNP-DNA3杂交形成“Y”字DNA骨架，在汞离子存在的情况下能与对应的AuNP-DNA2进行组装。所有核酸探针均由上海生工生物工程有限公司合成，其具体序列如下：
DNA2：5’-SH-TCAGGATCCC CCC-3’，
DNA3：5’-SH-TCAGAGCTTG CGTCATGAGA CGCTCCCCCC ATC-3’，
未做任何修饰的单链核酸探针：
DNA4：5’-GTAGCGAGAT GACGCAAGCT-3’
DNA5：5’-AGCGTGAGGC TACTTTTTTC GT-3’
（3）制备金纳米粒子与核酸的拉曼探针：首先是制备金纳米粒子与核酸的耦联物：将100μL AuNP分别和DNA2，DNA3按摩尔终浓度为1︰1的比例混合均匀，放置1h后，加入1μL 5M的氯化钠溶液至终浓度为50mM反应12h。反应结束后8000 r/min离心10min去除上清，用0.5×TBE洗涤重悬2次，最终仍重悬在100μL  0.5×TBE缓冲液中，即可得到AuNP-DNA2、AuNP-DNA3。
然后将DNA4，DNA5，AuNP-DNA3按摩尔终浓度为2︰2︰1的比例混和，再加入氯化钠溶液至终浓度为50mM，放置在95℃水浴锅中水浴5min，关闭水浴锅将样品放置在水浴锅上方用水蒸气加热至自然冷却。然后继续反应8h，离心去除多余的未杂交的核酸，然后用0.5×TBE重悬，即得到AuNP-DNA Y拉曼检测探针。
信标分子的修饰：分别把AuNP-DNA2，AuNP-DNAY分别与终浓度为5μM的MATT，NTP信标混合，室温反应8h，然后将修饰了MATT的AuNP-DNA2及修饰了NTP的AuNP-DNAY按体积1︰1的比例混合，即为制备得到检测用的拉曼探针溶液；
（4）Ag+ 的检测
在得到的AuNP-DNA Y拉曼检测探针溶液中加入终浓度为50mM的硝酸钠溶液，同时加入拉曼信标分子修饰过的等体积的AuNP-DNA2溶液，混合均匀。
含有不同浓度（0-0.5ng/mL）银离子的水溶液加入到上述检测体系中，并在25℃下维持1h，使银离子诱导的金纳米粒子组装完全进行。然后测量整个体系的拉曼光谱。
实施例3 Hg2+和Ag+ 同时检测
（1）20nm金纳米粒子的制备：方法如实施例1所述。
（2）检测用的核酸探针的设计与合成：其中DNA1、DNA2、DNA3的5’端修饰巯基，目的是能与金纳米粒子偶联。DNA4，DNA5与AuNP-DNA3杂交形成“Y”字DNA骨架，在汞离子存在的情况下能与对应的AuNP-DNA1进行组装；在银离子存在的情况下能与对应的AuNP-DNA2进行组装。所有核酸探针均由上海生工生物工程有限公司合成，其具体序列如下：
DNA 1：5’-SH-TCAGACGTTT TTT-3’，
DNA2：5’-SH-TCAGGATCCC CCC-3’，
DNA3：5’-SH-TCAGAGCTTG CGTCATGAGA CGCTCCCCCC ATC-3’，
未做任何修饰的单链核酸探针：
DNA4：5’-GTAGCGAGAT GACGCAAGCT-3’，
DNA5：5’-AGCGTGAGGC TACTTTTTTC GT-3’，
（3）制备金纳米粒子与核酸的拉曼探针
首先是制备金纳米粒子与核酸的耦联物：将1μL 10μM的DNA1，DNA2， DNA3分别加入三管100μL  25nM的AuNP溶液中并混合均匀，放置1h后，加入1μL 5M的氯化钠溶液至终浓度为50mM反应12h。反应结束后8000 r/min离心10 min去除上清，用0.5×TBE洗涤重悬2次，最终仍重悬在100μL 0.5×TBE缓冲液中，即可得到AuNP-DNA1、AuNP-DNA2、AuNP-DNA3溶液。
然后将DNA4，DNA5，AuNP-DNA3按摩尔终浓度为2︰2︰1的比例混和，再加入氯化钠溶液至终浓度为50mM，放置在95℃水浴锅中水浴5min，关闭水浴锅将样品放置在水浴锅上方用水蒸气加热至自然冷却。然后继续反应8h，离心去除多余的未杂交的核酸，然后用0.5×TBE重悬。
信标分子的修饰：分别把AuNP-DNA1，AuNP-DNA2，AuNP-DNAY溶液分别与终浓度为5μM的ATP，MATT，NTP 信标混合，室温反应8h，然后将修饰了ATP的AuNP-DNA1、修饰了MATT的AuNP-DNA2及修饰了NTP的AuNP-DNAY按体积1︰1︰1的比例混合，即为制备得到检测用的拉曼探针溶液；
（4）Hg2+和Ag+ 同时检测
在得到的Au-DNA Y拉曼检测探针溶液中加入终浓度为50mM的硝酸钠溶液，同时加入拉曼信标分子修饰过的等量的AuNP-DNA1，AuNP-DNA2溶液，混合均匀。
含有不同浓度（0-0.5 ng/mL）银离子和汞离子的水溶液同时加入到上述检测体系中，并在25℃下维持1h，使银离子和汞离子诱导的金纳米粒子组装完全进行。然后测量整个体系的拉曼光谱。

Claims (1)

1.基于三重信标修饰的金纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应来同时检测水溶液中二价汞离子和/或银离子的方法，其特征在于步骤为：
（一）检测方法的建立：
（1）二水合双（对-磺酰苯基）苯基膦化二钾盐BPS包裹的20nm金纳米粒子的制备：取150mL锥形瓶和配套的转子，用新鲜配制的王水浸泡24h并用超纯水冲洗三次，烘干备用；取97.5mL的超纯水放入洗涤洁净的锥形瓶中，在瓶口盖上保鲜膜防止外界灰尘进入；然后将装好超纯水的瓶子放在可加热的磁力搅拌仪上，将温度调至450℃、调转速800r/min，边加热边搅拌；2 min后加入2.5mL 4g/L的氯金酸溶液，继续加热至沸腾；迅速加入1.8 mL 10mg/mL的柠檬酸三钠，观察溶液颜色变化，待溶液变为酒红色后将温度调至250℃继续煮沸20min；将加热完毕的溶液降至室温后浓缩十倍用超纯水重悬，加入二水合双（对-磺酰苯基）苯基膦化二钾盐溶液至终浓度为10mg/mL，振荡过夜，8000 r/min离心10min，用0.5×TBE重悬，放置在4℃备用，BPS包裹后的Au纳米粒子记为AuNP；
（2）检测用的核酸探针的设计与合成：
巯基修饰的单链核酸探针：
DNA 1：5’-SH-TCAGACGTTT TTT-3’，
DNA 2：5’-SH-TCAGGATCCC CCC-3’，
DNA 3：5’-SH-TCAGAGCTTG CGTCATGAGA CGCTCCCCCC ATC -3’，
未做任何修饰的单链核酸探针：
DNA 4：5’-GTAGCGAGAT GACGCAAGCT-3’，
DNA 5：5’-AGCGTGAGGC TACTTTTTTC GT-3’，
首先制备金纳米粒子和核酸的偶联物：把AuNP分别和DNA1，DNA2，DNA3按摩尔终浓度为1︰1的比例混合在一起，反应1h后加入NaCl溶液至终浓度为50mM，混合均匀反应过夜；形成AuNP-DNA1，AuNP-DNA2，AuNP-DNA3；接下来DNA4与DNA5和 AuNP-DNA3按摩尔终浓度为2︰2︰1的比例混合，加入NaCl至终浓度为50mM，放置在95℃水浴锅中5 min，然后37℃放置8h，离心除去未杂交的DNA，即得到连有金纳米粒子的“Y”形DNA骨架AuNP-DNAY；
（3）信标分子的修饰：分别把AuNP-DNA1，AuNP-DNA2，AuNP-DNAY分别与终浓度为5μM的4-氨基苯硫酚ATP，4-硝基苯硫酚MATT，4-甲氧基苄硫醇NTP信标混合，室温反应8h，然后将修饰了ATP的AuNP-DNA1和/或修饰了MATT的AuNP-DNA2与修饰了NTP的AuNP-DNAY按体积1︰1︰1或1︰1的比例混合，即制备得到检测用的拉曼探针溶液；
（二）重金属离子Hg2+和/或Ag+的检测：
（4）Ag+的检测：25nM经过信标分子修饰的AuNP-DNAY和AuNP-DNA2按体积1︰1混合，缓冲体系为0.5×TBE，终浓度为50mM的NaNO3 溶液；含0-0.5ng/mL不同浓度的Ag+水溶液加入到上述检测体系中，并在室温下反应1h，使Ag+诱导的DNA杂交反应进行完全，然后测定样品体系的拉曼信号；
（5）Hg2+的检测：检测方法和步骤（4）类似，将AuNP-DNA2换成AuNP-DNA1，Ag+ 溶液换成Hg2+溶液，即经过信标分子修饰的25nM的AuNP-DNAY和AuNP-DNA1按体积1︰1混合，缓冲体系为0.5×TBE，终浓度为50mM的NaNO3 溶液；含0-0.5ng/mL不同浓度的Hg2+水溶液加入到上述检测体系中，并在室温下反应1h，使Hg2+诱导的DNA杂交反应进行完全，然后测定样品体系的拉曼信号；
（6）Ag+和Hg2+同时检测：检测方法和步骤（4）类似，只是检测体系多添加AuNP-DNA1，并将Ag+溶液换成Ag+和Hg2+的混合溶液，即经过信标分子修饰的25nM的AuNP-DNAY与AuNP-DNA1和AuNP-DNA2按体积1︰1︰1混合，缓冲体系为0.5×TBE，终浓度为50mM的NaNO3 溶液；含0-0.5ng/mL不同浓度的Ag+和0-0.5ng/mL Hg2+水溶液加入到上述检测体系中，并在室温下反应1h，使Ag+和Hg2+诱导的DNA杂交反应进行完全，然后测定样品体系的拉曼信号。
CN201410535765.5A 2014-10-13 2014-10-13 基于三重信标修饰的金纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应检测水溶液中Hg2+和/或Ag+的方法 Active CN104263837B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410535765.5A CN104263837B (zh) 2014-10-13 2014-10-13 基于三重信标修饰的金纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应检测水溶液中Hg2+和/或Ag+的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410535765.5A CN104263837B (zh) 2014-10-13 2014-10-13 基于三重信标修饰的金纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应检测水溶液中Hg2+和/或Ag+的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104263837A true CN104263837A (zh) 2015-01-07
CN104263837B CN104263837B (zh) 2016-03-23

Family

ID=52155411

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410535765.5A Active CN104263837B (zh) 2014-10-13 2014-10-13 基于三重信标修饰的金纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应检测水溶液中Hg2+和/或Ag+的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104263837B (zh)

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104931478A (zh) * 2015-06-11 2015-09-23 江南大学 基于银纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应超灵敏检测甲胎蛋白的方法
CN106290898A (zh) * 2016-07-29 2017-01-04 江南大学 一种金‑上转换纳米粒子三聚体的制备方法及其应用
WO2017181762A1 (zh) * 2016-04-20 2017-10-26 夏普株式会社 颗粒物浓度检测方法
CN108107033A (zh) * 2017-11-06 2018-06-01 中山大学 一种单个胸腺嘧啶探针及其制备方法和应用
CN108593558A (zh) * 2018-04-04 2018-09-28 深圳大学 一种用于Hg2+检测的光声检测探针及其制备方法
CN109406484A (zh) * 2018-10-19 2019-03-01 福建师范大学 一种纳米银胶的制备方法及该银胶用于检测环嗪酮的方法
CN109781697A (zh) * 2018-12-27 2019-05-21 西安交通大学 一种柔性sers基底及其制备方法和双氧水sers光谱检测的应用
CN111198177A (zh) * 2019-12-18 2020-05-26 江南大学 一种比率型表面增强拉曼光谱的金空间四面体结构的制备方法及其应用
CN112698020A (zh) * 2020-11-12 2021-04-23 中山大学 基于DNA-AuNP编码的交叉响应系统的多峰耦合分析方法
CN113252619A (zh) * 2020-02-12 2021-08-13 青岛科技大学 一种可同时检测Hg2+和Ag+的纳米胶囊-核酸生物分子复合物及其制备方法
CN115855928A (zh) * 2023-02-27 2023-03-28 合肥工业大学 基于核酸宏阵列和双功能分子的汞离子检测方法及试剂盒

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003073817A2 (en) * 2001-09-06 2003-09-12 Genomic Profiling Systems, Inc. Rapid and sensitive detection of cells and viruses
CN102890061A (zh) * 2012-10-12 2013-01-23 江南大学 一种运用圆二光谱高灵敏检测银离子的方法
CN103954607A (zh) * 2014-05-14 2014-07-30 江南大学 一种测定Hg2+的超灵敏表面增强拉曼光谱传感器的构建方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003073817A2 (en) * 2001-09-06 2003-09-12 Genomic Profiling Systems, Inc. Rapid and sensitive detection of cells and viruses
CN102890061A (zh) * 2012-10-12 2013-01-23 江南大学 一种运用圆二光谱高灵敏检测银离子的方法
CN103954607A (zh) * 2014-05-14 2014-07-30 江南大学 一种测定Hg2+的超灵敏表面增强拉曼光谱传感器的构建方法

Cited By (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104931478A (zh) * 2015-06-11 2015-09-23 江南大学 基于银纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应超灵敏检测甲胎蛋白的方法
CN104931478B (zh) * 2015-06-11 2017-07-07 江南大学 基于银纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应超灵敏检测甲胎蛋白的方法
WO2017181762A1 (zh) * 2016-04-20 2017-10-26 夏普株式会社 颗粒物浓度检测方法
CN106290898A (zh) * 2016-07-29 2017-01-04 江南大学 一种金‑上转换纳米粒子三聚体的制备方法及其应用
CN108107033A (zh) * 2017-11-06 2018-06-01 中山大学 一种单个胸腺嘧啶探针及其制备方法和应用
CN108593558A (zh) * 2018-04-04 2018-09-28 深圳大学 一种用于Hg2+检测的光声检测探针及其制备方法
CN109406484A (zh) * 2018-10-19 2019-03-01 福建师范大学 一种纳米银胶的制备方法及该银胶用于检测环嗪酮的方法
CN109781697A (zh) * 2018-12-27 2019-05-21 西安交通大学 一种柔性sers基底及其制备方法和双氧水sers光谱检测的应用
CN109781697B (zh) * 2018-12-27 2021-03-02 西安交通大学 一种柔性sers基底及其制备方法和双氧水sers光谱检测的应用
CN111198177A (zh) * 2019-12-18 2020-05-26 江南大学 一种比率型表面增强拉曼光谱的金空间四面体结构的制备方法及其应用
CN111198177B (zh) * 2019-12-18 2021-03-09 江南大学 一种比率型表面增强拉曼光谱的金空间四面体结构的制备方法及其应用
CN113252619A (zh) * 2020-02-12 2021-08-13 青岛科技大学 一种可同时检测Hg2+和Ag+的纳米胶囊-核酸生物分子复合物及其制备方法
CN112698020A (zh) * 2020-11-12 2021-04-23 中山大学 基于DNA-AuNP编码的交叉响应系统的多峰耦合分析方法
CN115855928A (zh) * 2023-02-27 2023-03-28 合肥工业大学 基于核酸宏阵列和双功能分子的汞离子检测方法及试剂盒

Also Published As

Publication number Publication date
CN104263837B (zh) 2016-03-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104263837B (zh) 基于三重信标修饰的金纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应检测水溶液中Hg2+和/或Ag+的方法
Zeng et al. Highly sensitive aptasensor for trace arsenic (III) detection using DNAzyme as the biocatalytic amplifier
Han et al. Practical, highly sensitive, and regenerable evanescent-wave biosensor for detection of Hg2+ and Pb2+ in water
Collasiol et al. Ultrasound assisted mercury extraction from soil and sediment
Costas-Mora et al. In situ building of a nanoprobe based on fluorescent carbon dots for methylmercury detection
Zhu et al. Ultrasensitive detection of mercury with a novel one-step signal amplified lateral flow strip based on gold nanoparticle-labeled ssDNA recognition and enhancement probes
Zhuang et al. DNAzyme-based magneto-controlled electronic switch for picomolar detection of lead (II) coupling with DNA-based hybridization chain reaction
Moraes et al. GFAAS determination of mercury in muscle samples of fish from Amazon, Brazil
Tian et al. Ultrasensitive detection of trace Hg2+ by SERS aptasensor based on dual recycling amplification in water environment
Chen et al. DNA-mediated inhibition of peroxidase-like activities on platinum nanoparticles for simple and rapid colorimetric detection of nucleic acids
Fan et al. Direct colorimetric visualization of mercury (Hg2+) based on the formation of gold nanoparticles
Sang et al. Determination of trace aluminum in biological and water samples by cloud point extraction preconcentration and graphite furnace atomic absorption spectrometry detection
CN102890061B (zh) 一种运用圆二色光谱高灵敏检测银离子的方法
Wu et al. Colorimetric detection of Hg 2+ based on inhibiting the peroxidase-like activity of DNA–Ag/Pt nanoclusters
Souza et al. Application of multivariate designs in the development of a method for vanadium determination in natural waters by HR-CS GF AAS after cloud-point extraction
Chen et al. Rhodanine stabilized gold nanoparticles for sensitive and selective detection of mercury (II)
Donati et al. Nanocatalyst/Nanoplasmon‐Enabled Detection of Organic Mercury: A One‐Minute Visual Test
Guo et al. Preparation and characterization of an aptamer‐functionalized solid‐phase microextraction fiber and its application in the selective monitoring of adenosine phosphates with liquid chromatography and tandem mass spectrometry
Li et al. A sensitive and rapid UV–vis spectrophotometry for organophosphorus pesticides detection based on Ytterbium (Yb3+) functionalized gold nanoparticle
Wang et al. A label-free G-quadruplex-based mercury detection assay employing the exonuclease III-mediated cleavage of T–Hg2+–T mismatched DNA
Mohseni et al. Mean centering of ratio spectra for colorimetric determination of morphine and codeine in pharmaceuticals and biological samples using melamine modified gold nanoparticles
Tang et al. A simple and sensitive resonance Rayleigh scattering method for determination of As (III) using aptamer‐modified nanogold as a probe
Du et al. Ionic liquid-based air-assisted liquid–liquid microextraction combined with dispersive micro-solid phase extraction for the preconcentration of copper in water samples
Wang et al. A dual-model SERS and RRS analytical platform for Pb (II) based on Ag-doped carbon dot catalytic amplification and aptamer regulation
Wang et al. Self-assembly of silver nanoparticles as high active surface-enhanced Raman scattering substrate for rapid and trace analysis of uranyl (VI) ions

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CP02 Change in the address of a patent holder

Address after: 214016 Jiangsu city of Wuxi Province District Liangxi No. 898 South Road 7 layer beam Creek area of food science and Technology Park

Patentee after: Jiangnan University

Address before: Food College of Jiangnan University No. 1800 Li Lake Avenue 214122 in Jiangsu province Wuxi City Binhu District

Patentee before: Jiangnan University

CP02 Change in the address of a patent holder