CN104262428A - 一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷a的方法 - Google Patents

一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷a的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104262428A
CN104262428A CN201410551259.5A CN201410551259A CN104262428A CN 104262428 A CN104262428 A CN 104262428A CN 201410551259 A CN201410551259 A CN 201410551259A CN 104262428 A CN104262428 A CN 104262428A
Authority
CN
China
Prior art keywords
stage
rebaudioside
extraction
separation
liquid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201410551259.5A
Other languages
English (en)
Inventor
陈少云
余祖兵
周建海
冒小云
顾和英
顾丹彤
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
NANTONG HAITIAN BIOTECHNOLOGY Co Ltd
Original Assignee
NANTONG HAITIAN BIOTECHNOLOGY Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by NANTONG HAITIAN BIOTECHNOLOGY Co Ltd filed Critical NANTONG HAITIAN BIOTECHNOLOGY Co Ltd
Priority to CN201410551259.5A priority Critical patent/CN104262428A/zh
Publication of CN104262428A publication Critical patent/CN104262428A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
    • C07H15/256—Polyterpene radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C07H1/06—Separation; Purification
    • C07H1/08—Separation; Purification from natural products

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Extraction Or Liquid Replacement (AREA)

Abstract

本发明公开了一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷A的方法，包括准备提取溶剂准备阶段、混合阶段、升温提取阶段、过滤离心阶段、大孔树脂吸附分离阶段、分子膜分离阶段、浓缩阶段、放置阶段、固液分离阶段、溶剂漂洗阶段、二次固液分离以及干燥，其中分子膜分离阶段是将解吸液用分子膜分离，HPLC跟踪分析，将含有莱鲍迪苷A的溶液合并收集。通过本发明的提取方法能使提取的莱鲍迪苷A纯度达到97%以上，且该方法工艺路线简单，对设备要求不高，而且具有低能耗、高产出、莱鲍迪苷A纯度稳定、彻底去除后苦味等优点，适合工业化生产的优点。

Description

一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷A的方法
 
技术领域
本发明属于生物提取技术领域，具体涉及一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷A的方法。
背景技术
甜菊糖苷是从甜菊叶中提取分离得到的一种高甜度低热能、味质好、且安全无毒的天然低热糖源，其甜度为蔗糖的150～300倍，可以替代糖精或蔗糖，应用于各种食品、饮料中。甜菊糖苷还可以防止糖尿病、肥胖症及小儿龋齿等疾病，是患者的理想甜味剂。但甜菊糖的苦味一直影响它的推广和运用，日本和韩国采用转移酶和水解酶化的方法来改变甜菊糖的后苦味；不足的是带来的副作用往往是甜度倍数下降，成本增高。同样造成应用上的困难。但随着天然甜味剂市场需求的逐步增大，越来越多的企业开始关注研究和解决甜菊的后苦味，人们试图提炼精致高纯度的莱鲍迪苷A的甜菊产品，去掉口感不好的成分甜菊双甙和杜克甙，这样甜度可高达350-400倍，同时除掉了甜菊的后苦味。目前韩国、马来西亚、美国、中国等的一些企业都可以将莱鲍迪苷A提纯到80%以上，但由于各自工艺和方法的差异，普遍存在转化率低，成本高，有效成分控制不稳定等弊端。
发明内容
发明目的：本发明针对现有技术中工艺复杂、提取纯度低的不足，提出一种工艺简单、成本低以及纯度高的从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷A的方法。
技术方案：本发明所述的一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷A的方法，包括如下步骤：
（1）准备提取溶剂准备阶段；
（2）混合阶段：将甜菊叶与上述提取溶剂按质体比1：10～20混合；
（3）升温提取阶段：将上述混合物加热升温至80～90℃，并保温1.5-2.0小时；
（4）过滤离心阶段：将提取混合物先通过目数为300目的布袋过滤器，再通过转速为4000转\分钟的碟片离心机，离心至澄清，冷却至40℃以下；
（5）大孔树脂吸附分离阶段：将冷却后的提取过滤澄清液上大孔吸附树脂吸附，水洗后再用50%-80%乙醇解吸；
（6）分子膜分离阶段：将上述解吸液用分子膜分离，HPLC跟踪分析，将含有莱鲍迪苷A纯度达85%以上的溶液合并收集；
（7）浓缩阶段：将收集液用刮板浓缩器减压浓缩至比重为1.1～1.5；
（8）放置阶段：将浓缩液在40℃以下的温度放置12-24小时，莱鲍迪苷A充分析出；
（9）固液分离阶段：用离心或板框压滤的方法进行固液分离，过滤滤材孔径大于400目；
（10）溶剂漂洗阶段：将分离的固体物用95%-100%的乙醇水溶液，按固体物质量的2-4倍进行漂洗15-30分钟；
（11）二次固液分离：用离心或板框压滤的方法进行再次固液分离，过滤滤材孔径大于400目；
（12）干燥：将分离的固形物用烘干或喷雾干燥的方法进行干燥。
作为优化，步骤（1）所述提取溶剂为乙醇与水的混合物。
进一步的优化，所述提取溶剂为乙醇与水按照溶剂的比例按1：10～100%混合。
作为优化，步骤（6）所述分子膜为组合膜，具体是1000-5000分子量卷式超滤膜、100-600分子量卷式纳滤膜，HPLC跟踪分析膜滤液中莱鲍迪苷A的纯度。
有益效果：通过本发明的提取方法能使提取的莱鲍迪苷A纯度达到97%以上，且该方法工艺路线简单，对设备要求不高，而且具有低能耗、高产出、莱鲍迪苷A纯度稳定、彻底去除后苦味等优点，适合工业化生产的优点。
附图说明
图1为实施例1中的莱鲍迪苷A 对照品溶液HPLC图谱及分析表；
图2为实施例1中的莱鲍迪苷A膜滤液HPLC图谱及分析表；
图3为实施例1中的莱鲍迪苷A 样品溶液HPLC图谱及分析表；
图4为实施例2中的莱鲍迪苷A 对照品溶液HPLC图谱及分析表；
图5为实施例2中的莱鲍迪苷A膜滤液HPLC图谱及分析表；
图6为实施例2中的莱鲍迪苷A 样品溶液HPLC图谱及分析表；
图7为实施例3中的莱鲍迪苷A 对照品溶液HPLC图谱及分析表；
图8为实施例3中的莱鲍迪苷A膜滤液HPLC图谱及分析表；
图9为实施例3中的莱鲍迪苷A 样品溶液HPLC图谱及分析表。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明：
实施例1
一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷A的方法，包括如下步骤：
（1）提取溶剂准备阶段：乙醇与水的比例为20%；
（2）混合阶段：甜菊叶与乙醇混合溶剂按质体比1：15；
（3）升温提取阶段：上述混合物加热升温至85℃，并保温1.5小时；
（4）过滤离心阶段：提取混合物先通过目数为300目的布袋过滤器，再通过转速为4000转\分钟的碟片离心机，离心至澄清，冷却至40℃以下； 
（5）大孔树脂吸附分离阶段：冷却后的提取过滤澄清液上大孔吸附树脂吸附，水洗后，用65%乙醇解吸；
（6）分子膜分离阶段：解吸液用分子膜分离，HPLC跟踪分析，将含有莱鲍迪苷A纯度达85%以上的溶液合并收集；
（7）浓缩阶段：收集液用刮板浓缩器减压浓缩至比重为1.25；
（8）放置阶段：浓缩液在40℃以下的温度放置15小时，莱鲍迪苷A充分析出；
（9）固液分离阶段：用离心方法进行固液分离，滤材孔径450目；
（10）漂洗提纯阶段：将分离的固体物用95%的乙醇水溶液，按固体物质量的3倍进行漂洗20分钟；
（11）二次固液分离：过滤滤材孔径450目；
（12）干燥：将分离的固形物用烘干的方法干燥。
通过上述提取工艺，经HPLC的检测最终的纯度高于97%，具体分析图谱及分析结果见附图1-3。
实施例2
一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷A的方法，包括如下步骤：
 （1）提取溶剂准备阶段：乙醇与水的比例为80%；
 （2）混合阶段：甜菊叶与乙醇混合溶剂按质体比1：20；
 （3）升温提取阶段：上述混合物加热升温至90℃，并保温2小时；
 （4）过滤离心阶段：提取混合物先通过目数为300目的布袋过滤器，再通过转速为4000转\分钟的碟片离心机，离心至澄清，冷却至40℃以下； 
 （5）大孔树脂吸附分离阶段：冷却后的提取过滤澄清液上大孔吸附树脂吸附，水洗后，用75%乙醇解吸；
 （6）分子膜分离阶段：解吸液用分子膜分离，HPLC跟踪分析，将含有莱鲍迪苷A纯度达85%以上的溶液合并收集；
 （7）浓缩阶段：收集液用刮板浓缩器减压浓缩至比重为1.35；
 （8）放置阶段：浓缩液在40℃以下的温度放置20小时，莱鲍迪苷A充分析出；
 （9）固液分离阶段：用离心方法进行固液分离，滤材孔径450目；
 （10）漂洗提纯阶段：将分离的固体物用100%的乙醇，按固体物质量的3倍进行漂洗30分钟；
 （11）二次固液分离：过滤滤材孔径450目；
 （12）干燥：将分离的固形物用喷雾干燥的方法干燥。
通过上述提取工艺，经HPLC的检测最终的纯度高于97%，具体分析图谱及分析结果见附图4-6。
实施例3
一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷A的方法，包括如下步骤：
 （1）提取溶剂准备阶段：乙醇与水的比例为60%；
 （2）混合阶段：甜菊叶与乙醇混合溶剂按质体比1：18；
 （3）升温提取阶段：上述混合物加热升温至90℃，并保温2小时；
 （4）过滤离心阶段：提取混合物先通过目数为300目的布袋过滤器，再通过转速为4000转\分钟的碟片离心机，离心至澄清，冷却至40℃以下； 
 （5）大孔树脂吸附分离阶段：冷却后的提取过滤澄清液上大孔吸附树脂吸附，水洗后，用80%乙醇解吸；
 （6）分子膜分离阶段：解吸液用分子膜分离，HPLC跟踪分析，将含有莱鲍迪苷A纯度达85%以上的溶液合并收集；
 （7）浓缩阶段：收集液用刮板浓缩器减压浓缩至比重为1.40；
 （8）放置阶段：浓缩液在40℃以下的温度放置22小时，莱鲍迪苷A充分析出；
 （9）固液分离阶段：用离心方法进行固液分离，滤材孔径450目；
 （10）漂洗提纯阶段：将分离的固体物用100%的乙醇，按固体物质量的3倍进行漂洗30分钟；
 （11）二次固液分离：过滤滤材孔径450目；
 （12）干燥：将分离的固形物用喷雾干燥的方法干燥。
通过上述提取工艺，经HPLC的检测最终的纯度高于97%，具体分析图谱及分析结果见附图7-9。

Claims (4)

1. 一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷A的方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）准备提取溶剂准备阶段；
（2）混合阶段：将甜菊叶与上述提取溶剂按质体比1：10～20混合；
（3）升温提取阶段：将上述混合物加热升温至80～90℃，并保温1.5-2.0小时；
（4）过滤离心阶段：将提取混合物先通过目数为300目的布袋过滤器，再通过转速为4000转\分钟的碟片离心机，离心至澄清，冷却至40℃以下；
（5）大孔树脂吸附分离阶段：将冷却后的提取过滤澄清液上大孔吸附树脂吸附，水洗后再用50%-80%乙醇解吸；
（6）分子膜分离阶段：将上述解吸液用分子膜分离，HPLC跟踪分析，将含有莱鲍迪苷A纯度达85%以上的溶液合并收集；
（7）浓缩阶段：将收集液用刮板浓缩器减压浓缩至比重为1.1～1.5；
（8）放置阶段：将浓缩液在40℃以下的温度放置12-24小时，莱鲍迪苷A充分析出；
（9）固液分离阶段：用离心或板框压滤的方法进行固液分离，过滤滤材孔径大于400目；
（10）溶剂漂洗阶段：将分离的固体物用95%-100%的乙醇水溶液，按固体物质量的2-4倍进行漂洗15-30分钟；
（11）二次固液分离：用离心或板框压滤的方法进行再次固液分离，过滤滤材孔径大于400目；
（12）干燥：将分离的固形物用烘干或喷雾干燥的方法进行干燥。
2.根据权利要求1所述的一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷A的方法，其特征在于：步骤（1）所述提取溶剂为乙醇与水的混合物。
3.根据权利要求1或2所述的一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷A的方法，其特征在于：所述提取溶剂为乙醇与水按照溶剂的比例按1：10～100%混合。
4.根据权利要求1所述的一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷A的方法，其特征在于：步骤（6）所述分子膜为组合膜，具体是1000-5000分子量卷式超滤膜、100-600分子量卷式纳滤膜，HPLC跟踪分析膜滤液中莱鲍迪苷A的纯度。
CN201410551259.5A 2014-10-17 2014-10-17 一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷a的方法 Pending CN104262428A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410551259.5A CN104262428A (zh) 2014-10-17 2014-10-17 一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷a的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410551259.5A CN104262428A (zh) 2014-10-17 2014-10-17 一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷a的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN104262428A true CN104262428A (zh) 2015-01-07

Family

ID=52154036

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410551259.5A Pending CN104262428A (zh) 2014-10-17 2014-10-17 一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷a的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104262428A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107474086A (zh) * 2016-06-07 2017-12-15 上海达盛食品有限公司 提取甜菊糖的工艺

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101062077A (zh) * 2007-06-18 2007-10-31 石任兵 一种同时制备甜叶菊总甜菊苷和甜叶菊总黄酮的方法
CN101117345A (zh) * 2007-08-29 2008-02-06 南京九思高科技有限公司 一种甜菊糖甙的提取方法
CN101367852A (zh) * 2008-09-09 2009-02-18 王德骥 一种甜菊叶中高效连续提取甜菊糖苷的方法
CN101817854A (zh) * 2010-04-09 2010-09-01 宋英海 利用大孔树脂制备高ra甜菊糖甙的方法
CN102199178A (zh) * 2011-04-10 2011-09-28 胡玮 莱鲍迪糖苷ra的提取工艺
CN103059078A (zh) * 2012-12-17 2013-04-24 山东圣旺药业股份有限公司 一种从甜菊糖中提取99%含量莱鲍迪苷a的方法
EP2742983A1 (en) * 2012-12-11 2014-06-18 Symrise AG Method for isolating fragrance and flavour compounds

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101062077A (zh) * 2007-06-18 2007-10-31 石任兵 一种同时制备甜叶菊总甜菊苷和甜叶菊总黄酮的方法
CN101117345A (zh) * 2007-08-29 2008-02-06 南京九思高科技有限公司 一种甜菊糖甙的提取方法
CN101367852A (zh) * 2008-09-09 2009-02-18 王德骥 一种甜菊叶中高效连续提取甜菊糖苷的方法
CN101817854A (zh) * 2010-04-09 2010-09-01 宋英海 利用大孔树脂制备高ra甜菊糖甙的方法
CN102199178A (zh) * 2011-04-10 2011-09-28 胡玮 莱鲍迪糖苷ra的提取工艺
EP2742983A1 (en) * 2012-12-11 2014-06-18 Symrise AG Method for isolating fragrance and flavour compounds
CN103059078A (zh) * 2012-12-17 2013-04-24 山东圣旺药业股份有限公司 一种从甜菊糖中提取99%含量莱鲍迪苷a的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
WEA-SHANG FUH，等: "Purification of Steviosides by Membrane and Ion Exchange Processes", 《JOURNAL OF FOOD SCIENCE》 *
凌立新，等: "甜叶菊中甜菊素提取工艺研究", 《食品工业科技》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107474086A (zh) * 2016-06-07 2017-12-15 上海达盛食品有限公司 提取甜菊糖的工艺

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10743573B2 (en) Method for extracting high-purity mogroside V from Siraitia grosvenorii
CN108516997B (zh) 一种从甜茶叶中提取甜茶苷的方法
CN101633676B (zh) 用工业色谱分离技术制备高纯水苏糖的方法
CN101671378B (zh) 一种利用真空低温提取分离甜菊糖苷的方法
CN101112458B (zh) 甜茶有效成份的提取方法
CN109674843B (zh) 一种干罗汉果综合利用的提取纯化方法
CN102702284A (zh) 高纯度甜茶苷的生产工艺
CN106866759B (zh) 从罗汉果甜甙脱色树脂柱排出的废液中生产罗汉果黄酮的工艺
CN105061526A (zh) 一种高纯度甜茶苷的提取方法
WO2018028144A1 (zh) 一种高纯度罗汉果苷v的分离纯化方法
CN109535209B (zh) 一种从甜叶菊中提取纯化甜菊糖甙的工艺方法
CN109180755A (zh) 一种从甜茶叶中提取甜茶苷的方法
CN113512081A (zh) 一种从木姜叶柯叶子中分离出三叶苷和根皮苷的方法
CN113637038B (zh) 一种从甜茶叶中提取无苦涩味甜茶苷和甜茶多酚的方法
CN103442591A (zh) 增强的天然甜味剂以及制备方法
AU2017416080B2 (en) Method for preparing betanin
CN110917240B (zh) 一种从青钱柳中分离多种有效成分的连续化方法
CN104262428A (zh) 一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷a的方法
CN103059078A (zh) 一种从甜菊糖中提取99%含量莱鲍迪苷a的方法
CN104876982A (zh) 一种从甜菊叶中分离甜菊苷(Stevioside)的工艺
CN110590876B (zh) 一种高纯甜菊糖苷及其制备方法
CN102146106A (zh) 一种95%含量莱鲍迪苷a的提取方法
CN108014176B (zh) 一种番石榴叶三萜类化合物的提纯方法
CN112106989A (zh) 一种甘薯茎叶多酚及其提取方法
CN102146105A (zh) 一种生产高纯度莱鲍迪苷a的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20170120

Address after: 226000 development zones in Jiangsu province Nantong City Star Building Room 0802

Applicant after: NANTONG ZICHEN HOME TEXTILE CO., LTD.

Address before: The east town of Tongzhou District city of Nantong province Jiangsu 226344 Tang Village fifteen groups

Applicant before: NANTONG HAITIAN BIOTECHNOLOGY CO., LTD.

AD01 Patent right deemed abandoned
AD01 Patent right deemed abandoned

Effective date of abandoning: 20170901