CN104207975B - 一种具有驱蚊抑菌功效的香水及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种具有驱蚊抑菌功效的香水及其制备方法。该香水包含如下成分：剩油母液20～25％、基础精油5～8％、精油乳化剂0.75～1.25％。本发明通过将剩油母液、基础精油、精油乳化剂和无水乙醇混合均匀，密封，于20～30℃避光保存后转移至2～8℃避光保存；接着过滤，滤液为具有驱蚊抑菌功效的香水。该香水色泽清亮，香味和谐，保留了梅片树挥发油特有的清凉气味，留香时间可达3～5天，同时具有很好的驱蚊、消炎抑菌以及抗氧化等功效，安全无毒，不添加任何色素，不污染衣物，市场开发前景较为广阔。本发明属于废物利用，不仅有益于保护环境，而且进一步扩大了梅片树的经济价值。
Description
技术领域
本发明属于化妆品领域，特别涉及一种具有驱蚊抑菌功效的香水及其制备方法。
背景技术
从梅片树叶中提取天然右旋龙脑的方法，通常采用水蒸气法，得到挥发油。接着将挥发油进行重结晶，过滤，结晶体为天然右旋龙脑，滤液为剩油。将剩油进一步利用，可进一步扩大梅片树的经济效益。目前有公告号为CN 102429848A、名称为“一种右旋龙脑香水“的国家发明专利报道了采用添加右旋龙脑配制的香水具有清凉独特，醒神开窍，具有一定的抗氧化性和抑菌性效果。然而，由于剩油除含有右旋龙脑外，还含有桉树脑、α-薰衣草棉多达30多种烯烃类小分子物质，这些成分综合起来具有良好的驱蚊功效和更好的抗氧化性和抑菌性，目前尚无对剩油重复利用的报道。
发明内容
本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种具有驱蚊抑菌功效的香水。
本发明的另一目的在于提供所述具有驱蚊抑菌功效的香水的制备方法。
本发明的目的通过下述技术方案实现：一种具有驱蚊抑菌功效的香水，包含如下按体积百分比计的成分：剩油母液20～25％、基础精油5～8％、精油乳化剂0.75～1.25％；
所述的具有驱蚊抑菌功效的香水还包含无水乙醇，无水乙醇为余量；
所述的剩油母液是从梅片树叶提取天然右旋龙脑得到的剩油，优选为通过水蒸气法从梅片树叶提取天然右旋龙脑得到的剩油；
所述的剩油母液含有10.5～14.5％的天然右旋龙脑；
所述的剩油母液优选为通过如下方法制备得到：将梅片树叶蒸馏得到的粗油进行冷冻结晶，再进行离心分离、过滤，得到的清液为剩油母液；
所述的冷冻结晶的时间优选为2～2.5h；
所述的基础精油为玫瑰精油、山苍子精油、荷荷巴油、甜杏仁油、葡萄籽油和橄榄油等等；
所述的基础精油优选为玫瑰精油和山苍子精油按体积比1:1混合得到；
所述的具有驱蚊抑菌功效的香水的制备方法，包含如下步骤：
(1)将剩油母液、基础精油、精油乳化剂和无水乙醇混合均匀，密封，于20～30℃避光保存；
(2)接着，转移至2～8℃避光保存；
(3)再过滤，滤液为具有驱蚊抑菌功效的香水；
其中，各种原料的含量如下：剩油母液20～25％、基础精油5～8％、精油乳化剂0.75～1.25％、无水乙醇余量；
步骤(1)中所述的避光保存的温度优选为25℃；
步骤(1)中所述的避光保存的时间优选为10～20天；更优选为15天；
步骤(1)中所述的避光保存的期间要不间断摇晃，使得剩油母液、基础精油、精油乳化剂和无水乙醇混合得更好；优选为每隔24小时摇晃一次；
步骤(2)中所述的避光保存的温度优选为4℃；
步骤(2)中所述的避光保存的时间优选为超过40天；更优选为60～100天；
步骤(3)中所述的过滤优选采用真空抽滤，滤材优选采用PTFE滤材(孔径≤50微米)。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
(1)本发明以梅片树挥发油经重结晶过滤后的那部分油(剩油)为主要成分，结合基础精油、精油乳化剂和无水乙醇制备成具有驱蚊抑菌功效的香水，所得产品色泽清亮，香味和谐，保留了梅片树挥发油特有的清凉气味，留香时间可达3～5天，同时具有很好的驱蚊、消炎抑菌以及抗氧化等功效。产品安全无毒，不添加任何色素，不污染衣物，市场开发前景较为广阔。
(2)本发明属于废物利用，不仅有益于保护环境，而且进一步扩大了梅片树的经济价值。
附图说明
图1是实施例1制备的香水对自由基清除作用曲线图。
图2是实施例1制备的香水抗脂质氧化的结果图。
具体实施方式
下面结合实施例和附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1
(1)剩油母液的制备：将梅片树叶蒸馏得到的粗油(按文献“A new source ofnatural D-borneol and its characteristic.Journal of Medicinal Plants Research,2012,5(15):3440-3447”制备)在0～-5℃冷冻结晶2～2.5h，再进行离心分离、过滤，得到的清液为剩油母液。经大量实验测试，剩油母液里面的右旋龙脑含量为10.5％～14.5％，此外还含有桉树脑、α-薰衣草棉以及30多种烯烃类小分子物质。
本发明中所用的剩油母液通过如下步骤制备得到：将梅片树叶蒸馏得到的粗油在-5℃冷冻结晶2h，10000rpm离心30min，使用孔径为50μm的滤膜进行过滤，得到的清液为剩油母液。该剩油母液用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)(Agilent6890N/5975)方法测试，含有约13.1％的天然右旋龙脑、25.2％的桉树脑、26.8％的α-薰衣草棉以及30多种烯烃类小分子物质。
(2)香水的制备：将剩油母液、基础精油、精油乳化剂和无水乙醇混合均匀，然后装入棕色玻璃瓶内，加盖密封，在25℃暗室中避光放置15天，在此期间每天摇晃1次，再用黑布包裹，在4℃冰箱中放置60天，取出真空抽滤，滤液即为具有驱蚊抑菌功效的香水。将该香水装入密封玻璃瓶中，常温避光保存。
其中，剩油母液23mL、基础精油(玫瑰精油和山苍子精油按照体积1:1比例混合制成)6mL、精油乳化剂(天然精油乳化剂，上海摩也实业发展有限公司生产)1mL、无水乙醇70mL。
(3)检测：
1)感官测评：随机安排20名测试者对不同配方配制的香水分别按香水风味、香水颜色和留香时间进行评价，为香水打分(总分30分)，评分标准见表1。
表1 所配制香水感官测评项目及评分标准
本实施例制备的香水风味得分9.3分，香水颜色得分9.7分，留香时间得分9.2分，总计28.2分。受试者可以明显感受到剩油特殊的清凉香味，剩油味道不会过于突出而影响香水整体效果，香水味道和谐自然，色泽清凉透明，喷洒到衣物上无任何污染，留香时间长达3～5天；香水色泽清凉。
2)抗氧化性实验：
①二苯代苦味肼基自由基法(DPPH法)
A、配制样品反应体系溶液：取8个试管，按照表2依次加入1.0mL 2×10-4mol/L的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼溶液(DPPH溶液)和不同体积的具有驱蚊抑菌功效的香水，用体积分数为95％的乙醇水溶液定容至3.0mL。
表2 用DPPH法测定具有驱蚊抑菌功效的香水抗氧化性试剂配比表
B、配制标准反应体系溶液：取1.0mL 2×10-4mol/L的DPPH溶液和2.0mL体积分数为95％的乙醇水溶液混合，最终体积达到3.0mL。
C、配制对照样品维生素E溶液：将步骤A中配制样品反应体系溶液的香水分别用等体积的维生素E溶液(将1.0g维生素E用体积分数为95％的乙醇水溶液溶解后定容至100mL配制而成)替换，其他原料及其加入量与样品反应体系溶液配制相同。
将上述3种溶液充分震荡，静置30分钟，用紫外-可见分光光度计在517nm处测定吸光值，按照下述公式计算其抑制率，即得所配制香水清除自由基的能力。
抑制率＝[(A标准-A样品)/A标准]×100％
式中A标准表示标准反应体系溶液的吸光值，A样品表示样品反应体系溶液或对照样品维生素E溶液的吸光值。实验结果如图1所示，样品反应体系溶液清除自由基的能力随着溶液中香水浓度的升高而增强，整体呈线性关系，其自由基抑制率为65.5％～77.3％，说明所配制香水具有很强的清除自由基的能力。
②脂质过氧化法
A、配制样品反应体系溶液：取8个试管，按照表3顺序依次加入0.8mL大豆卵磷脂缓冲液(0.03g大豆卵磷脂溶于100mL pH7.4、0.1mol/L磷酸钠缓冲液中配制而成)，不同体积的所配制香水，不同体积的pH7.4、0.1mol/L磷酸钠缓冲液和0.2mL FeSO4-Vc溶液(0.141g FeSO4和0.152g Vc溶于10mL蒸馏水中配制而成)，最终的溶液体积为3.0mL。
表3 用脂质过氧化法测定所配制香水的抗氧化性的试剂配制表
B、配制标准反应体系溶液：将0.8mL大豆卵磷脂缓冲液，2.0mL磷酸盐缓冲液和0.2mL FeSO4-Vc溶液混合，最终的溶液体积为3.0mL。
C、配制对照样品维生素E溶液：将步骤A中配制样品反应体系的香水分别用等体积的维生素E溶液(将1.0g维生素E用蔗糖脂肪酸脂溶解后定容至100mL配制而成)替换，其它原料及其加入量与样品反应体系溶液配制相同。
将上述3种溶液分别在98℃水浴中加热15分钟，取出，冷却，离心分离，取上层清液，置于可见分度光度计中，在532nm处测定吸光度值，按照步骤2)①计算其抑制率。实验结果如图2所示，所配制香水具有较强的抗脂质过氧化作用。在试验浓度范围内，样品反应体系溶液的抗氧化能力随溶液中香水浓度的降低而减小，脂质过氧化的抑制率为40.1～61.3％，说明所配制香水具有较好的抑制脂质过氧化能力。
3)所配制香水的抑菌性实验
①制备供试菌种悬液
将金黄色葡萄球菌ATCC29213(北京北纳凯创生物技术有限公司)、大肠杆菌ATCC25922(北京北纳凯创生物技术有限公司)、黑曲霉菌CPCC 800010(北京北纳凯创生物技术有限公司)、青霉菌ACCC30287(北京北纳凯创生物技术有限公司)和酿酒酵母CICC 1912(中国工业微生物菌种保藏管理中心)5种供试菌种分别进行活化：
A、将金黄色葡萄球菌ATCC29213按体积百分比1％的接种量接种到LB培养基，于37℃、150rpm培养12h。
B、将大肠杆菌ATCC25922按体积百分比1％的接种量接种到LB培养基，于37℃、180rpm培养12h。
C、将黑曲霉菌CPCC 800010按体积百分比1％的接种量接种到马铃薯葡萄糖肉汤培养基(PDB)，于37℃、180rpm培养24h。
D、将青霉菌ACCC30287按体积百分比1％的接种量接种到马铃薯葡萄糖肉汤培养基(PDB)，于28℃、180rpm培养42h。
E、将酿酒酵母CICC 1912按体积百分比1％的接种量接种到MEA培养基(麦芽浸膏30g，大豆蛋白胨3g，蒸馏水定容至1L，pH5.4～5.8)，于30℃、200rpm培养2h。
取已经活化的上述菌种分别置于装有9mL无菌蒸馏水的试管中，充分混合，制成菌悬液。用无菌吸管取1.0mL菌悬液于装有9.0mL无菌蒸馏水的试管中，依次进行稀释，分别配制成孢子浓度为106～107个/mL的供试菌种菌悬液，其中金黄色球菌、大肠杆菌计数采用平板计数法，黑曲霉菌、青霉菌和酿酒酵母采用显微镜直接计数法测定。
②测定抑菌圈直径
将直径为6mm的滤纸于热灭菌后放入所配制香水中浸泡2小时。取各种供试菌种菌悬液各0.2mL均匀涂布于相应的固体培养基上【金黄色葡萄球菌和大肠杆菌采用MH琼脂培养基(MHA)，黑曲霉菌和青霉菌采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)，酿酒酵母采用MEA培养基(麦芽浸膏30g，大豆蛋白胨3g，琼脂15g，蒸馏水定容至1L，pH5.4～5.8)】。在无菌条件下用无菌镊子将在香水中浸泡后的滤纸贴在涂布供试菌种菌悬液的固体培养基上，每个培养皿贴3片，同时取经干热灭菌后的无菌滤纸作为空白对照。然后将涂布金黄色葡萄球菌和大肠杆菌菌悬液的固体培养基置于37℃培养24小时，涂布黑曲霉菌、青霉菌和酿酒酵母菌悬液的固体培养基置于28℃培养48小时。取出平板，用游标卡尺测量抑菌圈直径，实验重复三次，测定结果见表4。
表4 为所配制香水对供试菌种的抑菌效果
按照抑菌圈评价抑菌效果，抗菌素的抑菌圈判断标准为：抑菌圈直径＞15mm时为最敏感性。10～15mm时为中度敏感型，7～9mm时为低度敏感型，无抑菌效果者为不敏感型。由表4可见，金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌圈直径均在15mm以上，属于最敏感型，青霉菌和酿酒酵母属于中度敏感型，黑曲霉菌属于低定度敏感型，说明所配制香水对供试的5种菌种都有一定的抑制作用，且对金黄色葡萄球菌的抑制作用最好，其次是大肠杆菌、酿酒酵母、青霉菌，对黑曲霉菌抑制效果最差。
4)所配制香水急性毒理性实验
先将香水配成10.0、12.5、15.0、17.5、20.0g/kg·bw5个剂量组溶液，选用120只SD大鼠(SPF级，由广东省医学实验动物中心提供，实验动物质量合格证明编号：44007200007929)雌雄各半，体重18～22g，随机分为6组，分别用所配制的溶液对各组SD大鼠进行灌胃，容量为20.0mL/kg·bw，并用蒸馏水灌胃作为对照，在同一条件下分笼饲养，喂养相同饲料，观察15天，记录所有SD大鼠的活动及其死亡情况。按表5评价急性毒性强弱，实验结果见表6。
表5 化合物经口急性毒性分级标准
注：本表为我国《食品安全性毒理学评价程序和方法》(GB15193.3-94)颁布的急性毒性(LD50)剂量分级标准。
表6 所配制香水SD大鼠急性毒理学实验结果
由表6结果看出所配制香水的剂量在17.5g/kg·bw以下时，SD大鼠可以行动自如，未见中毒反应及死亡现象；当香水剂量到20g/kg·bw时，SD大鼠出现中毒现象，并有少量死亡。结合表5急性毒性分级标准得出，所配制香水最大耐受剂量为17.5g/kg·bw，属于无毒级别。
5)所配香水的驱蚊有效性实验
将按最佳配方配制香水进行驱蚊检测。在装设有可移动窗口的密封透明的玻璃容器AB中随机各放入100只蚊子(实验用致倦库蚊用自制捕蚊器野外采集，由广东省疾病预防控制中心消毒与病媒生物预防控制所鉴定后进行繁殖得到)，然后将5μL清水滴到手背上，伸进A，观察一分钟内手背上落的蚊子数。再将5μL所配制的香水滴到手背上，伸进B中，观察一分钟内手背上落的蚊子数，重复试验三次。实验结果见表7。
表7 所配制香水的驱蚊有效性实验
由表7看出，A中手背上落有36只蚊子，设其驱蚊率为0，而B中手背只有10只蚊子，其相对驱蚊率为72.22％，说该香水具有良好的驱蚊效果。
实施例2
(1)具有驱蚊抑菌功效的香水的制备与实施例1同，区别仅在于香水的配方不同，具体如下：剩油母液(同实施例1)20mL、基础精油(玫瑰精油和山苍子精油按照体积1:1比例混合制成)5mL、精油乳化剂(天然精油乳化剂，上海摩也实业发展有限公司生产)0.75mL、无水乙醇74.25mL。
(2)检测：同实施例1，检测结果与实施例1基本相同，香水香味和谐，色泽清亮，保留了梅片树挥发油特有的清凉气味，留香时间可达3～5天，同时具有很好的驱蚊、消炎抑菌以及抗氧化等功效；产品安全无毒，不添加任何色素，不污染衣物。
实施例3
(1)具有驱蚊抑菌功效的香水的制备与实施例1同，区别仅在于香水的配方不同，具体如下：剩油母液(同实施例1)25mL、基础精油(玫瑰精油和山苍子精油按照体积1:1比例混合制成)8mL、精油乳化剂(天然精油乳化剂，上海摩也实业发展有限公司生产)1.25mL、无水乙醇65.75mL。
(2)检测：同实施例1，检测结果与实施例1基本相同，香水香味和谐，色泽清亮，保留了梅片树挥发油特有的清凉气味，留香时间可达3～5天，同时具有很好的驱蚊、消炎抑菌以及抗氧化等功效；产品安全无毒，不添加任何色素，不污染衣物。
实施例4
(1)具有驱蚊抑菌功效的香水的制备与实施例1同，区别仅在于香水的配方不同，具体如下：剩油母液(同实施例1)20mL、基础精油(玫瑰精油和山苍子精油按照体积1:1比例混合制成)8mL、精油乳化剂(天然精油乳化剂，上海摩也实业发展有限公司生产)0.75mL、无水乙醇71.25mL。
(2)检测：同实施例1，检测结果与实施例1基本相同，香水香味和谐，色泽清亮，保留了梅片树挥发油特有的清凉气味，留香时间可达3～5天，同时具有很好的驱蚊、消炎抑菌以及抗氧化等功效；产品安全无毒，不添加任何色素，不污染衣物。
实施例5
(1)具有驱蚊抑菌功效的香水的制备与实施例1同，区别仅在于香水的配方不同，具体如下：剩油母液(同实施例1)25mL、基础精油(玫瑰精油和山苍子精油按照体积1:1比例混合制成)5mL、精油乳化剂(天然精油乳化剂，上海摩也实业发展有限公司生产)1.25mL、无水乙醇68.75mL。
(2)检测：同实施例1，检测结果与实施例1基本相同，香水香味和谐，色泽清亮，保留了梅片树挥发油特有的清凉气味，留香时间可达3～5天，同时具有很好的驱蚊、消炎抑菌以及抗氧化等功效；产品安全无毒，不添加任何色素，不污染衣物。
对比例1
(1)香水的制备与实施例1同，区别仅在于香水的配方不同，具体如下：剩油母液(同实施例1)30mL、基础精油(玫瑰精油和山苍子精油按照体积1:1比例混合制成)15mL、精油乳化剂(天然精油乳化剂，上海摩也实业发展有限公司生产)1.25mL、无水乙醇53.75mL。
(2)检测：香水气味浓烈刺鼻，令人难以接受；剩油母液和基础精油的溶解性不好，香水出现浑浊。
对比例2
(1)香水的制备与实施例1同，区别仅在于香水的配方不同，具体如下：剩油母液(同实施例1)10mL、基础精油(玫瑰精油和山苍子精油按照体积1:1比例混合制成)5mL、精油乳化剂(天然精油乳化剂，上海摩也实业发展有限公司生产)0.75mL、无水乙醇84.25mL。
(2)检测：香味淡，有酒精味儿，且挥发性增强，留香时间大大缩短。
对比例3
(1)香水的制备与实施例1同，区别仅在于制备过程中在4℃冰箱中放置的时间为40天。
(2)检测：香水风味得分6.6分，香水颜色得分7.8分，留香时间得分9分，总计23.4分。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种具有驱蚊抑菌功效的香水，其特征在于由如下按体积百分比计的成分组成：剩油母液20～25％、基础精油5～8％、精油乳化剂0.75～1.25％、无水乙醇余量；
所述的剩油母液是通过水蒸气法从梅片树叶提取天然右旋龙脑得到的剩油；
所述的剩油母液含有10.5～14.5％的天然右旋龙脑。
2.根据权利要求1所述的具有驱蚊抑菌功效的香水，其特征在于：所述的剩油母液为通过如下方法制备得到：将梅片树叶蒸馏得到的粗油进行冷冻结晶，再进行离心分离、过滤，得到的清液为剩油母液。
3.根据权利要求1所述的具有驱蚊抑菌功效的香水，其特征在于：所述的基础精油为玫瑰精油、山苍子精油、荷荷巴油、甜杏仁油、葡萄籽油和橄榄油中的至少一种。
4.根据权利要求3所述的具有驱蚊抑菌功效的香水，其特征在于：所述的基础精油为玫瑰精油和山苍子精油按体积比1:1混合得到。
5.权利要求1～4任一项所述的具有驱蚊抑菌功效的香水的制备方法，其特征在于包含如下步骤：
(1)将剩油母液、基础精油、精油乳化剂和无水乙醇混合均匀，密封，于20～30℃避光保存；
(2)接着，转移至2～8℃避光保存；
(3)再过滤，滤液为具有驱蚊抑菌功效的香水；
其中，各种原料的含量如下：剩油母液20～25％、基础精油5～8％、精油乳化剂0.75～1.25％、无水乙醇余量。
6.根据权利要求5所述的具有驱蚊抑菌功效的香水的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的避光保存的温度为25℃；
步骤(1)中所述的避光保存的时间为10～20天；
步骤(2)中所述的避光保存的温度为4℃；
步骤(2)中所述的避光保存的时间为超过40天。
7.根据权利要求6所述的具有驱蚊抑菌功效的香水的制备方法，其特征在于：
步骤(1)中所述的避光保存的时间为15天；
步骤(2)中所述的避光保存的时间为60～100天。
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