CN104186431A - 一种利用单细胞蛋白一步食物链高密度养殖卤虫的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种利用单细胞蛋白一步食物链高密度养殖卤虫的方法，包括如下步骤：(1)单细胞蛋白的获取；(2)卤虫无节幼体的孵化；(3)卤虫初孵无节幼体的接种与培养；(4)卤虫成体的收获。本发明的优点是采用单细胞蛋白作为卤虫的唯一饵料，采用一步食物链养殖方式，营养丰富、培养方便、无毒无害、成本较低，养殖水体不易恶化，且藻类能补充养殖水体的溶解氧同时减少CO2的含量。
Description
技术领域
本发明属于卤虫养殖领域，尤其是涉及一种利用单细胞蛋白一步食物链高密度养殖卤虫的方法。
背景技术
单细胞蛋白(single cell protein简称SCP)，狭义指在单细胞生物如微藻、细菌内提取的蛋白质，目前泛指单细胞生物如微藻、细菌个体。单细胞蛋白是一个重要的食用、饲用蛋白质来源，是解决世界性蛋白质紧缺的重要途径之一，均有蛋白质含量高、活性物质丰富、生长速度快、成本低廉等优点。目前在水产领域主要使用到的单细胞蛋白包括：小球藻、硅藻、裂壶藻、盐藻、小新月菱形藻、酵母、枯草芽孢杆菌、光合细菌等。
卤虫(Artemia sp.)又称丰年虫，是一种广文耐盐性的一种小型甲壳动物，能够在淡水和咸水中生活。卤虫含有丰富的营养物质，干品含有蛋白质60％、脂肪20％以及丰富的高级不饱和脂肪酸、微量元素和种类丰富的生长因子。卤虫作为一种优质的活体饵料，在水产养殖中应用非常广泛。但是目前国际上卤虫资源有限，成体卤虫资源主要依靠野生繁殖，国际上人工养殖卤虫的技术含量也比较低，主要是越南等国家的粗放养殖为主。目前常用的养殖方法是在养殖的初期以肥水和补充生物饵料丰富的卤水为主，使透明度保持在30cm左右，随着卤虫的生长发育，需要逐步投喂有机碎屑，如糠麸、油饼类、玉米、鸡粪、牛羊粪等。颗粒要小于50μm，投喂量30～50kg/天·公顷，要分次饲喂。有条件可使用无机肥，每周每公顷水面施加尿素20kg、磷酸氢二铵25kg。因此，高技术含量的卤虫高密度养殖技术亟待解决。
发明内容
本发明创造要解决的问题是提供一种利用单细胞蛋白一步食物链高密度养殖卤虫的方法，该方法培养方便、无毒无害其成本较低。
为解决上述技术问题，本发明创造采用的技术方案是：一种利用单细胞蛋白一步食物链高密度养殖卤虫的方法，包括如下步骤：
(1)、单细胞蛋白的获取；
(2)、卤虫无节幼体的孵化；
(3)、将步骤(2)中得到卤虫初孵无节幼体进行接种与培养；
(4)、卤虫成体的收获，其中单细胞蛋白的投喂时间为接种后24h。
其中，所述单细胞蛋白为微藻或细菌中一种。
优选的，所述的微藻为盐藻、小球藻、裂壶藻、螺旋藻、金藻中的一种或两种以上混合物；所述细菌为酵母或光合细菌中的一种或两种的混合物。其形式包括藻液、菌液。单细胞蛋白的获取包括人工培养或者购买相关成品。如人工培养单细胞蛋白，则新鲜培养的单细胞蛋白浓度尽可能高，且单细胞蛋白培养液中残余的氨氮尽可能低。如购买的单细胞蛋白成品，需使用卤虫培养液进行调和，使用300目滤网过滤后投喂。
优选的，步骤(2)中，卤虫无节幼体的孵化中，孵化液盐度为10～30‰，pH为7～9，光照强度为1500～3000lux，持续充气孵化24h后，分离获取卤虫初孵无节幼体。卤虫初孵无节幼体的孵化不使用可能会对无节幼体有毒性的促孵化剂或药品。卤虫初孵无节幼体的分离不使用可能会对无节幼体有毒性促分离剂或药品。
优选的，步骤(2)中，孵化液盐度为25‰，pH为8，光照强度为3000lux，持续充气孵化24h。
优选的，步骤(3)中，卤虫初孵无节幼体以3～10ind/ml的密度接种；培养液盐度为30～150‰，pH为7～8，温度为25～30℃，DO为4～10ppm，氨氮含量低于5ppm，pH的变化使用饱和NaHCO3溶液进行调节。接种后24h，投喂单细胞蛋白，投喂量为0.5～1.5×107ind/ml，一天投喂3～6次。卤虫培养液在养殖过程中基本不用更换，如果氨氮含量过高可使用蛋白分离器降低培养液中的氨氮含量。
优选的，步骤(4)中，卤虫虫体成长到1cm左右或者养殖时长为15d左右时，养殖周期结束，使用120目滤网收获卤虫虫体。
本发明采用的卤虫无节幼体密度的测量方法为从混匀的孵化液中取100μ卤虫5次，在解剖镜下分别计数，计算五次平均值作为卤虫无节幼体的密度；采用的卤虫体长的测量方法为随机选择卤虫10只，在显微镜镜下分别测量体长，计算10个数据的平均值作为卤虫的平均体长。
本发明创造具有的优点和积极效果是：本发明采用单细胞蛋白作为卤虫的唯一饵料，营养丰富、培养方便、无毒无害、成本较低。而且单细胞蛋白含有种类丰富的促生长因子，能够提高卤虫抵抗力，生长迅速，能够在15d左右长为成虫，体长>1cm，而且养殖密度可以达到1000～10000ind/L。本方法培养出的卤虫营养均衡丰富，含有丰富的蛋白质和脂肪酸，抵抗力高。
具体实施方式
为了理解本发明，下面通过具体实例对本发明进行进一步说明，但不限定本发明的保护范围。
实施例一
(1)、新鲜培养盐藻
人工培养的盐藻，盐度为80‰，成品藻液浓度高于5×107ind/ml。
(2)、卤虫无节幼体的孵化
使用自来水调配人工海水精，配制成孵化液，盐度为30‰，使用碳酸氢钠调节pH为8.5，使用日光灯调节光照强度为3000lux。使用尖底透明玻璃管进行孵化，卤虫品系为美国大盐湖卤虫卵，持续充气孵化，控制温度为28℃。
孵化24h后，分离获取卤虫初孵无节幼体。
(3)卤虫初孵无节幼体的接种与培养
卤虫培养液使用自来水和人工海水经调配，盐度为80‰，充分曝气24h，使用紫外灯照射灭菌。卤虫初孵无节幼体的接种密度为10ind/ml。
(4)卤虫的培养
卤虫初孵无节幼体接种24h之后开始第一轮的投喂盐藻，卤虫培养液中盐藻的浓度基本控制在1×107ind/ml左右。投喂采用少量多次的原则，投喂分为4次，投喂时间点07:00、11:00、16:00、20:00。
在养殖过程中，控制水温为28～30℃，pH使用碳酸氢钠溶液调节控制在7～8之间，DO保持在3ppm以上。
卤虫培养16d时，卤虫密度为7ind/ml，体长增加为平均1.2cm，最长能够达到1.4cm。使用120目滤网收集卤虫虫体，使用清洁海水冲洗后沥干，湿重可达25kg/m3。
实施例二
(1)、商品活体酵母
购置的商品活体酵母，使用30‰人工海水调匀，300目滤网过滤作为饵料原液，使用前新鲜调配。
(2)、卤虫无节幼体的孵化
使用自来水调配人工海水精，配制成孵化液，盐度为25‰，使用碳酸氢钠调节pH为8，使用日光灯调节光照强度为3000lux。
使用尖底透明玻璃管进行孵化，卤虫品系为哈萨克咸海卤虫卵，持续充气孵化，控制温度为28℃。
孵化24h后，分离获取卤虫初孵无节幼体。
(3)卤虫初孵无节幼体的接种
卤虫培养液使用自来水和人工海水经调配，盐度为30‰，充分曝气24h，使用紫外灯照射灭菌。卤虫初孵无节幼体的接种密度为5ind/ml。
(4)卤虫的培养
卤虫初孵无节幼体接种24h之后开始第一轮的投喂，卤虫培养液中酵母的浓度基本控制在1×107ind/ml左右。投喂分为4次，07:00、11:00、16:00、20:00。
在养殖过程中，控制水温为28～30℃，pH使用碳酸氢钠溶液调节，控制在7～8之间，DO保持在3ppm以上。
卤虫培养14d时，卤虫密度为4ind/ml，体长增加为平均1.02cm，最长能够达到1.2cm。使用120目滤网收集卤虫虫体，使用清洁海水冲洗后沥干，湿重可达18kg/m3。
实施例三
(1)、商品螺旋藻粉调配
购置的商品螺旋藻粉5g，使用500ml150‰人工海水充分溶解后，300目滤网过滤作为饵料原液。
(2)、卤虫无节幼体的孵化
使用自来水调配人工海水精，配制成孵化液，盐度为30‰，使用碳酸氢钠调节pH为8.5，使用日光灯调节光照强度为3000lux。
使用尖底透明玻璃管进行孵化，卤虫品系为中国渤海湾卤虫卵，持续充气孵化，控制温度为28℃。
孵化24h后，分离获取卤虫初孵无节幼体。
(3)卤虫初孵无节幼体的接种
卤虫培养液使用自来水和人工海水经调配，盐度为150‰，充分曝气24h，使用紫外灯照射灭菌。
卤虫初孵无节幼体的接种密度为10ind/ml。
(4)卤虫的培养
卤虫初孵无节幼体接种24h之后开始第一轮的投喂，投喂量为1ml/L的螺旋藻粉液。投喂采用少量多次的原则，投喂分为4次，07:00、11:00、16:00、20:00。
在养殖过程中，控制水温为28～30℃，pH使用碳酸氢钠溶液调节，控制在7～8之间，DO保持在3ppm以上。
培养15d时，卤虫密度为7ind/ml，体长增加为平均1.2cm，最长能够达到1.6cm。使用120目滤网收集卤虫虫体，使用清洁海水冲洗后沥干，湿重可达18.5kg/m3。
以上对本发明创造的实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明创造的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明创造范围所作的均等变化与改进等，均应仍归属于本专利涵盖范围之内。
Claims (6)
1.一种利用单细胞蛋白一步食物链高密度养殖卤虫的方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)、单细胞蛋白的获取；
(2)、卤虫无节幼体的孵化；
(3)、将步骤(2)中得到卤虫初孵无节幼体进行接种与培养；
(4)、卤虫成体的收获，其中单细胞蛋白的投喂时间为接种后24h。
其中，所述单细胞蛋白为微藻或细菌中的一种。
2.根据权利要求1所述的利用单细胞蛋白一步食物链高密度养殖卤虫的方法，其特征在于：所述的微藻为盐藻、小球藻、裂壶藻、螺旋藻、金藻中的一种或两种以上混合物；所述细菌为酵母或光合细菌中的一种或两种的混合物。
3.根据权利要求1或2所述的利用单细胞蛋白一步食物链高密度养殖卤虫的方法，其特征在于：步骤(2)中，卤虫无节幼体的孵化中，孵化液盐度为10～30‰，pH为7～9，光照强度为1500～3000lux，持续充气孵化24h后，分离获取卤虫初孵无节幼体。
4.根据权利要求3所述的利用单细胞蛋白一步食物链高密度养殖卤虫的方法，其特征在于：步骤(2)中，孵化液盐度为25‰，pH为8，光照强度为3000lux，持续充气孵化24h。
5.根据权利要求1～4任一项所述的利用单细胞蛋白一步食物链高密度养殖卤虫的方法，其特征在于：步骤(3)中，卤虫初孵无节幼体以3～10ind/ml的密度接种；培养液盐度为30～150‰，pH为7～8，温度为25～30℃，DO为4～10ppm，氨氮含量低于5ppm；接种后24h，投喂单细胞蛋白，投喂量为0.5～1.5×107ind/ml，一天投喂3～6次，优选的，投喂量为1×107ind/ml。
6.根据权利要求1～5任一项所述的利用单细胞蛋白一步食物链高密度养殖卤虫的方法，其特征在于：步骤(4)中，卤虫虫体成长到1cm左右或者养殖时长为15d左右时，养殖周期结束，使用120目滤网收获卤虫虫体。
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