CN104159589A

CN104159589A - 肝脏状况的治疗

Info

Publication number: CN104159589A
Application number: CN201380012458.2A
Authority: CN
Inventors: P·菲什曼; 希拉·柯亨; S·巴-耶胡达
Original assignee: Can Fite Biopharma Ltd
Current assignee: Can Fite Biopharma Ltd
Priority date: 2012-01-23
Filing date: 2013-01-23
Publication date: 2014-11-19
Also published as: HK1202053A1; US20150018299A1; EP2806878A1; WO2013111132A1; JP2015504088A

Abstract

本公开内容涉及A₃腺苷受体激动剂2-氯-N⁶-(3-碘苄基)-腺苷-5’-N-甲基糖醛酰胺(Cl-IB-MECA)，以至少约10mg/天的量，用于治疗肝细胞癌(HCC)。本发明还提供了Cl-IB-MECA在具有慢性肝脏疾病，如肝硬化的受试者中维持肝脏功能的作用。如果至少一个指示肝脏功能的生理参数在两个或更多个时间点之间本质上恒定，即两个时间点之间的差异不超过医学上可接受的容限，则认为肝脏功能被维持。

Description

肝脏状况的治疗

技术领域

本发明涉及患有慢性肝脏状况的受试者中肝脏功能的维持并涉及肝癌的治疗。

先前出版物

以下是被认为作为背景与本公开内容相关的先前出版物的列表：

-Madi L,等人.(2007).Over-expression of A3adenosine receptor inPBMNC of rheumatoid arthritis patients:involvement of NF-κB in mediatingreceptor level.J Rheumatolo34:20-26

-Ochaion A,等人.(2009).The anti-inflammatory target A3adenosinereceptor is over-expressed in rheumatoid arthritis,psoriasis and Crohn’s disease.Cell Immunol258:115-122

-Fishman P,等人.(2006).The PI3K–NF-κB signal transductionpathway is involved in mediating the anti inflammatory effect of IB MECA inadjuvant-induced arthritis.Arth Res Ther8:R33

-Bar-Yehuda S,等人.(2007).The anti-inflammatory effect of A3adenosine receptor agonists:a novel targeted therapy for rheumatoid arthritis.Expert Opin Inves Drugs16:1601-1613

-WO2009/050707

-WO2007/043054

-Gregorio Gomez和Michall V Sitkovsky(2003).Differentialrequirement for A2a and A3adenosine receptors for the protection effect ofinosine in vivo Blood102(13):4472-4478

-Bar-Yehuda S.,等人.(2008).The A3adenosine receptor agonist CF102induces apoptosis of hepatocellular carcinoma via de-regulation of the Wnt andNF-kB signal transduction pathways.Int J Onc33:287-295,2008

-H.Thomas Lee,等人,(2006).A3adenosine receptor activationdecreases mortality and renal and hepatic injury in murine septic peritonitis AmJ Physiol Regul Integr Comp Physiol291:R959-R969

背景

Gi蛋白相关的细胞表面A₃腺苷受体(A₃AR)，在来自各种自身免疫炎症疾病，如类风湿关节炎、银屑病和克罗恩病的患者的炎症细胞和外周血单核细胞(PBMC)中是过量表达的[Madi L,等人.(2007),Over-expressionof A3adenosine receptor in PBMNC of rheumatoid arthritis patients:involvement of NF-κB in mediating receptor level.J Rheumatolo34:20-26；Ochaion A,等人.(2009),The anti-inflammatory target A3adenosine receptor isover-expressed in rheumatoid arthritis,psoriasis and Crohn’s disease.CellImmunol258:115-122]。

利用高度特异性的激动剂，例如IB-MECA和Cl-IB-MECA激活受体，诱导显著的抗炎症效果：通过下调NF-κB信号传导途径，导致促炎细胞因子脱调节，并诱导炎症细胞凋亡[Fishman P,等人.(2006)The PI3K–NF-κBsignal transduction pathway is involved in mediating the anti inflammatoryeffect of IB MECA in adjuvant-induced arthritis.Arth Res Ther8:R33；Bar-Yehuda S,等人.(2007)The anti-inflammatory effect of A3adenosinereceptor agonists:a novel targeted therapy for rheumatoid arthritis.Expert OpinInves Drugs16:1601-1613。

利用A₃AR激动剂，例如Cl-IB-MECA诱导肝细胞增殖和肝再生的方法和组合物在国际专利申请公布号WO2009/050707中描述。

此外，对肝癌患者进行监测和确定疾病状态的方法在国际专利申请公布号WO2007/043054中描述，该方法基于确定A3腺苷受体在白细胞中的表达水平，该表达水平指示疾病状态。Gomez G.和Sitkovsky M描述肌苷，一种已知特异性结合A₃AR的内源性核苷，在针对ConA诱导的肝炎提供保护中的作用[Gregorio Gomez和Michall V Sitkovsky(2003)Differentialrequirement for A2a and A3adenosine receptors for the protection effect ofinosine in vivo Blood 102(13):4472-4478]。

此外，Cl-IB-MECA对Con.A诱导的急性肝脏炎症的防护作用已被Cohen等人,2011描述[Cohen等人.Journal of cellular physiology Sep2011pp.2438-2447]。Cl-IB-MECA在大鼠中以剂量依赖性方式抑制HCC(肝细胞癌)肿瘤生长的效果已在Bar Yehuda等人,2008中表明[Bar-Yehuda等人,Int.J.Oncol.33:287-295]。

最后，Thomas Lee H.等表明A₃AR激活在CLP诱导的败血症后降低死亡率以及提高肾和肝脏功能的作用[H.Thomas Lee,Mihwa Kim,JinDeokJoo,George Gallos,Jiang-Fan Chen,和Charles W.Emala,(2006)A₃adenosine receptor activation decreases mortality and renal and hepatic injuryin murine septic peritonitis Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol 291:R959-R969]。

发明概述

本公开内容是基于对患有肝细胞癌(HCC)的人类患者的研究结果。表明，根据本公开内容，(i)用A₃腺苷受体激动剂(A₃AR)，2-氯-N⁶-(3-碘苄基)-腺苷-5’-N-甲基糖醛酰胺(Cl-IB-MECA)，处理的人类患者，维持一些指示其肝脏功能的生理参数在本质上稳定的水平，和(ii)一定剂量的Cl-IB-MECA有效治疗HCC，如通过HCC患者超出期望的存活期延长所证明的。

根据本公开内容，令人惊奇的发现，不同于基于以另一种A₃AR，N⁶-(3-碘苄基)-腺苷-5’-N-甲基糖醛酰胺(IB-MECA)治疗人类受试者的剂量响应关系所期望的，以及在HCC动物模型实验中对Cl-IB-MECA的先前发现(Bar-Yehuda等人,2008)，在其中观察到钟形的关系，在Cl-IB-MECA对人类HCC患者的使用中，增加剂量显示治疗活性的提高，直到最大效应剂量，此时吸收达到接近饱和(即超出最大效应剂量的更高剂量的给药会很少或不吸收)。

因此，本公开内容提供的是着眼于维持肝脏功能的方面(各为“维持方面”)和着眼于治疗肝癌的方面(各为“治疗方面”)。

根据一个维持方面，本公开内容提供了用于在患有慢性肝脏疾病的受试者中维持肝脏功能的Cl-IB-MECA。慢性肝脏疾病可以是，但不限于，肝癌，包括肝细胞癌(HCC)或具有肝中转移的转移性癌。

根据一个实施方案，肝脏功能的维持是指指示肝脏功能的至少一个生理参数的水平被维持一段时间，例如数周、数月或甚至数年。肝脏功能的维持可以通过在至少两个不同的时间点测量或以其他方式确定(例如通过医学上可接受的定性评估)至少一个生理参数。肝脏功能的维持可以指所测量的生理参数在医学上可接受的容限内大致恒定。

根据另一个维持方面，本公开内容还提供了一种在患有慢性肝脏疾病的受试者中维持肝脏功能的方法，该方法包括对患有慢性肝脏疾病的受试者给药有效维持肝脏功能在本质上恒定的水平的量的Cl-IB-MECA。

根据进一步的维持方面，本公开内容还提供了有效量的Cl-IB-MECA用于制备用于维持肝脏功能的药物制剂的用途。

本文还提供了一种包装物(package)，该包装物包括包含Cl-IB-MECA作为活性成分的药物组合物和使用Cl-IB-MECA维持肝脏功能的说明，所述说明包括向患有慢性肝脏疾病的受试者给药有效维持肝脏功能的量的Cl-IB-MECA。

根据维持方面，本文还公开了在患有慢性肝脏疾病的受试者中维持肝脏功能的药物组合物，所述组合物包含有效量的Cl-IB-MECA。

在这两个方面的上下文中，术语“有效量(effective amount)”或“有效的量(an amount effective)”应该被理解为当在给定的治疗方案中给药，例如每天一次、两次或三次时，有效地达到预期的治疗效果的量，预期的治疗效果在本发明的维持方面中是指维持患有慢性肝脏疾病的受试者的肝脏功能。有效量可以，例如，为至少约10mg/天的量，或以下关于治疗方面提及的任何剂量。

根据治疗方面，本公开内容还提供了Cl-IB-MECA，以至少约10mg/天的剂量(例如在每日一次治疗的治疗方案中至少约10mg，至少约5mg，每天两次，至少约3.3mg，每天三次，等等)用于治疗人类受试者的HCC。

至少约10mg/天的剂量可以是至少约15mg/天、至少约20mg/天、至少约25mg/天、至少约30mg/天、至少约35mg/天、至少约40mg/天、至少约45mg/天和约50mg/天或甚至更高的剂量。每天给患者的Cl-IB-MECA总量，不论给药次数，在本文被称作“每日治疗剂量”。

约50mg的每日治疗剂量是在治疗方面使用的剂量的一个例子。它可以是，例如每天两次，各约25mg的剂量，或每天3次，各约16mg的剂量。

根据治疗方面，本公开内容还提供了一种用于治疗人类受试者的HCC的方法，该方法包括向受试者给药每日治疗剂量的Cl-IB-MECA。

根据进一步的治疗方面，本公开内容还提供了以用于给药至少10mg/天的每日治疗剂量的单位剂型，Cl-IB-MECA用于制备治疗HCC的药物制剂的用途。当剂型预期用于在包括每天n个剂量的治疗方案中向患者给药时，则单位剂型可包括每日治疗剂量的1/n部分(例如，当预期的每日治疗剂量是20mg，治疗方案是每天两次时，那么每个单位剂型将具有10mg的剂量；或当预期的每日治疗剂量是50mg，治疗方案是每天两次时，那么每个单位剂型将具有25mg的剂量)。

根据治疗方面，本公开内容还提供了以单位剂型用于治疗HCC的Cl-IB-MECA，该单位剂型用于向需要所述治疗的受试者给药所述Cl-IB-MECA的每日治疗剂量。

进一步，根据治疗方面，提供了一种包含Cl-IB-MECA的单位剂型，该单位剂型用于向患有HCC的患者给药每日治疗剂量的Cl-IB-MECA。

根据治疗方面，进一步提供了一种包装物，该包装物包括包含Cl-IB-MECA作为活性成分的药物组合物，和使用这种药物组合物治疗HCC的说明，所述说明包括向需要治疗的受试者给药每日治疗剂量的Cl-IB-MECA。

附图简述

为了理解本发明并了解在实践中如何实施本发明，现在将通过仅非限制性示例的方式以及参考附图描述实施方案，其中：

图1A-1B是显示单次剂量后(n＝3/组，图1A)；和重复剂量后处于稳定状态(n＝3/组，图1B)，CF102的药代动力学行为的图。

图2A-2G是显示肝细胞癌(HCC)患者中的肝酶丙氨酸转氨酶ALT(图2A)和天冬氨酸转氨酶AST(图2B)、白蛋白(图2C)、胆红素(图2D)、凝血酶原时间(PT)(图2E)、ALK磷酸酶(图2F)和α-甲胎蛋白(图2G)的血清水平的图。该数据表明不同参数保持稳定，表明Cl-IB-MECA维持肝脏功能。

详述

慢性肝脏疾病包括肝组织随着时间推移逐渐破坏，并且可以被划分为肝硬化和肝纤维化。前者涉及正常功能的肝组织缓慢置换成瘢痕组织，逐渐减小通过肝脏的血流量，导致减少或缺乏对营养物质、激素、药物和毒物(细菌和毒素)的处理。此外，生产蛋白质、胆汁和其他物质被抑制。瘢痕化还损害肝脏控制感染的能力。

由于慢性肝脏疾病，特别是肝硬化，对肝脏的损害有时是不可逆的，在疾病的表现期间至少维持肝脏功能将是治疗上有益的。

本公开内容涉及两个方面，在HCC患者中维持肝脏功能(“维持方面”)和治疗HCC(“治疗方面”)。在下面进一步详细说明的这两个方面使用Cl-IB-MECA。

Cl-IB-MECA是一种公认的A₃腺苷受体激动剂，具有化学俗名1-[2-氯-6-[[(3-碘苯基)甲基]氨基]-9H-嘌呤-9-基]-1-脱氧-N-甲基-β-D-核糖呋喃糖醛酰胺和具有化学式C₁₈H₁₈ClIN₆O₄和化学结构：

已知CL-IB-MECA通过结合和激活A₃AR发挥其主要效应，即与其他任何腺苷受体相比，它对A₃AR的亲和力要高得多(Ki低3倍)。

根据维持方面，提供了CL-IB-MECA，用于维持患有慢性肝脏疾病的受试者的肝脏功能，如果至少一个指示肝脏功能的生理参数在两个或更多个时间点之间在医学上可接受的容限内本质上恒定，则肝脏功能被维持。

进一步，在维持方面，本公开内容提供一种用于维持患有慢性肝脏疾病的受试者的肝脏功能的方法，所述方法包括向具有慢性肝脏疾病的受试者给药一定量的Cl-IB-MECA，该量有效保持至少一个指示肝脏功能的生理参数在至少两个时间点之间在医学上可接受的容限内本质上恒定的水平。

根据维持方面，本公开内容还提供了有效量的Cl-IB-MECA用于制备用于维持肝脏功能的药物制剂的用途。

根据维持方面，还提供了一种包装物，该包装物包括包含Cl-IB-MECA作为活性成分的药物组合物，和使用Cl-IB-MECA维持肝脏功能的说明，该说明包括向患有慢性肝脏疾病的受试者给药一定量的Cl-IB-MECA，该量有效保持至少一个指示肝脏功能的生理参数在至少两个时间点之间在医学上可接受的容限内本质上恒定的水平。

最后，在维持方面，本文公开了一种用于在患有慢性肝脏疾病的受试者中维持肝脏功能的药物组合物，该组合物包括足以维持至少一个指示肝脏功能的生理参数在至少两个时间点之间在医学上可接受的容限内本质上恒定的水平的Cl-IB-MECA的量。

肝脏功能可通过指示肝脏功能的任何可测量的或可检测的生理参数来确定。

在一些实施方案中，生理参数是通过肝脏成像获得的，诸如计算机断层(CT)扫描、超声、磁共振成像(MRI)、肝扫描、腹腔镜检查。

在一些进一步的实施方案中，肝脏生理参数通过肝活检来确定。

在又其它一些实施方案中，生理参数是一种或更多种肝脏功能检查(liver function test，LFT)。LFT是血液或血液级分(优选血清)的临床生化实验室测定。LFT包括血液酶测定，例如但不限于，丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、乳酸脱氢酶(LDH)；LFT还包括血液总胆红素测定(测量血液中的黄色胆红素色素)；血白蛋白水平、总蛋白(白蛋白和抗体)；血糖水平。

肝脏功能可通过确定的生理参数的一个或两个或更多个的组合来确定。

根据维持方面，确定一个或更多个生理参数在两个时间点之间的水平差异。任何治疗的目的是，肝脏功能本质上保持恒定，因此，在如此两个或更多个时间点之间，期望生理参数被保持本质上恒定或其差异被维持在医学上可接受的容限内。换句话说，如果该参数没有变化(即，它本质上是恒定的)，或改变是在医学上可接受的容限内，就可以得出结论：肝脏功能被保持。

即使在健康受试者中，生理参数往往并不完全恒定，可能存在与昼夜节律相关的变化、由于消耗的食物类型导致的变化、由于其他药物治疗；暴露于病原体的变化等。因此，有时生理参数可发生变化，但只要在一定的可接受范围内，就视为基本相同。在本公开内容的上下文中，术语“医学上可接受的容限”指可归因于其他因素，并且因此可以从一个医生的医学观点视为是基本相同的测量的变化。医学上可接受的容限可以是，例如，并根据参数，参数在两个或更多个时间点之间小于50％的变化、小于40％、小于30％、小于20％、小于10％、甚至小于5％，并，有时甚至小于2％的差别、1％的差别，或没有可测量的差别。在这种情况下，本质上恒定的参数被理解为还涵盖医学上容忍的参数水平的变化。

在一个实施方案中，向患有慢性肝脏疾病的受试者提供一定量的Cl-IB-MECA后(立即、数小时后和甚至一天或更长时间后)至少一次确定生理参数。在一些其它实施方案中，向受试者提供2个或更多个剂量的Cl-IB-MECA后确定生理参数。

慢性肝脏疾病可包括肝硬化和/或肝纤维化。在一个优选的实施方案中，慢性肝脏疾病是肝硬化。

慢性肝脏疾病或肝硬化可由各种医学状况诱发或与之相关。但不限于，这样的状况可包括长期饮酒(chronic alcohol consumption)、慢性肝脏感染、慢性肝脏炎症(chronic liver inflammation)、炎性紊乱、自身免疫性紊乱、药物诱导的肝损伤、非酒精性代谢紊乱、慢性肝损伤、肝细胞癌、使用膳食补充剂后肝脏的不良反应。

肝脏感染可以是本领域中已知的导致肝组织损伤的任何类型。在一些实施方案中，慢性肝脏疾病是慢性乙、丙或丁型肝炎。慢性乙型或丙型肝炎引起炎症，随着时间推移损害肝脏并导致肝硬化。丁型肝炎也导致肝硬化，但仅在已患有乙型肝炎的受试者中发生。

在又一些其它实施方案中，慢性肝脏感染是HIV感染、巨细胞病毒、Epstein-Barr病毒中的任何一个。

慢性肝脏疾病还可以是药物诱导的，是长期药物治疗的结果。药物诱导的肝损伤可根据表现水平显著升高的(指示肝损害)的酶的类型进行分组。例如，肝细胞性肝毒性，可以由药物如对扑热息痛和异烟肼导致；胆汁淤积性肝毒性，其特征是瘙痒和黄疸，伴有血清碱性磷酸酶水平的显著升高，可以由药物如阿莫西林/克拉维酸和氯丙嗪导致。

可引起慢性肝脏疾病，特别是肝硬化的药物的优选实例包括胺碘酮，氨甲蝶呤及硝基呋喃妥因(Nitrofurantoin)。

然而，在一些实施方案中，慢性肝脏疾病是炎性或自身免疫性紊乱。炎症或自身免疫性紊乱可以选自，但不限于，慢性胰腺炎、炎性肠病、原发性硬化性胆管炎、原发性胆汁性肝硬化、原发性肝内胆管结石病和复发性化脓性胆管炎、系统性红斑狼疮、乳糜泻、甲状腺功能减退症、雷诺氏现象、干燥综合征。

在又一些实施方案中，所述慢性肝脏疾病是代谢紊乱，例如，但不限于，糖尿病、肥胖症、脂肪变性和非酒精性脂肪性肝炎、血色病、囊性纤维化、α-1抗胰蛋白酶缺乏症、半乳糖血症、糖原贮积病、威尔逊氏病、和肝内胆汁淤积症。其中一些原因也被确认为遗传性疾病。如上所述，本公开内容还涉及治疗肝癌，作为本文所公开的治疗方面的一部分。具体而言，已经发现，对递增量的Cl-IB-MECA存在本质上线性的剂量响应。此外，已经发现，发现有效对抗癌症的Cl-IB-MECA的剂量，比以结构相关的衍生物IB-MECA治疗可接受的剂量高得多。

因此，根据治疗方面，提供了一种治疗肝细胞癌(HCC)的方法，包括向被诊断患有HCC的受试者给药高于IB-MECA治疗的可接受量的每日治疗剂量的Cl-IB-MECA，所述量高于10mg/天。

关于本文所公开的两个方面，Cl-IB-MECA以口服给药至受试者，优选地人类受试者被认为是安全的、可耐受的和剂量限制毒性范围内的量使用。进一步，Cl-IB-MECA以显示医学上有利的药代动力学，并具有最小副作用的浓度提供。

具体而言，如本文所提供的非限制性实施例中证明的，Cl-IB-MECA被发现比替代品索拉非尼，或向肝硬化和/或肝损伤患者给予的其他药物甚至更安全。

当涉及到治疗方面，甚至惊奇地发现，Cl-IB-MECA有效治疗ChildPugh B患者，因为这些患者由于潜在的肝脏功能障碍，用索拉非尼治疗一般效果不佳。因此，结果导致Cl-IB-MECA意外地适合用于该亚群的治疗的结论。

根据治疗方面，还提供了一种包装物，该包装物包括包含以Cl-IB-MECA为活性成分的药物组合物，和使用Cl-IB-MECA用于治疗HCC的说明，所述说明包括向需要该治疗的受试者给药有效治疗HCC的每日治疗剂量的Cl-IB-MECA。该说明还可包括每日治疗剂量的治疗方案，例如为了接受所开处方的每日治疗剂量需要给予患者的单位剂型的数目。例如，说明可提供一种治疗方案，其中分2个单位剂型向受试者提供20mg的每日治疗剂量，每个含10mg。

按照本公开内容，通过向多个测试的受试者给药不同量的Cl-IB-MECA并然后绘制生理响应作为该量的函数(例如，综合几个指示肝脏功能的生理参数的集成“SS指数”(SS index))，可以容易地确定有效维持肝脏功能或治疗HCC的剂量。可选地，有时也可以如下确定有效量：通过在适当的动物模型中进行试验，然后使用多种转化方法中的一种外推至人类；或通过测量血浆浓度或血浆浓度随时间变化的曲线下面积(AUC)并计算有效剂量，以得到可比较的血浆浓度或AUC。如已知的，有效量可取决于多种因素，例如给药方式(例如，与静脉内给药相比，口服给药可能需要更高的剂量以达到给定的血浆水平或AUC)；受试者的年龄、体重、体表面积、性别、健康状况以及遗传因素；其他给药药物等等。

根据维持方面，确定有效的量为1μg/kg体重至1mg/kg体重之间。有时，所述量为10μg/kg体重至500μg/kg体重。在一些实施方案中，所述量为1、2、5、10、25、50、100、150、200、500、800μg/kg体重中的任一种。这些值可通过乘以体重转换成总每日治疗剂量。通常，该转换是通过乘以70kg(成年受试者的平均体重)。因此，1μg/kg体重相当于0.07mg的剂量。

根据治疗方面，有效治疗HCC的量为每日给药至少10mg。在一些其它实施方案中，所述量，即每日治疗剂量为15mg、20mg、25、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、或10mg至100mg范围内的任何量。

在治疗方面的上下文中，术语“治疗”应理解为按每日治疗剂量给药Cl-IB-MECA对肿瘤或肿瘤相关症状所造成的任何影响，这些包括，但不限于，被治疗患者的存活、肿瘤部分或完全收缩、消除肿瘤、指示肿瘤收缩或消除的症状的改善，包括受试者总体健康，以及一个或更多个指示肝脏功能障碍的生理指标参数的改善。

当提到“存活”，应理解为涵盖疾病治愈，即，其中通过常规方法诊断表明肿瘤消除；以及无预后存活率(prognosis-free survival rate)，即通过Cl-IB-MECA治疗HCC期间和之后，患者带有疾病但是没有恶化地生活的时间长度。

Cl-IB-MECA可以作为单剂量或在长期治疗的过程中提供给受试者。

在一些实施方案中，Cl-IB-MECA以天为基础提供给受试者，每日一次、两次或三次。因此，上述列举的量被认为是每日的量。

Cl-IB-MECA可与药学上可接受的载体一起使用，药学上可接受的载体即惰性、无毒材料，其不与Cl-IB-MECA反应，且可被添加到制剂中作为稀释剂或载体或对制剂提供形状或一致性。载体可包括添加剂、着色剂、稀释剂、缓冲剂、崩解剂、润湿剂、防腐剂、矫味剂和药理学上相容的载体。在口服给药的情况下，载体是口服给药可接受的，并且在注射情况下，该载体是注射给药可接受的。注射可包括，但并不限于此，

口服制剂，可以是丸剂、胶囊、糖浆的形式、芳香粉剂、以及其他各种形式。注射制剂可以是适合于腹膜内(i.p.)注射、静脉内(i.v.)注射或局部注射(直接进入肝脏)的形式。

有时，载体还可具有以下作用：提高Cl-IB-MECA对肝脏的递送或渗透，提高Cl-IB-MECA的稳定性，减缓Cl-IB-MECA的清除率，赋予Cl-IB-MECA缓释的性能，减少不希望的副作用等。载体还可以是使制剂稳定(例如，防腐剂)，或为制剂提供食用香味的物质，等等。

如本文所使用的，形式“一(a)”、“一个(an)”和“该(the)”包括单数和复数指代对象，除非上下文另有明确说明。例如，术语“一种化合物”包含一种或更多种化合物。

此外，如本文所用，术语“包含”是指组合物包括提及的活性剂，即Cl-IB-MECA，但不排除其他要素，如其它活性剂。术语“基本上由...组成”用于限定组合物，其包括所述要素，但排除可能对Cl-IB-MECA的性能(例如，递送)具有本质上显著的作用的其他要素。因此“由...组成”将表示不止排除其他要素中的微量要素。由这些过渡术语的每一个界定的实施方案在本发明的范围之内。

此外，所有的数值，例如当提及构成含有Cl-IB-MECA作为活性成分的组合物的要素的量或范围时，是从指定值浮动(+)或(-)达20％，有时达10％的近似值。应当理解，即使不总是明确陈述，所有的数字标号前加了术语“约”。

本发明现在将以根据本发明进行的实验的以下描述来示例。应理解，这些实施例旨在为举例说明的性质，而不是限制性的。显然，鉴于以上教导，这些实施例的许多修改和变化是可能的。因此，应理解的是在所附权利要求书的范围内，本发明可以与下文具体描述的不同地以无数可能方式执行。

非限制性实施例的描述

实施例1：患有晚期肝细胞癌患者中肝脏功能的长期维持

研究分组：

所有患者均为18岁以上、患有不治的晚期、难治性或转移性肝细胞癌(HCC)，经对患者细胞学和/或组织学证明无潜在肝硬化，或根据美国肝病学会操作指南(American Association for the Study of Liver DiseasesPractice Guideline)算法认为有潜在性肝硬化。

按照实体肿瘤响应评价标准(Response Evaluation Criteria in SolidTumors，RECIST)所有患者均有可测量的疾病；在基线的东部肿瘤协作组(ECOG)表现状态为0，1或2；肝硬化状态Child-Pugh A或B；充足的肾脏和血液功能；对于育龄妇女妊娠试验阴性；和预期寿命≥12周。

所有患者提供参与这项研究的书面知情同意，这项研究得到研究场所的独立伦理委员会(Independent Ethics Committee)和以色列卫生部批准。

排除标准包括：研究药物开始前14天内的任何化疗、免疫调节药物治疗、免疫抑制治疗、皮质类固醇激素>20mg/天泼尼松或等价的，或生长因子治疗(如促红细胞生成素)；研究药物开始前28天内进行大手术或放射治疗；严重肝脏功能不全(Child-Pugh分级C或肝性脑病)；需要全身治疗的活动性感染；和研究药物开始前3个月内不受控制的充血性心脏衰竭(纽约心脏协会分级3或4)、心绞痛、心肌梗死、脑血管意外、冠状动脉/外周动脉旁路移植手术、短暂性脑缺血发作、或肺栓塞。

人口统计学和基线受试者特征数据列于错误！未找到引用源。。

表1：人口统计学和基线特征：

目的：

在晚期肝细胞癌(HCC)患者中进行评价口服给药Cl-IB-MECA(CF102)的安全性、耐受性、药代动力学和药效学的1-2阶段、开放标签、剂量递增的研究。

该研究的主要目的是在晚期HCC患者中确定口服给药CF102的安全性和耐受性、剂量限制性毒性(DLT)、最大耐受剂量(MTD)、和建议的第2阶段剂量(RP2D)，并在那些患者中评估CF102的重复剂量PK行为。

这项研究符合良好药品临床试验规范(Good Clinical Practices)、研究场所伦理审查委员会规定、知情同意制度、以及赫尔辛基宣言地进行。

材料：

A₃AR激动剂，2-氯-N⁶-(3-碘苄基)-腺苷-5’-N-甲基糖醛酰胺(Cl-IB-MECA，此处使用缩写名称CF102)，由Albany Molecular ResearchInc,Albany,NY,USA为Can-Fite Bio Pharma合成。

方法：

试验采用传统的“三加三”设计。受试者在连续28天的周期中以口服剂量的CF102治疗。CF102的初始剂量为1mg，每天两次(BID)，随后增加至5mg和25mg BID，除非受到毒性限制。在CF102治疗的第一个周期每周，第二、三周期每2周，在各随后的周期结束时评价受试者，直至6个周期。在第一阶段9名患者参加剂量递增阶段，然后另外九人参加剂量确认阶段。此外，9例患者经历每个实验方案个体自身剂量递增。研究药物的最后一剂完成后28天受试者返回进行随访。耐受药物且其HCC没有进展的受试者，经赞助商同意并由研究人员决定，继续接受CF102(例如，在延长实验方案中)。

CF102以每剂量水平3个受试者的连续群组递增。如果在一个剂量水平的3个受试者没有人经历第一个周期的DLT，那么3个新的受试者进入下一个更高的剂量水平。

CF102的安全性和MTD是由以下来确定：DLT的表征；不良事件(AE)的类型、发生率、严重程度(根据不良事件的常用命名标准(CommonTerminology Criteria for Adverse Events，CTCAE，版本4.0)分级)、时机、严重性、以及与治疗的关系的表征；对生命体征和实验室参数的影响；和心电图(ECG)变化。每2个周期通过x-射线或适当的成像技术(磁共振成像，除非计算机断层扫描适用)和RECIST评价来确定CF102的临床活性。药代动力学参数包括曲线下面积(AUC)、最大血浆浓度(Cmax)、穿过血浆浓度(through plasma concentration，Cmin)、达到最大血浆浓度时间(Tmax)、以及血浆半衰期(t 1/2)。

统计分析

对接受至少一个剂量的CF102的所有受试者进行安全性数据分析。经历一种或更多种AE的受试者的数目和比例根据剂量水平组、与研究药物的关系以及严重性来概述。AE使用药事管理的标准医学术语集(MedicalDictionary for Regulatory Activities，MedDRA)术语编码。临床实验室参数采用描述性统计，按给药后相对于基线的变化、以及临床显著异常数据列表来概述。在每个剂量水平的生命体征和ECG数据按照相对于基线的变化使用描述性统计来概述。评估药代动力学参数，包括AUC(0-8小时)、Cmax、Cmin、和Tmax。跨剂量水平进行了比较，以评估比例性。采用Kaplan-Meier法计算总存活。

结果：

1.安全性数据-CF102是安全的且耐受良好

记录下总体出色的安全性，在生命体征、血液学或化学参数方面没有变化。

至今经历的中度至重度不良事件不同。在本研究中，最常报告的事件是与食欲减退；腹水或腹部肿胀；恶心或呕吐；腹泻、便秘、和其他胃肠道症状；水肿；蜂窝组织炎；脑出血；头痛、低钠血症、腿部血栓；和肌肉骨骼疼痛相关的那些。这些事件中的许多在晚期HCC患者群体中是意料中的。

2.药代动力学-CF102具有良好的口服生物利用度

以单一的(图1A)或重复的(图1B)的剂量提供的CF102表现出良好的口服生物利用度和线性的PK行为。在所有剂量的血浆水平超出CF102对A3AR的亲和力值(0.66nM)。

3.效果，总存活(OS)数据

至今，18名受试者的中位值OS是7.82个月(范围3.5-27.3个月)，其中一个受试者接受CF10241个月以上，并在继续接受药物。这项研究的另外一个重要发现是12位患者的7个月的中位值OS(范围3.5-13.2个月)，这些患者使用索拉非尼治疗失败，使用CF102作为二线治疗。此外，五位Child-Pugh B患者的中位值OS为8.1个月(范围7.0-13.2个月)(表2)。

表2总存活数据

CF102治疗持续时间对剂量的分析表明，CF102治疗的最长时间阶段是在25mg剂量(61.2个月)。患者分别以5mg和1mg剂量治疗49.9和24.2个月。

当在使用具有可比性的患者人群的此前经验的背景中考虑时，这些数据特别引人注目，此前经验例如等展示的[等人.Oncology2010；79:85–92]，在其文章表2中显示，使用舒尼替尼治疗的Child-Pugh B患者的中位值OS为3.5个月，与之相比在本CF102研究中是8.1个月。考虑到Child-Pugh B患者由于其肝脏状况不适合使用索拉非尼治疗，CF102可以是对该患者亚群体优选的药物。

此外，按照RECIST标准，本CF102试验中的一位受试者经历了10个月的病情稳定(SD)阶段。

4.CF102维持肝脏功能

CF102的治疗效果还通过对生理参数经6个月阶段的分析来证明，所述参数包括肝酶，例如丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、白蛋白、胆红素、凝血酶原时间(PT)、ALK磷酸酶(ALP)、α-甲胎蛋白经6个月阶段的血清水平。数据表明不同参数保持稳定，表明CF102负责维持肝脏功能(图2A-2G)。

在图2A至2G中提供的数据显示，不同的参数保持稳定，表明CF102在慢性肝脏疾病和肝硬化中有效维持肝脏功能。

Claims

1.2-氯-N⁶-(3-碘苄基)-腺苷-5’-N-甲基糖醛酰胺(Cl-IB-MECA)，以至少约10mg/天的剂量，用于在人类受试者中治疗肝细胞癌(HCC)。

2.如权利要求1所述的Cl-IB-MECA，用于以10mg至50mg之间的每日剂量使用。

3.如权利要求1或2所述的Cl-IB-MECA，用于以适合每天给药1或2次的剂型使用。

4.如权利要求3所述的Cl-IB-MECA，用于以适合每天给药2次的剂型使用。

5.如权利要求1至4中任一项所述的Cl-IB-MECA，用于以适合口服给药的剂型使用。

6.一种每日剂型，所述每日剂型包含至少10mg Cl-IB-MECA的量，所述量有效治疗HCC。

7.如权利要求6所述的每日剂型，所述每日剂型适于每日一次或两次给药至受试者。

8.如权利要求6或7所述的每日剂型，所述每日剂型包含10mg至50mg Cl-IB-MECA之间的量。

9.一种治疗被诊断患有肝细胞癌(HCC)的受试者的方法，所述方法包括向受试者给药每日治疗剂量的Cl-IB-MECA，所述每日治疗剂量为至少10mg/天。

10.如权利要求9所述的方法，所述方法包括向所述受试者每天给药所述Cl-IB-MECA一次、两次或三次。

11.如权利要求9或10所述的方法，所述方法包括向所述受试者口服给药所述CL-IB-MECA。

12.如权利要求9至11中任一项所述的方法，所述方法包括以10mg至50mg的每日治疗剂量给药所述Cl-IB-MECA。

13.一种包装物，所述包装物包括包含Cl-IB-MECA的剂型，以及使用所述剂型治疗HCC的说明，所述说明包括向需要HCC治疗的受试者给药接受至少10mg Cl-IB-MECA的每日剂量的Cl-IB-MECA的剂型。

14.2-氯-N⁶-(3-碘苄基)-腺苷-5’-N-甲基糖醛酰胺(Cl-IB-MECA)，用于维持患有慢性肝脏疾病的受试者的肝脏功能。

15.如权利要求14所述的Cl-IB-MECA，其中如果至少一个指示肝脏功能的生理参数的水平在两个或更多个时间点之间在医学上可接受的容限内本质上恒定，所述肝脏功能被维持。

16.如权利要求14或15所述的Cl-IB-MECA，其中所述慢性肝脏疾病是肝硬化。

17.如权利要求14至16中任一项所述的Cl-IB-MECA，其中所述慢性肝脏疾病与选自以下组成的组的一种或更多种状况相关或由选自以下组成的组的一种或更多种状况引起：长期饮酒、慢性肝脏感染、慢性肝脏炎症、炎性紊乱、自身免疫性紊乱、药物诱导的肝损伤、非酒精性代谢紊乱、慢性肝损伤、肝细胞癌、使用膳食补充剂后肝脏的不良反应。

18.如权利要求17所述的Cl-IB-MECA，其中所述慢性肝脏感染选自以下组成的组：乙型肝炎、丙型肝炎、人类免疫缺陷病毒(HIV)感染、巨细胞病毒、Epstein-Barr病毒。

19.如权利要求17所述的Cl-IB-MECA，其中所述药物诱导的肝损伤是长期药物治疗的结果。

20.如权利要求19所述的Cl-IB-MECA，其中所述药物诱导的肝损伤是用选自以下组成的组的药物治疗的结果：胺碘酮、氨甲喋呤和硝基呋喃妥因。

21.如权利要求17所述的Cl-IB-MECA，其中所述炎性或自身免疫性紊乱选自以下组成的组：慢性胰腺炎、炎性肠病、原发性硬化性胆管炎、原发性胆汁性肝硬化、原发性肝内胆管结石病和复发性化脓性胆管炎、系统性红斑狼疮、乳糜泻、甲状腺功能减退症、雷诺氏现象、干燥综合征。

22.如权利要求17所述的Cl-IB-MECA，其中所述非酒精性代谢紊乱选自以下组成的组：糖尿病、肥胖症、脂肪变性和非酒精性脂肪性肝炎、血色病、囊性纤维化、α-1抗胰蛋白酶缺乏症、半乳糖血症、糖原贮积病、威尔逊氏病、和肝内胆汁淤积症。

23.如权利要求15所述的Cl-IB-MECA，其中所述生理参数是以下一种或更多种的血清水平：丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)、白蛋白、胆红素、凝血酶原时间(PT)、ALK磷酸酶和α-甲胎蛋白。

24.如权利要求15至23中任一项所述的Cl-IB-MECA，其中所述至少一个时间点是在使用Cl-IB-MECA治疗受试者的过程中。

25.如权利要求14至24中任一项所述的Cl-IB-MECA，所述Cl-IB-MECA用于以适合口服给药的形式使用。

26.如权利要求14至25中任一项所述的Cl-IB-MECA，所述Cl-IB-MECA配制为用于每天一次或两次给药。

27.如权利要求26所述的Cl-IB-MECA，所述Cl-IB-MECA配制为用于每天两次给药。

28.如权利要求14至26中任一项所述的Cl-IB-MECA，所述Cl-IB-MECA用于以1μg/kg体重和1mg/kg体重之间的每日量使用。

29.如权利要求28所述的Cl-IB-MECA，所述Cl-IB-MECA以10μg/kg体重和500μg/kg体重之间的量。

30.一种用于维持患有慢性肝脏疾病的受试者的肝脏功能的方法，所述方法包括向所述患有慢性肝脏疾病的受试者给药有效量的Cl-IB-MECA。

31.如权利要求30所述的方法，其中所述量有效维持至少一个指示肝脏功能的生理参数在至少两个时间点之间在医学上可接受的容限内本质上恒定的水平。

32.如权利要求30或31所述的方法，其中所述慢性肝脏疾病是肝硬化。

33.如权利要求30至32中任一项所述的方法，其中所述肝脏疾病与选自以下组成的组的一种或更多种状况相关或由选自以下组成的组的一种或更多种状况引起：长期饮酒、长期肝脏感染、慢性肝脏炎症、炎性紊乱、自身免疫性紊乱、药物诱导的肝损伤、非酒精性代谢紊乱、慢性肝损伤、肝细胞癌、使用膳食补充剂后肝脏的不良反应。

34.如权利要求30至33中任一项所述的方法，其中所述生理参数是肝酶、白蛋白和葡萄糖的一种或更多种的血清水平。

35.如权利要求34所述的方法，其中所述生理参数是以下一种或更多种的血清水平：丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)、白蛋白、胆红素、凝血酶原时间(PT)、ALK磷酸酶和α-甲胎蛋白。

36.如权利要求30至35中任一项所述的方法，其中所述至少一个时间点是在向受试者给药Cl-IB-MECA后。

37.如权利要求30至36中任一项所述的方法，所述方法包括口服给药Cl-IB-MECA。

38.如权利要求30至37中任一项所述的方法，所述方法包括每天一次或两次给药Cl-IB-MECA。

39.如权利要求28所述的方法，所述方法包括每天两次给药Cl-IB-MECA。

40.如权利要求30至39中任一项所述的方法，所述方法包括以1μg/kg体重和1mg/kg体重之间的每日量给药Cl-IB-MECA。

41.如权利要求40所述的方法，其中所述每日量在10μg/kg体重和500μg/kg体重之间。

42.一种包装物，所述包装物包括包含Cl-IB-MECA作为活性成分的药物组合物，以及使用Cl-IB-MECA维持肝脏功能的说明，所述说明包含向患有慢性肝脏疾病的受试者给药有效量的Cl-IB-MECA。

43.如权利要求42所述的包装物，其中Cl-IB-MECA的所述量有效维持至少一个指示肝脏功能的生理参数在至少两个时间点之间在医学上可接受的容限内本质上恒定的水平。

44.如权利要求42或43所述的包装物，所述包装物包含所述Cl-IB-MECA如权利要求14至41的任一项中所定义的用途的说明。

45.一种药物组合物，所述药物组合物用于维持患有慢性肝脏疾病的受试者的肝脏功能，所述组合物含有有效量的Cl-IB-MECA。

46.如权利要求45所述的药物组合物，其中所述量有效维持至少一个指示肝脏功能的生理参数在至少两个时间点之间在医学上可接受的容限内本质上恒定的水平。

47.Cl-IB-MECA用于制备维持肝脏功能的药物组合物的用途。