CN104159548B

CN104159548B - 包装的益生菌组合物及其用途

Info

Publication number: CN104159548B
Application number: CN201280064533.5A
Authority: CN
Inventors: 布赖恩·尼尔森; 埃里克·尼尔森; 海伦妮·卡勒亨纳
Original assignee: Auspicious Co Of Micoud
Current assignee: Denmark biological Co.,Ltd.; Match at innovation Ltd.; Penn Holdings Ltd.; PERISENSE APS; Second holding Co.,Ltd.; Seiler Senf J Chaanning Innovations Ltd.
Priority date: 2011-11-25
Filing date: 2012-11-23
Publication date: 2017-02-22
Anticipated expiration: 2032-11-23
Also published as: CN104159548A; EP2596776A1; EP2782534A1; WO2013076272A1; CA2856177A1; AU2012342387A1; US20180280312A1; US20160199531A1; US20140328816A1

Abstract

本发明涉及包装的益生菌组合物，其可用于在伤口和组织中治疗或预防细菌定殖。本发明的特征是所述益生菌组合物含有益生微生物，其在所述益生菌组合物的贮藏期间与水直接接触。本发明还涉及使用和生产所述益生菌组合物的方法。

Description

包装的益生菌组合物及其用途

技术领域

本发明涉及包装的益生菌组合物(packaged probiotic composition)，其可用于在伤口和组织中治疗或预防细菌定殖(bacterial colonisation)。本发明的特征是所述益生菌组合物包含益生微生物，其在益生菌组合物的贮藏期间与水直接接触。本发明还涉及使用和生产所述益生菌组合物的方法。

背景技术

数十年来已知益生菌改善消化系统的健康，还改善肠中发生的炎症或伤口(如果发生的话)(治疗溃疡性肠炎(Colitis Ulcerosa)和克罗恩病(Morbus Crohn))。

一些现有技术文献还描述了用于局部施用的益生菌组合物。

WO2008/074,331公开了冻干的乳酸菌在伤口敷料中的用途。这样的伤口敷料还可以含有用于从伤口吸收渗出物的吸收剂材料。WO2008/074,331还公开了这样的伤口敷料可以含有水，但它没有描述乳酸菌在贮藏期间与水接触。

WO00/61,201公开了抑制微生物感染的方法，经常观察到所述微生物感染与尿布和其他卫生产品的使用有关。更具体地，WO00/61,201描述了将产生乳酸之细菌的水混悬剂应用于卫生产品，所述产品是干燥的并且随后使用所述卫生产品。

然而，没有描述卫生产品的产生乳酸之细菌在卫生产品的贮藏期间与水接触。

发明概述

本发明人意识到上述现有技术方法具有显著的缺陷。

现有技术中报道的干燥的益生微生物的使用导致所述微生物的生存力显著丧失。这种方法的另一个缺点是以干燥形式贮藏长时间后，重悬时活的微生物需要时间来恢复。这一滞后时间延迟了由所述益生微生物提供的有益的降低感染的作用，并且降低了产品的医疗价值。

本发明人还发现了新型的益生菌组合物，其中所述益生微生物在贮藏期间在含水介质中存在并且在23℃具有超过3个月的保质期。

因此，本发明的一个方面涉及包装的益生菌组合物，所述益生菌组合物包含：

-含水组合物，其含有活的第一益生微生物，以及

-支持剂(support agent)。

本发明的一些优选实施方案中，所述支持剂在贮藏期间与益生菌组合物中的含水组合物直接接触。所述支持剂可以例如已经吸收所述含水组合物或者所述益生菌组合物可以包含含有支持剂和含水组合物的水凝胶。

出人意料地，本发明人发现对于这样的一些实施方案，含水组合物中支持剂的稳定性对于获得保质期长的益生菌组合物是重要的。此外，可以期望支持剂在施用至伤口时不降解。因此，在这样的一些实施方案中，优选的是，所述支持剂不可被所述含水组合物降解。

本发明的又一方面涉及生产包装的益生菌组合物的方法，所述方法包括以下步骤：

a)提供含水组合物，其含有活的第一益生微生物，

b)提供支持剂，

c)任选地，使所述支持剂与所述含水组合物接触，以及

d)将所述支持剂和所述含水组合物的组合包装到合适的初级容器中。

如上所述，所述支持剂在本发明的一些实施方案中可以不可被所述含水组合物降解。

本发明的另一方面涉及治疗人或动物对象的方法，所述人或动物对象具有定殖的伤口或组织或者处于具有定殖之伤口或组织的风险中，所述方法包括以下步骤：

1)提供如本文所述的包装的益生菌组合物，

2)打开初级容器，其中已经包装了所述益生菌组合物，以及

3)将所述益生菌组合物施用至所述定殖的伤口或组织。

动物对象的可用实例是家养动物，例如牛、猪、马、绵羊、山羊、骆驼、猫和狗。

本发明的另一方面涉及本文中所述的益生菌组合物，其用于治疗或预防定殖的伤口或组织。

附图简述

图1是根据本发明的垫伤口敷料型益生菌组合物之横截面的示意图，

图2a是垫敷料型益生菌组合物(1)的示意图，所述垫敷料型益生菌组合物包含含有含水组合物的储库(6)和分离的支持剂(8)，

图2b是图2a之垫敷料型益生菌组合物(1)的示意图，其中所述储库(6)的含水组合物已经转移到支持剂(2)，

图3a是用于制备黏性敷料型益生菌组合物之组件的横截面的示意图，

图3b是黏性敷料型益生菌组合物(1)的示意图，

图4a是黏性敷料型益生菌组合物(1)的示意图，所述黏性敷料型益生菌组合物包含含有含水组合物的储库(6)和分离的支持剂(8)，以及

图4b是黏性敷料型益生菌组合物(1)的示意图，其中所述储库(6)的含水组合物已经转移到支持剂(9)。

图5是包装的药盒(packaged kit)的示意图，所述包装的药盒包含含有含水组合物(11)的密封的第一次级容器(10)和包含支持剂(8)的第二次级容器(13)。

发明详述

如提到的，本发明的一方面涉及包装的益生菌组合物，所述益生菌组合物包含：

-含水组合物，其包含活的第一益生微生物，以及

-支持剂。

所述益生菌组合物可以是半均质(semi-homogeneous)组合物，例如基本上由含水组合物和支持剂组成的水凝胶，或者其可以是含有多个结构组件(除含水组合物和支持剂外)的结构化组合物。这样的结构化益生菌组合物的实例是黏性伤口敷料，其(除支持剂和含水组合物外)可以含有与支持剂和黏合剂层连接的顶层。

在本发明的上下文中，术语“基本由......组成”意指关注的方法或产品由特定的材料或步骤以及不显著影响本发明之基础和新颖特征的那些组成。

在本发明的上下文中，术语“包装的益生菌组合物”涉及封闭在合适容器中的益生菌组合物，所述容器(例如初级容器)防止所述益生菌组合物受到来自环境的污染。优选地，所述初级容器形成使益生菌组合物避免外部非无菌环境的屏障。所述初级容器优选为当使用益生菌组合物(例如作为伤口敷料)时第一次破裂。

所述含水组合物包含第一益生微生物，其特征为活的微生物，当施用至宿主时其可凭借其替换、抑制和/或摧毁病原微生物的能力赋予健康益处。当施用至伤口或组织时，益生微生物具有抑制和/或防止病原微生物在伤口或组织中定殖的能力。

在本发明的上下文中，短语“Y和/或X”意指“Y”或“X”或者“Y和X”。沿相同的逻辑思路(line of logic)，短语“n₁，n₂，...n_i-1和/或n_i”意指“n₁”或“n₂”或...或“n_i-1”或“n_i”或者组分n₁，n₂，...n_i-1和n_i的任意组合。

含水组合物中的益生微生物是活的并且因此至少能够是代谢活跃的以及还优选地能够生长。当用作所述益生菌组合物的组分时并且当与来自伤口或组织之渗出物中存在的一种或更多种可代谢底物或营养物接触时，益生微生物优选具有代谢活性和生长的能力。

含水组合物优选为含水液体并且通常含有大量的水。在本发明的一些优选实施方案中，含水组合物含有相对于含水组合物之总重量至少50％(w/w)量的水。

例如，含水组合物可以含有至少60％(w/w)量的水，例如至少70％(w/w)，优选至少80％(w/w)，甚至更优选至少90％(w/w)。

可以优选的是，含水组合物含有至少95％(w/w)(例如至少97％(w/w))之量的水。

含水组合物可以例如含有50％-99.9％(w/w)范围内之量的水，例如在60％-99.7％(w/w)的范围内，优选在70％-99.5％(w/w)的范围内，例如在80％-99.3％(w/w)的范围内，甚至更优选在90％-99.1％(w/w)的范围内，例如在95％-99％(w/w)的范围内。

应当注意的是，含水组合物的水还涵盖益生微生物所包含的水。

在本发明的一些优选实施方案中，第一益生微生物是细菌或真菌。特别优选的是所述第一益生微生物为细菌。

优选所述细菌是厌氧细菌，例如产生乳酸的细菌，例如乳杆菌属(Lactobacillusspecies)或双歧杆菌属(Bifodobacterlum species)。

在本发明的一些优选实施方案中，第一益生微生物(例如乳酸乳杆菌(Lactobacillus lactic)和短乳杆菌(Lactobaeillus brevis)的亚种)能够产生一种或更多种细菌素(bacteriocin)。产生细菌素的微生物在本发明的情形下是有利的，因为已知细菌素作为窄谱抗生素充当蛋白质毒素并抑制其他细菌菌株的生长。

在本发明的一些优选实施方案中，益生微生物为乳酸菌。所述乳酸菌可以是例如属于选自以下之属的细菌：肉食杆菌属(Carnobacterium)、肠球菌属(Enterococcus)、乳杆菌属(Lactobacillus)、乳球菌属(Lactococcus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、酒球菌属(Oenococcus)、片球菌属(Pediococcus)、链球菌属(Streptococcus)、四联球菌属(Tetragenococcus)、漫游球菌属(Vaggococcus)、魏斯氏菌属(Weissella)和双歧杆菌属(Bifodobacterium)。

在本发明的一些实施方案中，第一益生微生物为芽孢杆菌属菌株(例如，凝结芽孢杆菌(B.coagulans))。

在本发明的另一些实施方案中，第一益生微生物为酵母，例如布拉酵母(Saccharomyces boulardii)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)或米曲霉(Aspergillus oryzae)。

另一些可用的乳酸菌和非乳酸菌可见于WO2008/074,331或WO00/61,201。

含水组合物可以含有选自上述微生物的一种或更多种另外的益生微生物。含水组合物可以例如含有第二益生微生物，其与第一益生微生物不同，以及甚至第三益生微生物，其与第一和第二益生微生物不同。

此外，含水组合物还可以含有一种或更多种非益生微生物(例如非益生乳酸菌)。

然而，优选这样的含水组合物和益生菌组合物都不含有病原微生物。

在本发明的一些优选实施方案中，含水组合物含有总量为至少约10³cfu(菌落形成单位)/mL的益生微生物。益生菌组合物可以例如含有总量为至少约10⁴cfu、优选至少10⁵cfu(例如至少10⁶cfu或至少10⁷cfu)以及甚至更优选至少10⁸cfu/mL(例如至少10⁹cfu/mL)的益生微生物。

或者，含水组合物可以含有总量为10³cfu/mL至10¹⁰cfu/mL的益生微生物，优选10^scfu/mL至10⁹cfu/mL，甚至更优选10⁶cfu/mL至10⁸cfu/mL的益生微生物。本领域技术人员将理解，益生微生物的总量涵盖第一益生微生物的所有单个细胞以及任何另外的益生微生物的单个细胞。

本发明人已发现包装的益生微生物的贮藏有时与不期望的气体在包装的益生菌组合物中产生相关。甚至温和程度的气体产生可以导致在支持剂中或在益生菌组合物的其他地方形成气泡，这可以降低益生菌组合物的整体效力。大程度的气体产生能够使所述益生菌组合物已经包装在其中的包装膨胀甚至使其爆炸，这种情况下益生菌组合物变得毫无用处。

本发明人还已发现与不期望的气体形成有关的问题可以通过限制含水组合物中低分子含碳营养物的量来解决。

因此，在本发明一些优选的实施方案中，含水组合物中分子量为至多5000g/mol的含碳营养物的总量为相对于含水组合物的重量至多0.5％(w/w)。例如含水组合物中分子量为至多5000g/mol的含碳营养物的总量可以是相对于含水组合物的重量至多0.2％(w/w)，优选至多0.1％(w/w)，并且甚至更优选相对于含水组合物的重量至多0.05％(w/w)，例如至多0.001％(w/w)。

在本发明的上下文中，术语“分子量为至多5000g/mol的含碳营养物”涉及充当第一益生微生物之营养物和碳源的有机化合物。这样的化合物为例如醇、碳水化合物、肽、脂肪酸及其组合。应当注意，对益生微生物没有营养价值的含碳化合物不被视为根据本发明的含碳营养物。

此外，含碳营养物优选被含水组合物中的益生微生物降解和/或代谢的那些。含水组合物中益生微生物的治疗效力被认为取决于微生物的代谢活性，从而伤口部位的pH被降低至抑制病原生物体增殖并且抑制这样的病原体产生蛋白水解酶的水平。

第一益生微生物(或另外的益生微生物)的生存力是pH依赖的，并且如果含水组合物具有至多为pH6.0的pH，那么包装的益生菌组合物的保质期延长。例如，含水组合物可以具有至多pH5，优选至多pH4.5，甚至更优选至多pH4的pH。

在一个实施方案中，包装的益生菌组合物的含水组合物具有范围为pH2至6的pH。例如，含水组合物可以具有范围为pH2.5至5，优选范围为pH3.0至4.5，或者甚至更优选范围为pH3.0至4.0的pH。

或者，含水组合物可以具有范围为pH4至6，优选范围为pH4.3至5.7，或者甚至更优选范围为pH4.7至5.3的pH。已经发现，这些范围内的pH降低患者的不适和灼烧感，其在向伤口施用酸物质时出现。

在本发明的上下文中提到的pH值涉及相关液体在25℃的pH值。

此外，通过将益生微生物保持在相同的培养基中，益生微生物的稳定性和/或生存力改善，其中所述微生物已经在培养基中发酵并且至少优选在含水组合物中存在一种或更多种发酵产物。

乳酸是乳酸菌发酵产物，所述乳酸菌适合用于本发明的包装的益生菌组合物并且因此可以存在于含有第一益生微生物的含水组合物中。

在本发明的一些实施方案中，含水组合物基本上由发酵液(fermentation broth)组成，所述发酵液通过将益生微生物与含碳营养物发酵直到基本上所有含碳营养物已经耗尽获得。然而，可能精制发酵液。可以例如优选地移除生理上不可接受的组分，一旦其施用至待治疗的伤口或组织，其干扰伤口愈合过程或者其抑制益生微生物的代谢和/或生长。

此外，乳酸还是适合用于调节含水组合物之pH的酸。

在一些实施方案中，包装的益生菌组合物的含水组合物包含相对于含水组合物之重量至少约0.01％(w/w)的乳酸。例如，含水组合物可以含有至少0.05％(w/w)，例如至少0.1％(w/w)，优选至少0.2％(w/w)，例如至少0.4％(w/w)，以及甚至更优选至少0.6％(w/w)，例如至少1％(w/w)的乳酸。

例如，含水组合物可以含有范围为0.01％-2％(w/w)，优选范围为0.1％-1.5％(w/w)，甚至更优选范围为0.2％-1％(w/w)的乳酸量。

在本发明的上下文中，术语“乳酸”涉及质子化和去质子化状态的乳酸并且因此还涵盖了乳酸盐。

一旦益生菌组合物已经被施用至待治疗的伤口或组织并且因此在与伤口或组织之病原微生物的竞争中胜出，含水组合物以及其中所含的益生微生物提供迅速的益生效果。

含水组合物可以例如通过发酵过程产生，其中益生微生物与水和营养物混合并在合适的温度(例如范围为20-45℃，例如大于约35℃)发酵。优选地，发酵持续直到基本上所有的含碳营养物已经被益生微生物消耗。

含水组合物还可以含有其他可用的组分(例如盐、pH缓冲剂和/或生长辅助因子)，其有益于益生微生物的稳定性和医疗效果。

可用的缓冲剂的实例为磷酸盐、乳酸、乙酸和酒石酸缓冲液。磷酸盐缓冲剂形成磷酸盐缓冲盐水溶液的一部分。

益生菌组合物包含支持剂，其优选具有打开的并且例如多孔的结构，其充当包含第一益生微生物之含水组合物的结构支持。或者，支持剂可以是凝胶网络或者可以具有凝胶形成特性并且与含水组合物组合形成水凝胶。

当支持剂的形式是纤维、泡沫或者形成水凝胶片层的凝胶网络时，支持剂的厚度有时是相关的特征。在本发明的一些实施方案中，支持剂的厚度(即，支持剂面向伤口或组织的一侧与相反的一侧之间的距离)为至多5cm、例如至多4cm或者例如至多3cm。例如，支持剂可以具有至多2cm的厚度。

在本发明的一些实施方案中，支持剂具有范围为0.1cm-5cm，优选范围为0.2cm-4cm，甚至更优选范围为0.5cm-3cm的厚度。例如，支持剂可以具有范围为1cm-2cm厚度。

支持剂甚至可以更薄，并且在本发明的一些实施方案中，支持剂具有范围为0.05cm-2cm，优选范围为0.1cm-1.5cm，甚至更优选范围为0.2-1cm的厚度。例如，支持剂可以具有范围为0.3cm-0.8cm的厚度。支持剂可以例如具有范围为0.1cm-0.5cm的厚度。

此外，支持剂优选具有吸水和/或保水性质。在本发明的一些优选实施方案中，支持剂是不溶于水的。在本发明的情况下，如果支持剂在23℃有至多0.5g/100g水的溶解度，那么认为它是不溶于水的。

例如，可以优选支持剂包含一种或更多种固体材料或者甚至由其组成。支持剂可以例如包含一种或更多种聚合物材料或者甚至由其组成。

支持剂优选包含一种或更多种生物相容的材料或者甚至由其组成，并且因此优选适合用于支持组合物中活的益生微生物并且适用于接触伤口或组织二者。

在本发明的一些实施方案中，支持剂不与微生物不可逆地结合并且不阻止组合物中微生物的生长和迁移。在本发明的一些优选实施方案中，支持剂的孔径尺寸为益生微生物的平均直径的至少5倍，优选至少10倍，甚至更优选益生微生物的平均直径的至少20倍。

在本发明的另一些实施方案中，支持剂与至少一些益生微生物不可逆地结合。

支持剂可以例如包含一种或更多种基于选自以下的聚合物材料或者甚至由其组成：聚酯、聚丙烯、聚乙烯、聚丙烯酸酯、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚氨酯、聚乙酸乙烯酯、多糖及其组合。支持剂可以例如包含一种或更多种基于选自以下的一种或更多种单体或者甚至由其组成：丙烯酸钠、丙烯酸、丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸甲酯及其组合。

用于支持剂的聚合物材料可以例如包含交联的聚合物或者甚至由其组成。本质上不亲水的材料(例如聚乙烯或聚丙烯)可以具有修饰的表面，其赋予其亲水性。或者，本质上不亲水的材料可以与亲水的材料混合。

通常优选在使用前的贮藏期间保持其形状、结构和/或颜色的支持剂，以确保包装的益生菌组合物足够的保质期。

本发明人还出人意料地发现对于这样的实施方案，含水组合物中支持剂的稳定性对于获得保质期长的益生菌组合物是重要的。此外，可以期望的是，当施用至伤口时支持剂不降解。因此，在这样的一些实施方案中优选不可被含水组合物降解的支持剂。

对于本发明的一些实施方案，其中含水组合物在贮藏期间与支持剂接触，优选支持剂不可被含水组合物降解。例如，不含有可水解之主链键的支持剂倾向于不可降解。

这样的支持剂优选地由一种或更多种聚合物材料形成，所述材料不含有包含在含水组合物中存在的pH下易于水解之键型的聚合物主链。含水组合物通常具有温和的酸性pH(pH2-6)。

此外，来自益生微生物的酶(其可以存在于含水组合物中)可促进支持剂的降解。因此，优选这样的支持剂，其由一种或更多种聚合物材料形成，所述材料不含有包含在含水组合物之特定酶的存在下易于水解之键型的聚合物主链。

在本发明的上下文中，术语“不可降解的支持剂”意指在长期暴露于含水组合物的期间仅表现出非常有限的降解或者优选没有降解。

支持剂的降解性取决于含水组合物的实际pH和其中含有的酶。因此，可有必要进行测定以测试特定支持剂是否不可被含水组合物降解。

然而，支持剂(其通常不可被本文所述的含水组合物降解)可以例如包含一种或更多种选自以下的聚合物材料或者甚至由其组成：酸稳定的聚酯、聚氨酯、聚丙烯、聚乙烯、聚丙烯酸酯、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚乙酸乙烯酯及其组合。

如果支持剂是凝胶网络并且益生菌组合物包含无定型水凝胶，其包含支持剂和含水组合物二者，那么优选当加热至35℃的温度持续3天时，益生菌组合物损失其黏度的至多25％。黏度的损失如下测量：

其中是无定型水凝胶在上述3天贮藏前的动态黏度并且是无定型水凝胶在贮藏后的动态黏度。动态黏度在布氏黏度计(Brookfield viscometer)上在23摄氏度下测量。

如果支持剂为纤维、泡沫或形成水凝胶片层之凝胶网络的形式，如果当浸没在含水组合物中并且加热至35℃的温度持续10天，支持剂具有至多10％w/w(干重)的重量损失，那么认为其不可降解。

重量的损失如下测量：

其中W_贮藏前是支持剂在上述10天贮藏之前的干重并且W_贮藏后是支持剂贮藏后的干重。动态黏度在布氏黏度计上在23摄氏度测量。

重量损失测定是基于干重大约为2g并且具有最大厚度2.0cm的支持剂样品。干支持剂样品在贮藏前称重以获得W_贮藏前，然后浸没在体积对应于支持剂样品之外部体积20倍的含水组合物中。

在35℃的温度贮藏10天后，将支持剂样品从含水组合物分离，尽可能地移除液体而不破坏支持剂样品。随后洗涤支持剂样品3次，每次用体积对应于支持剂样品之外部体积20倍的脱矿物质水。脱矿物质水应当具有23℃的温度。支持剂充分地与脱矿物质水接触并且在尽可能多的水从支持剂分离前允许静置20分钟。一旦脱矿物质水已经从支持剂移除，如上所述，加入下一体积的干净脱矿物质水以与支持剂样品接触。当支持剂样品已经洗涤三次并且最大量的脱矿物质水已经被除去时，将潮湿的支持剂样品放置在加热柜中，提供70℃的温度和25％的相对湿度，然后干燥24小时。最终，测量干支持剂支持物的重量以获得W_贮藏后。

支持剂可以例如包含一种或更多种选自以下之形式的材料或者由其组成：纤维、泡沫、凝胶网络、凝胶形成剂(gel-forming agent)及其组合。

在本发明的一些实施方案中，支持剂以干燥形式存在于包装的益生菌组合物中，意指支持剂不与任何显著量的水接触。

例如，如果支持剂和被支持剂吸收的任何水之组合含有相对于支持剂和吸收的水之总重量至多10％(w/w)的水，那么认为支持剂是干燥的。

干燥形式的支持剂可以例如通过对湿润形式的支持剂或支持剂之混合物进行冷冻干燥或真空干燥来制备。

在本发明的一些实施方案中，支持剂以湿润形式存在于包装的益生菌组合物，意指支持剂与液体水接触。在这种情况下，支持剂和被支持剂吸收之任何水的组合含有相对于支持剂和吸收之水的总重量超过10％(w/w)的水，并且优选至少20％(w/w)的水，甚至更优选至少30％(w/w)的水。

在本发明的一些优选实施方案中，支持剂包含纤维，甚至由其组成。这样的纤维可以例如是编织纤维织物、无纺纤维织物或其组合的形式。纤维可以例如包含聚合物(例如聚酯、聚氨酯、聚丙烯、聚乙烯、聚丙烯酸酯、吸收剂聚丙烯酸酯及其组合)或者甚至由其组成。

纤维可以例如附着于聚合物膜(例如聚酯或聚氨酯膜)。

纤维的优选类型是超吸收纤维(super absorbent fibre，SAF)，其可以包含丙烯酸纤维或者甚至由其组成。SAF纤维经常有较差的湿强度，因此，当使用SAF时，将SAF与具有更高湿强度的纤维(例如聚酯纤维)混合是有利的。

在本发明的一些实施方案中，支持剂的纤维包含相对于在支持剂中使用的纤维之总重量25％-95％(w/w)的超吸收纤维，优选35％-85％(w/w)，甚至更优选50％-80％(w/w)(w/w)的超吸收纤维。

在本发明的一些优选实施方案中，支持剂包含超吸收纤维和低吸收纤维的混合物。

在本发明的一些优选实施方案中，支持剂包含具有低吸水或者不吸水核心和吸水外壳的纤维。这样的纤维可以例如为来自Toyobo，JP的Lanseal纤维。

在本发明的上下文中，术语“超吸收纤维”意指纤维吸收至少25克纯净水/克纤维。

在本发明的上下文中，术语“低吸收纤维”意指纤维吸收至多10克纯净水/克纤维。

在本发明的一些优选实施方案中，支持剂包含泡沫或者甚至由其组成。

泡沫可以例如包含聚合物(例如聚乙烯醇、聚丙烯酸酯、聚氨酯、聚乙酸乙烯酯或其组合)或者甚至由其组成。

在本发明的一些优选实施方案中，支持剂包含凝胶形成剂或者甚至由其组成。

在本发明的上下文中，术语“凝胶形成剂”涉及这样的试剂，其在与含水组合物接触后将形成水凝胶或者水凝胶样黏性组合物。

可用的水凝胶形成剂通常包括聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚丙烯酸酯、聚氨酯、聚乙酸乙烯酯等。

在本发明的一些优选实施方案中，支持剂包含凝胶网络或者甚至由其组成。

在本发明的上下文中，术语“凝胶网络”涉及交联的凝胶形成剂的网络，其形成水凝胶的骨架。

在本发明的一些优选实施方案中，益生菌组合物包含包含支持剂和水的水凝胶或者甚至由其组成。在这种情况下，支持剂包含凝胶网络或者甚至由其组成。

水凝胶可以采用水凝胶片层的形式，即水凝胶含有交联聚合物的连续基质，从而形成片层样水凝胶结构。在这种情况下，凝胶网络通常是交联的凝胶形成剂的连续网络。

或者，水凝胶可以采用无定型水凝胶的形式。这种情况下，凝胶网络通常含有交联之凝胶形成剂的多种网络片段。当水合时，网络片段可相对于彼此移动并且因此提供了具有液体样性质的无定型水凝胶。

在又一种替代方案中，水凝胶可以是高黏性液体，其具有类似于无定型水凝胶的性质。

如果这样的益生菌组合物为包含第一益生微生物的无定型水凝胶，或者如果支持剂与含水组合物形成无定型水凝胶，无定型水凝胶可以具有至少50000cP的动态黏度。例如，无定型水凝胶可以具有至少1*10⁵cP，优选至少3*10⁵cP，例如至少6*10⁵cP，甚至更优选至少9*10⁵cP，例如至少1*10⁶cP的动态黏度。动态黏度用布氏黏度计在23摄氏度下测量。

或者，无定型水凝胶可以具有范围为5*10⁴-2*10⁶cP，优选范围为1*10⁵-1.5*10⁶cp，甚至更优选范围为5*10⁵-1*10⁶cP的动态黏度。

其中，包装的益生菌组合物包含含有支持剂和含水组合物的水凝胶，水凝胶优选含有至少50％的水。或者，水凝胶可以含有至少60％(w/w)，例如至少70％(w/w)，优选至少80％(w/w)，例如至少90％(w/w)，或者甚至更优选至少95％(w/w)(例如至少97％(w/w))的水。或者，水凝胶可以含有约50％-60％(w/w)的水，或60％-70％(w/w)的水，或70％-80％(w/w)的水，或80％-90％(w/w)的水，90％-97％(w/w)的水或95％-99％(w/w)的水。

在本发明的一些优选实施方案中，益生菌组合物是伤口敷料。

在本发明的一些实施方案中，其中益生菌组合物是伤口敷料，支持剂包含一种或更多种这样的材料或甚至由其组成，所述材料选自以下的形式：纤维、泡沫、凝胶网络、或凝胶形成剂及其组合。

益生菌组合物可以例如是所谓的垫敷料，其包含支持剂、含水组合物以及还任选地一个或更多个另外的层(例如湿气屏障层)，或者甚至由其组成。垫敷料通常需要绷带或者另外的手段以将其保持在治疗部位上的位置。

用于垫敷料的优选支持剂可以含有纤维、泡沫或凝胶网络形式的一种或更多种材料。用于垫的支持剂还可以含有凝胶形成剂-特别是当支持剂以干燥形式使用时。

益生菌组合物(1)的示例性实施方案，其是图1中举例说明的垫伤口敷料，图1含有包含含水组合物(2)之支持剂的横截面的示意图。

在本发明的一些优选实施方案中，含水组合物与支持剂接触。例如，这是当益生菌组合物是水凝胶或者当益生菌组合物包含用含水组合物浸渍的伤口敷料或甚至由其组成时的情况。

然而，在本发明的另一些优选实施方案中，当益生菌组合物在第一状态时，含水组合物不接触支持剂，但其中当含水组合物接触支持剂时，益生菌组合物可转变为第二状态。

第一状态通常是益生菌组合物在未打开的初级容器中贮藏期间的状态。转变成第二状态优选地在打开初级容器期间或之后或者在临打开初级容器之前发生。

在本发明的一些实施方案中，益生菌组合物包含含有含水组合物和导管的密封储库，当密封储库打开时，所述导管将允许含水组合物接触支持剂。密封的储库通常在上述转变期间打开。

这种示例性实施方案在图2a和2b中示意性举例说明。除了图1中描述的组分，这种益生菌组合物还含有储库(6)，其中含水组合物在贮藏期间是密封的。储库(6)优选经导管(7)与支持剂(8)连接。在图2a中，益生菌组合物处于其第一状态，即含水组合物保持在储库(6)中，与支持剂(8)分开。这个实施方案的益生菌组合物可转变为第二状态(在图2b中示意性举例说明)，其中储库(6)的含水组合物已经转移到支持剂(2)，其现在含有水和来自含水组合物的第一益生微生物二者。

转变通常涉及打开储库(6)和允许含水组合物经导管(7)流到支持剂(8)中。

储库可以例如通过对储库突起(protrusion)部分的按压打开，所述突起在储库壁上打孔并允许含水组合物流到支持剂中。或者，储库可以设计成当其弯曲时以可控的方式破裂，并且破裂允许含水组合物流动并被支持剂吸收。

储库还可以包含如本文中限定的搅动机构。

当用作伤口敷料时，包装的益生菌组合物还可以包含黏合剂层，其发挥在伤口周围的皮肤或者这种伤口与施用的敷料之间形成接触层的作用。黏合剂层优选为可渗透或半渗透的，允许渗出物从敷料蒸发出去。优选的黏合剂层包含吸收黏合剂(例如，来自Coloplast A/S，Denmark的Comfeel透明辅料)、硅酮黏合剂、聚丙烯酸酯黏合剂或聚氨酯黏合剂。

益生菌组合物还可以包含黏合剂层。这样的黏合剂层应当优选地能够将益生菌组合物黏附到其待活化的部位。

顶层可以形成最远离伤口接触表面的益生菌组合物外表面，其发挥防止伤口渗出物从敷料渗漏并且防止污染物进入伤口敷料的作用。优选地，顶层能够呼吸，能够渗透氧气和水蒸气二者。优选蒸汽传输速率为至少1000克/天/平方米/24小时。用于顶层的合适材料为聚氨酯膜。

在一个实施方案中，含水组合物在使用前不与支持剂接触(即使用前处于其未打开的状态)，并且当含水组合物接触支持剂时，其中打开包装的步骤导致益生菌组合物的转变。

支持剂可以例如直接或间接地通过一种或更多种其他材料附着于顶层。

益生菌组合物还可以包含底层。底层优选为可高度渗透水的并且优选为多孔的。在本发明的一些实施方案中，底层具有孔或空隙(opening)，其充分大以允许包含第一益生微生物的含水组合物通过底层流到待治疗的伤口或组织中。然而，可以优选孔或孔隙充分地小以保留支持剂。当支持剂必须与待治疗的伤口或组织接触时，这种实施方案是特别优选的。

在本发明的一些优选实施方案中，益生菌组合物包含顶层、底层和黏合剂，并且其中所述支持剂和所述含水组合物位于腔中，所述腔至少部分地被顶层和/或底层限定，并且其中黏合层配置为使得益生菌组合物可黏附到皮肤表面，使得底层接触伤口表面。

这一示例性实施方案在图3a和3b中示出。图3a示出用于产生益生菌组合物的组分：顶层(3)，含有并接触含水组合物的支持剂(2)，底层(4)和黏合剂层(5)。益生菌组合物可以通过以下产生：将支持剂(2)(其含有含水组合物)放在由顶层(3)形成的腔中，并且通过将底层(4)附着到顶层(3)的至少一部分(围绕腔的那一部分)上封闭所述腔。附着可以通过使用传统的附着技术(例如焊接)或使用黏合剂进行。

此外，如果顶层自身不具有充分的黏合剂特征，可以在顶层的部分表面上存在黏合剂层(5)，其接触待治疗伤口或组织周围的皮肤。黏合剂层(5)还可以附着于非黏性片层(未在图中示出)，其防止黏合剂层(5)粘到包装的益生菌组合物的包装上，并且在使用前必须从益生菌组合物移除。

这一示例性实施方案在图4a和4b中示意性举例说明。除了在图3a和3b中描述的组分，这种益生菌组合物还含有储库(6)，其中的含水组合物在贮藏期间是密封的。储库(6)优选经导管(7)与支持剂(8)连接。在图3a中，益生菌组合物处于其第一状态，即含水组合物保持在储库(6)中，与支持剂(8)分开。这个实施方案的益生菌组合物可转变为第二状态(在图4b中示意性举例说明)，其中储库(6)的含水组合物已经转移到支持剂(2)中，其现在含有水和来自含水组合物的第一益生微生物二者。

如上所述，储库可以例如通过对储库突起部分的按压打开，所述突起在储库壁上打孔并允许含水组合物流到支持剂中。或者，储库可以设计成当其弯曲时以可控的方式破裂，并且破裂允许含水组合物流动并被支持剂吸收。

益生菌组合物优选含有足量的水以能够向待治疗的伤口或组织提供水。

在一个实施方案中，益生菌组合物含有0.1mL的含水组合物。例如益生菌组合物可以含有至少0.5mL的含水组合物，例如至少1mL，或者甚至至少3mL的含水组合物。

甚至可以使用更高量的含水组合物之量。因此，在本发明的一些实施方案中，益生菌组合物含有至少50mL的含水组合物。例如，益生菌组合物可以含有至少100mL的含水组合物，例如至少200mL，或甚至至少300mL的含水组合物。

在本发明的一些优选实施方案中，益生菌组合物含有范围为0.1mL-100mL的含水组合物，优选范围为0.2mL-50mL，优选范围为0.5mL-30mL，甚至更优选范围为1mL-20mL的含水组合物。

甚至可以使用更高量的含水组合物之量。因此，在本发明的一些实施方案中，益生菌组合物含有范围为50mL-500mL的含水组合物之量。例如，益生菌组合物可以含有范围为100mL-450mL，优选范围为150mL-400mL或者甚至范围为200mL-350mL的含水组合物之量。

本发明的益生菌组合物的一个益处是其特别适用于干燥的伤口，由于其向伤口提供水并提供了含有益生微生物的受控微生物环境二者。

在一些优选的实施方案中，包装的益生菌组合物的支持剂可以已经吸收了一定量的水(例如由含水组合物提供)，对应于支持剂持水量(waterholding capacity)的至少50％。例如支持剂可以含有对应于其持水量之至少75％的水量，优选至少90％，甚至更优选其持水量的至少95％。支持剂在贮藏期间保持与含水组合物分开的实施方案中，以上水含量描述了在将益生菌组合物施用至伤口或组织前，支持剂已经接触含水组合物的情形。

根据EN13726-1章节3.2测量持水量，其中将给定重量的伤口敷料浸没在盐水溶液中，随后测量重量。

在本发明的一些优选实施方案中，支持剂与含水组合物之间的重量比为至多1∶1，优选至多1∶2，甚至更优选至多1∶5。例如，支持剂与含水组合物的组合物之间的重量比为至多1∶10，优选至多1∶20，甚至更优选至多1∶40，例如大约1∶50.

在本发明的一些优选实施方案中，支持剂与含水组合物之间的重量比在1∶1-1∶50的范围内，优选1∶2-1∶30的范围内，甚至更优选1∶4-1∶20的范围内。

益生菌组合物已经包装在合适的初级容器中并且因此成为包装的益生菌组合物。初级容器对于维持益生菌组合物中受控的微生物环境和将水保持在含水组合物中是重要的。

益生菌组合物包装在其中的初级容器通常包含提供保护性无菌屏障层的材料，所述屏障层具有至多10g/m²/24小时的水渗透性(根据EN13726-2，3.2章节测量)。例如，初级容器的材料可以提供具有至多5g/m²/24小时之水渗透性的屏障层。或者，初级容器的材料可以提供具有至多1g/m²/24小时之水渗透性的屏障层。

合适的材料通常选自塑料、铝箔、塑料层压板，任选地与黏合剂(例如聚氨酯)结合。合适的塑料包括：PET、PE、LLDPE、CPP、PA、PETP、METPET和Tyvek。如果含水组合物和支持剂已经包装在次级容器中，初级容器可以是基于纸板或纸张的容器。

多种容器类型可用于包装益生菌组合物。可用容器的非限制性实例为焊接膜，例如铝薄膜、盒、袋、盘、罐和包装物(wrapper)。

本发明的一个益处是，包装的益生菌组合物具有非常长的保质期。在一些实施方案中，当保持在23℃的温度和50％的相对湿度时，包装的益生菌组合物具有至少6个月的保质期。例如，当保持在23℃的温度和50％的相对湿度时，包装的益生菌组合物可以具有至少9个月(例如至少12个月)，甚至更优选至少18个月的保质期。

在给定温度和湿度下的保质期确定为从包装的益生菌组合物的生产到贮藏期间至少以下事件之一出现的时间：

-通过益生菌组合物的目视检查观察到气泡

-相对于在新产生的益生菌组合物中存在的益生微生物之菌落形成单位(cfu)的数目，益生菌组合物已经损失了超过99％的活的益生微生物，

-通过目视检查可观察到支持剂的降解，以及

-通过目视检查可观察到支持剂的褪色。

在本发明的一些优选实施方案中，包装的益生菌组合物是包装的药盒，其含有：

-密封的第一次级容器，其包含含水组合物，以及

-支持剂。

支持剂可存在于这样的药盒中或者它可以存在于含有支持剂的密封的第二次级容器中。

第一和第二次级容器二者均可以包含在初级容器中。初级容器可以例如包含这样的腔，其中存在第一和第二次级容器二者，或者初级容器可以包含两个腔，各自含有第一或第二次级容器。

因此，本发明的一个方面涉及包装的药盒，其含有：

-密封的第一次级容器，其包含含水组合物，以及

-支持剂。

在本发明的一些优选实施方案中，密封的第一次级容器不附着到密封的第二次级容器，或者其附着到密封的第二次级容器以使得这两个容器可以相互分开而不打开第二个密封的容器。这样的可分开类型的附着可例如通过使用合适的黏合剂将第一次级容器黏附到第二次级容器来获得。

在本发明的另一些实施方案中，形成第一次级容器的一部分材料还形成第二次级容器的一部分。

药盒还可以包含固定构件以将支持剂固定到伤口。固定构件的可用的实例为例如非黏合剂绷带或黏合剂组分，其能够将支持剂附着到待治疗对象的皮肤或者伤口。黏合剂组分可以例如为黏合剂带。非黏合剂绷带可以是例如纱布绷带或类似的绷带。

固定构件可以位于被药盒包含的第三次级容器中或者它可以被药盒本身所包含。

在本发明的一些实施方案中，黏合剂组分附着到支持剂上并且支持剂和黏合剂组分的组合位于密封的第二次级容器中。

在本发明的一些实施方案中，固定构件能够从支持剂吸收多余液体。

次级容器是密封的意味着没有来自外部的污垢或微生物能进入含水组合物或者支持剂。

密封的第一次级容器含有含水组合物并且因此应当足够防水以避免大量的水从含水组合物渗漏。

因此，在本发明的一些实施方案中，第一次级容器在23℃和50％的相对湿度贮藏180天期间，损失其水的至多10％(w/w)。例如，第一次级容器在23℃和50％的相对湿度贮藏180天期间，可以损失其水的至多5％(w/w)。或者，第一次级容器在23℃和50％的相对湿度贮藏180天期间，可以损失其水的至多3％(w/w)。

在本发明的一些优选实施方案中，第一次级容器在23℃和50％的相对湿度贮藏180天期间，损失其水的至多2％(w/w)，并且优选甚至更少。

如上所述，贮藏期间具有水之低损失的容器优选地使用一种或更多种具有低水渗透性的材料生产。这样的材料是本领域公知的。

本发明人已发现第一次级容器的实际设计对益生菌组合物的可用性有显著影响。第一次级容器优选地包含开口机构，其允许受控地打开第一次级容器。

可用的开口机构的非限制实例为：待从瓶剥下(pealed)或拧下帽，待移除的密封，第一次级容器待移除的一部分(例如通过破坏或撕裂)。

在本发明的一些实施方案中，开口机构的开启打开了通道，含水组合物可以通过其离开第一次级容器。因此，在开启开口机构之后，含水组合物与第一次级容器的外部流体联通。

虽然通道可以在尺寸和横截面不同，但目前优选这样的通道横截面使得单独的重力不能迫使含水组合物到第一次级容器外。

在本发明的一些实施方案中，通道的有效内径为至多5mm，优选至多4mm，甚至更优选至多2mm。通道的有效内径可以例如为至多1mm，优选至多0.5mm，甚至更优选至多0.2mm。

在本发明的上下文中，术语“有效内径”是可在通道的横截面内绘制的最大圆之直径。

特别优选地，使用第一次级容器的人能够控制含水组合物何时从打开的第一次级容器释放。此外，可以优选，使用打开的第一次级容器的人控制所释放的含水组合物的多少。

第一次级容器可以含有显示含水组合物多少的一个或更多个目视指示器，其对应于含水组合物的一个或更多个预定量。预定量可以例如涉及预定量的重量或预定量的体积。

例如，第一次级容器可以包含目视指示器，其标志含水组合物之总量的一半。或者，第一次级容器可以包含目视指示器，其标志含水组合物之总量的四分之一，一半和四分之三。第一次级容器可以包含目视指示器，其标志含水组合物之总量的每dL。

第一次级容器可以包含目视指示器，其标志保留在第一次级容器中的含水组合物的多少或者替代地已经使用的含水组合物的多少。

含有一个或更多个以上提到目视指示器的第一次级容器，优选地具有一个或更多个透明或半透明区域，使用者通过它可以评估含水组合物的剩余水平。

含有一个或更多个以上提到目视指示器的第一次级容器的非限制实例为透明的或半透明的玻璃瓶或者透明或半透明的注射器，其是容积刻度化的。

在本发明的一些优选实施方案中，通过向第一次级容器的至少一部分外表面施加压力，含水组合物从打开的第一次级容器转移。例如，第一次级容器可以是具有窄通道的软瓶或袋，在贮藏期间该通道关闭。在打开的第一次级容器之，通道也打开，但在向第一次级容器的至少一部分外表面施加压力前，含水组合物不离开容器。

在第一次级容器上施加压力的非限制实例为按压或挤压第一次级容器。

从以上将显而易见，第一次级容器可以以许多不同的方式和不同的材料成型。

在本发明的一些实施方案中，第一次级容器是由软的、柔性材料(例如有机聚合物)制成的瓶样容器，一旦其已经被打开可通过手动按压排空第一次级容器。瓶样容器优选具有窄的通道，其不允许含水组合物的外流与空气的内流在同一时间发生。

在本发明的另一些实施方案中，密封的第一次级容器是填充了含水组合物的袋。所述袋优选地含有如上限定的窄通道，其允许将含水组合物受控转移到支持物。

在本发明的一些实施方案中，第一次级容器是注射器，优选地由一种或更多种具有低水渗透性的材料制造，注射器的尖端是密封的，例如通过帽，其粘在或压在尖端上。在这种情况下，打开机构是帽，其应当被移除以打开注射器之尖端中的通道。

含水组合物密封在注射器的内部，在注射器壁、手柄活塞(pistol)与帽之间。通过从注射器的尖端除去帽并进一步将手柄活塞挤压到注射器中，将含水组合物从注射器转移。

在本发明的另一些实施方案中，第一次级容器是瓶或瓶样容器，其具有作为通道的开口，含水组合物可从其倒在支持剂上。瓶子还配有开口机构，例如帽，其可被拧下以打开瓶或瓶样容器。或者，瓶或瓶样容器的开口机构可以是例如封条，其封闭了瓶或瓶样容器的通道，并且其可以被移除、破坏或者改进以打开通道。当通过从含水组合物倒出含水组合物，将含水组合物从第一次级容器转移到支持剂时，通道的有效内径优选足够大以允许同时发生含水组合物的外流和空气的内流。

在本发明的一些实施方案中，通道的有效内径为至少0.6mm，优选至少1cm，甚至更优选至少1.5cm。通道的有效内径可以例如为至少2cm，优选至少2.5mm，甚至更优选至少3mm。

本发明的一个示例性实施方案在图5中示意性描述，其中包装的益生菌组合物(1)是位于初级容器(9)中的药盒。药盒包括瓶样的第一次级容器(10)，其含有含水组合物(11)。第一次级容器(10)用小的帽(12)密封，其可被移除以打开密封的第一次级容器(10)。药盒还包含第二次级容器，其包含支持剂。

可以通过常规的技术生产第一次级容器并且其优选地在引入含水组合物之前被灭菌。同样地，可以使用常规的密封技术进行第一次级容器的密封，例如焊接、胶粘、附加帽、或使用并入的拉链将第一次级容器拉上。

用于第一次级容器的可用材料优选地具有低水渗透性并且可以例如是初级容器之材料的上下文中提到的那些材料的一种或更多种。如果第一次级容器的开口机构是帽或帽样结构，它可以包含铝帽，其配备有膨胀的有机聚合物(例如膨胀聚乙烯(EPE，expandedpolyethylene)或膨胀聚丙烯(EPP，expanded polypropylene))的衬里。

密封的第二次级容器含有支持剂，优选地支持剂为干燥状态。密封的第二次级容器形成支持剂(其优选为无菌的)与周围环境之间的屏障。

出于这样的目的，可以使用常规的技术生产、填充和密封第二次级容器。

用于药盒的支持剂可以是本文所述的任意支持剂。用于药盒的支持剂优选具有打开和例如多孔的结构，其充当包含第一益生微生物之含水组合物的结构支持物。

此外，支持剂优选地具有吸水和/或保水性质。在本发明的一些优选实施方案中，支持剂是不溶于水的。

支持剂可以例如包含材料(例如纤维、泡沫、与水接触后形成水凝胶片层的凝胶网络、或者其组合)，或者甚至由其组成。纤维可以例如为编织或无纺纤维或其组合的形式。

在本发明的一些优选实施方案中，药盒的支持剂为干燥织物，并且优选干燥的无纺织物。

当支持剂的形式是纤维、泡沫或者形成水凝胶片层的凝胶网络时，用于药盒的支持剂的厚度有时是相关的特征。在本发明的一些实施方案中，支持剂的厚度(即，支持剂面向伤口或组织的一侧与相反的一侧之间的距离)为至多5cm、例如至多4cm或者例如至多3cm。例如，支持剂可以具有至多2cm的厚度。

在本发明的一些实施方案中，支持剂具有范围为0.1cm-5cm的厚度，优选范围为0.2cm-4cm，甚至更优选范围为0.5cm-3cm。例如，支持剂可以具有范围为1cm-2cm的厚度。

支持剂甚至可以更薄，并且在本发明的一些实施方案中，支持剂具有范围为0.05cm-2cm，优选范围为0.1cm-1.5cm，甚至更优选范围为0.2cm-1cm的厚度。例如，支持剂可以具有范围为0.3cm-0.8cm的厚度。支持剂可以例如具有范围为0.1cm-0.5cm的厚度。

支持剂可以以多种形状和尺寸提供。用于药盒的支持剂通常为片层样支持剂。这种片层样支持剂的形状可以例如为矩形、正方形、椭圆形或圆形。优选地，使用者或医疗专业人员能够使支持物的尺寸适合待治疗的伤口，例如通过用剪刀剪切支持剂。

在本发明的一些优选实施方案中，支持剂覆盖至少1cm²的皮肤面积。优选地，支持剂覆盖至少10cm²的皮肤面积。甚至更优选地，支持剂覆盖至少25cm²的皮肤面积。

对于大伤口甚至可能需要更大的支持剂。因此，在本发明的一些优选实施方案中，支持剂覆盖至少50cm²的皮肤面积。优选地，支持剂覆盖至少75cm²的皮肤面积。甚至更优选地，支持剂覆盖至少100cm²的皮肤面积。

在本发明的一些优选实施方案中，支持剂能够覆盖范围为1cm²-500cm²的皮肤面积。优选地，支持剂能够覆盖范围为10cm²-400cm²的皮肤面积。甚至更优选地，支持剂能够覆盖范围为25cm²-300cm²的皮肤面积。

在本发明的一些优选实施方案中，支持剂具有矩形形状，其具有范围为3-30cm*5-30cm的边长。例如，支持剂可以具有矩形形状，其具有范围为5-20cm*5-20cm的边长。支持剂可以例如具有矩形形状，其具有约10cm*10cm的边长。或者，支持剂可以具有边长为约10cm*20cm的矩形形状。更大的支持剂可以例如具有边长为约20cm*20cm的矩形形状。相对小的支持剂可以例如具有边长为约5cm*5cm的矩形形状。

密封的第一次级容器中含水组合物的量可以选择为与支持剂的最大水吸收相同的数量级。

例如，密封的第一次级容器中含水组合物的量可以是支持剂之持水量的至少25％。密封的第一次级容器中含水组合物的量可以例如为支持剂之持水量的至少50％。例如，密封的第一次级容器中含水组合物的量可以是支持剂之持水量的至少70％。或者，密封的第一次级容器中含水组合物的量可以例如为支持剂之持水量的至少90％。可以例如优选的是，密封的第一次级容器中含水组合物的量为支持剂之持水量的大约100％。

例如，密封的第一次级容器中含水组合物的量可以在支持剂之持水量的25％-200％之范围内。例如，密封的第一次级容器中含水组合物的量可以在支持剂之持水量的25％-150％之范围内。或者，密封的第一次级容器中含水组合物的量可以在支持剂之持水量的50％-150％之范围内。

虽然密封的第一次级容器之含水组合物的量可以远高于支持剂之持水量，但有时优选密封的第一次级容器中含水组合物的量为支持剂之持水量的至多200％。例如，密封的第一次级容器中含水组合物的量可以例如为支持剂之持水量的至多150％。或者，密封的第一次级容器中含水组合物的量可以例如为支持剂之持水量的至多125％。

密封的第一次级容器中含水组合物的量可以例如在支持剂之持水量的100％-200％之范围内，并且优选在支持剂之持水量的100％-150％之范围内。

通常优选第一次级容器的基本上所有的含水组合物可被转移到支持剂。如果第一次级容器含有一些不能转移到支持剂的含水组合物，则应当因此提高上述含水组合物的量。

在本发明的一些优选实施方案中，第一次级容器含有一定量的含水组合物，其在用于支持剂的含水组合物之预期剂量的80％-120％(w/w)之范围内。例如，第一次级容器可以含有的一定量的含水组合物，其在用于支持剂的含水组合物之预期剂量的90％-110％(w/w)之范围内。第一次级容器可以例如含有一定量的含水组合物，其在用于支持剂的含水组合物之预期剂量的95％-105％(w/w)之范围内。

在本发明的一些优选实施方案中，密封的第一次级容器预期仅使用一次，因此是可弃型容器。

在密封的第一次级容器中，一些益生微生物倾向于随时间沉降(至少在一定程度上)，这可以导致将被带到伤口的益生微生物的有效浓度降低。

在本发明的一些优选实施方案中，密封的第一次级容器包含用于在使用前(例如在打开第一次级容器前)搅动含水组合物的机构，从而获得益生微生物的更均匀分布。

在本发明的一些优选实施方案中，用于搅动含水组合物的机构为气体(例如空气或惰性气体)的一个或更多个气泡或袋子(pocket)，其位于第一次级容器的内部并且与含水组合物接触。当密封的第一次级容器手动晃动或上下颠倒一次或更多次时，气体的一个或更多个气泡或袋子通过含水组合物移动并且因此产生搅动，其使益生微生物在含水组合物中更均匀地分布。

在本发明的一些优选实施方案中，相对于第一次级容器的总内部体积，第一次级容器含有一个或更多个气袋和/或气泡形式的至少1％(体积/体积)的气体。例如，相对于第一次级容器的总内部体积，第一次级容器可以含有一个或更多个气袋和/或气泡形式的至少5％(体积/体积)的气体。相对于第一次级容器的总内部体积，第一次级容器可以含有一个或更多个气袋和/或气泡形式的至少10％(体积/体积)的气体。

相对于第一次级容器的总内部体积，第一次级容器可以含有一个或更多个气袋和/或气泡形式的1％-50％(体积/体积)之范围内的气体量。例如，相对于第一次级容器的总内部体积，第一次级容器可以含有一个或更多个气袋和/或气泡形式的5％-40％(体积/体积)之范围内的气体量。相对于第一次级容器的总内部体积，第一次级容器可以例如含有一个或更多个气袋和/或气泡形式的10％-30％(体积/体积)之范围内的气体量。

第一次级容器可以例如含有至少0.5mL的一个或更多个气袋和/或气泡形式的气体。例如，第一次级容器可以例如含有一个或更多个气袋和/或气泡形式的气体至少1mL。或者，第一次级容器可以例如含有至少5mL的一个或更多个气袋和/或气泡形式的气体，例如至少10mL气体。

在本发明的另一些优选实施方案中，用于搅动含水组合物的机构为一个或更多个独立的固体体(solid body)，例如一个或更多个玻璃、陶瓷、塑料或金属体，其位于第一次级容器的内部并且与含水组合物接触。当手动摇晃或上下颠倒密封的第一次级容器一次或更多次时，一个或更多个独立的固体体通过含水组合物移动并且因此产生搅动，其使益生微生物在含水组合物中更均匀地分布。

独立的固体体优选具有显著不同于含水组合物的密度，即比含水组合物显著更高的密度或显著更低的密度。

独立的固体体可以例如具有至少1.5kg/L的密度。例如，独立的固体体可以例如具有至少2kg/L的密度或者甚至更高的密度，例如至少3kg/L或至少5kg/L。

或者，独立的固体体可以具有至多0.9kg/L的密度。例如，独立的固体体可以例如具有至多0.8kg/L的密度，或者甚至更高的密度，例如至多0.8kg/L或至少5kg/L。

独立固体体的至少一个优选具有至少0.2cm³的体积。例如，独立固体体的至少一个可以具有至少0.5cm³的体积。或者，独立固体体的至少一个可具有至少1cm³的体积。

本发明的又一方面涉及如本文所限定的可弃型的、密封的第一次级容器，其包含含水组合物。

药盒优选地通过打开初级容器以及然后打开次级容器来使用。任选地，支持剂可以转变成适合待治疗之伤口的尺寸，例如，通过剪切支持剂。然后可以将支持剂施用至伤口并且第一次级容器的含水组合物施用至支持剂。

或者，支持剂例如通过剪切转变成期望的尺寸，含水组合物施用至支持剂并且然后将湿的支持剂施用至伤口。

或者，在任选的剪切之前并且在支持剂施用至伤口之前，含水组合物可以施用至支持剂。

一旦支持剂已经施用至伤口，通过一种或更多种本文所限定的固定构件固定支持剂。

优选地，第一次级容器在打开之前手动晃动或上下颠倒一次或更多次以获得益生微生物的更均匀分布。

在本发明的一些优选实施方案中，益生菌组合物包含足量的水，以允许在将支持剂和含水组合物的组合施用至伤口前在含水组合物中冲洗伤口。初始的冲洗步骤具有移除伤口的至少一些定殖微生物的作用并且认为加速了益生菌组合物之有益效果的开始。

在本发明的一些实施方案中，药盒含有第三次级容器，其含有用于在施用第一次级容器之支持剂和含水组合物之前冲洗伤口的额外的含水组合物。第三次级容器优选地使用在第一次级容器的上下文中描述的一个或更多个实施方案设计和生产。应当指出的是，第三次级容器可以含有第一次级容器更多或更少的含水组合物。还应当指出的是，特定药盒的第一和第三次级容器不必是相同的设计，只要这两种容器均能提供含水组合物的有效贮藏即可。

第三次级容器通常含有的含水组合物的量在5-200mL的范围内，例如在10-100mL的范围内。

本发明提供了生产包装的益生菌组合物的方法，其包括以下步骤：

a)提供含水组合物，其含有活的第一益生微生物，

b)提供如本文限定的支持剂，

c)任选地，将支持剂与含水组合物接触，

d)将支持剂与含水组合物的组合包装在合适的容器中。

包装的益生菌组合物优选地在无菌条件下制造，并且可以例如采用100,000级清洁室。

此外，包装步骤d)优选地在最小化微生物之生存力损失的条件下进行。热加工(例如焊接)应当小心地应用以避免破坏益生微生物。

本发明的又一方面涉及本发明的包装的益生菌组合物用于人或动物的预防和治疗用途。特别地，益生菌组合物用作用于治疗伤口或组织的伤口敷料以及用于治疗和预防病原微生物在伤口或组织部位定殖或感染。益生菌组合物还可以用于重建伤口的细菌平衡。

本发明的又一方面涉及治疗动物或人对象的方法，所述人或动物对象具有定殖的伤口或组织或者处于具有定殖的伤口或组织的风险中，所述方法包括以下步骤：

1)提供包装的益生菌组合物，

2)打开容器，其中已经包装了益生菌组合物，以及

3)将益生菌组合物施用至定殖的伤口或组织。

益生菌组合物应当优选地这样施用，使得第一益生微生物至少与待治疗的伤口或组织液体连通。还可以优选第一益生微生物接触待治疗的伤口或组织。

本发明的包装的益生菌组合物的益处在于其减少或防止来自定殖伤口的不良气味。

本发明已在上文中参考具体实施例进行描述。然而，除了以上描述的之外，其他实施方案同样可能在本发明的范围之内。除非另有说明，本发明的各种实施方案和方面的不同特征和步骤可以以其他的方式(除了本文描述的那些)组合。

实施例

实施例1a 含水组合物的制备

通过混合800克来自Danisco的糖，16000克35℃的热水以及1克嗜酸乳杆菌(Lactobacillus Acidophilus)、1克动物双歧杆菌(Bifidobacterium Animalis)和1克来自Chr.Hansen的干酪乳杆菌(Lactobacillus Casai)的益生菌共混物来制备含水组合物。

允许组合物发酵3周直到所有的糖已经被益生菌共混物代谢。产生的含水组合物的pH为pH4。

实施例1b 含水组合物

1升具有pH为3.4的“Vita Biosa Probiotic urter”购自Biosa Danmark并且用作替代的含水组合物。

实施例2 包装的伤口敷料的制备

通过将泡沫浸入含水组合物中，将来自Mondomed的PVA泡沫(8×12×0.6cm)用来自实施例1b的含水组合物浸渍。1分钟后，将泡沫移出并允许过量的液体滴落。样品称为2a。

通过将纤维浸入含水组合物1b，将包含超吸收纤维(super absorbent fibre，SAF)的无纺织物，Technical Absorbent Inc.的Oasis Type2577(包含75％的聚丙烯酸酯SAF和25％聚酯纤维)用含水组合物浸渍。1分钟后，移出纤维并允许过量的液体滴落。样品称为2b。

通过将无纺织物浸入含水组合物1b，将来自Kanglidi Medical的藻酸盐伤口敷料(无纺织物)用含水组合物浸渍。1分钟后，移出无纺织物并允许过量的液体滴落。样品称为2c。

通过将无纺织物浸入含水组合物1b，将来自Kanglidi Medical的壳聚糖伤口敷料(无纺织物)用含水组合物浸渍。1分钟后，移出无纺织物并允许过量的液体滴落。样品称为2d。

然后所有的样品被包装并密封在拉链袋中并且进行实施例4中描述的测试。

实施例3 包装的无定型水凝胶的制备

将20克来自BASF的超吸收聚丙烯酸酯颗粒与500克益生菌组合物以及500克盐水(0.9％NaCl)混合。无定型水凝胶包装在注射器中并且称作3a。

将35克Chitosan Primex(Chitoclear高分子量)与500克益生菌组合物以及500克生理盐水(0.9％NaCl)混合。无定型水凝胶包装在注射器中并且称作3b。

随后两个样品包装在注射器中并且进行实施例5中描述的测试。

实施例4 比较测试-伤口敷料

对来自实施例2的伤口敷料进行有关稳定性和含水组合物如何影响支持剂之稳定性和外观的测试。将样品贮藏在35摄氏度。48小时后，目视检查样品的着色、袋中气体形成、目视评估伤口敷料中支持剂的降解和气泡的形成。5天后，分析益生菌的生存力。结果总结在表1中。

表1伤口敷料的比较

基于以上测试，得出的结论是：样品2b是稳定的并且可作为支持剂。样品2c和2d显著地受含水组合物的影响并且因此不适合作为益生菌组合物中的支持剂，其中含水组合物在益生菌组合物的贮藏期间与支持剂接触。样品2a的支持剂显著减少益生菌并且因此未发现生物相容并且不适用于本发明。

实施例5 比较测试-无定型水凝胶

将样品贮藏在35摄氏度下48小时。48小时后，目视检查样品的着色、注射器中的气体形成、目视评估水凝胶中支持剂的降解和气泡的形成。结果总结在表2中。

表2水凝胶的比较

评估样品3a可用作本发明的支持剂，同时发现样品3b不可用，因为它受含水组合物显著影响并且示出清楚的降解迹象。因此，3b不适合作为益生菌组合物中的支持剂，其中含水组合物在益生菌组合物的贮藏期间与支持剂接触。

实施例6 药盒的生产和使用

在这个实施例中提供了本发明下的药盒之生产和使用的实例。

1)将0.2×5×5cm³、0.2×10×10cm³、0.2×10×20cm³或0.2×20×20cm³的Oasis纤维织物(Type2577)单独包装在底部包含托盘的容器中，所述垫放在托盘中。然后将容器密封并灭菌。

2)如实施例1A中所述生产含水组合物，在无菌条件下填充到容器中并密封。

3)然后将容纳纤维织物垫的容器和容纳含水组合物的容器包装到合适的盒中作为药盒。

将含水组合物均匀地手动施用至纤维织物垫上。施用的量取决于伤口的渗出物水平(无/低/中/高)。施用至高度渗出物伤口的垫应当为部分地饱和的(即在0.2×10×10cm³纤维织物中为15.0ml-30.0ml)，而接近饱和的纤维织物垫(即在0.2×10×10cm³纤维织物中为30.0ml-37.5ml)可施用至低渗出物伤口。

如果期望，纤维织物垫可被剪切以适合伤口的形状。包含含水组合物的纤维织物垫优选地每天更换或每两天更换，取决于伤口的特征。

Claims

1.包装的益生菌组合物，所述益生菌组合物包含：

-含水组合物，其含有活的第一益生微生物，所述含水组合物含有相对于所述含水组合物之总重量至少50％(w/w)量的水，以及

-支持剂。

2.根据权利要求1所述的包装的益生菌组合物，其是包装的药盒，所述药盒包含：

-密封的第一次级容器，其包含所述含水组合物，以及

-所述支持剂。

3.根据权利要求2所述的包装的益生菌组合物，其中所述密封的第一次级容器中含水组合物的量在所述支持剂之持水量的50％至200％的范围内。

4.根据权利要求2或3所述的包装的益生菌组合物，其中所述支持剂能够覆盖范围为1至500cm²的皮肤面积。

5.根据权利要求2或3所述的包装的益生菌组合物，其中所述密封的第一次级容器含有用于在使用前搅动所述含水组合物的机构。

6.根据权利要求1至3中任一项所述的包装的益生菌组合物，其中所述含水组合物具有范围为pH2至6的pH。

7.根据权利要求1至3中任一项所述的包装的益生菌组合物，其中所述支持剂不溶于水。

8.根据权利要求1至3中任一项所述的包装的益生菌组合物，其中所述第一益生微生物是细菌或真菌。

9.根据权利要求1至3中任一项所述的包装的益生菌组合物，其中所述益生菌组合物包含至少0.1mL含水组合物。

10.根据权利要求1至3中任一项所述的包装的益生菌组合物，其中所述支持剂与所述含水组合物之间的重量比为至多1∶1。

11.根据权利要求1至3中任一项所述的包装的益生菌组合物，其中所述含水组合物中分子量为至多5000g/mol之含碳营养物的总量为相对于所述含水组合物之重量的至多0.5％(w/w)。

12.根据权利要求1至3中任一项所述的包装的益生菌组合物，其中所述支持剂包含一种或更多种选自以下形式的材料：纤维、泡沫、凝胶网络、凝胶形成剂及其组合。

13.根据权利要求1至3中任一项所述的包装的益生菌组合物，其中所述支持剂是不溶于水的凝胶形成剂。

14.根据权利要求1至3中任一项所述的包装的益生菌组合物，其中所述含水组合物与所述支持剂接触。

15.根据权利要求1至3中任一项所述的包装的益生菌组合物，其中当所述益生菌组合物处于第一状态时，所述含水组合物不与所述支持剂接触，但是其中所述益生菌组合物可转变成第二状态，在这种情况下所述含水组合物与所述支持剂接触。

16.根据权利要求1至3中任一项所述的包装的益生菌组合物，所述包装的益生菌组合物当保持在23℃的温度和50％的相对湿度时具有至少3个月的保质期。

17.生产根据权利要求1至3中任一项所述的包装的益生菌组合物的方法，所述方法包括以下步骤：

a)提供含水组合物，其含有活的第一益生微生物，所述含水组合物含有相对于所述含水组合物之总重量至少50％(w/w)量的水，

b)提供支持剂，

c)任选地，使所述支持剂与所述含水组合物接触，以及

d)将所述支持剂与所述含水组合物的组合包装到合适的初级容器中。

18.根据权利要求1至3中任一项所述的包装的益生菌组合物，其用于治疗或预防定殖的伤口或组织。