CN104140989A - 一种多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法 - Google Patents
一种多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种多菌种固态发酵鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，该方法包括以下步骤：（一）发酵菌种的制备（二）豆粕及鱼溶浆蛋白与种子培养液的混合（三）发酵过程的控制，通过该方法得到一种可作为猪饲料或鱼饲料配方的蛋白产品，能有效的取代饲料中常用的蛋白原料（鱼粉）。
Description
技术领域
本发明涉及一种利用多种微生物固态发酵来降解鱼溶浆蛋白中的大分子蛋白质和豆粕中的抗原蛋白的方法，特别涉及一种多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法属于发酵工程技术领域。
背景技术
大豆及其产品因蛋白质含量高和氨基酸平衡性好而成为人和动物优质的植物蛋白源，并被广泛应用于食品及饲料行业。虽然大豆籽粒蛋白质含量高达40％，但是大豆中含有多种抗营养因子(Antinutritional factors，ANF)，严重影响大豆蛋白源的开发和利用。其中，大豆抗原蛋白(Soybean antigen)是大豆中最主要的抗营养因子之一。大豆抗原蛋白是指大豆中能引起人和动物过敏反应的一些抗原性蛋白质或糖蛋白，又称为致敏因子。其中，大豆球蛋白(Glycinin)和β-伴大豆球蛋白(β-Conglycinin)是免疫原性最强的大豆蛋白，约占大豆籽实蛋白质总量的70％；球蛋白由6个酸性亚基和6个碱性亚基组成的六聚体结构，酸性亚基和碱性亚基通过-S-S-形成一个聚合体；β-伴球蛋白由α、α’和β三种亚基组成。采用SDS-PAGE法(polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE)检测豆粕中抗原蛋白的组成，结果见图1。从图1中可以看出，豆粕中抗原蛋白分子量范围为22-76kDa，均属于大分子蛋白。这两种蛋白具有较强的热稳定性，普通的热处理不能钝化大豆抗原蛋白的免疫活性，可引起婴儿和幼龄动物产生过敏反应，造成胃肠道的损伤，甚至导致动物死亡。此外，豆粕中的寡糖主要成分是水苏糖、棉籽糖和蔗糖等，含量分别为4%、1%和5%。蔗糖是由α-D-葡萄糖和β-D-果糖以α-1，2糖苷键结合而成。而棉籽糖和水苏糖则是在蔗糖结构中的葡萄糖C6位以α-1，6糖苷键又分别结合了1分子和2分子的半乳糖，因此，蔗糖是二糖，棉籽糖是三糖，水苏糖是四糖，它们都属于非还原性糖，结构如图2所示。
由于动物小肠粘液中缺乏α-半乳糖苷酶，水苏糖和棉籽糖不被消化而直接进入大肠中，经肠道产气微生物利用，产生气体，从而引起动物肠胃胀气或腹疼现象。因此，豆粕中的这些寡糖也被称作胀气因子或不良寡糖。图3显示了采用硅胶板薄层色谱法(thin layer chromatography，TLC)测定了豆粕样品中的寡糖，分子量相同的寡糖与标样中的寡糖在硅胶介质中迁移到同一水平位置上。
因此，大豆中的抗原蛋白和不良寡糖是制约大豆及其制品在饲料中广泛应用的真正瓶颈，需要通过一定方法体外消除这些抗营养因子。
鱼粉具有必需氨基酸和脂肪酸含量高，碳水化合物含量低，适口性好，抗营养因子少以及能够被养殖动物很好的消化吸收等特点。一直以来是水产饲料中不可缺少的优质蛋白源。但是，鱼粉含磷较高，而大多数鱼对鱼粉中磷的利用率很低，未被吸收的磷随着残料和粪便进入养殖水体，导致水体的富营养化。同时，随着集约化水产养殖业的发展，鱼用人工配合饲料的应用也日渐广泛，鱼粉的需求量巨增；另外，由于海洋环境的不断恶化和人类的无序捕捞，使得海洋渔业资源急剧衰退，致使世界鱼粉产量急剧下降。而鱼粉加工废水通常为原料鱼重的60%～70%，其中固形物占6%～7%，因此开发鱼溶浆蛋白对于资源的回收利用具有可观的经济效益和社会效益。纯品鱼溶浆蛋白是由新鲜鱼类在制作鱼粉的过程中压榨出的鱼溶浆液，经浓缩、酶解、干燥而成，生产工艺见图4。
鱼溶浆蛋白通常有两种：一种是类似于牙膏状的，另一种是喷雾干燥后的粉末，两种状态的鱼溶浆蛋白常规指标表1所示。
表1鱼溶浆蛋白的常规指标
| 指标 | 粉末状 | 膏体状 |
| 水分，% | 3-5 | 35-40 |
| 粗蛋白，% | 80-85 | 45-48 |
| 粗灰分，% | 6-8 | 4-6 |
| 粗脂肪，% | 2-3 | 1-2 |
| VBN，mg/100g | 600-700 | 1000-1200 |
| 小肽，% | 70-75 | 15-18 |
| 氨基酸总和，% | 62-65 | 32-35 |
从表1中的结果可以看出，鱼溶浆蛋白的蛋白质含量很高，大部分为小分子蛋白，而且由于是鱼粉加工的副产物，浓缩后具有极强的鱼腥味，诱食性非常好，是一种非常好的蛋白原料。
发明内容
本发明的目的是提供一种工艺过程简单，不产生大量废弃物的利用多种微生物发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，通过该方法得到一种可作为猪饲料或鱼饲料配方的蛋白产品，能有效的取代饲料中常用的蛋白原料(鱼粉)。
为实现本发明的目的，本发明的技术方案如下：
一种多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，该方法包括以下步骤：
1.发酵菌种的制备步骤
1.1嗜酸乳杆菌种子液的制备
1.1.1一级嗜酸乳杆菌种子培养：从嗜酸乳杆菌斜面菌种挑取一嗜酸乳杆菌环菌体到10ml嗜酸乳杆菌斜面培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，转37℃静置培养24小时，得到一级嗜酸乳杆菌种子液；
1.1.2二级嗜酸乳杆菌种子扩大培养：吸取5mL由步骤1.1.1所得的一级嗜酸乳杆菌种子液到100mL嗜酸乳杆菌种子培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，37℃静置培养24小时，得到嗜酸乳杆菌种子液，备用；
1.2德氏乳杆菌种子液的制备
1.2.1一级德氏乳杆菌种子培养：从德氏乳杆菌斜面菌种挑取一德氏乳杆菌环菌体到10ml德氏乳杆菌斜面培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，37℃，静置培养24小时，得到一级德氏乳杆菌种子液；
1.2.2二级德氏乳杆菌种子扩大培养：吸取5mL由步骤1.2.1所得的一级德氏乳杆菌种子液到100mL德氏乳杆菌种子培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，37℃静置培养24小时，得到德氏乳杆菌种子液，备用；
1.3酵母菌种子液的制备
1.3.1一级种子培养：从酵母菌斜面菌种挑取一酵母菌环菌体到10mL酵母菌斜面培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，转速为150r/min，30℃，培养24小时，得到一级酵母菌种子液；
1.3.2二级种子扩大培养：吸取5mL由步骤1.3.1所得的一级酵母菌种子液到100mL酵母菌种子培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，转速为150r/min，30℃，培养24小时，得到酵母菌种子液，备用；
2.豆粕及鱼溶浆蛋白与种子培养液的混合步骤
2.1将豆粕粉碎，其大小为3mm；
2.2将鱼溶浆蛋白溶于自来水中，搅拌至充分溶解后，加入上述粉碎后的豆粕，拌匀后置于121℃灭菌15min，取出冷却后，接入由步骤1制备的嗜酸乳杆菌种子液、德氏乳杆菌种子液和酵母菌种子液，充分混合均匀，其中嗜酸乳杆菌种子液、德氏乳杆菌种子液和酵母菌种子液的接入量均为鱼溶浆蛋白与豆粕重量之和的5-20wt.%，混合后，所得混合物的水分含量控制在30-55wt%；所述豆粕与鱼溶浆蛋白的重量比例为10～30∶90～70；
3.发酵步骤
将由步骤2所得的混合物置于38-45℃的温度下进行发酵，保温3-5天后，得到发酵产物，经过60-80℃反复干燥后微粉碎即得成品。
在本发明的一优选实施例中，所述嗜酸乳杆菌斜面培养基配方为：蛋白陈10.0g，牛肉粉5.0g，酵母粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温801.0mL，磷酸氢二钾2.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，琼脂粉15.0g，蒸馏水1000mL。
在本发明的一优选实施例中，所述嗜酸乳杆菌斜面培养基经121℃灭菌15min。
在本发明的一优选实施例中，所述嗜酸乳杆菌种子培养基配方为：蛋白陈10.0g，牛肉粉5.0g，酵母粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温801.0mL，磷酸氢二钾2.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，蒸馏水1000mL。
在本发明的一优选实施例中，所述嗜酸乳杆菌种子培养基经121℃灭菌15min。
在本发明的一优选实施例中，所述德氏乳杆菌斜面培养基配方为：蛋白陈10.0g，牛肉粉5.0g，酵母粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温801.0mL，磷酸氢二钾2.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，琼脂粉15.0g，蒸馏水1000mL。
在本发明的一优选实施例中，所述德氏乳杆菌斜面培养基经121℃灭菌15min。
在本发明的一优选实施例中，所述德氏乳杆菌种子培养基配方为：蛋白陈10.0g，牛肉粉5.0g，酵母粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温801.0mL，磷酸氢二钾2.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，蒸馏水1000mL。
在本发明的一优选实施例中，所述德氏乳杆菌种子培养基经121℃灭菌15min。
在本发明的一优选实施例中，所述酵母菌斜面培养基配方为：葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏5g，琼脂20g。
在本发明的一优选实施例中，所述酵母菌斜面培养基经121℃灭菌15min。
在本发明的一优选实施例中，所述酵母菌种子培养基配方为：葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏5g。
在本发明的一优选实施例中，所述酵母菌种子培养基经121℃灭菌15min。
采取固态混合发酵的工艺，以鱼溶浆蛋白和豆粕为主要原料，接种多种对动物机体有益的菌株，科学搭配使用，采用机械化程度较高的混合和发酵设备，严格控制产品的卫生指标和理化指标，以微生态营养作为产品研发的核心，发酵生产一种富含有机酸、消化酶、生物活性小肽和低抗原等生物活性物质的前瞻性产品。
附图说明
图1为豆粕中抗原蛋白的SDS-PAGE指纹图谱。
图2为大豆寡糖的分子结构示意图。
图3为薄层色谱法(TLC)检测大豆寡糖的图谱，其中，a为蔗糖；b为棉籽糖；c为水苏糖；1为寡糖标样；2为发酵前样品；3为发酵后样品。
图4为现有鱼溶浆蛋白的生产工艺流程图。
图5为本发明生产工艺流程图。
图6为鱼溶浆蛋白与豆粕混合发酵后不良寡糖的降解情况，其中，1为蔗糖；2为棉籽糖；3为水苏糖；4为单糖；SBM为豆粕；A、B、C为发酵后的成品。
图7为鱼溶浆蛋白与豆粕混合发酵后抗原蛋白的降解情况，其中，SBM为豆粕；A、B、C为发酵后的成品。
具体实施方式
下面通过实施例进一步说明本发明。
实施例1
1.发酵菌种的制备
1.1嗜酸乳杆菌种子液的制备
1.1.1一级嗜酸乳杆菌种子培养：从嗜酸乳杆菌斜面菌种挑取一嗜酸乳杆菌环菌体到装有10mL嗜酸乳杆菌斜面培养基的250mL三角瓶中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，37℃培养24小时，得到一级嗜酸乳杆菌种子液；
1.1.2二级嗜酸乳杆菌种子扩大培养：吸取由步骤1.1.1所得的5mL一级嗜酸乳杆菌种子培养液到装有100mL嗜酸乳杆菌种子培养基的500mL三角瓶中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，37℃培养24小时，得到嗜酸乳杆菌种子液，备用；
其中嗜酸乳杆菌斜面培养基（g/L）的配方为：蛋白陈10.0g，牛肉粉5.0g，酵母粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温801.0mL，磷酸氢二钾2.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，琼脂粉15.0g，蒸馏水1000mL；嗜酸乳杆菌斜面培养基经121℃灭菌15min。
嗜酸乳杆菌种子培养基（g/L）的配方为：蛋白陈10.0g，牛肉粉5.0g，酵母粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温801.0mL，磷酸氢二钾2.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，蒸馏水1000mL；嗜酸乳杆菌种子培养基经121℃灭菌15min。
1.2德氏乳杆菌种子液的制备
1.2.1一级德氏乳杆菌种子培养：从德氏乳杆菌斜面菌种挑取一德氏乳杆菌环菌体到装有10mL德氏乳杆菌斜面培养基的250mL三角瓶中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，37℃培养24小时，得到一级德氏乳杆菌种子液；
1.1.2二级德氏乳杆菌种子扩大培养：吸取由步骤1.1.1所得的5mL一级德氏乳杆菌种子培养液到装有100mL德氏乳杆菌种子培养基的500mL三角瓶中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，37℃培养24小时，得到德氏乳杆菌种子液，备用；
其中德氏乳杆菌斜面培养基（g/L）的配方为：蛋白陈10.0g，牛肉粉5.0g，酵母粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温801.0mL，磷酸氢二钾2.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，琼脂粉15.0g，蒸馏水1000mL；德氏乳杆菌斜面培养基经121℃灭菌15min。
德氏乳杆菌种子培养基（g/L）的配方为：蛋白陈10.0g，牛肉粉5.0g，酵母粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温801.0mL，磷酸氢二钾2.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，蒸馏水1000mL；德氏乳杆菌种子培养基经121℃灭菌15min。
1.3酵母菌种子液的制备
1.3.1一级酵母菌种子培养：从保藏的酵母菌斜面菌种挑取一酵母菌环菌体到装有10mL酵母菌斜面培养基的250mL三角瓶中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，转速为150r/min，30℃培养24小时，得到一级酵母菌种子液；
1.3.2二级酵母菌种子扩大培养：吸取5mL由1.3.1所得的一级酵母菌种子培养液到装有100mL酵母菌种子培养基的500mL三角瓶中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，转速为150r/min，30℃培养24小时，得到酵母菌种子液，备用；
其中，酵母菌斜面培养基（g/L）的配方为：葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏5g，琼脂20g；酵母菌斜面培养基经121℃灭菌15min；
酵母菌种子培养基（g/L）的配方为：葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏5g；酵母菌种子培养基经121℃灭菌15min。
2.豆粕及鱼溶浆蛋白与种子培养液的混合
2.1先将90g豆粕粉碎，其大小约为3mm左右；
2.2然后将10g鱼溶浆蛋白溶于60ml自来水中，搅拌至充分溶解后，加入上述粉碎后的豆粕，拌匀后置于121℃灭菌15min，取出冷却后，按要求接入嗜酸乳杆菌种子液、德氏乳杆菌种子液和酵母菌种子液，充分混合均匀。其中嗜酸乳杆菌种子液、德氏乳杆菌种子液、酵母菌种子液接入量均为鱼溶浆蛋重量的10wt.%，混合后，所得混合物的水分含量均控制在40-50wt.%。
3.发酵过程的控制
将上述混合物置于45℃的温度下进行发酵，保温5天后，得到发酵产物，经过70℃反复干燥后微粉碎即得成品。
实施例2
该实施例的发酵菌种的制备步骤同实施例1。
2.豆粕及鱼溶浆蛋白与种子培养液的混合
2.1先将80g豆粕粉碎，其大小约为3mm左右；
2.2然后将20g鱼溶浆蛋白溶于50ml自来水中，搅拌至充分溶解后，加入上述粉碎后的豆粕，拌匀后置于121℃灭菌15min，取出冷却后，按要求接入嗜酸乳杆菌种子液、德氏乳杆菌种子液和酵母菌种子液，充分混合均匀。其中嗜酸乳杆菌种子液、德氏乳杆菌种子液、酵母菌种子液接入量均为鱼溶浆蛋白和豆粕混合物重量的10wt.%，混合后，所得混合物的水分含量均控制在40-50wt.%。
3.发酵过程的控制
将上述混合物置于38℃的温度下进行发酵，保温3天后，得到发酵产物，经过60℃反复干燥后微粉碎即得成品。
实施例3
该实施例的发酵菌种的制备步骤同实施例1。
2.豆粕及鱼溶浆蛋白与种子培养液的混合
2.1先将70g豆粕粉碎，其大小约为3mm左右；
2.2然后将30g鱼溶浆蛋白溶于70ml自来水中，搅拌至充分溶解后，加入上述粉碎后的豆粕，拌匀后置于121℃灭菌15min，取出冷却后，按要求接入嗜酸乳杆菌种子液、德氏乳杆菌种子液和酵母菌种子液，充分混合均匀。其中嗜酸乳杆菌种子液、德氏乳杆菌种子液、酵母菌种子液接入量均为鱼溶浆蛋白和豆粕混合物重量的10wt.%，混合后，所得混合物的水分含量均控制在50wt.%。
3.发酵过程的控制
将上述混合物置于40℃的温度下进行发酵，保温4天后，得到发酵产物，经过60℃反复干燥后微粉碎即得成品。
实施例4
成品指标检测
4.1不良寡糖的检测
将实施例1至3的发酵样品，进行不良寡糖的定性分析，结果如图6所示。从图6中可以看出，鱼溶浆蛋白和豆粕混合发酵前，豆粕中的三种寡糖均存在，经过多菌种混合固态发酵后，成品中的寡糖均完全降解，生成了大量的单糖，说明酵母菌在鱼溶浆蛋白和豆粕的混合物中能够正常生长，利用寡糖为自身生长所需的碳源，将其降解为单糖。
2）抗原蛋白的检测
将实施例1至3的发酵样品，进行抗原蛋白的定性分析，结果如图7所示。从图7中可以看出，鱼溶浆蛋白和豆粕混合发酵前，豆粕中的球蛋白和伴球蛋白均存在，鱼溶浆蛋白样品中也存在一定量的大分子蛋白，经过多菌种混合固态发酵后，成品中的大分子蛋白均完全降解，生成了大量的小分子蛋白，表现为凝胶底部有大量的蛋白条带，说明所用的乳酸菌在鱼溶浆蛋白和豆粕的混合物料中能够正常生长，对物料的同化能力较强。
3）常规指标的检测
实施例1检测成品常规指标如下：
表2鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的常规指标
| 项目 | 含量 |
| 颜色 | 较深，红褐色 |
| 气味 | 较浓的鱼腥味 |
| 水分，wt.% | 9.72 |
| 粗蛋白，wt.% | 53.4 |
| 小肽，wt.% | 20.94/20.65 |
| pH | 6.07/6.05 |
| VBN，mg/100g | 100/90 |
从表2中的检测结果来看，鱼溶浆蛋白与豆粕混合发酵后小肽含量高达20wt.%以上，约占总蛋白的40wt.%，说明经过发酵后大分子蛋白有效的降解成小分子蛋白；此外，由于发酵后的成品味道与鱼粉接近，因此有良好的诱食效果。
对上述鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料进行检测及检测结果与讨论
1、材料与方法
（1）试验动物：选用80头日龄为44d，体重为13kg左右健康的大白保育仔猪。
（2）试验场地：本试验在航头种猪联营养殖场进行。
（3）试验处理：按体重相近，公母比例一致的原则，随机分成试验组40头和常规对照组40头，试验每组设2个重复，每个重复20头猪，试验期为断奶-保育期结束，共28天，各圈饲养环境基本一致，要求各组试验平均体重差异不显著。
（4）试验日粮：试验中对照组为航头联营养殖场配方师自配的常规保育猪料，试验组用实施例1制备的2wt.%鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料全部替代进口鱼粉。
（5）试验时间：2012年3月1日-2012年3月29日，共28天。
（6）饲养管理：参与试验的猪群全部实施实行自由采食、自由饮水，按常规进行消毒，免疫和饲养管理，猪舍为敞开式结构，发现疾病酌情治疗，其他饲养管理一样。
2、测试指标
（1）试验开始和结束称重
分别逐栏逐头称重，计算各栏初始平均体重和结束平均体重。
（2）每头日均采食量
每头日均采食量=（投料量-余料量）/（试验天数×试验猪数）
（3）每头日均增重
试验结束时，15：00称取各组试验猪空腹体重，计算各组平均日增重。
（4）料肉比（F/G）：根据各组试验猪采食量和增重，计算料肉比。
料肉比（F/G）=试验期总采食量（kg）/试验期间总增重（kg）
（5）腹泻频率计算
腹泻频率=[腹泻猪头日数/（试验猪总头数×饲养天数）]×100%
3结果与分析
（1）饮食情况：从试验全过程来看，试验猪采食，饮水均表现正常。
（2）数据统计分析
表2喂养实验数据测定及统计
本试验数据均由本公司新产品推广与应用部门负责养殖试验的专有人员现场养殖提供。由表2可以看出，应用2%鱼溶浆发酵蛋白替代等量进口鱼粉后，仔猪的平均日增重增加48g，平均头增重增加1.34kg，料肉比下降0.12。
表3试验各组腹泻统计情况
从表3可以看出，试验组和对照组的的平均腹泻频率分别为1.34%和1.87%，试验组的腹泻平率较低，整个试验全期的病死率均为0，说明采用鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料全部取代鱼粉后，小猪的腹泻率降低了，生长性能得到了明显提高。
Claims (13)
1.一种多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
1）.发酵菌种的制备步骤
1.1）嗜酸乳杆菌种子液的制备
1.1.1）一级嗜酸乳杆菌种子培养：从嗜酸乳杆菌斜面菌种挑取一嗜酸乳杆菌环菌体到10ml嗜酸乳杆菌斜面培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，37℃静置培养24小时，得到一级嗜酸乳杆菌种子液；
1.1.2）二级嗜酸乳杆菌种子扩大培养：吸取5mL由步骤1.1.1）所得的一级嗜酸乳杆菌种子液到100mL嗜酸乳杆菌种子培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，37℃静置培养24小时，得到嗜酸乳杆菌种子液，备用；
1.2）德氏乳杆菌种子液的制备
1.2.1）一级德氏乳杆菌种子培养：从德氏乳杆菌斜面菌种挑取一德氏乳杆菌环菌体到10ml德氏乳杆菌斜面培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，37℃，静置培养24小时，得到一级德氏乳杆菌种子液；
1.2.2）二级德氏乳杆菌种子扩大培养：吸取5mL由步骤1.2.1）所得的一级德氏乳杆菌种子液到100mL德氏乳杆菌种子培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，37℃静置培养24小时，得到德氏乳杆菌种子液，备用；
1.3）酵母菌种子液的制备
1.3.1）一级种子培养：从酵母菌斜面菌种挑取一酵母菌环菌体到10mL酵母菌斜面培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，转速为150r/min，30℃，培养24小时，得到一级酵母菌种子液；
1.3.2）二级种子扩大培养：吸取5mL由步骤1.3.1）所得的一级酵母菌种子液到100mL酵母菌种子培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，转速为150r/min，30℃，培养24小时，得到酵母菌种子液，备用；
2）.豆粕及鱼溶浆蛋白与种子培养液的混合步骤
2.1）将豆粕粉碎，其大小为3mm；
2.2）将鱼溶浆蛋白溶于自来水中，搅拌至充分溶解后，加入上述粉碎后的豆粕，拌匀后置于121℃灭菌15min，取出冷却后，接入由步骤1制备的嗜酸乳杆菌种子液、德氏乳杆菌种子液和酵母菌种子液，充分混合均匀，其中嗜酸乳杆菌种子液、德氏乳杆菌种子液和酵母菌种子液的接入量均为鱼溶浆蛋白与豆粕重量之和的5-20wt.%，混合后，所得混合物的水分含量控制在30-55wt%；所述豆粕与鱼溶浆蛋白的重量比例为10～30∶90～70；
3）发酵步骤
将由步骤2所得的混合物置于38-45℃的温度下进行发酵，保温3-5天后，得到发酵产物，经过60-80℃反复干燥后微粉碎即得成品。
2.如权利要求1所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，所述嗜酸乳杆菌斜面培养基配方为：蛋白陈10.0g，牛肉粉5.0g，酵母粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温801.0mL，磷酸氢二钾2.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，琼脂粉15.0g，蒸馏水1000mL。
3.如权利要求2所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，所述嗜酸乳杆菌斜面培养基经121℃灭菌15min。
4.如权利要求1所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，所述嗜酸乳杆菌种子培养基配方为：蛋白陈10.0g，牛肉粉5.0g，酵母粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温801.0mL，磷酸氢二钾2.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，蒸馏水1000mL。
5.如权利要求4所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，所述嗜酸乳杆菌种子培养基经121℃灭菌15min。
6.如权利要求1所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，所述德氏乳杆菌斜面培养基配方为：蛋白陈10.0g，牛肉粉5.0g，酵母粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温801.0mL，磷酸氢二钾2.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，琼脂粉15.0g，蒸馏水1000mL。
7.如权利要求6所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，所述德氏乳杆菌斜面培养基经121℃灭菌15min。
8.如权利要求1所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，所述德氏乳杆菌种子培养基配方为：蛋白陈10.0g，牛肉粉5.0g，酵母粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温801.0mL，磷酸氢二钾2.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，蒸馏水1000mL。
9.如权利要求8所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，在本发明的一优选实施例中，所述德氏乳杆菌种子培养基经121℃灭菌15min。
10.如权利要求1所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，所述酵母菌斜面培养基配方为：葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏5g，琼脂20g。
11.如权利要求10所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，所述酵母菌斜面培养基经121℃灭菌15min。
12.如权利要求1所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，所述酵母菌种子培养基配方为：葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏5g。
13.如权利要求12所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，所述酵母菌种子培养基经121℃灭菌15min。
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104872379A (zh) * | 2015-05-18 | 2015-09-02 | 青岛尚德生物技术有限公司 | 一种在玉米-豆粕型日粮中添加鱼溶浆的发酵物及其发酵方法 |
| CN105995044A (zh) * | 2016-06-13 | 2016-10-12 | 陕西中马环保科技有限公司 | 一种固态发酵生产棕榈仁粕蛋白饲料的方法 |
| CN109498702A (zh) * | 2018-12-26 | 2019-03-22 | 佛山市南海东方澳龙制药有限公司 | 发酵中药制剂及其制备方法和应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102265984A (zh) * | 2011-08-03 | 2011-12-07 | 北京大北农科技集团股份有限公司 | 一种早期断奶乳猪饲料 |
| CN102334601A (zh) * | 2010-07-15 | 2012-02-01 | 上海源耀生物科技有限公司 | 瓜尔豆粕发酵蛋白饲料添加剂、制备方法及含有其的饲料 |
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102334601A (zh) * | 2010-07-15 | 2012-02-01 | 上海源耀生物科技有限公司 | 瓜尔豆粕发酵蛋白饲料添加剂、制备方法及含有其的饲料 |
| CN102265984A (zh) * | 2011-08-03 | 2011-12-07 | 北京大北农科技集团股份有限公司 | 一种早期断奶乳猪饲料 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 李旺军等: "多菌种固态发酵对豆粕、棉籽粕和花生粕组成的混合蛋白原料的影响", 《粮食与饲料工业》 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104872379A (zh) * | 2015-05-18 | 2015-09-02 | 青岛尚德生物技术有限公司 | 一种在玉米-豆粕型日粮中添加鱼溶浆的发酵物及其发酵方法 |
| CN104872379B (zh) * | 2015-05-18 | 2018-07-24 | 青岛尚德生物技术有限公司 | 一种在玉米-豆粕型日粮中添加鱼溶浆的发酵物及其发酵方法 |
| CN105995044A (zh) * | 2016-06-13 | 2016-10-12 | 陕西中马环保科技有限公司 | 一种固态发酵生产棕榈仁粕蛋白饲料的方法 |
| CN109498702A (zh) * | 2018-12-26 | 2019-03-22 | 佛山市南海东方澳龙制药有限公司 | 发酵中药制剂及其制备方法和应用 |
| CN109498702B (zh) * | 2018-12-26 | 2021-07-27 | 佛山市南海东方澳龙制药有限公司 | 发酵中药制剂及其制备方法和应用 |
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