CN104117089A - 一种新型医用生物胶的制备 - Google Patents
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Abstract
一种新型医用生物胶的制备。它具有防水性和强粘附性的功能,还具有很好的生物相容性和可降解性,从原料来源广泛、价格低廉的鱼(如以黄唇鱼、黄鱼、小黄鱼、鳕鱼、海鳗及淡水鲤鱼、鲶鱼等)中提取鱼鳔胶,是一类低成本极具优势和潜力的生物粘合剂。选取新鲜鱼鳔,剔除鱼鳔表面的脂肪、血管、神经等组织,采用酸提取,以盐析和透析进行纯化,过滤除菌并真空冷冻干燥,分装成10mg/瓶作为生物胶主体,溶于溶解剂(0.05mol/L的氯化钙1mL/瓶)中即可使用。本发明的优点:提出鱼鳔胶所制备的粘合剂用于医学生物工程领域,比如可用作粘膜组织、皮肤组织、骨骼、软组织等的手术切口和创口的粘接,作为生物医用材料生物粘合剂在临床使用具有广泛的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种新型医用生物胶,尤其是涉及一种用鱼鳔胶制成一类用于医学生物工程领域,比如用作粘膜组织、皮肤组织、骨骼 、软组织等的手术切口和创口的粘接的生物粘合剂的制备方法。
背景技术
鱼鳔胶是从鱼(如以黄唇鱼、黄鱼、小黄鱼、鳕鱼、海鳗及淡水鲤鱼、鲶鱼等)的鱼鳔中提取出胶原物。鱼鳔干中蛋白质含量约90%以上,其中胶原蛋白占鱼鳔蛋白质总量的62.34%,估算胶原含量为11.54%。因鱼鳔胶中富含粘性蛋白、多种维生素和矿物质,具有补肾益精、滋养经脉、止血等功效,常作为一种名贵的药材,保健食品为人们所青睐。相关文献及专利的报道也多围绕着其营养价值进行产品的粗加工及研究。而庞坤玮研究了鱼鳔胶粘剂应用于木构件修复中,考察了鱼鳔胶固含量、温度等因素与粘度的关系,充分证实了鱼鳔胶的粘附性。这一点在医疗领域的应用极少,本发明目的将鱼鳔胶作为一种具有防水性和强粘附性的功能,还具有很好的生物相容性和可降解性,廉价的生物粘合剂,用于医学生物工程领域,比如作粘膜组织、皮肤组织、骨骼 、软组织等的手术切口和创口的粘接。
发明内容
本发明的目的在于突破鱼鳔胶传统粗加工工艺,减少制备过程中资源浪费、环境污染,提高鱼鳔胶生产的经济效益、社会效益和环境效益。提出了一种低成本、纯天然、高质量、高纯度的鱼鳔胶生物粘合剂的制备方法
本发明的具体步骤如下:
其特征在于所述的鱼鳔胶生物粘合剂的制备过程如下:
1)选取新鲜鱼鳔,剔除鱼鳔表面的脂肪、血管、神经等组织,清洗干净然后用剪刀将鱼鳔剪碎,再用自来水清洗干净,室温下晾干后储存在-20℃条件下备用
2)称取100g鱼鳔,加入提取溶剂0.1%-0.3%高氯酸或1%-5%乙酸600-1000ml,25℃浸提l5-30min,使用搅拌器将其高速打碎;
3)以8000-15000r/min离心40-60min或以45μm滤膜过滤去除残渣,保留上清液;
4)上清液用2-4倍体积的8-12mol/L的氯化钠在25℃下盐析5-8h;
5)4℃,8000-15000rpm下离心5-10min,收集沉淀,用5倍体积1%-3%的乙酸溶解;
6)4℃,8000-15000rpm离心5-10min去除其中不溶成分用用5倍体积0.5%-2%的乙酸再次溶解;
7)用0.1%-1%的乙酸4℃透析(透析袋截留分子量12000)12-24h,过滤除菌并真空冷冻干燥,检测蛋白含量,含量在85%以上即合格,分装成10mg/瓶,即生物胶主体;
8)配制0.05mol/L的氯化钙溶液,除菌并分装成1mL/瓶,即为相应溶解剂;
9)用相应溶解剂将生物胶主体溶解即可使用
用该方法制备的鱼漂胶生物粘合剂具有成本低廉,粘附效果好等特点。在制备过程中,试剂均为常规化学试剂,配制方便,价格低廉,制备操作便捷。鱼鳔胶所制备的粘合剂可用于医学生物工程领域,比如用作粘膜组织、皮肤组织、骨骼 、软组织等的手术切口和创口的粘接,作为生物医用材料生物粘合剂在临床使用具有广泛的应用前景。
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明的技术方案。这些实施例仅用于本说明而不用于限制发明的范围。此外应理解,在阅读了办发明的内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等价形式同样落入本发明所限定的保护范围
实施例1:
1)选取新鲜鱼鳔,剔除鱼鳔表面的脂肪、血管、神经等组织,清洗干净然后用剪刀将鱼鳔剪碎,再用自来水清洗干净,室温下晾干后储存在-20℃条件下备用;
2)称取100g鱼鳔,加入提取溶剂0.2%高氯酸600ml,25℃浸提15min,使用搅拌器将其高速打碎;
3)以8000r/min离心40min,保留上清液;
4)上清液用2倍体积的8mol/L的氯化钠在25℃下盐析5h;
5)4℃,8000rpm下离心5min,收集沉淀,用5倍体积1%的乙酸溶解;
6)4℃,8000rpm离心5min去除其中不溶成分用用5倍体积1%的乙酸再次溶解;
7)用0.5%的乙酸4℃透析(透析袋截留分子量12000)12h,过滤除菌并真空冷冻干燥,检测蛋白含量,含量在85%以上即合格,分装成10mg/瓶,即生物胶主体;
8)配制0.05mol/L的氯化钙溶液,除菌并分装成1mL/瓶,即为相应溶解剂;
9)用相应溶解剂将生物胶主体溶解即可使用
实施例2:
1)选取新鲜鱼鳔,剔除鱼鳔表面的脂肪、血管、神经等组织,清洗干净然后用剪刀将鱼鳔剪碎,再用自来水清洗干净,室温下晾干后储存在-20℃条件下备用;
2)称取100g鱼鳔,加入提取溶剂5%乙酸1000ml,25℃浸提30min,使用搅拌器将其高速打碎;
3)以45μm滤膜过滤去除残渣,保留上清液;
4)上清液用4倍体积的12mol/L的氯化钠在25℃下盐析8h;
5)4℃,15000rpm下离心3min,收集沉淀,用5倍体积2%的乙酸溶解;
6)4℃,15000rpm离心3min去除其中不溶成分用用5倍体积2%的乙酸再次溶解;
7)用1%的乙酸4℃透析(透析袋截留分子量12000)24h,过滤除菌并真空冷冻干燥,检测蛋白含量,含量在85%以上即合格,分装成10mg/瓶,即生物胶主体;
8)配制0.05mol/L的氯化钙溶液,除菌并分装成1mL/瓶,即为相应溶解剂;
9)用相应溶解剂将生物胶主体溶解即可使用。
Claims (1)
1.一种新型医用生物胶的制备,其特征在于包括以下制备步骤:
1)选取新鲜鱼鳔,剔除鱼鳔表面的脂肪、血管、神经等组织,清洗干净,然后用剪刀将鱼鳔剪碎,再用自来水清洗干净,室温下晾干后储存在-20℃条件下备用;
2)称取100g鱼鳔,加入提取溶剂0.1%-0.3%高氯酸或1%-5%乙酸600-1000ml,25℃浸提l5-30min,使用搅拌器将其高速匀浆;
3)以8000-15000r/min离心40-60min或以45μm滤膜过滤去除残渣,保留上清液;
4)上清液用2-4倍体积的8-12mol/L的氯化钠在25℃下盐析5-8h;
5)4℃,8000-15000rpm下离心5-10min,收集沉淀,用5倍体积1%-3%的乙酸溶解;
6)4℃,8000-15000rpm离心5-10min去除其中不溶成分用用5倍体积0.5%-2%的乙酸再次溶解;
7)用0.1%-1%的乙酸4℃透析(透析袋截留分子量12000)12-24h,过滤除菌并真空冷冻干燥,检测蛋白含量,含量在85%以上即合格,分装成10mg/瓶,即生物胶主体;
8)配制0.05mol/L的氯化钙溶液,除菌并分装成1mL/瓶,即为相应溶解剂;
9)用相应溶解剂将生物胶主体溶解即可使用。
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