CN104093713A

CN104093713A - 新氮杂环丁烷衍生物

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Publication number: CN104093713A
Application number: CN201380008271.5A
Authority: CN
Inventors: 莉莉·安塞尔姆; 戴维·班纳; 沃尔夫冈·哈普; 贝恩德·库恩; 托马斯·吕贝斯; 延斯-乌韦·彼得斯; 贝亚特·施平勒
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 2012-02-07
Filing date: 2013-02-04
Publication date: 2014-10-08
Anticipated expiration: 2033-02-04
Also published as: AR089903A1; JP2015509484A; US8822505B2; RU2014133987A; US20130210799A1; EP2812322B1; EP2812322A1; CA2859271A1; CN104093713B; JP6096808B2; WO2013117512A1; RU2629114C2; MX2014009451A; KR20140120902A; BR112014019180A2; MX351093B; BR112014019180A8

Abstract

本发明涉及式(I)的化合物，其中A¹、A²和R¹至R⁸如说明书和权利要求书中所定义。该式(I)的化合物可以用作药物。

Description

新氮杂环丁烷衍生物

本发明涉及可用于哺乳动物中治疗和/或预防的有机化合物，并且特别涉及为半胱氨酸蛋白酶组织蛋白酶的优先抑制剂的化合物，特别是为半胱氨酸蛋白酶组织蛋白酶S或L的优先抑制剂的化合物。

本发明特别涉及式(I)化合物

其中

A¹和A²中的一个是-NR⁹-并且另一个是-CH₂-；

R¹是卤素；

R²是氢、卤素、烷基或卤代烷基；

R³是氢、卤素、烷基或卤代烷基；

R⁴和R⁵同时都是氢；

或者R⁴和R⁵与它们所连接的碳原子一起形成环烷基；

R⁶是氢、卤素、烷基、卤代烷基或环烷基；

R⁷是氢、卤素、烷基、卤代烷基或环烷基；

R⁸是氢、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、烷基吡啶基、烷基-1H-吡唑基、苯基、取代的苯基、杂环基或取代的杂环基，其中杂环基是吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、唑基、异唑基、二唑基、噻吩基、噻唑基、噻二唑基、哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基或吗啉基，其中取代的苯基是被独立地选自以下各项的一至三个取代基取代的苯基：烷基、卤素、环烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、卤代环烷基和腈，并且其中取代的杂环基是被独立地选自以下各项的一至三个取代基取代的杂环基：烷基、卤素、环烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、卤代环烷基和腈；并且

R⁹是氢、烷基、卤代烷基、环烷基、酰基或烷氧基羰基；

或其药用盐或酯。

本发明化合物是半胱氨酸蛋白酶组织蛋白酶(Cat)的优先抑制剂、特别是组织蛋白酶S或组织蛋白酶L的优先抑制剂，因此可用于治疗代谢性疾病如糖尿病，动脉粥样硬化，腹主动脉瘤，外周动脉疾病，癌症，慢性肾病中的心血管事件的减少(reduction of cardiovascular events in chronickidney disease)，肾小球肾炎，老年性黄斑变性(age related maculardegeneration)，糖尿病性肾病和糖尿病性视网膜病。此外，免疫介导的疾病如类风湿性关节炎，克罗恩病，多发性硬化，斯耶格伦综合征，红斑狼疮，神经性疼痛，I型糖尿病，哮喘和过敏反应和与皮肤有关的免疫性疾病也是适合用组织蛋白酶S抑制剂治疗的疾病。

本发明的目的是式(I)化合物及其前述盐本身，以及它们作为治疗活性物质的用途，制备所述化合物的方法，中间体，药学组合物，包含所述化合物、其药用盐的药物，所述化合物和盐在预防和/或治疗疾病中的用途，特别是在治疗或预防糖尿病，动脉粥样硬化，腹主动脉瘤，外周动脉疾病，癌症，慢性肾病中的心血管事件的减少和糖尿病性肾病中的用途，以及所述化合物和盐在制备药物中的用途，所述药物用于治疗和预防糖尿病，动脉粥样硬化，腹主动脉瘤，外周动脉疾病，癌症，慢性肾病中的心血管事件的减少和糖尿病性肾病。

哺乳动物组织蛋白酶是参与生物学和病理事件关键步骤的半胱氨酸型蛋白酶。组织蛋白酶被认为是易于驾驭的药物靶点，因为其能够用小分子化合物抑制酶活性，因此其也是制药行业感兴趣的(Bromme，D.(2001)，′Papain-like cysteine proteases′，Curr Protoc Protein Sci，第21章，第212单元；Roberts，R.(2005)，′Lysosomal cysteine proteases：structure，function andinhibition of cathepsins′，Drug News Perspect，18(10)，605-14)。

组织蛋白酶S在抗原呈递细胞如巨噬细胞和树突状细胞和平滑肌细胞中显著表达(Hsing，L.C.and Rudensky，A.Y.(2005)，′The lysosomalcysteine proteases in MHC class II antigen presentation′，Immunol Rev，207，229-41；Rudensky，A.and Beers，C.(2006)，′Lysosomal cysteine proteases andantigen presentation′，Ernst Schering Res Found Workshop，(56)，81-95)。尽管组织蛋白酶S在正常动脉组织中仅微弱表达，在动脉粥样硬化的动脉中可见到有力的增量调节(Liu，J.等(2006)，′Increased serum cathepsin S inpatients with atherosclerosis and diabetes′，Atherosclerosis，186(2)，411-9；Sukhova，G.K.等(1998)，′Expression of the elastolytic cathepsins S and K inhuman atheroma and regulation of their production in smooth muscle cells′，JClin Invest，102(3)，576-83)。

临床前数据提示，组织蛋白酶S的功能对于动脉粥样硬化是关键性的，因为当在适当的小鼠模型中检测时，组织蛋白酶S缺失的小鼠具有减少的动脉粥样硬化表型。在LDL-Rec缺失的小鼠中，也有报道具有减少的脂质累积，弹性纤维的分解和慢性动脉炎症。在APO E缺失的小鼠中，有报道急性斑块破裂事件显著减少。当慢性肾病被引入CatS/In APO E缺失的小鼠时，可以看到，除在动脉和心脏瓣膜中的抗动脉粥样硬化活性之外，加速钙化的显著减少(Aikawa，E.等(2009)，′Arterial and aortic valvecalcification abolished by elastolytic cathepsin S deficiency in chronic renaldisease′，Circulation，119(13)，1785-94；de Nooijer，R.等(2009)，′Leukocytecathepsin S is a potent regulator of both cell and matrix turnover in advancedatherosclerosis′，Arterioscler Thromb Vasc Biol，29(2)，188-94；Rodgers，K.J.等(2006)，′Destabilizing role of cathepsin S in murine atherosclerotic plaques′，Arterioscler Thromb Vasc Biol，26(4)，851-6；Sukhova等(2003)，′Deficiencyof cathepsin S reduces atherosclerosis in LDL receptor-deficient mice′，J ClinInvest，111(6)，897-906)。这提示通过减少细胞外基质分解、减少促炎症状态、以及减少加速钙化，组织蛋白酶S的潜在抑制剂能够稳定动脉粥样硬化斑块，以及随后稳定其临床表现。

动脉粥样硬化模型中所述的这些表型与组织蛋白酶S的已知细胞功能一致。首先，组织蛋白酶S涉及细胞外基质的降解，其使斑稳定。特别是，组织蛋白酶S具有强有利的解弹性蛋白(elastinolytic)活性并且可以在中性pH发挥该功能，这是组织蛋白酶S区别于所有其他组织蛋白酶的特征。其次，组织蛋白酶S是抗原呈递中涉及的主要蛋白酶，特别是抗原呈递细胞中不变链(invariant chain)的分裂，导致T细胞对动脉粥样硬化组织的慢性炎症的贡献减少。升高的炎症导致进一步的氧化性和解蛋白性组织损伤以及随后的斑不稳定化(Cheng，X.W.等(2004)，′Increasedexpression of elastolytic cysteine proteases，cathepsins S and K，in theneointima of balloon-injured rat carotid arteries′，Am J Pathol，164(1)，243-51；Driessen，C.等(1999)，′Cathepsin S controls the trafficking and maturation ofMHC class II molecules in dendritic cells′，J Cell Biol，147(4)，775-90；Rudensky，A.and Beers，C.(2006)，′Lysosomal cysteine proteases and antigenpresentation′，Ernst Schering Res Found Workshop，(56)，81-95)。

Cat S抑制剂的抗炎和抗-解弹性蛋白性质使其也成为慢性阻塞性肺疾的突出的靶点(Williams，A.S.等(2009)，′Role of cathepsin S inozone-induced airway hyperresponsiveness and inflammation′，PulmPharmacol Ther，22(1)，27-32)。此外，由于其细胞外的基质降解功能，抑制组织蛋白酶S将影响新内膜形成和血管生成(Burns-Kurtis，C.L.等(2004)，′Cathepsin S expression is up-regulated following balloon angioplastyin the hypercholesterolemic rabbit′，Cardiovasc Res，62(3)，610-20；Cheng，X.W.等(2004)，′Increased expression of elastolytic cysteine proteases，cathepsins S and K，in the neointima of balloon-injured rat carotid arteries′，Am J Pathol，164(1)，243-51；Shi，G.P等(2003)，′Deficiency of the cysteineprotease cathepsin S impairs microvessel growth′，Circ Res，92(5)，493-500；Wang，B.等(2006)，′Cathepsin S controls angiogenesis and tumor growth viamatrix-derived angiogenic factors′，J Biol Chem，281(9)，6020-9)。因此，组织蛋白酶S的抑制剂对于数种不同的疾病定位(setting)可能是有用的。

组织蛋白酶S还在减少肿瘤生长和肿瘤细胞侵入中起作用，如Roberta E.Burden在Clin Cancer Res 2009；15(19)中所述。另外，肾切除的组织蛋白酶S敲除小鼠与肾切除的野生型小鼠相比，表现出动脉钙化的显著减少。这表明，抑制组织蛋白酶S可以对减少慢性肾病患者的心血管事件具有有益的效果(Elena Aikawa，Circulation，2009，1785-1794)。

组织蛋白酶L显示出比组织蛋白酶S宽的表达分布，并且还有数据表明组织蛋白酶L在动脉粥样硬化中所起的作用，例如，LDLrec&Cat L缺失小鼠表现出减少的动脉粥样硬化表型(Kitamoto，S.等(2007)，′Cathepsin L deficiency reduces diet-induced atherosclerosis in low-densitylipoprotein receptor-knockout mice′，Circulation，115(15)，2065-75)。另外，Cat L被认为涉及代谢综合征，因为其控制脂肪生成和外周葡萄糖耐受性。在肾病中，组织蛋白酶L被描述为通过蛋白分解性呈递发动蛋白和因此的蛋白尿而调节足状突细胞功能(Sever，S.等(2007)，′Proteolytic processingof dynamin by cytoplasmic cathepsin L is a mechanism for proteinuric kidneydisease′，J Clin Invest，117(8)，2095-104)。

组织重构、细胞外基质降解、活性神经肽的生成和胸腺上皮细胞中抗原呈递中的角色是对组织蛋白酶L描述的细胞活性(Funkelstein等(2008)，(a)′Major role of cathepsin L for producing the peptide hormones ACTH，β-Endorphin，and α-MSH，illustrated by protease gene knockout andexpression′，Journal of Biological Chemistry，283(51)，35652-35659；(b)′Cathepsin L participates in the production of neuropeptide Y in secretoryvesicles，demonstrated by protease gene knockout and expression′，Journal ofNeurochemistry，106(1)，384-391；Rudensky and Beers 2006)。

在本说明书中，术语“烷基”，单独或组合地，是指具有1至8个碳原子的直链或支链烷基，尤其是1至6个碳原子的直链或支链烷基，并特别是1至4个碳原子的直链或支链烷基。直链和支链C1-C8烷基的实例为甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、同分异构的戊基、同分异构的己基、同分异构的庚基和同分异构的辛基，尤其是甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基和叔丁基，更特别是甲基和乙基。

术语“环烷基”，单独或组合地，是指3至8个碳原子的环烷基环，并特别是3至6个碳原子的环烷基环。C3-C8环烷基的实例为环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。特别的环烷基是环丙基、环丁基、环戊基和环己基。环丙基是特别的环烷基。

术语“烷氧基”，单独或组合地，是指式烷基-O-的基团，其中术语″烷基″具有之前给出的含义，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基，特别是甲氧基和叔丁氧基。

术语“氧基”，单独或组合地，是指-O-基团。

术语“卤素”或“卤代”，单独或组合地，是指氟、氯、溴或碘，特别是氟、氯或溴。

术语“卤代烷基”，“卤代环烷基”和“卤代烷氧基”，单独或组合地，表示被至少一个卤素取代，尤其是被1至5个卤素取代，特别是被1至3个卤素取代的烷基，环烷基和烷氧基。氟烷基是被至少一个氟原子取代，特别是被1至5个氟原子取代，更特别是被1至3个氟原子取代的烷基。特别的卤代烷基是二氟乙基和三氟乙基。特别的卤代烷氧基是三氟乙氧基和三氟丙氧基。

术语“羰基”，单独地或组合地，表示-C(O)-基团。

术语“酰基”，单独地或组合地，用于意指甲酰基(-CH(O))。

术语“药用盐”是指保持游离碱或游离酸的生物学效力和性能，并且不是在生物学上或在其他方面不适宜的那些盐。所述盐用无机酸和有机酸形成，所述无机酸例如盐酸，氢溴酸，硫酸，硝酸，磷酸，特别是盐酸，所述有机酸例如乙酸，丙酸，羟基乙酸，丙酮酸，草酸(oxylic acid)，马来酸，丙二酸，琥珀酸，富马酸，酒石酸，柠檬酸，苯甲酸，肉桂酸，扁桃酸，甲磺酸，乙磺酸，对甲苯磺酸，水杨酸，N-乙酰基半胱氨酸。另外，这些盐可以通过将无机碱或有机碱加入到游离酸中而制备。来自无机碱的盐包括但不限于钠，钾，锂，铵，钙，镁盐。来自有机碱的盐包括但不限于以下物质的盐：伯、仲和叔胺，取代的胺包括天然存在的取代的胺，环状胺和碱性离子交换树脂，例如异丙胺，三甲胺，二乙胺，三乙胺，三丙胺，乙醇胺，赖氨酸，精氨酸，N-乙基哌啶，哌啶，聚胺树脂。式(I)化合物还可以以两性离子形式存在。特别的式(I)化合物的药用盐是盐酸盐，氢溴酸盐，硫酸盐，磷酸盐和甲磺酸盐。

“药用酯”表示通式(I)的化合物可以在官能团处衍生以提供能够在体内转化回母体化合物的衍生物。这样的化合物的实例包括生理学上可接受的且在代谢上不稳定的酯衍生物，如甲氧基甲酯，甲硫基甲酯和新戊酰氧基甲酯。另外，类似于在代谢上不稳定的酯，能够在体内生成通式(I)的母体化合物的通式(I)化合物的任何生理上可接受的等价物都在本发明的范围内。

如果原料或式(I)化合物Z之一含有在一步或多步反应步骤的反应条件下不稳定或反应性的一个或多个官能团，可以采用本领域熟知的方法在关键步骤之前引入合适的保护基(如，例如T.W.Greene和P G.M.Wutts的“Protective Groups in Organic Chemistry”，第3版，1999，Wiley，纽约中所述)。这样的保护基可采用文献中描述的标准方法在合成的后期除去。保护基的实例是叔丁氧羰基(Boc)，氨基甲酸9-芴基甲酯(Fmoc)，氨基甲酸2-三甲基甲硅烷基乙酯(Teoc)，苄氧羰基(Cbz)和对甲氧基苄氧基羰基(Moz)。

式(I)化合物可以含有几个不对称中心并且可以以光学纯对映异构体，对映异构体的混合物如，例如，外消旋物，非对映异构体的混合物，非对映异构体外消旋物或非对映异构体外消旋物的混合物的形式存在。

术语“不对称碳原子”表示具有四个不同取代基的碳原子。按照Cahn-Ingold-Prelog规则，不对称碳原子可以具有“R”或“S”构型。

本发明尤其涉及以下各项：

式(I)的化合物，其中A¹是-NR⁹-；

式(I)的化合物，其中A¹是-CH₂-；

式(I)的化合物，其中A²是-NR⁹-；

式(I)的化合物，其中A²是-CH₂-；

式(I)的化合物，其中R¹是氯或溴；

式(I)的化合物，其中R²是氢；

式(I)的化合物，其中R³是氢或卤素；

式(I)的化合物，其中R³是氢或氟；

式(I)的化合物，其中R⁴和R⁵与它们所连接的碳原子一起形成环丙基；

式(I)的化合物，其中R⁶是卤素；

式(I)的化合物，其中R⁶是氯；

式(I)的化合物，其中R⁷是氢；

式(I)的化合物，其中R⁸是氢、卤素、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、烷基吡啶基或烷基-1H-吡唑基；

式(I)的化合物，其中R⁸是氢、卤素、烷氧基、卤代烷氧基、烷基吡啶基或烷基-1H-吡唑基；

式(I)的化合物，其中R⁸是氢、氟、甲氧基、三氟乙氧基、三氟丙氧基、甲基吡啶基或甲基-1H-吡唑基；

式(I)的化合物，其中R⁹是氢、烷基、卤代烷基、环烷基、甲酰基或烷氧基羰基；

式(I)的化合物，其中R⁹是氢、烷基、卤代烷基或烷氧基羰基；

式(I)的化合物，其中R⁹是氢或烷基；

式(I)的化合物，其中R⁹是氢、甲基、乙基、叔丁氧基羰基或二氟乙基；

式(I)的化合物，其中R⁹是氢、甲基或乙基；

式(I)的化合物，其中R⁹是氢、烷基、卤代烷基、甲酰基或烷氧基羰基；和

式(I)的化合物，其中R⁹是氢、甲基、乙基、二氟乙基、甲酰基、甲氧基羰基或三氟乙基。

本发明还涉及选自以下各项的式(I)的化合物：

3-[(2S，4R)-4-(2-氯-4-甲氧基-苯磺酰基)-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-3-(5-氯-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯；

(2S，4R)-4-(2-氯-4-甲氧基-苯磺酰基)-1-[3-(5-氯-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

(2S，4R)-4-(2-氯-4-甲氧基-苯磺酰基)-1-[3-(5-氯-吡啶-2-基)-1-甲基-氮杂环丁烷-3-羰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

3-(5-氯-吡啶-2-基)-3-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯；

3-(5-溴-吡啶-2-基)-3-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯；

(2S，4R)-1-[3-(5-氯-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

(2S，4R)-1-[3-(5-氯-吡啶-2-基)-1-(2，2-二氟-乙基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-吡啶-2-基)-1-(2，2-二氟-乙基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

3-[(2S，4R)-4-(2-氯-苯磺酰基)-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-3-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯；

3-(5-溴-3-氟吡啶-2-基)-3-((2S，4R)-4-(2-氯苯磺酰基)-2-(1-氰基环丙基氨基甲酰基)吡咯烷-1-羰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯；

(2S，4R)-1-(3-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-羰基)-4-(2-氯苯磺酰基)-N-(1-氰基环丙基)吡咯烷-2-甲酰胺；

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-(2-氯-苯磺酰基)-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-1-甲基-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-(2-氯-苯磺酰基)-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-1-乙基-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-(2-氯-苯磺酰基)-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

(2S，4R)-4-(2-氯-苯磺酰基)-1-[3-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-1-甲基-氮杂环丁烷-3-羰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

3-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-3-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯；

3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯；

(2S，4R)-1-(3-(5-溴-3-氟吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-羰基)-4-(2-氯-4-(2，2，2-三氟乙氧基)苯磺酰基)-N-(1-氰基环丙基)吡咯烷-2-甲酰胺；

(2S，4R)-1-(3-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-羰基)-4-(2-氯-4-(2，2，2-三氟乙氧基)苯磺酰基)-N-(1-氰基环丙基)吡咯烷-2-甲酰胺；

2-[(2S，4R)-4-(2-氯-4-氟-苯磺酰基)-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯；

2-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(2S，4R)-4-(2-氯-4-氟-苯磺酰基)-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯；

2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2-((2S，4R)-4-(2-氯-4-((S)-1，1，1-三氟丙-2-基氧基)苯磺酰基)-2-(1-氰基环丙基氨基甲酰基)吡咯烷-1-羰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯；

2-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯；

(2S，4R)-4-(2-氯-4-氟-苯磺酰基)-1-[2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

(2S，4R)-4-(2-溴-4-氟-苯磺酰基)-1-[2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯；

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

(2S，4R)-1-[2-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-(2-氯-4-氟-苯磺酰基)-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

(2S，4R)-1-[2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

(2S，4R)-1-[2-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-1-甲基-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-(2-甲基-吡啶-4-基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯；

2-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-(2-甲基-吡啶-4-基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯；

(2S，4R)-1-[2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-[2-氯-4-(2-甲基-吡啶-4-基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

(2S，4R)-1-[2-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-[2-氯-4-(2-甲基-吡啶-4-基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2-((2S，4R)-4-(2-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯磺酰基)-2-(1-氰基环丙基氨基甲酰基)吡咯烷-1-羰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯；

2-(5-溴-3-氟吡啶-2-基)-2-((2S，4R)-4-(2-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯磺酰基)-2-(1-氰基环丙基氨基甲酰基)吡咯烷-1-羰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯；

(2S，4R)-1-[2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-[2-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；和

(2S，4R)-1-[2-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-[2-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺。

本发明特别涉及选自以下各项的式(I)的化合物：

(2S，4R)-1-[2-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-[2-氯-4-(2-甲基-吡啶-4-基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；和

(2S，4R)-1-[2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-[2-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺。

本发明还特别涉及选自以下各项的式(I)的化合物：

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-1-(2，2-二氟-乙基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-1-甲酰基-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸甲酯；和

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-1-(2，2，2-三氟-乙基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺。

式(I)的化合物可以使用本领域已知的程序制备。式(I)的化合物也可以使用以下程序制备。

在本说明书中使用以下缩写。

AcOEt：乙酸乙酯；

ACN：乙腈；

BOP：苯并三唑基-N-氧基-三(二甲基氨基)-六氟磷酸根；

BOP-Cl：双-(2-氧代-3-唑烷基)-次膦酰氯；

CDI：1，1’-羰基二咪唑；

DCM：二氯甲烷

DIEA：二异丙基乙基胺；

DMF：N，N-二甲基甲酰胺；

EDCI：N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基-碳二亚胺盐酸盐；

h：小时

HATU：O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸盐；

HOBT：1-羟基苯并三唑；

许尼希碱：乙基-二异丙基-胺

KHMDS：双(三甲基甲硅烷基)氨基化钾

LDA：二异丙基氨基化锂

LHMDS：双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂

MeOH：甲醇

Mes-Cl：甲磺酰氯；

min：分钟

Na₂SO₄：硫酸钠

Nos-Cl：3-硝基苯磺酰氯；

Pd₂(dba)₃：三(二亚苄基丙酮)二钯

PyBOP：六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷；

TBTU：O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲四氟硼酸盐；

THF：四氢呋喃；

TFA：三氟乙酸；和

Tos-Cl：甲苯-4-磺酰氯。

R¹-R³如上所定义；R为例如甲基、乙基、异丙基或苄基；碱1为例如NaOtBu、KOtBu、NaH、LiHMDS、KHMDS或LDA；碱2为例如LiOH、NaOH或KOH。

将2-氟吡啶衍生物如1用Boc保护的氮杂环丁烷衍生物2在碱(如上所定义的碱1)的存在下处理以产生氮杂环丁烷衍生物3。将化合物3用碱(如上所定义的碱2)处理以产生最终的羧酸衍生物4，为游离酸或其盐。

将2-氟吡啶衍生物如1用Boc保护的氮杂环丁烷衍生物5在碱(如上所定义的碱1)的存在下处理以产生氮杂环丁烷衍生物6。将化合物6用碱(如上所定义的碱2)处理以产生最终的羧酸衍生物4，为游离酸或其盐。

LG为离去基团如三氟甲磺酸根、甲磺酸根、甲苯磺酸根、对溴苯磺酸根或(间)硝基苯磺酸根；R⁴-R⁸如上所定义；R为例如甲基、乙基、异丙基或苄基。

使Boc保护的脯氨酸衍生物8与2-氯苯基硫醇衍生物在碱如三乙胺、DIEA、2，6-二甲基吡啶等的存在下反应以产生硫醚衍生物9。9用过氧化物试剂如H₂O₂、过硫酸氢钾制剂、MCPBA的氧化产生砜衍生物10。酯至酸用碱如LiOH、NaOH、KOH等的皂化产生对应的羧酸11或其盐。酰胺偶联通过11与1-氨基-环丙烷-甲腈和偶联剂如EDCI、CDI、BOP-Cl、TBTU、HATU、PyBOP、BOP等在碱如DIEA、三乙胺、二甲基吡啶等的存在下的反应完成，以产生酰胺12。最终，通过用酸如TFA、有机溶剂(例如AcOEt、二烷)中的HCl或甲酸处理化合物12移除Boc保护基以产生胺13。

R¹-R⁹如上所定义；酸为例如TFA、HCl或甲酸；X为离去基团如Cl、Br、I、三氟甲磺酸根、甲磺酸根、甲苯磺酸根、苯磺酸根、对溴苯磺酸根或(间)硝基苯磺酸根；R¹⁰为例如烷基、卤代烷基或环烷基；Y为例如H、烷基或卤代烷基。

使羧酸4与胺13在酰胺偶联剂如EDCI、CDI、BOP-C1、TBTU、HATU、PyBOP、BOP等中的一个的存在下在碱如DIEA、三乙胺、2，6-二甲基吡啶等的存在下反应以产生酰胺14。将化合物14用酸如TFA、甲酸、有机溶剂(例如二烷、AcOEt)中的HCl脱保护以产生胺15。可以将胺15用烷基化试剂R⁹-X如烷基卤化物、磺酸酯等烷基化或备选地通过还原胺化以产生胺16。在后一种情况下，R¹⁰-C(O)-Y是醛或酮；R¹⁰为例如烷基、卤代烷基或环烷基；Y为例如氢、烷基或卤代烷基；还原剂为例如NaBH₄、NaCNBH₃或三乙酰氧基硼氢化钠。

R¹-R⁸如上所定义；酸为例如TFA、HCl或甲酸。

使羧酸7与胺13在酰胺偶联剂如EDCI、CDI、BOP-Cl、TBTU、HATU、PyBOP、BOP等中的一个的存在下在碱如DIEA、三乙胺、二甲基吡啶等的存在下反应以产生酰胺17。将化合物18用酸如TFA、甲酸、有机溶剂(例如二烷、AcOEt)中的HCl脱保护以产生胺18。

R¹-R⁷和R⁹如上所定义；LG是如上所定义的离去基团；R⁸为烷氧基或卤代烷氧基；R为烷基或卤代烷基；酸为例如TFA、HCl或甲酸；X为离去基团如Cl、Br、I、三氟甲磺酸根、甲磺酸根、甲苯磺酸根、苯磺酸根、对溴苯磺酸根或(间)硝基苯磺酸根；R¹⁰为例如烷基、卤代烷基或环烷基；Y为例如H、烷基或卤代烷基。

使化合物14与醇R-OH在碱如Na₂CO₃、K₂CO₃、Cs₂CO₃、三乙胺、DIEA等的存在下反应为醚19。将醚19用酸如TFA、甲酸、有机溶剂(例如二烷、AcOEt)中的HCl脱保护以产生胺20。将胺20用烷基化试剂R⁹-X如卤化物、磺酸酯等烷基化或备选地通过还原胺化以产生胺21。在后一种情况下，R¹⁰-C(O)-Y为醛或酮；R¹⁰为例如烷基、卤代烷基或环烷基；Y为例如氢、烷基或卤代烷基；还原剂为例如NaBH₄、NaCNBH₃或三乙酰氧基硼氢化钠。

R¹-R⁷如上所定义；LG为如上所定义的离去基团；R⁸为烷氧基或卤代烷氧基；R为烷基或卤代烷基；酸为例如TFA、HCl或甲酸。

使化合物17与醇R-OH在碱如Na₂CO₃、K₂CO₃、Cs₂CO₃、三乙胺、DIEA等的存在下反应为醚22。将醚22用酸如TFA、甲酸、有机溶剂(例如二烷、AcOEt)中的HCl脱保护以产生胺23。

R¹-R⁷如上所定义；LG为离去基团如Cl、Br、I；R⁸是如上所定义的苯基、取代的苯基、杂环基或取代的杂环基；R为H或甲基，或两个R与它们所连接的硼原子一起形成环如2，4，4，5，5-五甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷；酸为例如TFA、HCl或甲酸。

使化合物17与硼酸或酯衍生物26在碱如Na₂CO₃、K₂CO₃、Cs₂CO₃、KOtBu、K₃PO₄等和本领域中已知的用于进行Suzuki反应的催化剂例如Pd(PPh₃)₄、具有膦配体的Pd₂(dba)₃等的存在下反应以产生联芳基衍生物24。将化合物24用酸如TFA、甲酸、有机溶剂(例如二烷、AcOEt)中的HCl脱保护以产生胺25。

本发明还涉及一种用于制备如上所定义的式(I)的化合物的方法，所述方法包括以下步骤中的一个：

(a)式(II)的化合物

在酸的存在下的反应，其中R¹至R⁸如上所定义，A¹和A²中的一个是-CH₂-并且另一个是-NR¹⁰-，其中R¹⁰是胺保护基团；

(b)式(III)的化合物

在R⁹-X的存在下的反应，其中A¹、A²和R¹至R⁹如上所定义；或者

(c)如上所定义的式(III)的化合物在R¹⁰-C(O)-Y和还原剂的存在下的反应，其中A¹、A²和R¹至R⁹如上所定义，R¹⁰为烷基、卤代烷基或环烷基，并且Y是氢、烷基或卤代烷基。

在步骤(a)中，酸为例如TFA、HCl或甲酸。

在步骤(a)中，胺保护基团为例如Boc、Fmoc、Cbz、Teoc、苄基或Moz。

在步骤(c)中，还原剂为例如NaBH₄、NaCNBH₃或三乙酰氧基硼氢化钠。

根据本发明的以上方法制备的式(I)的化合物也是本发明的目标。

式(I)的化合物和它们的药用盐可以作为药物使用(例如以药物制剂的形式)。可以将该药物制剂内服给药，如经口(例如以片剂、包衣片剂、糖锭剂、硬和软明胶胶囊、溶液、乳剂或混悬剂)的形式、经鼻(例如以鼻喷雾剂的形式)或经直肠(例如以栓剂的形式)。然而，给药还可以肠胃外实现，如肌肉内或静脉内(例如以注射液的形式)。

式(I)的化合物和它们的药用盐可与药学上惰性的无机或有机辅剂一起加工用于片剂、包衣片剂、糖锭剂和硬明胶胶囊的制造。可以使用乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其盐等，例如，作为用于片剂、糖锭剂和硬明胶胶囊的这种辅剂。

用于软明胶胶囊的合适的辅剂是，例如，植物油、蜡、脂肪、半固体物质和液体多元醇等。

用于溶液和糖浆的制造的合适的辅剂是，例如，水、多元醇、蔗糖、转化糖、葡萄糖等。

用于注射液的合适的辅剂是，例如，水、醇、多元醇、甘油、植物油等。

用于栓剂的合适的辅剂是，例如，天然或硬化油、蜡、脂肪、半固体或液体多元醇等。

此外，药物制剂可以含有防腐剂、增溶剂、粘度增加物质、稳定剂、润湿剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、食用香料、用于改变渗透压的盐、缓冲剂、掩蔽剂或抗氧化剂。它们仍然还可以含有其他的治疗上有价值的物质。

本发明因此还特别涉及以下各项：

式(I)的化合物，所述式(I)的化合物用作治疗活性物质；

一种药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物和治疗惰性载体；

式(I)的化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或预防糖尿病，动脉粥样硬化，腹主动脉瘤，外周动脉疾病，癌症，慢性肾病中心血管事件的减少，糖尿病性肾病，糖尿病性视网膜病或老年性黄斑变性；

式(I)的化合物，所述式(I)的化合物用于治疗或预防糖尿病，动脉粥样硬化，腹主动脉瘤，外周动脉疾病，癌症，慢性肾病中心血管事件的减少，糖尿病性肾病，糖尿病性视网膜病或老年性黄斑变性；和

一种用于治疗或预防糖尿病，动脉粥样硬化，腹主动脉瘤，外周动脉疾病，癌症，慢性肾病中心血管事件的减少，糖尿病性肾病，糖尿病性视网膜病或老年性黄斑变性的方法，所述方法包括给药有效量的式(I)的化合物。

将用不具有限制特性的以下实施例描述本发明。

实施例

实施例1

3-[(2S，4R)-4-(2-氯-4-甲氧基-苯磺酰基)-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-3-(5-氯-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

A)3-(5-氯-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-1，3-二甲酸1-叔丁基酯3-甲基酯

向5-氯-2-氟吡啶(0.5g，3.8mmol，当量：1.00)和氮杂环丁烷-1，3-二甲酸1-叔丁酯3-甲酯(818mg，3.8mmol，当量：1.00)在甲苯(5ml)中的溶液在0℃逐滴加入KHMDS在甲苯中的0.5M溶液(7.6ml，3.8mmol，当量：1.00)持续15分钟。无色溶液变为黄色-橙色。在0℃搅拌45分钟之后，允许反应混合物升温至20℃并搅拌2.5h。加入饱和NH₄Cl水溶液(50ml)并将水相用AcOEt(2x75ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥、过滤并在减压下浓缩。将粗材料通过快速色谱(硅胶，12g，庚烷中10％至60％AcOEt)提纯，以产生无色胶(0.234g；19％)。m/z＝327.2[M+H]⁺。

B)1-叔丁氧基羰基-3-(5-氯-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-3-甲酸锂

在10ml圆底烧瓶中，将实施例1A)(0.21g，643μmol，当量：1.00)和氢氧化锂(24.6mg，1.03mmol，当量：1.6)与四氢呋喃(1.8ml)和水(1.2ml)合并以给出浅黄色悬浮液。将反应混合物在22℃搅拌2h。将粗反应混合物在真空中浓缩以产生灰白色固体(0.241g；100％)。m/z＝311.3[M-H]^-。

C)(2S，4R)-4-(2-氯-4-甲氧基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺

在10ml圆底烧瓶中，将CAS#1252640-17-7(0.25g，517μmol，当量：1.00)和二烷中的4M氯化氢溶液(517μl，2.07mmol，当量：4)合并以给出无色溶液。将反应混合物在22℃搅拌1.5h。在搅拌20分钟之后，形成浆液。将粗反应混合物在AcOEt(30ml)中稀释并用10％Na₂CO₃水溶液(20ml)萃取。将水层用AcOEt(2x20ml)反萃取。将有机层合并，用盐水洗涤(1x15ml)，在Na₂SO₄上干燥并在真空中浓缩，以产生无色泡沫(202mg；100％)。m/z＝384.3[M+H]⁺。

D)3-[(2S，4R)-4-(2-氯-4-甲氧基-苯磺酰基)-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-3-(5-氯-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

在10ml圆底烧瓶中，将实施例1B)(0.165g，518μmol，当量：1.00)，HATU(394mg，1.04mmol，当量：2)和DIPEA(134mg，181μl，1.04mmol，当量：2)与乙腈(3ml)合并以给出浅棕色溶液。将实施例1C)(199mg，518μmol，当量：1.00)加入至以上溶液并在20℃搅拌18h。将粗反应混合物在真空中浓缩，将残留物用AcOEt(30ml)稀释并用10％Na₂CO₃水溶液(25ml)萃取，将水层用AcOEt(2x20ml)反萃取，用盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥并蒸发至干燥。随后使粗产物通过快速色谱(硅胶，12g，庚烷中30％至90％AcOEt)提纯，以产生灰白色泡沫(0.166g；48％)。m/z＝678.3[M+H]⁺。

实施例2

(2S，4R)-4-(2-氯-4-甲氧基-苯磺酰基)-1-[3-(5-氯-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺

在10ml圆底烧瓶中，将实施例1D)(0.15g，221μmol，当量：1.00)和甲酸(305mg，254μl，6.63mmol，当量：30)合并以给出黄色溶液。将混合物在20℃搅拌20h。将反应混合物用水(2ml)稀释，用冰冷却的10％Na₂CO₃水溶液调节至pH＝8，用CH₂Cl₂萃取两次，将合并的有机层用盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥，过滤并蒸发以产生淡黄色固体(0.131g；100％)。m/z＝580.3[M+H]⁺。

实施例3

(2S，4R)-4-(2-氯-4-甲氧基-苯磺酰基)-1-[3-(5-氯-吡啶-2-基)-1-甲基-氮杂环丁烷-3-羰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺

向实施例2(0.05g，86.4μmol，当量：1.00)在回流下的甲醇(1ml)中的溶液加入甲基碘(9.2mg，4.05μl，64.8μmol，当量：0.75)。在完成加入之后，将混合物在80℃搅拌2h。加入另外的甲基碘(9.2mg，4.05μl，64.8μmol，当量：0.75)并将混合物在80℃搅拌2h，之后在20℃搅拌过夜。使混合物通过制备型HPLC提纯，以产生无色固体(3mg；6％)。m/z＝592.2[M+H]⁺。

实施例4

3-(5-氯-吡啶-2-基)-3-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯磺酰基]-241-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

起始于CAS#1252634-04-0与实施例1类似地制备标题化合物以产生无色无定形固体。m/z＝746.1[M+H]⁺。

实施例5

3-(5-溴-吡啶-2-基)-3-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

起始于5-溴-2-氟-吡啶和CAS#1252634-04-0与实施例1中描述的方法类似地制备标题化合物以产生黄色泡沫。m/z＝792.1[M+H]⁺。

实施例6

(2S，4R)-1-[3-(5-氯-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺

起始于实施例4与实施例2类似地制备标题化合物以产生无色蜡状固体。m/z＝646.1[M+H]⁺。

实施例7

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺

起始于实施例5与实施例2类似地制备标题化合物以产生黄色泡沫。m/z＝692.0[M+H]⁺。

实施例8

(2S，4R)-1-[3-(5-氯-吡啶-2-基)-1-(2，2-二氟-乙基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺

在10ml圆底烧瓶中，将实施例6(0.082g，127μmol，当量：1.00)，三氟甲磺酸2，2-二氟乙酯(40.7mg，27.0μl，190μmol，当量：1.5)和DIEA(24.6mg，33.2μl，190μmol，当量：1.5)与乙腈(1.5ml)合并以给出浅黄色溶液。将反应混合物在22℃搅拌72h。将粗反应混合物在真空中浓缩并通过快速色谱(硅胶，12g，庚烷中25％至80％AcOEt)提纯以产生标题化合物，为无色无定形固体(0.014g；16％)。m/z＝710.2[M+H]⁺。

实施例9

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-吡啶-2-基)-1-(2，2-二氟-乙基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺

起始于实施例7与实施例8类似地制备标题化合物以产生无色无定形固体。m/z＝756.1[M+H]⁺。

实施例10

3-[(2S，4R)-4-(2-氯-苯磺酰基)-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-3-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

起始于5-氯-2，3-二氟-吡啶和CAS#1252638-10-0以与对于实施例1所描述类似的方法制备标题化合物以产生无色泡沫。m/z＝666.2[M+H]⁺。

实施例11

3-(5-溴-3-氟吡啶-2-基)-3-((2S，4R)-4-(2-氯苯磺酰基)-2-(1-氰基环丙基氨基甲酰基)吡咯烷-1-羰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

起始于5-溴-2，3-二氟-吡啶和CAS#1252638-10-0以与对于实施例1所描述类似的方法制备标题化合物以产生无色泡沫。m/z＝712.0[M+H]⁺。

实施例12

(2S，4R)-1-(3-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-羰基)-4-(2-氯苯磺酰基)-N-(1-氰基环丙基)吡咯烷-2-甲酰胺

起始于实施例10以与对于实施例2所描述类似的方法制备标题化合物以产生无色泡沫。m/z＝566.1[M+H]⁺。

实施例13

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-(2-氯-苯磺酰基)-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺

起始于实施例11以与对于实施例2所描述类似的方法制备标题化合物以产生无色泡沫。m/z＝611.9[M+H]⁺。

实施例14

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-1-甲基-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-(2-氯-苯磺酰基)-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺

向实施例13(0.05g，81.8μmol，当量：1.00)、乙酸钠(14.8mg，180μmol，当量：2.2)和乙酸(10.8mg，10.3μl，180μmol，当量：2.2)在二氯甲烷(0.5ml)中的混合物在25℃加入甲醛水溶液(36％；19.1mg，17.5μl，229μmol，当量：2.8)。将混合物搅拌45分钟，之后将三乙酰氧基硼氢化钠(55.5mg，262μmol，当量：3.2)在0-5℃以一份加入。在10分钟之后将冷却浴移除并且在25℃继续搅拌另外18h。将反应混合物用0.5M NaOH水溶液(2ml)猝灭，搅拌2分钟，之后分离各层。将水层用三份AcOEt(各5ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥并在真空中浓缩。将粗材料通过制备型HPLC提纯以产生标题化合物，为无色无定形固体(O.0206g；40％)。m/z＝626.1[M+H]⁺。

实施例15

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-1-乙基-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-(2-氯-苯磺酰基)-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺

起始于实施例13以与对于实施例14所描述类似的方法制备标题化合物以产生浅黄色无定形固体。m/z＝640.1[M+H]⁺。

实施例16

(2S，4R)-4-(2-氯-苯磺酰基)-1-[3-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-1-甲基-氮杂环丁烷-3-羰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺

起始于实施例12以与对于实施例14所描述类似的方法制备标题化合物以产生浅黄色无定形固体。m/z＝580.1[M+H]⁺。

实施例17

3-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-3-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

以与对于实施例4所描述的类似的方法制备标题化合物以产生无色无定形固体。m/z＝764.3[M+H]⁺。

实施例18

3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

以与对于实施例4所描述的类似的方法制备标题化合物以产生无色无定形固体。m/z＝710.1[M+H-Boc]⁺。

实施例19

(2S，4R)-1-(3-(5-溴-3-氟吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-羰基)-4-(2-氯-4-(2，2，2-三氟乙氧基)苯磺酰基)-N-(1-氰基环丙基)吡咯烷-2-甲酰胺

在10ml圆底烧瓶中，将溶解在二烷(1.5ml)中的实施例18(0.210g，260μmol，当量：1.00)和二烷中的4M氯化氢溶液(260μl，1.04mmol，当量：4)合并以给出无色溶液。将反应混合物加热至22℃并搅拌18h。将粗反应混合物在真空中浓缩并且将残留物在AcOEt(30ml)中稀释并用10％Na₂CO₃水溶液(50ml)萃取。将水层用AcOEt(2x30ml)反萃取。将有机层合并，用盐水洗涤(1x20mL)，在Na₂SO₄上干燥并在真空中浓缩。将粗材料通过制备型HPLC提纯以产生无色无定形固体(0.038g；21％)。m/z＝710.0[M+H-Boc]⁺。

实施例20

(2S，4R)-1-(3-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-羰基)-4-(2-氯-4-(2，2，2-三氟乙氧基)苯磺酰基)-N-(1-氰基环丙基)吡咯烷-2-甲酰胺

以与对于实施例19所描述的类似的方法制备标题化合物以产生无色无定形固体。m/z＝664.1[M+H-Boc]⁺。

实施例21

2-[(2S，4R)-4-(2-氯-4-氟-苯磺酰基)-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

A)2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯

向5-氯-2，3-二氟吡啶(1.39g，9.29mmol，当量：1.00)和氮杂环丁烷-1，2-二羧酸1-叔丁酯2-甲酯(2g，9.29mmol，当量：1.00)在甲苯(15ml)中的溶液在0℃在15分钟内逐滴加入甲苯中的KHMDS的0.5M溶液(18.6ml，9.29mmol，当量：1.00)。无色溶液变为浅棕色。在0℃搅拌45分钟之后，允许反应混合物升温至高达25℃。将反应混合物搅拌2.5h。加入饱和NH4Cl水溶液(100ml)并将水相用AcOEt(2x150ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗材料通过快速色谱(硅胶，40g，庚烷中10％至60％AcOEt)提纯以产生无色粘性油，为外消旋体(1.746g；55％)。m/z＝345.2[M+H]⁺。

B)2-[(2S，4R)-4-(2-氯-4-氟-苯磺酰基）-2-（1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯[差向异构体1：1]

起始于实施例21A)和CAS#1252633-65-0，以与对于实施例1所描述的类似的方法制备标题化合物以产生差向异构体的混合物，为无色无定形固体。m/z＝684.3[M+H]⁺。

实施例22

2-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(2S，4R)-4-(2-氯-4-氟-苯磺酰基)-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

以与对于实施例21所描述的类似的方法制备标题化合物。将所获得的差向异构体的混合物通过手性HPLC提纯以产生单一差向异构体，为无色无定形固体。m/z＝730.1[M+H]⁺。

实施例23

在实施例21的为产生单一差向异构体的手性HPLC分离之后获得实施例23，为单一差向异构体，无色无定形固体。m/z＝684.3[M+H]⁺。

实施例24

在实施例21的为产生单一差向异构体的手性HPLC分离之后获得实施例24，为单一差向异构体，无色无定形固体。m/z＝684.3[M+H]⁺。

实施例25

在实施例22的为产生单一差向异构体的手性HPLC分离之后获得实施例25，为单一差向异构体，无色无定形固体。m/z＝730.1[M+H]⁺。

实施例26

在实施例22的为产生单一差向异构体的手性HPLC分离之后获得实施例26，为单一差向异构体，无色无定形固体。m/z＝730.1[M+H]⁺。

实施例27

2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-24(2S，4R)-4-(2-氯-44(S)-1，1，1-三氟丙-2-基氧基)苯磺酰基)-2-(1-氰基环丙基氨基甲酰基)吡咯烷-1-羰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

在25ml圆底烧瓶中，将实施例21(0.1g，146μmol，当量：1.00)与N，N-二甲基乙酰胺(1.5ml)合并以给出浅黄色溶液。将(S)-1，1，1-三氟丙-2-醇(26.7mg，234μmol，当量：1.6)和碳酸铯(57.1mg，175μmol，当量：1.2)在25℃加入至以上溶液并搅拌24h。在那之后，将另外的(S)-1，1，1-三氟丙-2-醇(6.67mg，58.4μmol，当量：0.4)加入至反应混合物并在25℃搅拌另外24h。将粗反应混合物浓缩，将残留物溶解在AcOEt(100ml)中，用0.5N HCl水溶液(35ml)和10％Na₂CO₃水溶液(25ml)连续萃取。将水层用AcOEt(2x25ml)反萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥、过滤并蒸发。将粗材料相继通过快速色谱(硅胶，40g，庚烷中10％至50％EtOAc)提纯以产生差向异构体的混合物，之后将其随后用手性HPLC提纯以产生一种差向异构体，为无定形无色固体(9mg；8％)。m/z＝778.3[M+H]⁺。

实施例28

2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2-((2S，4R)-4-(2-氯-4-((S)-1，1，1-三氟丙-2-基氧基)苯磺酰基)-2-(1-氰基环丙基氨基甲酰基)吡咯烷-1-羰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

在实施例27的手性HPLC提纯之后获得实施例28，为另一种差向异构体。m/z＝778.3[M+H]⁺。

实施例29

2-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

以与对于实施例27所描述的类似的方法制备标题化合物。将所获得的差向异构体的混合物通过手性HPLC提纯以产生单一差向异构体，为无色无定形固体。m/z＝842.1[M+H]⁺。

实施例30

在实施例27的手性HPLC提纯之后获得实施例30，为另一种差向异构体。m/z＝842.1[M+H]⁺。

实施例31

(2S，4R)-4-(2-氯-4-氟-苯磺酰基)-1-[2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；盐酸盐

在10ml圆底烧瓶中，将二烷(0.1ml)中的实施例24(0.034g，49.7μmol，当量：1.00)和二烷中的4M氯化氢溶液(62.1μl，248μmol，当量：5)合并以给出无色溶液。将反应混合物加热至22℃并搅拌18h。在那之后，加入二烷中的4M氯化氢溶液(62.1μl，248μmol，当量：5)并将反应混合物在25℃搅拌24h。在那之后，加入另外二烷中的4M氯化氢溶液(24.8μl，99.3μmol，当量：2)并将混合物搅拌2h。将反应混合物在真空中浓缩以产生灰白色泡沫(0.031g；100％)。m/z＝584.0[M+H]⁺。

实施例32

(2S，4R)-4-(2-溴-4-氟-苯磺酰基)-1-[2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺盐酸盐

与实施例31类似地由实施例26制备标题化合物以产生灰白色固体。m/z＝630.2[M+H]⁺。

实施例33

3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-[(2S，4R)-4-[2-氯-44(S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

起始于CAS#1252636-85-3与对于实施例1和11描述的方法类似地制备标题化合物以产生无色蜡状固体。m/z＝824.1[M+H]⁺。

实施例34

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-44(S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺

使用对于实施例31所描述的方法由实施例33制备标题化合物。在蒸发之后，将化合物用制备型HPLC提纯以产生白色固体。m/z＝724.2[M+H]⁺。

实施例35

(2S，4R)-4-(2-氯-4-氟-苯磺酰基)-1-[2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺盐酸盐

使用对于实施例31所描述的方法由实施例23制备标题化合物以产生无色固体。m/z＝584.2[M+H]⁺。

实施例36

(2S，4R)-1-[2-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-(2-氯-4-氟-苯磺酰基)-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺盐酸盐

使用对于实施例31所描述的方法由实施例25制备标题化合物以产生无色固体。m/z＝630.2[M+H]⁺。

实施例37

(2S，4R)-1-[2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-[2-氯-44(S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺盐酸盐

使用对于实施例31所描述的方法由实施例27制备标题化合物以产生无色固体。m/z＝678.2[M+H]⁺。

实施例38

(2S，4R)-1-[2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺盐酸盐

使用对于实施例31所描述的方法由实施例28制备标题化合物以产生无色固体。m/z＝678.2[M+H]⁺。

实施例39

(2S，4R)-1-[2-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺盐酸盐

使用对于实施例31所描述的方法由实施例29制备标题化合物以产生无色固体。m/z＝724.1[M+H]⁺。

实施例40

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-1-甲基-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺

根据对于实施例14描述的方法由实施例34制备标题化合物以产生无定形无色固体。m/z＝756.3[M+H]⁺。

实施例41

2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-(2-甲基-吡啶-4-基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

A)(2S，4R)-4-(4-溴-2-氯-苯硫基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯

将CAS#1252633-25-2(5.3g，12.3mmol，当量：1.00)溶解在丙腈(40ml)中并加入4-溴-2-氯苯硫醇(3.3g，14.8mmol，当量：1.20)。现在加入三乙胺(2.49g，3.43ml，24.6mmol，当量：2.00)。将反应混合物在回流下搅拌过夜。将反应混合物倒入至100ml10％Na₂CO₃中并用EtOAc(2x100mL)萃取。将有机层用100ml0.1N HCl萃取，在Na₂SO₄上干燥、过滤并蒸发。将粗材料通过快速色谱(硅胶，120g，庚烷中0％至30％AcOEt，在30分钟内)提纯以产生无色油(4.72g；85％)。m/z＝352.1[M+H-Boc]⁺。

B)(2S，4R)-4-(4-溴-2-氯-苯磺酰基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯

将实施例41A)(4.72g，10.5mmol，当量：1.00)溶解在二氯甲烷(40ml)中并将MCPBA(3.79g，22.0mmol，当量：2.10)小心地逐份加入。将反应混合物在25℃搅拌18h。将反应混合物用10％Na₂CO₃水溶液、0.1NHCl水溶液和饱和Na₂5₂O₃水溶液萃取。将有机层在Na₂SO₄和Na₂SO₃上干燥2h、过滤并小心地蒸发以产生无色蜡状固体(4.96g；98％)。m/z＝383.9[M+H-Boc]⁺。

C)(2S，4R)-4-(4-溴-2-氯-苯磺酰基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯

将实施例41B)(4.96g，10.3mmol，当量：1.00)溶解在THF(15ml)和水(10ml)中。现在加入LiOH水合物(418mg，17.5mmol，当量：1.70)并将反应混合物在22℃搅拌3h。将反应混合物用0.2N HCl水溶液/二氯甲烷萃取。将有机层在Na₂SO₄上干燥、过滤并在真空中浓缩为白色泡沫(4.83g；100％)。m/z＝467.9[M-H]^-。

D)(2S，4R)-4-(4-溴-2-氯-苯磺酰基)-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

将实施例41C)(4.83g，10.3mmol，当量：1.00)溶解在乙腈(40ml)中。将HATU(7.84g，20.6mmol，当量：2.00)、DIEA(2.66g，3.6ml，20.6mmol，当量：2.00)和1-氨基环丙烷-甲腈盐酸盐(1.47g，12.4mmol，当量：1.20)加入至溶液并在22℃搅拌2h。将反应混合物倒入至0.1M HCl水溶液(100ml)中并用二氯甲烷(3x75mL)萃取。将有机层在Na₂SO₄上干燥并在真空中浓缩。将粗材料通过快速色谱(硅胶，120g，庚烷中0％至60％AcOEt)提纯以产生白色固体(3.2g；58％)。m/z＝531.9[M-H]^-。

E)(2S，4R)-4-(4-溴-2-氯-苯磺酰基）-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺

根据对于实施例2描述的方法制备标题化合物以产生灰白色固体。m/z＝434.1[M+H]⁺。

F)2-[(2S，4R)-4-(4-溴-2-氯-苯磺酰基)-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-2-(4-氯-2-氟-苯基)-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

以与对于实施例21所描述的类似的方法制备标题化合物以产生无色泡沫。m/z＝746.0[M+H]⁺。

G)2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-(2-甲基-吡啶-4-基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

向10ml微波瓶加入水(1.0ml)和二烷(2.5ml)中的实施例41G)(0.05g，67.1μmol，当量：1.00)、2-甲基吡啶-4-硼酸频哪醇酯(16.2mg，73.8μmol，当量：1.1)和磷酸三钾(42.7mg，201μmol，当量：3)和2′-(二甲基氨基)-2-联苯-氯化钯(II)二降莰烷基膦配合物(3.76mg，6.71μmol，当量：0.1)。将瓶加盖并在微波中在120℃加热30分钟。将粗材料通过制备型HPLC提纯以产生无色泡沫(0.019g；37％)。m/z＝757.4[M+H]⁺。

实施例42

2-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-(2-甲基-吡啶-4-基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

以与对于实施例21和41所描述的类似的方法制备标题化合物以产生无色无定形固体。m/z＝803.1[M+H]⁺。

实施例43

(2S，4R)-1-[2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-[2-氯-4-(2-甲基-吡啶-4-基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺盐酸盐

与实施例31类似地由实施例41制备标题化合物以产生白色固体。m/z＝657.4[M+H]⁺。

实施例44

(2S，4R)-1-[2-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-[2-氯-4-(2-甲基-吡啶-4-基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺盐酸盐

与实施例31类似地由实施例42制备标题化合物以产生白色无定形固体。m/z＝703.3[M+H]⁺。

实施例45

2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2-((2S，4R)-4-(2-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯磺酰基)-2-(1-氰基环丙基氨基甲酰基)吡咯烷-1-羰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

由实施例41F)和1-甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑与实施例41G)的方法类似地制备标题化合物以产生无色泡沫。m/z＝746.3[M+H]⁺。

实施例46

2-(5-溴-3-氟吡啶-2-基)-2-((2S，4R)-4-(2-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯磺酰基)-2-(1-氰基环丙基氨基甲酰基)吡咯烷-1-羰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

与实施例42和45类似地制备标题化合物以产生无色泡沫。m/z＝746.3[M+H]⁺。

实施例47

(2S，4R)-1-[2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-[2-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺盐酸盐

与实施例31类似地由实施例45制备标题化合物以产生白色固体。m/z＝646.5[M+H]⁺。

实施例48

(2S，4R)-1-[2-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-[2-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺盐酸盐

与实施例31类似地由实施例46制备标题化合物以产生无色泡沫。m/z＝692.2[M+H]⁺。

实施例49

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-1-(2，2-二氟-乙基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺

在5ml圆底烧瓶中，将实施例34(100mg，138μmol，当量：1.00)，三氟甲磺酸2，2-二氟乙酯(51.8mg，34.3μl，242μmol，当量：1.75)和许尼希碱(31.3mg，42.3μl，242μmol，当量：1.75)与乙腈(1.5ml)合并以给出浅黄色溶液。将反应混合物在25℃搅拌4h。将粗反应混合物在真空中浓缩。将反应混合物倒入至EtOAc(20ml)中并用10％Na₂CO₃水溶液(1x15mL)萃取。将水层用EtOAc(2x20mL)反萃取。将有机层合并，用饱和NaCl水溶液(1x15mL)洗涤。将有机层在Na₂SO₄上干燥并在真空中浓缩。将粗材料通过快速色谱(硅胶，12g，庚烷中10％至80％EtOAc)提纯，以产生标题化合物，为无色无定形固体(41mg；38％)。m/z＝786.0415[M-H]^-。

实施例50

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-1-甲酰基-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺

在5ml圆底烧瓶中，将实施例34与DMSO(0.5ml)合并以给出无色溶液。加入甲酸4-硝基苯酯(12.7mg，76.1μmol，当量：1.10)。将反应混合物在25℃搅拌3天。在那之后，将另外的甲酸4-硝基苯酯(3.47mg，20.7μmol，当量：0.3)加入至以上溶液并搅拌5天。将粗材料通过制备型HPLC提纯以产生标题化合物，为无色无定形固体(14mg；27％)。m/z＝752.0394[M+H]⁺。

实施例51

3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-[(2S，4R)-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-2-(1-氰基-环丙基氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羰基]-氮杂环丁烷-1-甲酸甲酯

在5ml圆底烧瓶中，将实施例34(50mg，69.2μmol，当量：1.00)与二氯甲烷(1.0ml)合并以给出无色溶液。加入氯甲酸甲酯(13.1mg，10.7μl，138μmol，当量：2.00)和三乙胺(14.0mg，19.3μl，138μmol，当量：2.00)。将反应混合物在25℃搅拌4h。将粗材料通过制备型HPLC提纯以产生标题化合物，为白色固体(15mg；27％)。m/z＝782.0487[M+H]⁺。

实施例52

(2S，4R)-1-[3-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-1-(2，2，2-三氟-乙基)-氮杂环丁烷-3-羰基]-4-[2-氯-4-((S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺

在5ml圆底烧瓶中，将实施例34(50mg，69.2μmol，当量：1.00)与乙腈(1.5ml)合并以给出无色溶液。加入三氟甲磺酸2，2，2-三氟乙酯(20.1mg，12.5μL，86.5μmol，当量：1.25)和许尼希碱(11.2mg，15.1μL，86.5μmol，当量：1.25)。将反应混合物在25℃搅拌18h。将粗材料通过制备型HPLC提纯以产生标题化合物，为无色固体(12mg；22％)。m/z＝806.0479[M+H]⁺。

实施例53

组织蛋白酶的酶抑制测定

通过观察由含荧光团的肽底物的分解造成的荧光强度的增加，测量酶活性，所述荧光团的(光)发射在完整的肽中是被猝灭的。

测定缓冲液：100mM磷酸钾pH6.5，EDTA-Na5mM，TritonX-1000.001％，DTT5mM。

酶(均为1nM)：人和小鼠组织蛋白酶S、Cat K、Cat B、Cat L

底物(20μM)：Z-Val-Val-Arg-AMC，Cat K除外，其使用Z-Leu-Arg-AMC(均来自Bachem)。

Z＝苄氧羰基。

AMC＝7-氨基-4-甲基-香豆素。

DTT＝二硫苏糖醇

最终体积：100μL。

激发360nm，发射465nm。

将酶加入到在96孔微滴定板中的物质稀释物中，并且用底物启动反应。

测量荧光发射20分钟，期间，在没有抑制剂的情况下观察到线性升高。

采用标准方法计算IC₅₀。

分别测定对人Cat S、小鼠Cat S、人Cat K、人Cat B、人Cat L和小鼠Cat L的抑制性。本发明的代表性化合物对人Cat S和L的所得结果以μM列在下表中。

本发明的化合物是对组织蛋白酶S和L比对组织蛋白酶K和B优先的抑制剂。

在以上试验中，根据本发明的化合物对Cat S和/或L具有0.00001至100μM，优选0.00001至50μM，更优选0.00001至20μM的IC₅₀。本发明的特别的化合物在以上试验的至少一个中具有低于0.09μM的IC₅₀。

实施例A

式(I)化合物可以作为活性成分以本身已知方式用于制备具有下列组成的片剂：

实施例B

式(I)化合物可以作为活性成分以本身已知方式用于制备具有下列组成的胶囊：

Claims

1.式(I)的化合物

其中

A¹和A²中的一个是-NR⁹-并且另一个是-CH₂-；

R¹是卤素；

R²是氢、卤素、烷基或卤代烷基；

R³是氢、卤素、烷基或卤代烷基；

R⁴和R⁵同时都是氢；

或者R⁴和R⁵与它们所连接的碳原子一起形成环烷基；

R⁶是氢、卤素、烷基、卤代烷基或环烷基；

R⁷是氢、卤素、烷基、卤代烷基或环烷基；

R⁸是氢、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、烷基吡啶基、烷基-1H-吡唑基、苯基、取代的苯基、杂环基或取代的杂环基，其中杂环基是吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、唑基、异唑基、二唑基、噻吩基、噻唑基、噻二唑基、哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基或吗啉基，其中取代的苯基是被独立地选自以下各项的一至三个取代基取代的苯基：烷基，卤素，环烷基，卤代烷基，烷氧基，卤代烷氧基，卤代环烷基和腈，并且其中取代的杂环基是被独立地选自以下各项的一至三个取代基取代的杂环基：烷基、卤素、环烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、卤代环烷基和腈；并且

R⁹是氢、烷基、卤代烷基、环烷基、酰基或烷氧基羰基；

或其药用盐或酯。

2.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹是氯或溴。

3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中R²是氢。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其中R³是氢或卤素。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中R³是氢或氟。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中R⁴和R⁵与它们所连接的碳原子一起形成环丙基。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中R⁶是卤素。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物，其中R⁶是氯。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物，其中R⁷是氢。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的化合物，其中R⁸是氢、卤素、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、烷基吡啶基或烷基-1H-吡唑基。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的化合物，其中R⁸是氢、卤素、烷氧基、卤代烷氧基、烷基吡啶基或烷基-1H-吡唑基。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的化合物，其中R⁸是氢、氟、甲氧基、三氟乙氧基、三氟丙氧基、甲基吡啶基或甲基-1H-吡唑基。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物，其中R⁹是氢、烷基、卤代烷基、甲酰基或烷氧基羰基。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的化合物，其中R⁹是氢、甲基、乙基、二氟乙基、甲酰基、甲氧基羰基或三氟乙基。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的化合物，所述化合物选自

(2S，4R)-1-[2-(5-氯-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-[2-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

(2S，4R)-1-[2-(5-溴-3-氟-吡啶-2-基)-氮杂环丁烷-2-羰基]-4-[2-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯磺酰基]-吡咯烷-2-甲酸(1-氰基-环丙基)-酰胺；

16.根据权利要求1至15中任一项所述的化合物，所述化合物选自

17.一种用于制备根据权利要求1至16中任一项所述的式(I)的化合物的方法，所述方法包括以下步骤中的一个：

(a)式(II)的化合物

在酸的存在下的反应，其中R¹至R⁸如权利要求1至14中的任一项所定义，A¹和A²中的一个是-CH₂-并且另一个是-NR¹⁰-，其中R¹⁰是胺保护基团；

(b)式(III)的化合物

在R⁹-X的存在下的反应，其中A¹、A²和R¹至R⁹如权利要求1至14中的任一项所定义；或者

(c)如上所定义的式(III)的化合物在R¹⁰-C(O)-Y和还原剂的存在下的反应，其中A¹、A²和R¹至R⁹如权利要求1至14中的任一项所定义，R¹⁰是烷基、卤代烷基或环烷基，并且Y是氢、烷基或卤代烷基。

18.根据权利要求17的方法制备的根据权利要求1至16中任一项的化合物。

19.根据权利要求1至16中任一项的化合物，所述化合物用作治疗活性物质。

20.根据权利要求1至16中任一项的化合物，所述化合物用作治疗活性物质，所述治疗活性物质用于治疗或预防糖尿病，动脉粥样硬化，腹主动脉瘤，外周动脉疾病，癌症，慢性肾病中的心血管事件的减少，糖尿病性肾病，糖尿病性视网膜病或老年性黄斑变性。

21.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1至16中任一项的化合物和治疗惰性载体。

22.根据权利要求1至16中任一项的化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗或预防糖尿病，动脉粥样硬化，腹主动脉瘤，外周动脉疾病，癌症，慢性肾病中的心血管事件的减少，糖尿病性肾病，糖尿病性视网膜病或老年性黄斑变性。

23.一种用于治疗或预防糖尿病，动脉粥样硬化，腹主动脉瘤，外周动脉疾病，癌症，慢性肾病中的心血管事件的减少，糖尿病性肾病，糖尿病性视网膜病或老年性黄斑变性的方法，所述方法包括给药有效量的如权利要求1至16中任一项所定义的化合物。

24.如上所述的本发明。