CN1040888C - 快速细胞染色剂 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种快速细胞染色剂FME,它是由亚甲基蓝、品红、碱性物质在氧化剂配合下加热煮沸混合制得的碱性染料,曙红Y酸化集泡沫干燥制得的酸性染料两部分组成。本染色剂具有瑞氏、姬姆隆等世界通用染色剂的染色效果,时间大大加快,通用染色剂染色需15~20分钟,本染色剂仅用30秒钟,且图象清晰、易辨认,判断可靠,对医疗急诊、抢救工作非常有利。且无毒害,安全可靠,配制简便,不需特殊设备,可广泛适用于各种细胞的染色。
Description
本发明涉及一种细胞染色剂,尤其是一种快速细胞染色剂。
细胞染色,目前世界通用的是姬姆隆、瑞氏两种染料,它们是以酸、碱化学物质经过加热制成的混合物,容易因湿度等原因导致失去其比例的平衡。批量生产常出现偏酸偏碱现象,在缓冲条件差的情况下,细胞核或浆的蛋白质中NH+、Coo-与酸、碱染料的亲和力相应地受到影响,就会难得理想的染色效果。一般常见瑞氏染色胞浆着色较差,姬姆隆染色胞核着色不及胞浆好。
国内的湖蓝快速染色,仅是对检查癌细胞而言。胞浆均是蓝染有影响胞核检查的效果。世界卫生组织FIELD的快速染色仅对检查疟原虫而言,该染料呈色较浅,稳定性较差,容易漏诊,都不是较全面、较理想的染料。
本发明的目的是提供一种着色快,图象清晰,易辨认,判断可靠,配制简便,省时省试剂,稳定性好的快速细胞染色剂。
细胞核的主要物质是DNA(脱氧核糖核酸),它富有带负电荷的磷酸残基,对本发明的FME碱性染料富有亲和力,染呈紫色;细胞浆的主要物质是RNA(核糖核酸),是弱碱性的蛋白质对酸性染料的酸化曙红富有亲和力,染呈浅红或浅紫色,在氧化剂的作用下可起到快速呈色的效果。
本发明的快速细胞染色剂简称FME,(FME为:品红Fuchsine亚甲基兰Methylene曙红Eosine的第一字母缩写),是由染细胞核的碱性染料和染细胞浆的酸性染料两部份组成。以亚甲基蓝、品红、曙红Y、氧化剂、碱性物质和有机酸为主要原料。
其配比及生产方法为(以干物质计):
取亚甲基蓝10份、品红7份、碱性物质1份、氧化剂5份,各置于水中并加热溶解,总水量为200份,混合后继续缓慢加热至沸,然后冷却至40~50℃过滤,在减压、60℃恒温下干燥,即得FME碱性染料。取曙红Y10份溶于100份蒸馏水中,以5份有机酸(以比重换算成干物质计算份数)在不断搅拌中逐渐滴加酸化,收集泡沫,并在减压、60℃恒温下干燥,即得酸性染料。使用时,将酸性染料加入适量碱性物质调PH为4~6.6,成为应用液。
亚甲基蓝可用天青II代替,品红可用对苯胺蓝代替,碱性物质最佳为无水碳酸钠,氧化剂最佳选择为高锰酸钾,有机酸可以是冰醋酸、柠檬酸、酒石酸或其它。
实施例:
取品红0.7克,亚甲基蓝1克和0.1克无水碳酸钠、0.5克高锰酸钾分别置于总量为20毫升水中,加热溶解,将其混合用慢火煮沸。冷却终止氧化,稍冷至50℃过滤,60℃恒温减压下干燥,即得快速细胞染色剂的碱性染料。另取曙红Y1克,溶于10毫升水中,以0.5毫升冰醋酸滴加酸化,在容器中不断搅拌,使成泡沫,收集泡洙置于另一棕色瓶中,如此反复操作,直至完全收齐泡沫为止。在60℃恒温减压下干燥,即得快速细胞染色剂的酸性染料。使用时,在酸性染料中加入适量无水碳酸钠调PH值为4~6.6,成为应用液。
本快速细胞染色剂FME具有瑞氏、姬姆隆等世界通用染色剂的染色效果,时间却大大加快,瑞氏、姬姆隆染色需15~20分钟,本FME染色仅用30秒钟,着色快赢得时间,对医疗急诊、抢救工作非常有利,且图象清晰,易辨认,判断可靠。细胞的核、浆分别染色不需缓冲条件即可取得满意效果。本染色剂无毒无害,安全可靠,配制简便,不需特殊设备,可广泛适用于各种细胞的染色。
Claims (1)
1、一种快速细胞染色剂,是由染细胞核的碱性染料和染细胞浆的酸性染料组成,其特征在于:
a、取亚甲基蓝10份、品红7份、无水碳酸钠1份、高锰酸钾5份各置于水中并加热溶解,总水量为200份,混合后继续缓慢加热至沸,然后冷却至40~50℃过滤,在减压、60℃恒温下干燥,即得碱性染料;
b、取曙红Y10份溶于100份蒸馏水中,以5份冰醋酸在不断搅拌中逐渐滴加酸化,收集泡沫,并在减压、60℃恒温下干燥,即得酸性染料;
c、酸性染料加入适量无水碳酸钠调PH为4~6.6,成为应用液。
使用时,在酸性染料中加入适量无水碳酸钠调PH值为4~6.6,成为应用液。
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