CN104056268A

CN104056268A - 一种具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂

Info

Publication number: CN104056268A
Application number: CN201310090657.7A
Authority: CN
Inventors: 熊云峰
Original assignee: Guangzhou Is Bioisystech Co Ltd How
Current assignee: Guangzhou Is Bioisystech Co Ltd How
Priority date: 2013-03-20
Filing date: 2013-03-20
Publication date: 2014-09-24

Abstract

本发明提出了一种具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂，包括以下重量配比的各组分：植物抗病毒蛋白-D0.0001-10份，抗-HPV IgY0.0001-50份，复合植物酶1-15份，辅料1-80份，具有抗人乳头瘤病毒及消除子宫内膜炎症的作用，同时还具有抗多种病毒性疾病的感染，细菌感染等效果，且无毒副作用。

Description

一种具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂

技术领域

本发明涉及生物制剂领域，特别是指一种具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂。

背景技术

现代医学在大量的实验研究的基础上，己证实子宫颈癌源自一种人乳头瘤病毒(HPV)，这是目前人类所有癌症中唯一一个病因明确的癌症。人乳头瘤病毒(HPV)是一个大家族，共有100多型，其中约30型可以引起男女生殖器部位的持续感染。低危类型的HPV病毒可引起生殖器疣的形成，即在生殖器表面或周围出现肉质的非癌变的生长物，其中6型和11型感染造成的生殖器疣占所有病例的90%。高危类型的HPV病毒有16、18、31和45型及其它型，感染如果长期存在，会导致宫颈癌和阴道癌以及外阴癌等，其中l6和18型感染导致的宫颈癌占70%左右，迄今为止，医药界还没有开发出用于治疗HPV感染的抗病毒药物，抗生素和其它杀菌药、消毒药对HPV病毒完全没有作用。目前，美国刚刚推出进行临床试验的一种疫苗，一些其他国家中存在有抗-HPV IgY的新药获准，从这些表明，抗-HPV IgY的工艺及制备技术已经成熟，但是，对己经发生的HPV感染更没有任何根除方法，现有的治标方法仅为去除外生的疣体；而且，各种暂时的处置手段均有复发的可能。一旦受到高危类型HPV病毒感染，最终往往会发展成为癌症。虽然美国等一些国家已经研发出HPV疫苗，经大量的临床试验证明，没有感染过HPV病毒的人，经过3针免疫注射，预防HPV病毒感染的效果可以达到100%；但是，HPV疫苗对HPV病毒感染只有预防作用，并没有治疗作用，对于己受到HPV病毒感染的人注射这种疫苗是无能为力的。而且，现在也还没有足够证据表明这种疫苗可使注射者获得终身免疫。因此，寻找一种既可预防又具有治疗作用的新药是世界各国千百万女性的廹切需求，也成为摆在国际医学科学界面前的一项重要课题。

在生殖系统感染性疾病中，子宫内膜炎是很常见的疾病，子宫内膜炎是子宫内的炎症，其发生后，整个宫腔常常发生水肿、渗出，急性期还会导致全身症状，出现发热、寒战、白细胞增高、下腹痛、白带增多、有时为血性或有恶臭，有时子宫略大，子宫有触痛，慢性者表现也基本相同，也可有月经过多、下腹痛及腰骶附胀明显。而引起子宫内膜炎症的主要诱因是细菌感染，如葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、厌氧菌等，此外，还有支原体、衣原体等病原体感染，因此，杀死各种细菌、病毒、支原体、衣原体转阴，是治疗子宫内膜炎症的基础。

不少植物酶均具有杀灭细菌的作用，比如说菠萝酶和木瓜植物酶等植物酶能够溶解细菌细胞壁，破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂，内容物逸出而使细胞溶解，阻碍致病菌的活性繁殖，并杀死致病菌，是一类安全高效的广谱抗菌剂，对大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌、沙门氏杆菌、多杀巴斯德式杆菌、产气杆菌等都有不同程度的抑菌作用，抗菌活性稳定，特别是对一些耐药性菌株有良好的抑菌作用。

植物抗病毒蛋白-D，(Cyanovirin-D，简称CV-D)，由101个氨基酸组成，主要是由β-叠片结构形成的链状蛋白，其中有2个内部二硫键.通过基因重组表达纯化的产物，其结构和活性均与天然CV-D相同，与脂肪酸和酯化的氨基二羧酸缩合得到的阳离子表面活性剂有相似性；是一种对有膜病毒的直接杀灭剂。CV-D与人类免疫缺陷病毒(HIV)包膜糖蛋白120(gp120)具有高度亲和性，并能够阻断由包膜蛋白介导的细胞融合过程从而阻止病毒的扩散。CV-D不仅能够有效地抑制多个亚型的人类免疫缺陷病1(HIV-1)，2(HIV-2)，猴免疫缺陷病毒(SIV)，而且对单纯疱疹病毒、流行性感冒病毒及其他一些包膜病毒也有抑制作用。CV-D的若干特性使其有可能成为一种非常有价值的新型抗病毒药物，而关于植物抗病毒蛋白D(Cyanovirin-D，简称CV-D)的医药应用价值佐证可参照米雷特实验室股份公司的研究专利（专利号：200680055519），但本发明不侵权其专利，其发明提供了由脂肪酸和酯化的氨基二羧酸缩合得到的阳离子表面活性剂，例如从月桂酸和精氨酸，特别是精氨酸单盐酸盐的月桂酰胺的乙基酯（ＬＡＥ），可以用于对抗微生物生长的保护，该类型的阳离子表面活性剂也有效对抗病毒感染，将LAE加入到培养的1型疱疹病毒、牛痘病毒和牛副流感3病毒中，导致在这些培养物中几乎完全减少病毒生物体，这些效果在5和60分钟后上可观测到，而对于CV-D的获取，一方面可以从植物中，比如椰子中进行提取，另一方面，也可以采用基因工程的方法进行制备。

发明内容

本发明提出一种具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂，具有疗效确切、安全方便、无毒副作用等特点。

本发明的技术方案是这样实现的：一种具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂，包括以下重量配比的各组分：

优选的，各组分的重量配比采用：

优选的，当所述具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂用于治疗病毒性疾病感染时，采用以下重量配比的各组分：

以上组分的选取与配比与CV-D具有良好的抗病毒效果相关。

优选的，当所述具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂用于治疗HPV感染时，采用以下重量配比的各组分：

以上组分及配比的选择是根据抗-HPV IgY能够特异性的与HPV结合，达到更好的治疗效果。

优选的，当所述具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂用于治疗细菌性疾病感染时，采用以下重量配比的各组分：

以上组分的及配比的选取与复合植物酶具有的杀灭细菌的效果相关，当然，针对不用的细菌、病毒的感染，各组分的配比关系限于上述的三种，应当根据细菌、病毒等的不同，采用不同的组分配比进行治疗，从而达到最好的治疗效果，同时控制成本与资源。

进一步，所述复合植物酶包括菠萝酶和木瓜植物酶。

进一步，所述辅料包括溶剂、固型剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、pH值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂、释放阻滞剂中的一种或者多种的混合物。

进一步，所述辅料为表面活性剂、固型剂、乳化剂、PH值调节剂和包合剂，根据制备不同的剂型，如洗液、栓塞以及口服液等，我们可以采用不同的辅料组合以及配比，这些均参照现有技术即可，无需进行特殊工艺处理。

本发明以植物抗病毒蛋白-D为核心，抗-HPV IgY辅助，联合复合植物酶作为所述具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂的主体，并根据制备不同剂型的需求，选用不同的所述药用辅料，得到不同剂型的所述具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂，具有以下有益效果：

1、抑制HPV病毒与靶细胞结合，从而阻断了HPV病毒进入靶细胞，预防了HPV病毒感染(中和作用)。体外实验证明杀灭率达97%。

2、抑制从感染的细胞释放出来的HPV病毒再重新感染新的靶细胞，从而阻断了HPV病毒的传播和扩散，治疗HPV病毒感染疾病，阻止诱发对女性健康危害极大的子宫颈癌、阴道癌和外阴癌等。

3、抗人乳头瘤病毒(HPV)IgY特异性地结合HPV病毒，阻止和排斥病毒在致病的敏感部位停留和存在，彻底消除了诱发癌症产生的病灶。

4、抗HPV特异性IgY结合到HPV病毒表面后改变HPV病毒表面结构和电场，促进和加强吞噬细胞(巨噬细胞等)对HPV病毒的吞噬、消化和清除。

5、CV-D能够干扰HPV病毒脱壳，并抑制HPV病毒本身的蛋白酶活性，从而对HPV病毒的代谢和合成起着抑制作用，最终抑制了HPV病毒的活性这样，就可以从病发根源入手，达到预防和辅助治疗的双重效果。

6、所述复合植物酶能够对细菌起到很好的杀灭作用，且抗菌活性稳定，能够消除子宫内膜炎症。

7、所述具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂除了具有抗人乳头瘤病毒及消除子宫内膜炎症的作用外，由于CV-D具有对病毒的抗性，因而还具有抵抗多种病毒的效果，如HCV（丙型肝炎病毒）、HIV（人类免疫缺陷病毒）等。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1中表A为本发明一种具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂的用于实验2中A实验的实验数据图，表B为实验2中B实验的实验数据图；

图2为本发明一种具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂的用于实验3的实验数据图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

由于辅料的选配是根据指定不同的剂型来确定的，且这些均属于现有常规技术，故在此不在详述。

我们对各实施例进行活性与药性的检测：

实验1

将0.1g/ml的实施例1进行ELISA（酶联免疫检测），利用抗原-抗体特异性免疫反应的原理，讲抗原包被于酶标板上，再加上特异性IgY抗体，然后加标有辣根过氧化酶的抗IgY的第二抗体，再加入酶的底物，使酶催化底物显色，根据颜色的深浅判断抗体效价高低，并利用以下公式进行计算：

效价=测定样本孔吸收值（P）/一组阴性样本测定孔平均吸收值（N），由于ELISA为实验室常规技术，在此不再赘述，我们根据ELISA法检测到该具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂中抗-HPV IgY的效价结果如下：

IgY 抗原抗体结合效价

抗-HPV IgY HPV 1:2048

从上述结果中可以看出，该具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂中抗-HPV IgY对HPV具有非常高的结合效率。

实验2

对HCV的抑制活性：

A、采用0.1μg/ml的实施例2处理Huh-7细胞2小时，洗去多余的复合抗病毒制剂，然后用HCVpp感染3小时，再去掉感染物，继续培养。

7天后测病毒产量，图1表A中的数字为3个不同试验的均数及标准差。

B、HCVpp与不同浓度的实施例3一起孵育2小时，加到Huh-7细胞上感染3小时，再去掉感染物，继续培养。

7天后测病毒产量，图1表B中的数字为3个不同试验的均数及标准差

从实验2中可以看出，该具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂能够高效的中和HCV病毒。

实验3

该具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂抑制HIV-1实验株在细胞间的传播：

在正常的TZM-bl细胞培养中加入不同浓度的实施例4，把感染HIV-1BaL（BaL）、HIV-1RF（RF）和HIV-1IIIB（IIIB）的PM1细胞加入到上述经实施例4处理的TZM-bl细胞上一起培养，结果显示3个复孔的均数及标准差如图2所示。

从实验3及图2中，能够很明显的看到，随着该具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂剂量的增加，中和率逐步上升。

以上实施例以及实验数据均表明该具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂对HPV、HIV、HCV以及细菌感染等具有良好的抗性，但由于各组分的作用广泛，同时组分间药性的配合，因而其效果并不至于上述的几个实施例。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂，其特征在于，包括以下重量配比的各组分：

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2.如权利要求1中所述的具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂，其特征在于，包括以下重量配比的各组分：

。

3.如权利要求2中所述的具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂，其特征在于，包括以下重量配比的各组分：

。

4.如权利要求2中所述的具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂，其特征在于，包括以下重量配比的各组分：

。

5.如权利要求2中所述的具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂，其特征在于，包括以下重量配比的各组分：

。

6.如权利要求3或4或5中所述的具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂，其特征在于：所述复合植物酶包括菠萝酶和木瓜植物酶。

7.如权利要求3或4或5中所述的具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂，其特征在于：所述辅料包括溶剂、固型剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、pH值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂、释放阻滞剂中的一种或者多种的混合物。

8.如权利要求7中所述的具有抗人乳头瘤病毒及子宫内膜炎症的新型制剂，其特征在于：所述辅料为表面活性剂、固型剂、乳化剂、PH值调节剂和包合剂。