CN104041393A - 菌根真菌菌种快速扩繁方法 - Google Patents

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CN104041393A CN201410263983.8A CN201410263983A CN104041393A CN 104041393 A CN104041393 A CN 104041393A CN 201410263983 A CN201410263983 A CN 201410263983A CN 104041393 A CN104041393 A CN 104041393A
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张峰
段延玉
南志标
高鹏
闫飞扬
李芳�
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Abstract

本发明公开了一种菌根真菌菌种快速扩繁方法，包括基质准备、菌种接种、宿主播种、培养管理及收获保藏。本发明所需材料常见，操作过程简单，省时，省力，所扩繁菌种三个月就能达到常规扩繁技术五个月的效果，此扩繁技术较常规扩繁技术缩短了两个月甚至于三个月的时间；本发明扩繁的菌根真菌运用于试验的同时，也可以在生物防治、保护生态环境和现代化高科技农业领域得到广泛的应用。

Description

菌根真菌菌种快速扩繁方法
技术领域
本发明属于微生物领域，具体而言，涉及一种土壤有益微生物快速高效扩繁菌根真菌的方法。
背景技术
目前，常规的菌根真菌扩繁技术存在以下不足：(1)需要4-5个月才能完成一个扩繁周期，耗时较长；(2)扩繁所用基质以砂石为主，持水性差，需每隔2-3天浇一次水，耗时费水；(3)扩繁过程中基质极易被暴露在空气中的杂菌污染，导致菌种纯度下降，甚至导致扩繁失败。
发明内容
为了快速高效地扩繁菌根真菌，满足试验和实际使用的需要，本发明提供一种省时、省力、节水、有效的菌根真菌扩繁技术。为了实现本发明的目的，拟采用如下技术方案：
本发明涉及一种菌根真菌菌种快速扩繁方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)将灭菌基质砂石装入容器中至3/5处，加入接种菌剂平铺在基质上，接着再覆一层灭菌基质至容器4/5处，浇透水后每盆播种宿主植物种子15-20粒，然后再覆0.5-1㎝的灭菌沙，最后将容器移入温室内，在上面覆盖一层保鲜膜来保水保温；(2)培养管理期间温室温度控制在20-35℃，等种子发芽出苗顶着保鲜膜时在膜上扎个洞，将苗放出来生长，此后每隔一周浇一次水，植株叶片开始发黄时加入适量Hoagland营养液，浇水或营养液时直接将其洒在膜上，顺着膜孔即可流入容器内；(3)宿主植物生长到90天左右时，揭去保鲜膜，剪去地上部分，干燥2周，将容器中所有培养物收获，即获得大量菌根真菌菌剂。
在本发明的一个优选实施方式中，所述的宿主植物种子是高粱和/或玉米。
在本发明的一个优选实施方式中，所述的菌根真菌菌种快速扩繁方法周期不超过3个月。
本发明所需材料常见，操作过程简单，省时，省力，所扩繁菌种三个月就能达到常规扩繁技术五个月的效果，此扩繁技术较常规扩繁技术缩短了两个月甚至于三个月的时间；本发明扩繁的菌根真菌运用于试验的同时，也可以在生物防治、保护生态环境和现代化高科技农业领域得到广泛的应用。
本发明的方法运用具有保水功能容易在花盆上黏着固定的保鲜膜，使本来持水性很差的砂石培养基质的水分得到很好地保持；同时此保鲜膜还可以较好地保持基质相对较高的温度，使植物在较适宜且稳定的温度下较快的生长；另外运用保鲜膜使基质与空气直接接触面积大大减少，只有通过膜孔接触和交换空气，这样就有效地避免了杂菌的。
本发明的有益效果是：
本发明的有益效果是：宿主种子播种2天即可发芽出土，发芽率达到95％以上；加快植株生长时间，缩短扩繁时间1-2个月；节约水资源40-50％；避免了杂菌污染。由此快速高效地完成菌根真菌菌种的扩繁。
附图说明
图1是本发明播完种子，覆盖好保鲜膜的示意图。
图2是种子发芽出苗后，把苗放出来生长的示意图。
图3是培养管理的整体效果示意图。
图中1代表保鲜膜；2代表砂石基质；3代表花盆；
4代表宿主植物(高粱和玉米)；5代表膜孔。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明进一步说明。
图1中在完成了灭菌砂石基质的称装，菌种接种，宿主植物(高粱和玉米)的播种以及浇水覆沙后，将花盆移入温室，最后在花盆上面覆盖一层保鲜膜来保水保温。
具体操作步骤是：(1)将灭菌基质(砂石)装入花盆至3/5处，加入接种菌剂10-15g平铺在基质上，接着再覆一层灭菌基质至花盆4/5处，浇透水后每盆播种宿主植物(高粱、玉米)种子15-20粒，然后再覆0.5-1㎝的灭菌沙，最后将花盆移入温室内，在上面覆盖一层保鲜膜来保水保温，促进种子快速萌发、提高种子发芽率和促进植株快速生长；(2)培养管理期间温室温度控制在20-35℃，等种子发芽出苗顶着保鲜膜时在膜上扎个洞，将苗放出来生长，此后每隔一周浇一次水，植株叶片开始发黄时加入100mlHoagland营养液,浇水和营养液时时直接将其洒在膜上，顺着膜孔即可流入盆内。(3)宿主植物生长到90天左右时，孢子密度达到50个/㎝3以上，揭去保鲜膜，剪去地上部分，干燥2周，将盆中所有培养物收获，即获得大量菌根真菌菌剂，装袋，写好标签，将其保藏在阴凉干燥处即可。经检测，宿主植物生长到两个月左右时，检测孢子密度时有些已经达到50个/㎝3；生长到两个半月时再检测，孢子密度大部分达到50个/㎝3，有些达到80个/㎝3，甚至超过100个/㎝3；生长到90天时，经检测孢子密度最少的是50个/㎝3，大部分已经达到100个/㎝3。扩繁完成的标志就是所有扩繁菌种孢子密度最少达到50个/㎝3，由此可见，本发明的方法通过不到3个月就可以完成扩繁。
图2中当种子发芽出苗顶着保鲜膜时应立即在膜上扎个洞，将苗放出来生长。在培养管理期间浇水和营养液时，将其洒在膜上顺着膜孔即可流入。
以上所述是本发明的优选实施例，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明所述原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (3)

1.一种菌根真菌菌种快速扩繁方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)将灭菌基质砂石装入容器中至3/5处，加入接种菌剂平铺在基质上，接着再覆一层灭菌基质至容器4/5处，浇透水后每盆播种宿主植物种子15-20粒，然后再覆0.5-1㎝的灭菌沙，最后将容器移入温室内，在上面覆盖一层保鲜膜来保水保温；(2)培养管理期间温室温度控制在20-35℃，等种子发芽出苗顶着保鲜膜时在膜上扎个洞，将苗放出来生长，此后每隔一周浇一次水，植株叶片开始发黄时加入适量Hoagland营养液，浇水或营养液时直接将其洒在膜上，顺着膜孔即可流入容器内；(3)宿主植物生长到85-95天左右时，揭去保鲜膜，剪去地上部分，干燥2周，将容器中所有培养物收获，即获得大量菌根真菌菌剂。
2.根据权利要求1所述的方法，所述的宿主植物种子是高粱和/或玉米。
3.根据权利要求1或2所述的方法，所述的菌根真菌菌种快速扩繁方法周期不超过3个月。
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