CN104025761B - 一种促进垂序商陆种子萌发的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种促进垂序商陆种子萌发的方法。具体操作步骤：(1)种子的收集与干燥；(2)种子净选消毒；(3)种子层积处理；(4)发芽培养。本发明的益效：1.本发明方法操作简单、成本低、无危险、易于人工操作、无污染、易于推广等优点，对垂序商陆的种子育苗、规模化种植具有很高的实际应用价值。2.本发明方法通过14～28天的处理可有效地促进垂序商陆种子的萌发与成苗，使垂序商陆种子萌发率从不到10％提高到96～100％。

Description

一种促进垂序商陆种子萌发的方法

技术领域

本发明涉及一种植物种子休眠解除的技术。具体是一种促进垂序商陆种子萌发的方法。

背景技术

垂序商陆(Phytolacca americana L.)是商陆科多年生草本植物，药用部位为干燥根，具有逐水消肿，通利二便，解毒散结功效，主治水肿胀满，二便不通，臃肿，疮毒，为历版《中华人民共和国药典》收载品种。此外，垂序商陆是良好的土壤和水体污染修复植物，垂序商陆在锰矿废弃地生长良好，对生长介质中锰具有超强的吸附能力，在锰污染土壤和水体修复方面具有很大的应用前景。

垂序商陆结实量大，种子寿命长，但种子萌发率低，存在种子休眠现象(周兵,闫小红,肖宜安,等.外来入侵植物美洲商陆的繁殖生物学特性及其入侵性的关系[J].生态环境学报,2013,22(4):567-574)。垂序商陆种子休眠的原因主要是存在硬实现象，未经处理的种子萌发率很低，不足10％，种子难萌发已经成为制约其进一步有效利用的严重问题。

目前，生产上解除硬实种子休眠的方法主要是浓硫酸处理，刘丽莉等人对美洲商陆种子的研究表明，浓硫酸处理后发芽率可达90％以上(刘丽莉,冯涛,严明理,等.几种破除美洲商陆种子休眠的方法[J].植物生理学通讯,2007,43,(4):795-796)。然而，经过硫酸处理的种子，在萌发过程中容易出现霉烂，会导致成苗率降低，且浓硫酸是一种具有极强的腐蚀性的化学试剂，价格高，难回收，易造成环境污染，烧种操作具有一定的危险性。因此，亟需一种低成本无危险操作简单的促进垂序商陆种子萌发的方法。

发明内容

本发明的目的是为了提供一种促进垂序商陆种子萌发的方法，是一种低成本、无危险、操作简单的促进垂序商陆种子萌发的方法。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

一种促进垂序商陆种子萌发的方法，操作步骤如下：

1)种子的收集和干燥：在每年8～10月，当垂序商陆浆果从紫红色变紫黑色时收集果实，种子剥出后用流动的水冲洗干净，自然晾干。

2)种子净选消毒：将步骤1)自然晾干的垂序商陆种子用筛孔为2.5mm的方孔筛筛选出净种子，将净种子放入质量百分数为0.1％的高锰酸钾溶液中进行浸泡消毒，消毒后用蒸馏水冲洗除净消毒液。

3)种子层积处理：将经过步骤2)消毒后的垂序商陆种子与湿珍珠岩混合，置于5℃的条件下层积28天，或置于15℃的条件下层积14天。

所述的种子层积处理过程中种子与珍珠岩混合的体积比为1∶3，珍珠岩的消毒方法是用质量百分浓度为1％的漂白粉液浸泡30分钟，然后再用蒸馏水冲洗至无氯味，湿珍珠岩的绝对含水量为200～300％。

4)发芽培养：将经过步骤3)层积处理的垂序商陆种子置于直径为9cm的培养皿中，在变温和交替光照条件下萌发，以24小时作为一个循环周期，培养28天。

所述变温和交替光照的条件为：每天先在25℃光照条件下处理12h，再在15℃黑暗条件下处理12小时；或每天先在30℃光照条件下处理12小时，再在20℃黑暗条件下处理12小时。

所述发芽培养的操作过程为：

(1)培养皿和发芽床的消毒：9cm的玻璃培养皿内铺2层定性滤纸，牛皮纸包扎好后置于120摄氏度高温下蒸汽消毒20分钟，取出后晾干。

(2)种子消毒：先用体积百分浓度为75％的乙醇浸种0.5min，再用质量百分浓度为1％的次氯酸钠浸种5分钟，最后用无菌蒸馏水冲洗3次。

(3)摆放种子：打开已经消毒过的培养皿，先用5ml的无菌水浸湿滤纸，再将种子均匀摆放在滤纸上，每皿摆种子50粒，最后用封口膜将培养皿封好后置于光照培养箱内培养28天。整个摆种过程在无菌操作台内进行。

本发明的益效：

1.本发明方法操作简单、成本低、无危险、易于人工操作、无污染、易于推广等优点，对垂序商陆的种子育苗、规模化种植具有很高的实际应用价值。

2.本发明方法通过14～28天的处理可有效地促进垂序商陆种子的萌发与成苗，使垂序商陆种子萌发率从不到10％提高到96～100％。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明作进一步描述，但本发明并不局限于此。

下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

实施例1

促进垂序商陆种子萌发的方法，操作步骤如下：

1.采种、干燥及消毒：2013年9月，在广西药用植物园内采收成熟的垂序商陆果实，将种子剥出后再用流动的自来水冲洗干净，于室内摊开，自然晾干7天，筛取粒径大于2.5mm的种子5g，重复3份，然后用50mL的质量百分数为0.1％高锰酸钾溶液浸泡消毒5分钟，过滤后用蒸馏水冲洗3遍。

2.种子层积处理：将经过消毒的种子与绝对含水量为200％的湿珍珠岩混合，种子与珍珠岩的体积比为1:3，置于5℃冰箱中层积28天。

3.发芽培养：将层积种子取出，标记为CJ1；以未经层积处理的种子作对照，标记为CK1。两个处理的种子分别先用75％乙醇浸种0.5分钟，再用1％次氯酸钠浸种5分钟，最后用无菌蒸馏水冲洗3次。将50粒消毒种子均匀摆放到玻璃培养皿内(直径9cm的培养皿内预先铺2层定性滤纸，经过120摄氏度高温灭菌处理20min)，封口膜封口后置于光照培养箱内培养28天，各处理均重复4次。设置光照培养箱的光照和温度条件为每天8：00至20:00光照1000～3000lx、温度30℃；其余时间为黑暗、温度20℃。

28天后以胚根突破种皮的种子粒数占供试种子粒数的百分比记为种子发芽率，层积处理CJ1的种子发芽率4次重复分别为100％、98％、98％、98％，平均发芽率达98.5％；而对照处理CK1的种子发芽率4次重复分别为8％、12％、10％、8％，平均发芽率仅9.5％。本专利方法使垂序商陆的发芽率增加了89.0％。

实施例2

促进垂序商陆种子萌发的方法：

本实施例操作过程与实施例1所述采种、干燥、消毒、发芽培养条件相同，但所用的层积条件为将经过消毒的种子与绝对含水量为300％的湿珍珠岩混合，种子与珍珠岩的体积比为1:3，置于15℃冰箱中层积14天。将层积处理种子标记为CJ2，对照种子未作任何处理标记为CK2。

28天后层积处理CJ2的种子发芽率4次重复分别为100％、100％、100％、100％，平均发芽率达100.0％；而对照处理CK2的种子发芽率4次重复分别为8％、12％、10％、8％，平均发芽率仅9.5％。本专利方法使垂序商陆的发芽率增加了90.5％。

实施例3

促进垂序商陆种子萌发的方法：

本实施例操作过程与实施例2所述的采种、干燥、消毒、层积处理相同，但种子发芽培养所设置的光照和温度条件为每天8：00至20:00光照1000～3000lx、温度25℃；其余时间为黑暗、温度15℃。将层积处理种子标记为CJ3，对照种子未作任何处理标记为CK3。

28天后层积处理CJ3的种子发芽率4次重复分别为98％、96％、98％、96％，平均发芽率达97.0％；而对照处理CK3的种子发芽率4次重复分别为2％、2％、0、0，平均发芽率仅1.0％。本专利方法使垂序商陆的发芽率增加了96.0％。

实施例4

促进垂序商陆种子萌发的方法：

本实施例操作过程与实施例1所述的采种、层积处理、发芽培养条件相同，但所采种子经室内自然阴干10d,筛取粒径大于2.5mm的种子5g，然后用50mL的0.1％高锰酸钾溶液浸泡消毒5分钟，过滤后用蒸馏水冲洗3遍。将层积处理种子标记为CJ4，对照种子未作任何处理标记为CK4。

28天后层积处理CJ4的种子发芽率4次重复分别为98％、96％、98％、96％，平均发芽率达97.0％；而对照处理CK4的种子发芽率4次重复分别为8％、12％、10％、8％，平均发芽率仅9.5％。本专利方法使垂序商陆的发芽率增加了87.5％。

实施例5

促进垂序商陆种子萌发的方法：

本实施例操作过程与实施例2所述的层积温度和层积时间、发芽培养条件相同，但所用实验材料为2013年10月在广西武鸣县采集到的野生垂序商陆种子。将种子剥出后再用流动的自来水冲洗干净，于室内摊开，自然晾干14天，筛取粒径大于2.5mm的种子5g，重复2份，然后用50mL的质量百分数为0.1％高锰酸钾溶液浸泡消毒5分钟，过滤后用蒸馏水冲洗3遍。将消毒的种子与绝对含水量为250％的湿珍珠岩进行混合层积。

28天后层积处理CJ5的种子发芽率4次重复分别为96％、96％、98％、96％，平均发芽率达96.5％；而对照处理CK5的种子发芽率4次重复分别为8％、8％、10％、8％，平均发芽率仅8.5％。本专利方法使垂序商陆的发芽率增加了88.0％。

实施例6

促进垂序商陆种子萌发的方法：

本实施例操作过程与实施例5所述的实验材料、干燥、消毒、层积处理相同，但种子发芽培养所设置的光照和温度条件为每天8：00至20:00光照1000～3000lx、温度25℃；其余时间为黑暗、温度15℃。将层积处理种子标记为CJ6，对照种子未作任何处理标记为CK6。

28天后层积处理CJ6的种子发芽率4次重复分别为98％、94％、94％、98％，平均发芽率达96.0％；而对照处理CK6的种子发芽率4次重复分别为4％、8％、6％、4％平均发芽率仅5.5％。本专利方法使垂序商陆的发芽率增加了90.5％。

Claims (1)

1.一种促进垂序商陆种子萌发的方法，其特征在于，操作步骤如下：

1)种子的收集和干燥：在每年8～10月，当垂序商陆浆果从紫红色变紫黑色时收集果实，种子剥出后用流动的水冲洗干净，自然晾干；

2)种子净选消毒：将步骤1)自然晾干的垂序商陆种子用筛孔为2.5mm的方孔筛筛选出净种子，将净种子放入质量百分数为0.1％的高锰酸钾溶液中进行浸泡消毒，消毒后用蒸馏水冲洗除净消毒液；

3)种子层积处理：将经过步骤2)消毒后的垂序商陆种子与湿珍珠岩混合，置于5℃的条件下层积28天，或置于15℃的条件下层积14天；

所述的种子层积处理过程中种子与珍珠岩混合的体积比为1∶3，珍珠岩的消毒方法是用质量百分浓度为1％的漂白粉液浸泡30分钟，然后再用蒸馏水冲洗至无氯味，湿珍珠岩的绝对含水量为200～300％；

4)发芽培养：将经过步骤3)层积处理的垂序商陆种子置于直径为9cm的玻璃培养皿中，在变温和交替光照条件下萌发，以24小时作为一个循环周期，培养28天；

所述变温和交替光照的条件为：每天先在25℃光照条件下处理12h，再在15℃黑暗条件下处理12小时；或每天先在30℃光照条件下处理12小时，再在20℃黑暗条件下处理12小时；

所述发芽培养的操作过程为：

(1)培养皿和发芽床的消毒：9cm的玻璃培养皿内铺2层定性滤纸，牛皮纸包扎好后置于120摄氏度高温下蒸汽消毒20分钟，取出后晾干；

(2)种子消毒：先用体积百分浓度为75％的乙醇浸种0.5min，再用质量百分浓度为1％的次氯酸钠浸种5分钟，最后用无菌蒸馏水冲洗3次；

(3)摆放种子：打开已经消毒过的培养皿，先用5ml的无菌水浸湿滤纸，再将种子均匀摆放在滤纸上，每皿摆种子50粒，最后用封口膜将培养皿封好后置于光照培养箱内培养28天；整个摆种过程在无菌操作台内进行。