CN102090181B - 一种快速解除蔓荆子种子休眠的方法 - Google Patents

一种快速解除蔓荆子种子休眠的方法 Download PDF

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Abstract

一种快速解除蔓荆子种子休眠的方法，其步骤是：选出蔓荆子净种子，将其用浓硫酸浸泡，然后去掉表面碳化物质；将其在常温下，浸泡于赤霉素溶液，之后用次氯酸钠消毒，然后用蒸馏水清洗；再将蔓荆子种子转入恒温或变温条件的光照培养箱中用蛭石或湿沙或滤纸或海绵发芽床，或置沙质土壤中进行发芽。本发明的快速解除蔓荆子种子休眠的方法，能有效解除阻碍蔓荆子种子萌发的各种因素，包括种皮所形成的机械障碍，打破蔓荆子种子休眠，显著提高种子发芽率，发芽率可达82.1%，与现有的营养繁殖相比，具有操作简单、成本低廉、快速萌发等优点，可广泛用于蔓荆子药材的栽培和园林绿化中。

Description

一种快速解除蔓荆子种子休眠的方法
技术领域
本发明涉及一种快速解除蔓荆子种子休眠的方法。
技术背景
蔓荆子为马鞭草科植物单叶蔓荆Vitex trifolia L. var.simplicifolia Cham.或蔓荆V. trifolia L.的干燥成熟果实。蔓荆子临床应用广泛，同时又是优良的园林绿化、防风固沙、改良土壤的物种，具有较高的开发利用价值。目前蔓荆子资源以野生为主，主产于山东、江西、广西等省区，其中山东、江西以单叶蔓荆为主，广西以蔓荆为主。近年来，蔓荆子野生资源破坏严重，已被列为国家重点保护野生药材物种名录(三类)。由于蔓荆子种子具有休眠特性，生产上主要以营养繁殖为主，解除蔓荆子种子休眠，提高蔓荆子繁殖系数，对开展蔓荆子资源保护和可持续利用具有重要意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种安全性好、操作简单、容易控制的快速解除蔓荆子种子休眠的方法。
本发明的快速解除蔓荆子种子休眠的方法，包括以下步骤：
1．收集10～11月份的黑色成熟的蔓荆子果实，常温储藏，用种子风选净度仪清选空壳，选出净种子，即为蔓荆子种子；
2．将蔓荆子种子用浓硫酸浸泡1～60分钟，流水冲洗2小时后去掉表面碳化物质；
3．将其在常温20～25℃下，浸泡于0.1～5.0mg/ml赤霉素溶液1～36小时，之后用1%次氯酸钠消毒5～15分钟，然后用蒸馏水清洗至pH＝7；
4．将蔓荆子种子置恒温或变温条件的光照培养箱中，用蛭石或湿沙或滤纸或海绵发芽床，或置沙质土壤中进行发芽。
本发明的快速解除蔓荆子种子休眠的方法，能有效解除阻碍蔓荆子种子萌发的各种因素，包括种皮所形成的机械障碍，打破蔓荆子种子休眠，从而提高发芽率(发芽率可以达到82.1%)，与现有的营养繁殖相比，具有操作简单、成本低廉、快速萌发等优点，可广泛用于蔓荆子药材的栽培和园林绿化中。
附图说明
图1为不同浓度赤霉素下浓硫酸酸蚀和未酸蚀与发芽率的关系，横坐标为赤霉素的浓度，纵坐标为发芽率，以百分比表示，WS表示未酸蚀处理，S表示酸蚀处理。
图2 为浓硫酸处理后不同浓度赤霉素处理与发芽率的关系，横坐标为赤霉素的浓度，纵坐标为发芽率，以百分比表示。
具体实施方式
一种快速解除蔓荆子种子休眠的方法，其步骤是：
1．收集10～11月份的黑色成熟的蔓荆子果实，常温储藏，用种子风选净度仪清选空壳，选出净种子，即为蔓荆子种子；
2．将蔓荆子种子用98%的浓硫酸浸泡10～15分钟，流水冲洗2小时后用纱布搓掉表面碳化物质；
3．再将其在常温20℃下，浸泡于0.5～1.0mg/ml赤霉素溶液18小时，之后用1%次氯酸钠消毒15分钟，然后用蒸馏水清洗至pH＝7；
4．再将蔓荆子种子置恒温或变温条件的光照培养箱中用滤纸发芽床进行发芽。所述的恒温是15、20、25、30℃，所述的变温条件是白天25℃培养18小时、晚上15℃培养8小时，或者是白天30℃培养18小时、晚上20℃培养8小时。
以下通过实施例来进一步描述本发明。
说明: 1．具体实施方式中所采用的发芽试验（除实施例5外）均为纸床发芽试验法，具体如下:直径为9cm的培养皿内放置滤纸，用水湿透，将多余的水倒掉，以保湿不积水为度，选取50粒蔓荆子种子均匀放入培养皿内的纸上，再将培养皿盖好后放入微电脑控制光照培养箱(LRH-250-Gll；广东省医疗器械厂生产),按照各个试验例所设计的特定温度(恒温或变温)条件进行发芽，整个发芽过程中均进行光照;发芽过程中每天检测1～2次，并适当补足水分，蔓荆子种子开始发芽后，每天计数1次。发现有腐败的种子应随时拣出,若霉变种子≥5%，应及时更换培养皿内的滤纸，并将种子用蒸馏水清洗后再放入培养皿内继续令其发芽。
2．参照《国际种子检验规程》(1985)、《农作物种子检验规程》(1995)等作为评定种子是否发芽的标准(以长出1cm为发芽)。
3．种子发芽率是指发芽试验终期，在规定的日期内发芽的全部种子数占供试种子的百分率。发芽率(%)＝规定日期内发芽种子/供试种子粒数×100%。本试验中的发芽日期均为自将发芽纸床放入箱中起的20天。
4．本实验试图通过多种方法打破蔓荆子的休眠，但只有赤霉素能打破蔓荆子种子的休眠，其它方法如湿沙层积、生长素、浓硫酸等均不能解除蔓荆子休眠。
实验材料
本实验所用的蔓荆子种子为2009年10月份在江西省新建县采收的黑色成熟的单叶蔓荆子果实。将蔓荆子果实常温阴干后，用种子风选净度仪清选空壳，选出的蔓荆子核果中有种子者为蔓荆子种子，蔓荆子种子用牛皮纸袋常温储藏。
实施例1
一、实验方法
将蔓荆子种子分为两组，一组用浓硫酸酸蚀一定时间，一组空白对照。然后把蔓荆子种子分别浸泡于0.1、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/ml赤霉素溶液中18小时后，用1%次氯酸钠消毒15分钟，无菌水漂洗5次至至pH＝7。每个浓度平行四组，每组50粒置于30℃恒温培养箱全光照培养，每日统计发芽率。
二、实验结果
如图1表明，在相同赤霉素浓度条件下酸蚀蔓荆子种子对其发率率和发芽势均有明显提高。酸蚀处理蔓荆子种子的7天的发芽率为70%，而未酸蚀蔓荆子种子的发芽率为10%，20天时发芽率达到最高，酸蚀处理的发芽率为73.5%，而未酸蚀的发芽率为69.0%。酸蚀处理的发芽势也显著高于未经酸蚀处理的，第10天酸蚀处理的发芽势为73.5%，未酸蚀的为58%。因此浓硫酸酸蚀处理可以打破蔓荆子果皮的机械束缚。
实施例2
一、实验方法
用98%浓硫酸分别浸泡成熟的蔓荆子种子0.5、5、10、15、30、60分钟后，慢慢倾倒掉硫酸，用清水冲洗2小时，然后用纱布搓掉蔓荆子表面碳化物质，再将蔓荆子分别浸泡于1.0 mg/ml赤霉素溶液中18小时后，用1%次氯酸钠消毒15分钟，无菌水漂洗5次至pH＝7。每个处理平行四组，每组50粒，置于30℃恒温培养箱全光照培养。每日统计发芽率，实验结果见表1。
表1 浓硫酸酸蚀处理蔓荆子的发芽率
二、实验结果
如表1结果表明：随酸蚀时间的增加，发芽率有所提高，其中以15分钟最佳，酸蚀30分钟时则下降。酸蚀处理提高萌发率可能与克服果皮的机械阻力有关。
实施例3
一、实验方法
将浓硫酸酸蚀15分钟后的蔓荆子分别浸泡于0.1、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 mg/ml赤霉素溶液中18小时后，用1%次氯酸钠消毒15分钟，无菌水漂洗5次至至pH＝7。每个浓度平行四组，每组50粒，置于30℃恒温培养箱全光照培养。每日统计发芽率，实验结果见图2。
二、实验结果
图2结果表明解除蔓荆子种子休眠的最佳浓度为0.5～1.0mg/ml,本实验浓度范围内发芽率没有显著性差异。
实施例4
一、实验方法
将浓硫酸酸蚀15分钟后的蔓荆子种子分别浸泡于1.0mg/ml赤霉素溶液中，浸泡的时间为浸泡的时间为1、6、12、18、24、36小时。用次氯酸钠消毒15分钟，然后用蒸馏水清洗至pH＝7。每个浓度平行四组，每组50粒，置于30℃恒温培养箱全光照培养。每日统计发芽率，实验结果见表2（A，B表示有显著性差异）。
二、实验结果
表2结果表明：赤霉素浸泡时间并不是影响蔓荆子种子发芽率的主要因数，但以18小时的发芽率最高，浸泡18、24、36小时的发芽率没有显著性差异（P﹥0.05），故浸泡时间为18小时。
表2赤霉素浸泡时间与蔓荆子种子发芽率
Figure 996884DEST_PATH_IMAGE002
实施例5
一、实验方法
（1）打破种子休眠的恒温处理  将浓硫酸酸蚀15分钟后的蔓荆子种子置1.0mg/ml赤霉素常温（20℃）浸泡18小时后恒温培养，培养温度分别为15、20、25、30℃，每个温度分别用蛭石、湿沙、滤纸、海绵四种培养床，每个处理平行四组，每组50粒种子。结果见表3。
（2）打破种子休眠的变温处理  将浓硫酸酸蚀15分钟后的蔓荆子种子置1.0mg/ml赤霉素常温（20℃）浸泡18小时后变温培养。变温条件为：白天25℃培养16小时，夜晚15℃培养8小时或者白天30℃培养16小时，夜晚20℃培养8小时。每个变温分别用蛭石、湿沙、滤纸、海绵四种培养床，每个处理平行四组，每组50粒种子。结果见表4。
二、实验结果
结果表明：在温度相同时，不同培养床的种子发芽率无显著性差异。在蛭石培养床上不同温度的SNK比较的同类子集结果如表3所示：20、25、30、30/20℃四者之间无显著性差异，与15、25/15℃之间存在显著性差异。如表4所示蔓荆子种子发芽势以30℃最高，因此采用30℃恒温光照培养。温度低于20℃不适合蔓荆子种子的萌发。
表3  不同温度的SNK（Student-Newman-Keuls）比较
Figure DEST_PATH_IMAGE003
表4 不同发芽介质和温度对蔓荆子种子发芽率的影响
Figure 44517DEST_PATH_IMAGE004

Claims (3)

1.一种快速解除蔓荆子种子休眠的方法，其特征在于：它包括以下步骤：
(a)收集10～11月份的黑色成熟的蔓荆子果实，常温储藏，用种子风选净度仪清选空壳，选出净种子；
(b)将蔓荆子种子用浓硫酸浸泡1～60分钟，流水冲洗2小时后去掉表面碳化物质；
(c)将其在常温20～25℃下，浸泡于0.1～5.0mg/ml赤霉素溶液1～36小时，之后用1％次氯酸钠消毒15～18分钟，然后用蒸馏水清洗至pH＝7；
(d)再将蔓荆子种子转入恒温或变温条件的光照培养箱中用蛭石或湿沙或滤纸或海绵发芽床，或置沙质土壤中进行发芽，所述的恒温是15、20、25、30℃中的任意一种，所述的变温条件是白天25℃培养18小时、晚上15℃培养8小时，或者是白天30℃培养18小时、晚上20℃培养8小时。
2.如权利要求1所述的快速解除蔓荆子种子休眠的方法，其特征在于：步骤(b)中蔓荆子种子用浓硫酸浸泡10～15分钟。
3.如权利要求1所述的快速解除蔓荆子种子休眠的方法，其特征在于：步骤(c)中蔓荆子种子浸泡于0.5～1.0mg/ml赤霉素溶液18小时。
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