CN103999750B - 一种阴地蕨孢子的繁殖方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种阴地蕨孢子的繁殖方法，包括以下四个步骤：一、阴地蕨孢子收集、预处理，二、阴地蕨孢子培养基准备、处理，三、孢子播种及管理，四、阴地蕨小苗移栽。本发明由于采用了上述的技术方案，解决以往阴地蕨种苗完全依赖野生资源的局限，以及传统蕨类植物繁殖组织培养投资大、需专业人员等的技术缺陷问题。具有繁殖系数高、成本低、成苗率高、腐烂率低等优点，可以将利用极少的母本材料最大限度的培养成优质小苗，作为母本种植，是目前繁殖阴地蕨的最佳途径之一。

Description

一种阴地蕨孢子的繁殖方法

技术领域

本发明涉及一种植物繁殖方法，尤其是阴地蕨孢子繁殖方法。

背景技术

阴地蕨(BotrychiumSw)属于阴地蕨科，阴地蕨为陆生蕨类植物，根状茎短，直立，具肉质粗根。全世界约有40余种，主要分布于温带的高山地区和低地森林地区。我国现有17种，分布于全国各地。该属植物具有清热解毒、利水通淋、消肿的作用，具有很高的药用价值。尤其在我国浙江、福建、贵州等地的少数民族，民间多用阴地蕨属植物治疗肺热咳嗽，毒蛇咬伤，出血等疾病症状而受到了人们的关注。

阴地蕨的主要化学成分为黄酮类化合物和多糖类化合物，具有广泛的生物活性，阴地蕨具有很高的药用价值，最早报道从该属植物中分离得到了阴地蕨素(ternatin)、槲皮素、3－O－α－L－鼠李糖－7－O－β－D－葡萄糖甙等化学成分。

陈晓清等人研究发现阴地蕨含多种生物活性物质，从阴地蕨分离得到粗多糖提取物对抑制3种鱼病病原菌：烂尾病病原菌、赤皮病病原菌、肠炎病病原菌，显示出不同程度的活性。其中，阴地蕨多糖提取物对肠炎病病原菌的MIC最小，为6.25mg/mL，对赤皮病病原菌的MIC最大，为25.0mg/mL。倪亚等人报道阴地蕨作为拉枯族的常用药，可用来治疗支气管炎，用法与灯台叶相仿，该药直接可以用来煎水、内服，以蜂蜜为引，治疗效果满意。福建医科大学省立临床学院王少明研究发现小春花对小鼠肿瘤的发生具有确切的抑制作用，可在一定程度上推迟肿瘤发生时间、降低肿瘤发生率，且在始发阶段和促癌阶段均可发挥作用，表现出较强的癌症化学预防作用，并于2010年申请了发明专利，公开了一种从阴地蕨中提取的木犀草素、阴地蕨素等提取物在抗肿瘤药物中的新用途，表明该提取物具有抗肿瘤转移作用，具体表现为抑制自发性肿瘤转移和实验性肿瘤转移，可用于制备抗肿瘤转移药物，从而为阴地蕨属植物在抗肿瘤领域的研究提供了重大的研究意义。福建省立医院药剂科依据民间经验配置的阴地蕨口服液（小伏口服液）由阴地蕨等药物组成的复方制剂，具有清肝解热，临床用于呼吸系统疾病、抗炎、免疫调节等。

阴地蕨属植物具有多种生物活性，具有很高的药用价值。主要还集中于作为民间的常用药药理方面、化学成分、活性成分、临床应用方面的研究，然而在阴地蕨品种资源资源收集评价、人工繁育、仿生栽培方面研究暂未见报导，因此这方面技术的缺乏制约了阴地蕨药用植物的人工规模化栽培及药品保键品的开发应用。

阴地蕨目前资源主要依靠野生，但是目前野生资源经过多年的人工挖掘，基本灭绝，加上自然环境的变异，自然状态下，阴地蕨孢子萌发率逐年降低，以往孢子繁殖也可以通过组织培养，但是需要专业技术人员和专业设备，投资大，难推广。要保证供应大量的阴地蕨种苗，利用少量的野生或人工培育的阴地蕨作为材料是最佳的途径之一。

发明内容

为了解决上述的技术问题，本发明的目的是提供一种阴地蕨孢子的繁殖方法，该方法利用阴地蕨孢子为繁殖材料，利用阴地蕨孢子，采集孢子、孢子预处理、繁殖基质前期处理及配比、繁殖环境的调控等，经过约250-300天，孢子即可萌发、生根，约20天后即可移栽、大田种植。

为了实现上述的目的，本发明采用了以下的技术方案：

一种阴地蕨孢子的繁殖方法，该方法包括以下的步骤：

一、阴地蕨孢子收集、预处理

1）阴地蕨孢子采集时间，每年12月至次年的1月，当阴地蕨叶片背面的孢子呈棕色即可采集；

2）孢子采集方法：将带成熟孢子的叶片，从阴地蕨叶柄处剪断，用纸袋将整个叶片装好带回；

3）孢子的预处理：将采集到阴地蕨叶片，首先和蒸馏水混合，然后在搅拌器内将其打碎，最后再往打碎的汁液中加入30倍量的蒸馏水；

二、阴地蕨孢子培养基准备、处理：

1）培养基准备：首先在每年6-7月份将新鲜的稻草用机械打碎成小于0.5厘米的颗粒，加入秸秆腐熟剂，进行腐烂；

2）培养基准备：将山上分布有野生阴地蕨区域环境内地表5厘米的表层土收集；

3）培养基消毒：将收集到腐殖土和腐熟的稻草，按照腐殖土：腐熟的稻草体积比为3:1混合均匀，在灭菌锅中高温灭菌1小时；

三、孢子播种及管理

1）将穴盘冲洗干净，在穴盘的孔穴中填充经过配比消毒的培养基质，将含有孢子的液体用滴管在每个孔穴上滴入2-4毫升，然后上面覆盖0.5厘米的培养基即可，最后将穴盘放在培养区；

2）培养区建设：架设40厘米高小拱棚，先覆盖薄膜再覆盖遮阴率70%~80%的遮阳网；

4）培养区环境控制：控制湿度75%~80%之间，温度先期15~20℃3个月，20~30℃培养20-30天；

四、阴地蕨小苗移栽

1）经过大约250-300天孢子即可萌发，经过20-30天的生长，阴地蕨小苗即可长到3厘米以上即可移栽。

本发明由于采用了上述的技术方案，解决以往阴地蕨种苗完全依赖野生资源的局限，以及传统蕨类植物繁殖组织培养投资大、需专业人员等的技术缺陷问题。具有繁殖系数高、成本低、成苗率高、腐烂率低等优点，可以将利用极少的母本材料最大限度的培养成优质小苗，作为母本种植，是目前繁殖阴地蕨的最佳途径之一。

具体实施方式

一种阴地蕨孢子的繁殖方法，该方法包括以下的步骤：

一、阴地蕨孢子收集、预处理

1）阴地蕨孢子采集时间，每年12月至次年的1月，当阴地蕨叶片背面的孢子呈棕色即可采集，此时段，阴地蕨孢子已经接近成熟；

2）孢子采集方法：将带成熟孢子的叶片，从阴地蕨叶柄处剪断，用纸袋将整个叶片装好带回；

3）孢子的预处理：将采集到阴地蕨叶片，首先和蒸馏水混合，然后在搅拌器内将其打碎，最后再往打碎的汁液中加入30倍量的蒸馏水。

二、阴地蕨孢子培养基准备、处理：

1）培养基准备：首先在每年6-7月份将新鲜的稻草用机械打碎成小于0.5厘米的颗粒，加入秸秆腐熟剂，进行腐烂；

2）培养基准备：将山上分布有野生阴地蕨区域环境内地表5厘米的表层土收集；

3）培养基消毒：将收集到腐殖土和腐熟的稻草，按照腐殖土：腐熟的稻草体积比为3:1混合均匀，在灭菌锅中高温灭菌1小时。

三、孢子播种及管理

1）将穴盘冲洗干净，在穴盘的孔穴中填充经过配比消毒的培养基质，将含有孢子的液体用滴管在每个孔穴上滴入2-4毫升，然后上面覆盖0.5厘米的培养基即可，最后将穴盘放在培养区；

2）培养区建设：架设40厘米高小拱棚，先覆盖薄膜再覆盖遮阴率70%~80%的遮阳网；

4）培养区环境控制：控制湿度75%~80%之间，温度先期15~20℃3个月，20~30℃培养20-30天。

四、阴地蕨小苗移栽

1）经过大约250-300天孢子即可萌发，经过20-30天的生长，阴地蕨小苗即可长到3厘米以上即可移栽。

采用本发明提供的方法进行培养，通过250-300天左右的培养，阴地蕨孢子即可萌发、生根、当阴地蕨小苗等长到3厘米以上即可移栽，即可出圃移植。

Claims (1)

1.一种阴地蕨孢子的繁殖方法，其特征在于该方法包括以下的步骤：

一、阴地蕨孢子收集、预处理

1）阴地蕨孢子采集时间，每年12月至次年的1月，当阴地蕨叶片背面的孢子呈棕色即可采集；

2）孢子采集方法：将带成熟孢子的叶片，从阴地蕨叶柄处剪断，用纸袋将整个叶片装好带回；

3）孢子的预处理：将采集到阴地蕨叶片，首先和蒸馏水混合，然后在搅拌器内将其打碎，最后再往打碎的汁液中加入30倍量的蒸馏水；

二、阴地蕨孢子培养基准备、处理：

1）培养基准备：首先在每年6-7月份将新鲜的稻草用机械打碎成小于0.5厘米的颗粒，加入秸秆腐熟剂，进行腐烂；

2）培养基准备：将山上分布有野生阴地蕨区域环境内地表5厘米的表层腐殖土收集；

3）培养基消毒：将收集到腐殖土和腐熟的稻草，按照腐殖土：腐熟的稻草体积比为3:1混合均匀，在灭菌锅中高温灭菌1小时；

三、孢子播种及管理

1）将穴盘冲洗干净，在穴盘的孔穴中填充经过配比消毒的培养基质，将含有孢子的液体用滴管在每个孔穴上滴入2-4毫升，然后上面覆盖0.5厘米的培养基即可，最后将穴盘放在培养区；

2）培养区建设：架设40厘米高小拱棚，先覆盖薄膜再覆盖遮阴率70%~80%的遮阳网；

3）培养区环境控制：控制湿度75%~80%之间，温度先期15~20℃3个月，20~30℃培养20-30天；

四、阴地蕨小苗移栽

1）经过250-300天孢子即可萌发，经过20-30天的生长，阴地蕨小苗即可长到3厘米以上即可移栽。