CN103999595A

CN103999595A - 提高党参耐盐性的方法

Info

Publication number: CN103999595A
Application number: CN201410246686.2A
Authority: CN
Inventors: 张金林; 吴永娜; 许瑞; 韩庆庆; 吕昕培; 王引权; 王锁民
Original assignee: Lanzhou University
Current assignee: Lanzhou University
Priority date: 2014-06-05
Filing date: 2014-06-05
Publication date: 2014-08-27

Abstract

本发明公开了一种提高党参耐盐性的方法，其是在党参播种前用有益土壤细菌枯草芽孢杆菌GB03菌液对其进行浸泡处理，浸泡处理后分离出种子进行播种。采用上述方案在播种前对党参种子进行处理，其可有效地提高党参的耐盐性，显著提高党参种子在盐碱化土壤中播种的出苗率、生长势，提高党参根系的生长，从而提高了产量。同时，枯草芽孢杆菌具有对人畜无毒无害、不污染环境、非致病性和抗逆性强等特点。本发明对党参种子处理的方法简单，可广泛应用于在轻度和中度盐碱化土地上栽培党参，具有重要的经济、社会和生态价值。

Description

提高党参耐盐性的方法

技术领域

本发明涉及中药材种植领域，具体涉及一种提高党参耐盐性的方法。

背景技术

党参，又名黄参，产于我国山西、甘肃、陕西、四川和湖北等地，目前，党参主要采用人工栽培种植，少量为野生，其中，甘肃是党参的最大产区。近年来，党参在治疗冠心病、高血脂症、低血压病等方面取得了新的进展，使其用量速增；同时，随着中药现代化的实施以及中国在世界经济中地位的提升，中药材的生产和出口均稳步的增长，党参药材供不应求已经成为中药生产中的一大难题。党参耐盐性弱，对盐渍化土壤敏感，而我国大部分耕地土壤盐碱化严重，使得党参难以被大范围的推广栽培种植。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提高党参耐盐性的方法，使得党参的耐盐性增强，扩大党参的种植区域，解决目前市场上党参供不应求的难题。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案进行实施：

一种提高党参耐盐性的方法，其是在党参播种前用有益土壤细菌枯草芽孢杆菌GB03菌液对其进行浸泡处理，浸泡处理后分离出种子进行播种。

具体操作步骤为：

S1：对党参种子进行消毒处理；

S2：配制枯草芽孢杆菌GB03菌液；

S3：对党参种子进行浸泡处理；

S4：将浸泡处理后的党参种子与农田土混合，然后进行播种。

详细的操作为：

有益土壤细菌枯草芽孢杆菌GB03菌液中OD₆₀₀为0.8～1.0，浸泡处理的时间为5～10min。

步骤S1中党参种子先用酒精浸泡8～10s，然后用次氯酸钠浸泡10～12min，最后用灭菌的蒸馏水冲洗，放置于2～4℃的冰箱中过夜待用。所用的酒精浓度为75％，次氯酸钠浓度为5％，蒸馏水冲洗6～8次。

配制枯草芽孢杆菌GB03菌液的具体操作为：配制LB液体培养基，灭菌冷却后在每100mL的LB液体培养基中加入50～100μL的枯草芽孢杆菌GB03菌液，然后进行菌株培养，当菌液浓度OD₆₀₀为0.8～1.0时，取出备用。LB液体培养基中氯化钠、胰蛋白胨和酵母粉的重量比为1:2:1，溶剂为蒸馏水；调pH至7.2，115～132℃灭菌，然后冷却至20～35℃备用。菌株培养在恒温培养摇床上进行，控制转速为180～250r/min，温度为25～30℃。

采用上述方案在播种前对党参种子进行处理，其可有效的提高党参的耐盐性，可显著提高党参种子在盐碱化土壤中播种的出苗率、生长势，提高党参根系的生长，从而提高了产量。同时，枯草芽孢杆菌具有对人畜无毒无害、不污染环境、非致病性和抗逆性强等特点。本发明对党参种子处理的方法简单，可广泛应用于在轻度和中度盐碱化土地上栽培党参，具有重要的经济、社会和生态价值。

附图说明

图1为枯草芽孢杆菌GB03对不同盐浓度土壤中党参根长(Rootlength)的影响；

图2为枯草芽孢杆菌GB03对不同盐浓度土壤中党参根鲜重(Root fresh weight)的影响；

图3为枯草芽孢杆菌GB03对不同盐浓度土壤中党参根干重(Root dry weight)的影响。

具体实施方式

为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步的详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。以下所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以作出若干的同等的替换和润饰，这些同等的替换和润饰也应视为本发明权利要求请求的保护范围。

实施例1

党参种子消毒处理：党参种子用75％的酒精浸泡10s后，使用5％次氯酸钠浸泡10min，用灭菌的蒸馏水冲洗7次，于2～4℃冰箱过夜；

枯草芽孢杆菌GB03菌液制备：先配制溶菌肉汤LB液体培养基：按照氯化钠、胰蛋白胨和酵母粉的比例为1:2:1配制，溶剂为蒸馏水；调pH到7.2，高温为132℃灭菌,待冷却温度为20℃后，每100mL的LB液体培养基加入50μL的枯草芽孢杆菌GB03菌液，在转速为250r/min下，温度为25℃的恒温培养摇床上培养过夜后，测定菌液浓度为OD₆₀₀为0.8～1.0时，取出备用；

种子菌液处理：将消毒处理完成种子浸泡于枯草芽孢杆菌GB03菌液中10min，然后将菌液倒出；取适量的农田土与刚处理完的种子混合均匀，保证土壤颗粒松散待用。

实施例2

党参种子消毒处理：党参种子用75％的酒精浸泡8s后，使用5％次氯酸钠浸泡12min，用灭菌的蒸馏水冲洗8次，于2～4℃冰箱过夜；

枯草芽孢杆菌GB03菌液制备：先配制溶菌肉汤LB液体培养基：按照氯化钠、胰蛋白胨和酵母粉的比例为1:2:1配制，溶剂为蒸馏水；调pH到7.2，高温为115℃灭菌,待冷却温度为35℃后，每100mL的LB液体培养基加入100μL的枯草芽孢杆菌GB03菌液，在转速为180r/min下，温度为30℃的恒温培养摇床上培养过夜后，测定菌液浓度为OD₆₀₀为0.8～1.0时，取出备用；

种子菌液处理：将消毒处理完成种子浸泡于枯草芽孢杆菌GB03菌液中5min，然后将菌液倒出；取适量的农田土与刚处理完的种子混合均匀，保证土壤颗粒松散待用。

实施例3

种子菌液处理：取适量的农田土与消毒处理完的种子混合均匀，保证土壤颗粒松散待用。

实施例4

实施例5

分别配制NaCl浓度为0mM、50mM、100mM和150Mm的土壤，然后将实施例1、2中处理后的党参种子分别播种于上述各土壤中，标记为GB03；将实施例3、4中处理后的党参种子分别播种于上述各土壤中，标记为对照LB，观察党参茎、根的长势，具体结果如图1～3所示。

(1)、在0、50、100和150mM的NaCl盐胁迫下，与对照LB相比，GB03分别显著(P＜0.05)增加党参根长9％、12.3％、19.4％和27.7％。

(2)、在0、50、100和150mM NaCl盐胁迫下，较对照LB，GB03分别显著(P＜0.05)增加党参根部鲜重66.0％、72.7％、8.6％和28.4％，分别显著(P＜0.05)提高党参根部干重117％、69.9％、31.0％和37.9％。

Claims

1.一种提高党参耐盐性的方法，其是在党参播种前用枯草芽孢杆菌GB03菌液对其进行浸泡处理，浸泡处理后分离出种子进行播种。

2.如权利要求1所述的提高党参耐盐性的方法，其特征在于：枯草芽孢杆菌GB03菌液中OD₆₀₀为0.8～1.0。

3.如权利要求1所述的提高党参耐盐性的方法，其特征在于：浸泡处理的时间为5～10min。

4.如权利要求1或2或3所述的提高党参耐盐性的方法，其特征在于，具体操作步骤为：

S1：对党参种子进行消毒处理；

S2：配制枯草芽孢杆菌GB03菌液；

S3：对党参种子进行浸泡处理；

5.如权利要求4所述的提高党参耐盐性的方法，其特征在于：步骤S1中党参种子先用酒精浸泡8～10s，然后用次氯酸钠浸泡10～12min，最后用灭菌的蒸馏水冲洗，放置于2～4℃的冰箱中过夜待用。

6.如权利要求4所述的提高党参耐盐性的方法，其特征在于，配制枯草芽孢杆菌GB03菌液的具体操作为：配制LB液体培养基，灭菌冷却后在每100mL的LB液体培养基中加入50～100μL的枯草芽孢杆菌GB03菌液，然后进行菌株培养，当菌液浓度OD₆₀₀为0.8～1.0时，取出备用。

7.如权利要求5所述的提高党参耐盐性的方法，其特征在于：所用的酒精浓度为75％，次氯酸钠浓度为5％，蒸馏水冲洗6～8次。

8.如权利要求6所述的提高党参耐盐性的方法，其特征在于：LB液体培养基中氯化钠、胰蛋白胨和酵母粉的重量比为1:2:1，溶剂为蒸馏水；调pH至7.2，115～132℃灭菌，然后冷却至20～35℃备用。

9.如权利要求6所述的提高党参耐盐性的方法，其特征在于：菌株培养在恒温培养摇床上进行，控制转速为180～250r/min，温度为25～30℃。