CN103651148B - 一种两面针的组织培养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种两面针的组织培养方法,属于作物种植技术领域;包括原料预处理、接种、培养、移栽、培育管理、苗木出圃六个步骤,于晴天选取生长健壮、无病虫害的优良植株,用自来水冲洗干净后在高锰酸钾溶液中浸泡6~8min,再用无菌水冲洗2~3次,在无菌条件下切成0.5~0.8cm长的带芽小段,在无菌条件下接种在培养基上,在30~35℃条件下培养4~5天;待培养完全后,将小苗在自然环境下进行炼苗3~5天,使其适应自然条件后进行移栽到基质上,在温度为25~35℃,湿度为50~70%条件下进行培育;移栽后进行浇水,保持土壤湿润,每周施肥1次,4~5个月后,待苗高长到20cm以上即可出圃种植;采用本方法种植的两面针成活率最高,达95%以上;培养方法简单,培育时间短,有利于规模化生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物的组织培养方法,具体涉及一种具有多种功效的两面针的组织培养方法,属于作物栽培技术领域。
背景技术
两面针Zanthoxylum nitidum (Roxb.) DC.曾以蔓椒之名始载于《神农本草经》,列为下品,清朝赵其光《本草求原》一书将其定名为入地金牛。经本草考证为芸香科(Rumceae)花椒属(Zanthoxylum)木质藤本植物干燥根、茎,自1977年始被收入《中国药典》。两面针在我国药用历史悠久,用途广泛,且用量大,为南方地区常用中药材之一,主要分布于广西、福建、湖南、云南、台湾等地。
两面针具有很好的功效,其根和茎皮具有驱风化湿、消肿止痛、行气之功效,主治跌打损伤、风湿痹痛、胃痛、牙痛,毒蛇咬伤;外用治汤火资伤。化学成分及药理学研究发现两面针茎皮、根和根皮中含有生物碱类、木脂素类、黄酮甘类、甾醇类、无机元素等成分,具有解痉、镇痛、抗炎、抗菌、抗癌等药理活性。目前,随着研究的深入,两面针所具有的多种药理活性,已被逐渐应用到临床,市售多种中成药和日用品均含有两面针,如风痧冲剂、金鸡系列、妇炎净胶囊、正骨水、跌打万花油、骨刺片、两面针镇国痛片以及两面针中药牙膏等。据调査,2009年两面针需求量已达到约2400吨,强大的市场需求对两面针野生资源造成了巨大压力,致使两面针野生资源逐年减少。
随着社会经济的发展,两面针应用于各个领域越来越广泛,需求量也越来越大,人工种植两面针的数量目前还较少,不能满足市场发展的需求,因此人工栽培和种植两面针成为社会发展的必要趋势。通过对两面针的培育,进行人工栽培,保证了两面针原材料的供给,稳定两面针药材市场,给我国两面针制药行业健康可持续发展提供坚强的后盾。同时减少了人为的泛滥采挖,对两面针的自然生态保护起到十分重要的作用。
两面针苗木培育方法有种子繁殖、扦插繁殖和组织培养3种方法,文件CN101099433B公开了一种植物两面针的繁殖方法,利用扦插床,铺上沙壤,将已木质化的插条休整后直接扦插,半年到一年后进行移栽;文件CN102986437A公开了一种两面针的人工栽培方法,采用种子育苗或者营养杯育苗或扦插方式进行育苗,产量高,产品质量稳定;而对于两面针的组织培养方法研究的较少,本发明针对两面针的组织培养方法进行深入的研究,提供一种两面针人工栽培的新方法,成活率高,长势好。
发明内容
本发明的目的是提供一种两面针的组织培养方法,采用本方法培育的两面针成活率高,生长快。
为实现上述发明的目的,本发明采取的技术方案如下:
一种两面针的组织培养方法,包括如下步骤:
(1)原料预处理:于晴天选取生长健壮、无病虫害的优良植株,用自来水冲洗干净后在高锰酸钾溶液中浸泡6~8min,再用无菌水冲洗2~3次,在无菌条件下切成0.5~0.8cm长的带芽小段;
(2)接种:将上述芽段在无菌条件下接种在培养基上;
(3)培养:将接种好的芽段在30~35℃条件下培养4~5天;
(4)移栽:待培养后,将小苗在自然环境下进行炼苗3~5天,使其适应自然条件后进行移栽到基质上,进行培育;
(5)培育管理:移栽后进行浇水,保持土壤湿润,每周施肥1次;
(6)苗木出圃:移栽4~5个月后,待苗高长到20cm以上即可出圃种植。
步骤(2)所述的培养基为MS+6-BA 1mg/L+IBA 0.1mg/L +NAA 0.15mg/L + 琼脂 80mg/L +蔗糖20mg/L。
步骤(4)所述的基质是指黄心土:细沙:塘泥:过磷酸钙按重量比70:25:3:2的比例混合均匀得到。
步骤(4)所述的培养条件为温度为25~35℃,湿度为50~70%。
步骤(5)所述的施肥是指施用添加其重量份5%钙镁磷的农家肥,施肥量1~2kg/m3。
与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
(1)成活率高,生长快:采用本发明的种植方法,两面针培养成活率最高,达90% 以上,移栽后成活率达到95%以上。
(2)方法简单,培育时间短,有利于规模化生产。
具体实施方式
下面通过实例对本发明做进一步详细说明,这些实例仅用来说明本发明,并不限制本发明的范围。
实施例1
一种两面针的组织培养方法,包括如下步骤:
(1)原料预处理:于晴天选取生长健壮、无病虫害的优良植株,用自来水冲洗干净后在高锰酸钾溶液中浸泡6min,再用无菌水冲洗2次,在无菌条件下切成0.5cm长的带芽小段;
(2)接种:将上述芽段在无菌条件下接种在培养基上,培养基配方为MS+6-BA 1mg/L+IBA 0.1mg/L +NAA 0.15mg/L + 琼脂 80mg/L +蔗糖20mg/L;
(3)培养:将接种好的芽段在30℃条件下培养5天;
(4)移栽:待培养后,将小苗在自然环境下进行炼苗3天,使其适应自然条件后进行移栽到基质上在温度为25℃,湿度为70%条件下进行培育,基质为黄心土:细沙:塘泥:过磷酸钙按重量比70:25:3:2的比例混合均匀得到;
(5)培育管理:移栽后进行浇水,保持土壤湿润,每周施肥1次,施用含5%重量份钙镁磷的农家肥,施肥量1kg/m3;
(6)苗木出圃:移栽4个月后,待苗高长到20cm以上即可出圃种植。
实施例2
一种两面针的组织培养方法,包括如下步骤:
(1)原料预处理:于晴天选取生长健壮、无病虫害的优良植株,用自来水冲洗干净后在高锰酸钾溶液中浸泡8min,再用无菌水冲洗3次,在无菌条件下切成0.8cm长的带芽小段;
(2)接种:将上述芽段在无菌条件下接种在培养基上,培养基配方为MS+6-BA 1mg/L+IBA 0.1mg/L +NAA 0.15mg/L + 琼脂 80mg/L +蔗糖20mg/L;
(3)培养:将接种好的芽段在35℃条件下培养4天;
(4)移栽:待培养后,将小苗在自然环境下进行炼苗5天,使其适应自然条件后进行移栽到基质上在温度为35℃,湿度为50%条件下进行培育,基质为黄心土:细沙:塘泥:过磷酸钙按重量比70:25:3:2的比例混合均匀得到;
(5)培育管理:移栽后进行浇水,保持土壤湿润,每周施肥1次,施用含5%重量份钙镁磷的农家肥,施肥量2kg/m3;
(6)苗木出圃:移栽5个月后,待苗高长到20cm以上即可出圃种植。
实施例3
一种两面针的组织培养方法,包括如下步骤:
(1)原料预处理:于晴天选取生长健壮、无病虫害的优良植株,用自来水冲洗干净后在高锰酸钾溶液中浸泡7min,再用无菌水冲洗3次,在无菌条件下切成0.6cm长的带芽小段;
(2)接种:将上述芽段在无菌条件下接种在培养基上,培养基配方为MS+6-BA 1mg/L+IBA 0.1mg/L +NAA 0.15mg/L + 琼脂 80mg/L +蔗糖20mg/L;
(3)培养:将接种好的芽段在33℃条件下培养4天;
(4)移栽:待培养后,将小苗在自然环境下进行炼苗4天,使其适应自然条件后进行移栽到基质上在温度为28℃,湿度为60%条件下进行培育,基质为黄心土:细沙:塘泥:过磷酸钙按重量比70:25:3:2的比例混合均匀得到;
(5)培育管理:移栽后进行浇水,保持土壤湿润,每周施肥1次,施用含5%重量份钙镁磷的农家肥,施肥量1.5kg/m3;
(6)苗木出圃:移栽5个月后,待苗高长到20cm以上即可出圃种植。
实施例4
一种两面针的组织培养方法,包括如下步骤:
(1)原料预处理:于晴天选取生长健壮、无病虫害的优良植株,用自来水冲洗干净后在高锰酸钾溶液中浸泡8min,再用无菌水冲洗3次,在无菌条件下切成0.6cm长的带芽小段;
(2)接种:将上述芽段在无菌条件下接种在培养基上,培养基配方为MS+6-BA 1mg/L+IBA 0.1mg/L +NAA 0.15mg/L + 琼脂 80mg/L +蔗糖20mg/L;
(3)培养:将接种好的芽段在32℃条件下培养4天;
(4)移栽:待培养后,将小苗在自然环境下进行炼苗5天,使其适应自然条件后进行移栽到基质上在温度为30℃,湿度为70%条件下进行培育,基质为黄心土:细沙:塘泥:过磷酸钙按重量比70:25:3:2的比例混合均匀得到;
(5)培育管理:移栽后进行浇水,保持土壤湿润,每周施肥1次,施用含5%重量份钙镁磷的农家肥,施肥量2kg/m3;
(6)苗木出圃:移栽5个月后,待苗高长到20cm以上即可出圃种植。
实施例5
一种两面针的组织培养方法,包括如下步骤:
(1)原料预处理:于晴天选取生长健壮、无病虫害的优良植株,用自来水冲洗干净后在高锰酸钾溶液中浸泡8min,再用无菌水冲洗2次,在无菌条件下切成0.8cm长的带芽小段;
(2)接种:将上述芽段在无菌条件下接种在培养基上,培养基配方为MS+6-BA 1mg/L+IBA 0.1mg/L +NAA 0.15mg/L + 琼脂 80mg/L +蔗糖20mg/L;
(3)培养:将接种好的芽段在35℃条件下培养4天;
(4)移栽:待培养后,将小苗在自然环境下进行炼苗5天,使其适应自然条件后进行移栽到基质上在温度为29℃,湿度为66%条件下进行培育,基质为黄心土:细沙:塘泥:过磷酸钙按重量比70:25:3:2的比例混合均匀得到;
(5)培育管理:移栽后进行浇水,保持土壤湿润,每周施肥1次,施用含5%重量份钙镁磷的农家肥,施肥量1.8kg/m3;
(6)苗木出圃:移栽5个月后,待苗高长到20cm以上即可出圃种植。
Claims (2)
1.一种两面针的组织培养方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)原料预处理:于晴天选取生长健壮、无病虫害的优良植株,用自来水冲洗干净后在高锰酸钾溶液中浸泡6~8min,再用无菌水冲洗2~3次,在无菌条件下切成0.5~0.8cm长的芽段;
(2)接种:将上述芽段在无菌条件下接种在培养基上;
(3)培养:将接种好的芽段在30~35℃条件下培养4~5天;
(4)移栽:待培养后,将小苗在自然环境下进行炼苗3~5天,使其适应自然条件后进行移栽到基质上,进行培育;
(5)培育管理:移栽后进行浇水,保持土壤湿润,每周施肥1次;
(6)苗木出圃:移栽4~5个月后,待苗高长到20cm以上即可出圃种植;
步骤(2)所述的培养基为MS+6-BA 1mg/L+IBA 0.1mg/L +NAA 0.15mg/L + 琼脂 80mg/L +蔗糖20mg/L;
步骤(4)所述的基质是指黄心土:细沙:塘泥:过磷酸钙按重量比70:25:3:2的比例混合均匀得到;
步骤(5)所述的施肥是指施用添加重量份5%钙镁磷的农家肥,施肥量1~2kg/m3。
2.根据权利要求1所述的一种两面针的组织培养方法,其特征在于:步骤(4)的培养条件为温度为25~35℃,湿度为50~70%。
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