CN103976988A - 左旋薄荷酮在制备抗抑郁药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及医药领域，具体涉及左旋薄荷酮在制备抗抑郁药物中的应用。通过小鼠慢性不可预见温和刺激抑郁模型体重外观实验、糖水偏好试验、旷场试验、强迫游泳试验等结果，均证明左旋薄荷酮具有显著的抗抑郁活性，可以用于制备抗抑郁的药物。

Description

左旋薄荷酮在制备抗抑郁药物中的应用

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及一种左旋薄荷酮在制备抗抑郁药物中的应用。

背景技术

左旋薄荷酮(L-Menthone)，无色油状液体，溶于有机溶剂，微溶于水。CAS号：14073-97-3，其结构式为：

天然的左旋薄荷酮存在于荆芥、薄荷、黄芩等中药中。荆芥为唇形科植物荆芥的干燥地上部分。性微温，味辛，归肝肺经。具有解表散风，透疹、清头目、利咽喉、消疮止痒、止血、通鼻窍等之功。薄荷为唇形科薄荷属多年生草本植物薄荷的干燥地上部分。薄荷味辛、凉，归肝肺经。能宣散风热，清头目，透疹。用于风热感冒，风温初起，头痛，目赤，喉痹，口疮，风疹，麻疹，胸胁胀闷等。左旋薄荷酮还可被用作食用香精、香料。从现有的可检索的文献中均未见有其关于抑郁症方面的报道。

抑郁症(Depression)是一种以显著而持久的心境低落为主要特征的综合征，具有高患病率、高复发率、高致残率和高致死率等特点。世界卫生组织报道称全球范围内，共有超过3.5亿人患有抑郁症，遍布各个年龄组，到2020年抑郁症可能成为仅次于心脏病的第二大疾病。抑郁症是世界各地的首要致残原因，因患抑郁症而导致自杀的人数超过80万人，它是导致全球疾病负担的一个重大因素。

现有的抑郁症的治疗药物主要包括：选择性的五羟色胺再摄取抑制剂、去甲肾上腺素与特定五羟色胺再摄取抑制剂、三环类抗抑郁剂、单胺氧化酶抑制剂和五羟色胺与去甲肾上腺素再摄取抑制剂。然而，这些传统的抗抑郁药大多在用药后2至4周才可能起效，且只对70％左右的患者起作用，同时还存在副作用多、患者对药物耐受性差、易复发等缺陷。因此，寻找治疗抑郁症的安全有效药物具有良好的经济效益和社会效益。

目前常用的动物抑郁模型包括应激模型、药物诱发的抑郁模型、孤养或分养模型以及嗅球切除模型等其中，慢性不可预见温和刺激抑郁模型采用长期的慢性温和刺激，而非单次的强烈刺激。小鼠每天都处于不同的应激刺激下，这种刺激方式被认为是更能模拟人类抑郁症发生的环境状态，已成为国内外广泛公认的抑郁模型之一。

发明内容

本发明公开了左旋薄荷酮在制备抗抑郁药物中的新用途。

本发明人发现左旋薄荷酮具有新的药物用途，即具有抗抑郁的活性。到目前为止，未见任何关于左旋薄荷酮用于抗抑郁的文献报道。

本发明公开了左旋薄荷酮在制备抗抑郁药物中的应用。

本发明左旋薄荷酮的抗抑郁的有益效果主要体现在：本发明研究结果显示，左旋薄荷酮显著缩短慢性不可预见温和刺激抑郁模型小鼠在强迫游泳实验和悬尾实验中的不动时间，显著增加慢性不可预见温和刺激抑郁模型小鼠的糖水偏好。本发明左旋薄荷酮具有显著的抗小鼠实验性抑郁作用。

具体实施方式

以下通过实施例来进一步描述本发明，应该理解的是，这些实施例仅用于例证的目的，决不限制本发明的保护范围。

实施例1发明所述的左旋薄荷酮对慢性不可预见温和刺激抑郁模型小鼠的影响试验

1实验方法

1.1慢性不可预见温和刺激抑郁模型的建立

建立慢性温和不可预知应激模型。其中，慢性温和刺激包括：(1)悬尾10分钟，(2)摇晃鼠笼10分钟，(3)噪音(未调频的收音机)3小时，(4)饲养笼倾斜(约30°)8小时或过夜，(5)潮湿的垫料(150ml水)8小时或过夜，(6)异物8小时或过夜，(7)照明过夜，(8)夹尾5分钟，(9)束缚10分钟，(10)禁食8小时或过夜，(11)禁水8小时或过夜。

模型组、氟西汀组与左旋薄荷酮高、低剂量组应用上述慢性温和应激3周。每天采用以上两个不同的应激，应激的种类和顺序随机选取，避免小鼠预见将要发生的刺激。

1.2分组与给药

实验开始前小鼠在实验室动物房适应性饲养一周，以适应环境。适应性饲养结束后，小鼠进行旷场实验(Open-field test)。选择在旷场实验中行为学评分相近的ICR小鼠，每组13只，共分5组：正常对照组、模型组、氟西汀组(10mg/kg)、左旋薄荷酮低剂量组(15mg/kg)、左旋薄荷酮高剂量组(30mg/kg)。室温22±2℃，小鼠自由摄食饮水。

正常对照组正常给予饲料和饮水，除了必要的鼠笼垫料清理工作，不接受任何刺激。模型组共接受42天不同的刺激，后21天每天灌胃给予蒸馏水。左旋薄荷酮高、低剂量组共接受42天不同的刺激，后21天每天灌胃给药(15mg/kg、30mg/kg)。氟西汀组共接受42天刺激，后21天每天灌胃给予氟西汀(10mg/kg)。空白对照组不接受任何刺激饲养42天，后21天每天灌胃给予蒸馏水。

1.3外观及体重

观察小鼠毛发光泽度，活动状态等。每周记录小鼠体重。抑郁症中常表现出厌食、消瘦、体重减轻的症状。

1.4旷场实验

于慢性不可预见温和刺激实验结束后第2天，用旷场实验检测各组小鼠行为学的改变。将小鼠置于小鼠开阔箱，观察4分钟，比较各组小鼠后2分钟内水平得分(穿格次数)、垂直得分(小鼠双前肢向上抬举次数)、修饰次数(小鼠在清洁身体各部位过程中，使用头、舌和前肢做出的多种动作)。行为评定采用单盲法，观察慢性不可预见温和刺激及药物对小鼠自发活动能力的影响。

1.5强迫游泳实验

各组小鼠在慢性不可预见温和刺激结束后第2天进行强迫游泳实验。将小鼠置于水深10cm、水温25℃的玻璃圆筒中，观察6分钟，比较各组小鼠在后4分钟内的累积不动时间。不动时间判定：小鼠漂浮在水面，不挣扎，仅作一些必须保持头部在水面的动作。

1.6悬尾实验

各组小鼠在慢性不可预见温和刺激结束后第2天进行悬尾实验。将小鼠尾端2cm的部位贴正在一根水平木棍上，使小鼠成倒挂状态，其头部距离台面约15cm，用隔板隔开相邻动物之间的视线。观察6分钟，记录后4分钟内各组小鼠的累积不动时间。不动时间判定标准：小鼠被悬挂期间，无任何活动时定位不动时间。

1.7糖水偏好实验

各组小鼠在慢性不可预见温和刺激结束的第2天进行各组小鼠的糖水消耗量的测定。开始测定前禁水、禁食24小时，然后给予1％(w/v)的蔗糖水溶液，蔗糖水溶液分别置于2个相同的饮水瓶中，24小时后进行糖水偏好的测定。测量时小鼠单笼饲养，每笼1只，2只饮水瓶中分别装有普通饮用水和1％蔗糖水溶液，24小时后称量小鼠普通饮用水、1％蔗糖水以及总液体的消耗量。比较正常小鼠、慢性不可预见温和刺激小鼠和给予受试药及氟西汀的小鼠在糖水消耗及糖水偏爱方面的差异。

糖水偏好(Sucrose Preference，SP)以蔗糖水溶液的消耗量(g)/总饮用水的消耗量(g)×100％表示。

1.8统计学处理

所有数据均以均数±标准差(Mean±SD)表示，采用单向方差分析法(ANOVA)对实验数据进行统计分析，P＜0.05为具有显著性差异，P＜0.01为具有极显著差异。

2实验结果

2.1外观及体重

实验开始前小鼠毛发光泽度高，梳理毛发动作频繁，活跃好动，对外界的声音、光线等变化反应灵敏，嗅查寻觅站立等动作频繁，好奇探索能力强。应激过程开始后，除正常对照组外，其余各组小鼠毛色晦暗，活动均减少，梳理毛发动作减少，对外界声音等变化的反应明显迟钝，灌胃时无挣扎和喊叫，嗅查站立动作明显减少，丧失对外界的好奇探索能力。给药后，氟西汀组(10mg/kg)、左旋薄荷酮低剂量组(15mg/kg)、左旋薄荷酮高剂量组(30mg/kg)小鼠上述症状明显改善，而模型组小鼠症状继续加重。

2.2旷场实验

如表2-1所示，进过42天的慢性温和刺激后，与空白对照组小鼠相比，模型组小鼠的自发活动明显降低，表现为穿格次数、直立次数、修饰次数明显减少；给予左旋薄荷酮(15mg/kg)21天后，与模型组小鼠相比，小鼠的直立次数和修饰次数均有显著增加；给予左旋薄荷酮(30mg/kg)21天后，与模型组小鼠相比，小鼠的穿格次数、直立次数和修饰次数均有显著增加；阳性药组(氟西汀，10mg/kg)也能显著增加小鼠的自发活动。

表2-1左旋薄荷酮对慢性不可预见温和刺激抑郁模型小鼠自发活动的影响(Mean±SD，n＝14)

注：与模型组相比，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001；与空白组相比，^#P＜0.05，^###P＜0.001

2.3强迫游泳实验

如表2-2所示，与空白对照组相比，经过42天的慢性不可预见温和刺激之后，模型组小鼠在强迫游泳实验中不动时间显著延长，提示慢性不可预见温和刺激可增加小鼠的行为绝望程度；连续3周给予左旋薄荷酮(15mg/kg，30mg/kg)可显著缩短抑郁小鼠在强迫游泳实验中的不动时间，表明左旋薄荷酮可显著改善慢性不可预见温和刺激小鼠的绝望行为；阳性对照组(氟西汀，10mg/kg)同样可以显著改善抑郁小鼠的绝望行为。

表1-2左旋薄荷酮对慢性不可预见温和刺激抑郁模型小鼠强迫游泳实验不动时间的影响(Mean±SD，n＝14)

注：与模型组相比，**P＜0.01，***P＜0.001；与空白组相比，^###P＜0.001

2.4悬尾实验

如表2-3所示，与空白对照组相比，经过42天的慢性不可预见温和刺激之后，小鼠在悬尾实验中的不动时间显著延长(p＜0.01)，表明慢性不可预见温和刺激可加重小鼠的行为绝望程度；连续给予左旋薄荷酮(15mg/kg，30mg/kg)21天可显著缩短小鼠在悬尾实验中的不动时间，显示左旋薄荷酮可显著改善慢性不可预见温和刺激抑郁模型小鼠的绝望行为；连续给予阳性药(氟西汀，10mg/kg)21天同样具有改善抑郁小鼠绝望行为的作用。

表2-3左旋薄荷酮对慢性不可预见温和刺激抑郁模型小鼠悬尾实验不动时间的影响(Mean±SD，n＝14)

注：与模型组相比，*P＜0.05，**P＜0.01；与空白组相比，^##P＜0.01

2.5糖水偏好实验

遭受慢性不可预见温和刺激的小鼠出现蔗糖水饮用量下降的现象，这种现象称之为快感缺失。与抑郁症患者表现出的情绪低落、兴趣丧失有一定的相似性。糖水偏好为小鼠在24小时内蔗糖水饮用量与全部饮用水饮用量的比值，该值反应了小鼠对糖水的优先选择的程度。如表2-4所示，42天的慢性不可预见温和刺激导致小鼠的糖水偏好显著降低(P＜0.001)，与模型组相比，连续21天给予左旋薄荷酮(15mg/kg，30mg/kg)能显著增加慢性不可预见温和刺激抑郁小鼠的糖水偏好；阳性对照组(氟西汀，10mg/kg)小鼠的糖水偏好度与模型组相比也有显著增加。显示左旋薄荷酮能够改善慢性抑郁小鼠的情绪，拮抗抑郁状态导致的小鼠兴趣丧失和快感缺失。

表2-4左旋薄荷酮对慢性不可预见温和刺激抑郁模型小鼠糖水偏好的影响(Mean±SD，n＝14)

注：与模型组相比，***P＜0.001；与空白组相比，^###P＜0.001

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (1)

1.左旋薄荷酮在制备抗抑郁药物中的应用。