CN103933543A - 利用穿心莲和粘杆菌素治疗畜禽大肠杆菌感染疾病的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种利用穿心莲和粘杆菌素治疗畜禽大肠杆菌感染疾病的方法，将穿心莲与粘杆菌素按照15-170：3-30的重量比例混合，得到含穿心莲的复方药物，将该复方药物按照0.1-7g/kg饲料的添加量添加到畜禽饲料中进行饲喂，连续使用3-7天。本发明能够逆转细菌对抗菌药的耐药性，从而提高抗菌药的治疗效果，大幅降低用药成本和药物残留，为养殖户创造更高的经济效益，且保障人类的食品安全。
Description
技术领域
本发明属于畜禽大肠杆菌感染治疗技术领域，尤其涉及一种利用穿心莲和粘杆菌素治疗畜禽大肠杆菌感染疾病的方法。
背景技术
大肠杆菌是常见的条件致病菌，也是常发的一种疾病，它可原发引起鸡急性败血症、腹膜炎、肝炎、肺炎、肠炎等多部位严重感染，亦可继发或混发于病毒病，给养殖业造成巨大的经济损失。阿莫西林、氨苄西林、头孢噻呋、头孢曲松、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦等β-内酰胺环类抗生素是防治该病的常用的重要药物，随着养殖规模集约化程度愈来愈大，用药愈来愈泛滥，其耐药菌株愈来愈多，关于大肠杆菌耐药性的报道也较多。研究证实，耐药的主要机制之一是产生β-内酰胺酶，尤其是超广谱β-内酰胺酶(Extended-Spectrumβ-lactamase，ESBLs)，该酶能较强和快速地水解β-内酰胺环，使这类抗生素丧失抗菌活性。ESBLs是β-内酰胺酶的最主要酶型，它不仅对头孢三代和氨曲南耐药，而且对氨基糖苷类、喹诺酮类和磺胺类呈交叉耐药，仅对碳青霉烯类、头霉烯类药物敏感。许多文献已经报道大肠杆菌的多重耐药性与产生ESBLs有密切关系，国内外对之较为关注。发明人最近开展了食品动物源致病菌ESBLs的检测、提取、酶对抗生素的水解率及舒巴坦、他唑巴坦以及中药的抑酶保护作用等研究，对部分ESBLs大肠杆菌的药敏试验表明，其多重耐药率明显高于非ESBLs菌株。另外，结果还表明产ESBLs菌株不仅对头孢噻呋等第三代头孢菌素严重耐药，而且亦对氟喹诺酮类、氨基糖苷类和磺胺类、磷霉素等多种抗菌药耐药，呈严重的多重耐药。发明人在产ESBLs菌株中分离到耐磷霉素产fosA3耐药基因的大肠杆菌，更加强了细菌的耐药性。大肠杆菌的耐药性造成养殖户用药成本增加，治疗疗程延长，畜禽死亡率增加，给生产带来较大经济损失，并且增加畜禽药物残留风险。因此，实际生产中亟需一种对无论是否耐药的大肠杆菌都能有较好治疗作用的方法，并能缩短治疗疗程，减少死亡率，降低经济损失且降低药物残留，为养殖户创造更高的经济效益，也保障人类的健康安全。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种利用穿心莲和粘杆菌素治疗畜禽大肠杆菌感染疾病的方法，它能够较快地杀死细菌，克服抗菌药治疗由于耐药性问题造成的疗效差、用量大、残留高和成本高的缺陷，避免了单纯中药杀菌谱窄、杀菌慢的问题。
为解决以上技术问题，本发明采用以下技术方案：一种利用穿心莲和粘杆菌素治疗畜禽大肠杆菌感染疾病的方法，将穿心莲与粘杆菌素按照15-170：3-30的重量比例混合，得到含穿心莲的复方药物，将该复方药物按照0.1-7g/kg饲料的添加量添加到畜禽饲料中进行饲喂，连续使用3-7天。
所述的复方药物制备成散剂、片剂、口服液或颗粒剂。
所述的复方药物的制备方法为：将穿心莲粉碎过60目筛，再与粉末状的抗菌药混匀，按常规方法制备成散剂、片剂、口服液或颗粒剂。
针对目前畜禽大肠杆菌感染存在的耐药性问题，发明人利用广西特色中药穿心莲与抗菌药组成复方药物。研究证明，抗菌药中加入穿心莲后，能够逆转细菌对抗菌药的耐药性，从而提高抗菌药的治疗效果。按常规方法将该复方药物制成散剂、片剂、口服液或颗粒剂，按照0.1-7g主药/kg饲料的添加量添加到畜禽饲料中进行饲喂，可大幅降低用药成本和药物残留，为养殖户创造更高的经济效益，同时也确保了食品安全。
具体实施方式
一、穿心莲对抗菌药的耐药逆转作用研究
抗菌药本身具有治疗大肠杆菌的效果，但由于产ESBLs耐药基因的大肠杆菌具有较强的耐药性，致使抗菌药在正常的使用剂量情况下并未表现出较好的治疗效果。
为了验证穿心莲对抗菌药的耐药逆转作用，在96孔板上采用微量试管二倍稀释法，先测定了抗菌药对产ESBLs和fosA3耐药基因的大肠杆菌株的最小抑菌浓度和穿心莲对产ESBLs和fosA3耐药基因大肠杆菌株的亚抑菌浓度，然后在培养基中加入亚抑菌浓度的穿心莲再次使用微量试管二倍稀释法培养测定抗菌药的最小抑菌浓度；利用连续传代法在加有同样亚抑菌浓度穿心莲和同样浓度抗菌药的培养基中对产ESBLs和fosA3耐药基因大肠杆菌株进行传代培养，直至观测到的抗菌药最小抑菌浓度与传代前相比变小4倍以上，即可判断为穿心莲对抗菌药具有耐药逆转作用。试验结果统计如表1所示：
表1亚抑菌浓度(0.25g/mL)穿心莲传代引起产ESBLs和fosA3大肠杆菌西药MIC的变化(μg/mL)。
由上表可知，抗菌药对耐药大肠杆菌的最小抑菌浓度均减小4倍以上，即可判断是穿心莲对产ESBLs和fosA3耐药基因大肠杆菌具有耐药逆转作用。
二、本发明复方药物的应用实例
按照以下方法制备实施例1-实施例4：将穿心莲粉碎过60目筛后，作为基础原料，再与粉末状的抗菌药按重量份比例放入混合器中混匀，按常规方法，将复方药物制备成制剂产品。
表2实施例1-4的配方及制备剂型
| 编号 | 抗菌药 | 穿心莲 | 剂型 |
| 实施例1 | 粘杆菌素10g | 170g | 散剂 |
| 实施例2 | 粘杆菌素3g | 60g | 片剂 |
| 实施例3 | 粘杆菌素18g | 10g | 口服液 |
| 实施例4 | 粘杆菌素30g | 120g | 颗粒剂 |
发明人将上述实施例1-4所得的复方药物产品，在广西桂林某猪场，对40日龄的仔猪腹泻的进行疗效实验。
临床症状：，该猪群在断奶转圈后，开始出现腹泻，拉水样粪便，粪便含有未消化的饲料，猪吃料但就是不长，个别严重的猪腹泻脱水死亡，没有出现呕吐症状，养殖户使用多种药物，治疗均没有出现理想效果。
剖检病变：剖检后猪肠壁菲薄，尤其小肠后端和结肠部位，肠粘膜脱落，肠壁充血、出血。
实验室诊断：取病变肝脏染片，革兰氏染色，显微镜下观察，可见红色的革兰氏阴性杆菌；初步判断为大肠杆菌疾病。通过大肠杆菌培养，生化实验鉴别，判断仔猪感染为大肠杆菌疾病，PCR扩增，证明产有CTX-M型的ESBLs耐药基因和fosA3耐药基因。
试验用药方案：发病猪群分6组给药，第一组用实施例1按照2g/kg饲料的添加量给药，第二组用实施例2按照2g/kg饲料的添加量给药，第三组用实施例3按照0.3g/kg饲料的添加量给药，第四组用实施例4按照0.4g/kg饲料的添加量给药；第五组用粘杆菌素粉剂按照0.1g/kg饲料的添加量给药，第六组用穿心莲粗散剂按照7g/kg饲料的添加量给药；以上六组用药方案均持续使用5天。
使用效果反馈：第一组至第四组用药2天后，猪群不再拉水样粪便，粪便成形，粪便中不再含有饲料，继续使用3天，猪群痊愈；第五组用药2天后，猪群仍不健康，继续使用3天，基本恢复健康，但个别还是拉糊状粪便，但停药3天后，猪群出现复发；第六组用药2天后，猪群无明显改观，继续使用3天，猪群继续拉稀，其余个别还比较严重。可见，含有穿心莲的复方药物对猪群疗效优于单方。
Claims (2)
1.一种利用穿心莲和粘杆菌素治疗畜禽大肠杆菌感染疾病的方法，其特征在于，将穿心莲与粘杆菌素按照15-170：3-30的重量比例混合，得到含穿心莲的复方药物，将该复方药物按照0.1-7g/kg饲料的添加量添加到畜禽饲料中进行饲喂，连续使用3-7天。
2.根据权利要求1所述的利用穿心莲和粘杆菌素治疗畜禽大肠杆菌感染疾病的方法，其特征在于，所述的复方药物制备成散剂、片剂、口服液或颗粒剂。
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