CN103961421A - 一种含有赤芍和痢菌净的畜禽用复方药物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种含有赤芍和痢菌净的畜禽用复方药物，由以下重量份的原料组成：痢菌净3-30份，赤芍5-200份。发明人利用中药赤芍与抗菌药组成复方药物。研究证明，抗菌药中加入赤芍后，能够逆转细菌对抗菌药的耐药性，从而提高抗菌药的治疗效果。按常规方法将该复方药物制成散剂、片剂、口服液或颗粒剂，按照0.1-7g主药/kg饲料的添加量添加到畜禽饲料中进行饲喂，可大幅降低用药成本和药物残留，为养殖户创造更高的经济效益，同时也确保了食品安全。

Description

一种含有赤芍和痢菌净的畜禽用复方药物

技术领域

本发明属于畜禽大肠杆菌和沙门氏菌感染治疗技术领域，尤其涉及一种含有赤芍和痢菌净的畜禽用复方药物。

背景技术

禽沙门氏菌病(Avian salmonellosis)是由沙门氏菌属中的一种或多种沙门氏菌所引起的禽类疾病的总称。根据病原体抗原结构的不同可分为3类：鸡白痢、禽伤寒和禽副伤寒。其中鸡白痢和禽伤寒沙门氏菌有宿主特异性，主要引起鸡和火鸡发病；而禽副伤寒沙门氏菌则能广泛感染多种动物和人，受其污染的家禽及其产品是人类沙门氏菌感染和食物中毒的主要来源之一。禽沙门氏菌病常形成相当复杂的传播循环。病禽和带菌禽是主要的传染源，可通过消化道、呼吸道或眼结膜水平传播，经卵垂直传播后可感染幼禽，引起大部分死亡，家禽长期带菌，而后产出带菌的卵子，若以此作为种蛋来孵化，则可周而复始的代代相传，致使禽沙门氏菌病在鸡群中很难净化，造成严重的经济损失。由于沙门氏菌在鸡群中污染面大，且易产生耐药性，目前市场上的疫苗免疫效果均不理想。因此，种鸡群检疫、药物控制、环境消毒净化、加强饲养管理和卫生防疫仍是控制和防止沙门氏菌进入食物链的根本措施。雏鸡出壳后饮用0.01％高锰酸钾溶液或其他药物1～2天进行药物预防。该菌对常用药物产生耐药性，逼迫生产中不得不进行各种药物交替使用，以求更好的控制耐药菌。目前该菌对氨基糖苷类药物产生较强的耐药性，氨基糖苷类钝化酶是对这些抗菌药物分子中某些保护抗菌活性所必需的基团进行修饰，使其与作用靶位核糖体的亲和力大为降低。这些钝化酶包括氨基糖苷酰基转移酶(AAC)、氨基糖苷腺苷酰基转移酶(AAD)、氨基糖苷磷酸转移酶(APH)、腺核苷转移酶(ANT)等。目前已经在许多氨基糖苷类的耐药菌中发现了不同特性的钝化酶。

大肠杆菌是常见的条件致病菌，也是常发的一种疾病，它可原发引起鸡急性败血症、腹膜炎、肝炎、肺炎、肠炎等多部位严重感染，亦可继发或混发于病毒病，给养殖业造成巨大的经济损失。阿莫西林、氨苄西林、头孢噻呋、头孢曲松、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦等β-内酰胺环类抗生素是防治该病的常用的重要药物，随着养殖规模集约化程度愈来愈大，用药愈来愈泛滥，其耐药菌株愈来愈多，关于大肠杆菌耐药性的报道也较多。研究证实，耐药的主要机制之一是产生β-内酰胺酶，尤其是超广谱β-内酰胺酶(Extended-Spectrumβ-lactamase，ESBLs)，该酶能较强和快速地水解β-内酰胺环，使这类抗生素丧失抗菌活性。ESBLs是β-内酰胺酶的最主要酶型，它不仅对头孢三代和氨曲南耐药，而且对氨基糖苷类、喹诺酮类和磺胺类呈交叉耐药，仅对碳青霉烯类、头霉烯类药物敏感。许多文献已经报道大肠杆菌的多重耐药性与产生ESBLs有密切关系，国内外对之较为关注。发明人最近开展了食品动物源致病菌ESBLs的检测、提取、酶对抗生素的水解率及舒巴坦、他唑巴坦以及中药的抑酶保护作用等研究，对部分ESBLs大肠杆菌的药敏试验表明，其多重耐药率明显高于非ESBLs菌株。另外，结果还表明产ESBLs菌株不仅对头孢噻呋等第三代头孢菌素严重耐药，而且亦对氟喹诺酮类、氨基糖苷类和磺胺类、磷霉素等多种抗菌药耐药，呈严重的多重耐药。发明人在产ESBLs菌株中分离到耐磷霉素产fosA3耐药基因的大肠杆菌，更加强了细菌的耐药性。

沙门氏菌和大肠杆菌的耐药性造成养殖户用药成本增加，治疗疗程延长，畜禽死亡率增加，给生产带来较大经济损失，并且增加畜禽药物残留风险。因此，实际生产中亟需一种对无论是否耐药的沙门氏菌和大肠杆菌都能有较好治疗作用的药物，并能缩短治疗疗程，减少死亡率，降低经济损失且降低药物残留，为养殖户创造更高的经济效益，也保障人类的健康安全。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种含有赤芍和痢菌净的畜禽用复方药物，它能够较快地杀死细菌，克服抗菌药治疗由于耐药性问题造成的疗效差、用量大、残留高和成本高的缺陷，避免了单纯中药杀菌谱窄、杀菌慢的问题。

为解决以上技术问题，本发明采用以下技术方案：一种含有赤芍和痢菌净的畜禽用复方药物，由以下重量份的原料组成：痢菌净3-30份，赤芍5-200份。

所述的复方药物制备成散剂、片剂、口服液或颗粒剂。

所述的复方药物的制备方法为：将赤芍粉碎过60目筛，再与粉末状的抗菌药混匀，按常规方法制备成散剂、片剂、口服液或颗粒剂。

针对目前畜禽大肠杆菌和沙门氏菌感染存在的耐药性问题，发明人利用中药赤芍与抗菌药组成复方药物。研究证明，抗菌药中加入赤芍后，能够逆转细菌对抗菌药的耐药性，从而提高抗菌药的治疗效果。按常规方法将该复方药物制成散剂、片剂、口服液或颗粒剂，按照0.1-7g主药/kg饲料的添加量添加到畜禽饲料中进行饲喂，可大幅降低用药成本和药物残留，为养殖户创造更高的经济效益，同时也确保了食品安全。

具体实施方式

一、赤芍对抗菌药的耐药逆转作用研究

抗菌药本身具有治疗大肠杆菌和沙门氏菌的效果，但由于产耐药基因的大肠杆菌和沙门氏菌具有较强的耐药性，致使抗菌药在正常的使用剂量情况下并未表现出较好的治疗效果。

1、赤芍与抗菌药混合后对大肠杆菌的耐药抑制试验

在96孔板上采用微量试管二倍稀释法，先测定了抗菌药对产ESBLs和fosA3耐药基因的大肠杆菌株的最小抑菌浓度和赤芍对产ESBLs和fosA3耐药基因大肠杆菌株的亚抑菌浓度，然后在培养基中加入亚抑菌浓度的赤芍再次使用微量试管二倍稀释法培养测定抗菌药的最小抑菌浓度；利用连续传代法在加有同样亚抑菌浓度赤芍和同样浓度抗菌药的培养基中对产ESBLs和fosA3耐药基因大肠杆菌株进行传代培养，直至观测到的抗菌药最小抑菌浓度与传代前相比变小4倍以上，即可判断为赤芍对抗菌药具有耐药逆转作用。试验结果统计如表1所示：

表1亚抑菌浓度(0.5g/mL)赤芍传代引起产ESBLs和fosA3大肠杆菌西药MIC的变化(mg/mL)。

由上表可知，抗菌药对耐药大肠杆菌的最小抑菌浓度均减小4倍以上，即可判断是赤芍对产ESBLs和fosA3耐药基因大肠杆菌具有耐药逆转作用。

2、赤芍与抗菌药混合后对沙门氏菌的耐药抑制试验

在96孔板上采用微量试管二倍稀释法，先测定了抗菌药对耐药沙门氏菌株的最小抑菌浓度和赤芍对耐药沙门氏菌株的亚抑菌浓度，然后在培养基中加入亚抑菌浓度的赤芍再次使用微量试管二倍稀释法培养测定抗菌药的最小抑菌浓度；利用连续传代法在加有同样亚抑菌浓度赤芍和同样浓度抗菌药的培养基中对沙门氏菌耐药株进行传代培养，直至观测到的抗菌药最小抑菌浓度与传代前相比变小4倍以上，即可判断为赤芍对抗菌药具有耐药逆转作用。试验结果统计如表2所示：

表2亚抑菌浓度(0.5g/mL)赤芍传代引起耐药沙门氏菌西药MIC的变化(mg/mL)。

由上表可知，抗菌药对耐药沙门氏菌的最小抑菌浓度均减小4倍以上，即可判断是赤芍对耐药沙门氏菌具有耐药逆转作用。

二、本发明复方药物的应用实例

按照表3配方和以下方法制备实施例1-实施例4：将赤芍粉碎过60目筛后，作为基础原料，再与粉末状的抗菌药按重量份比例放入混合器中混匀，将复方药物制备成制剂产品。

表3实施例1-4的配方及制备剂型

编号	抗菌药	赤芍	剂型
				实施例1	痢菌净11g	5g	口服液
实施例2	痢菌净20g	10g	颗粒剂
				实施例3	痢菌净3g	45g	散剂
实施例4	痢菌净30g	180g	片剂

1、实施例1-4所得的复方药物产品对35日龄的仔猪腹泻的疗效实验

临床症状：广西贵港某猪场，35日龄仔猪，该猪群在断奶转圈后，开始出现腹泻，拉水样粪便，粪便含有未消化的饲料，猪吃料但就是不长，个别严重的猪腹泻脱水死亡，没有出现呕吐症状，养殖户使用多种药物，治疗均没有出现理想效果。

剖检病变：剖检后猪肠壁菲薄，尤其小肠后端和结肠部位，肠粘膜脱落，肠壁充血、出血。

实验室诊断：取病变肝脏染片，革兰氏染色，显微镜下观察，可见红色的革兰氏阴性杆菌；初步判断为大肠杆菌疾病。通过大肠杆菌培养，生化实验鉴别，判断仔猪感染为大肠杆菌疾病，PCR扩增，证明产有CTX-M型的ESBLs耐药基因和fosA3耐药基因。

试验用药方案：发病猪群分6组给药，第一组用实施例1按照0.3g/kg饲料的添加量给药，第二组用实施例2按照0.3g/kg饲料的添加量给药，第三组用实施例3按照3g/kg饲料的添加量给药，第四组用实施例4按照1.4g/kg饲料的添加量给药；第五组用痢菌净粉剂按照0.2g/kg饲料的添加量给药，第六组用赤芍粗散剂按照4g/kg饲料的添加量给药；以上六组用药方案均持续使用5天。

使用效果反馈：第一组至第四组用药2天后，猪群不再拉水样粪便，粪便成形，粪便中不再含有饲料，继续使用3天，猪群痊愈；第五组用药2天后，猪群仍不健康，继续使用3天，基本恢复健康，但个别还是拉糊状粪便，但停药3天后，猪群出现复发；第六组用药2天后，猪群无明显改观，继续使用3天，猪群继续拉稀，其余个别还比较严重。可见，含有赤芍的复方组合物对猪群疗效优于单方痢菌净和单方赤芍。

2、实施例1-4所得复方药物产品对鸡沙门氏菌疾病的疗效实验。

临床症状：广西贵港某鸡场，10日龄肉鸡，鸡群出现下痢，排白色、糊状稀粪，肛门周围的绒毛被粪便污染，有石灰样硬块，有的发出痛苦的尖叫声，有死亡现象。剖检个别鸡肝肿大呈暗红色至深紫色，或略带土黄色，质脆易破，表面散在或密布灰白、灰黄色坏死点，有时为红色的出血点，典型的沙门氏菌疾病特征。

实验室诊断：取病变肝脏染片，革兰氏染色，显微镜下观察，可见红色的革兰氏阴性杆菌；初步判断为沙门氏菌疾病。通过沙门氏菌培养，生化实验鉴别，判断小鸡感染为沙门氏菌疾病，药敏试验结果根据NCCLS标准判断为耐药株沙门氏菌。

试验用药方案：将发病鸡群分成6组给药，第一组用实施例1按照0.3g/kg饲料的添加量给药，第二组用实施例2按照0.3g/kg饲料的添加量给药，第三组用实施例3按照3g/kg饲料的添加量给药，第四组用实施例4按照1.4g/kg饲料的添加量给药；第五组用痢菌净粉剂按照0.2g/kg饲料的添加量给药，第六组用赤芍粗散剂按照4g/kg饲料的添加量给药；以上六组用药方案均持续使用5天。

效果反馈：第一组至第四组的鸡群用药后，病鸡采食量上升，不再出现死鸡，继续使用3天，鸡群基本痊愈；第五组的鸡群用药2天后，鸡群多数仍不健康，仍有个别鸡死亡，继续使用3天，鸡死亡现象仍没有得到有效控制；第六组的鸡群用药2天后，鸡群没有太大的明显改观，继续使用3天，鸡死亡现象仍没有得到有效控制。可见，含有赤芍的复方药物疗效优于单方。

Claims (2)

1.一种含有赤芍和痢菌净的畜禽用复方药物，其特征在于，由以下重量份的原料组成：痢菌净3-30份，赤芍5-200份。

2.根据权利要求1所述的含有赤芍和痢菌净的畜禽用复方药物，其特征在于，所述的复方药物制备成散剂、片剂、口服液或颗粒剂。